| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Nucleobase-modified nucleotide for synthesis of mRNA
N1-Methylpseudouridine targets the translation machinery and the innate immune system. When incorporated into mRNA, it enhances translation by increasing ribosome density and promoting eIF2α-dependent and independent translation initiation. Additionally, N1-methylpseudouridine reduces the immunogenicity of mRNA by preventing recognition by Toll-like receptors (TLRs) such as TLR3, TLR7, and TLR8, which recognize unmodified RNA as foreign. This dual action—enhancing translation and reducing immune activation—makes N1-methylpseudouridine a critical component of modern mRNA therapeutics. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
用N1-甲基假尿苷对Luc和GFP mRNA进行核修饰，可改善翻译起始步骤，部分原因是阻断了eIF2α的磷酸化。在HEK293T细胞中，插入N1-甲基假尿苷修饰的mRNA产生的luc量与标准Luc mRNA相同。N1-甲基假尿苷修饰的Luc mRNA的形成延伸减少，导致多核糖体形成增加，并促进了细胞增殖。当Luc和GFP mRNA能够接触到N1-甲基假尿苷时，所有外部翻译系统的翻译效率均显著提高。就多核糖体而言，Luc mRNA的重要性不如N1-甲基假尿苷修饰的Luc mRNA[1]。
N1-甲基假尿苷通过提高mRNA的翻译效率在体外表现出活性。在无细胞翻译系统和培养细胞中，含有N1-甲基假尿苷的mRNA比含有未修饰尿苷或其他修饰核苷（例如5-甲基胞苷）的mRNA产生更多的蛋白质。该化合物可增加mRNA上的核糖体密度并促进翻译起始。它还能降低先天免疫传感器的激活，从而降低I型干扰素的产生水平。这些体外活性已在mRNA疫苗的研发中得到广泛研究。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在小鼠和细胞系中，N1-甲基假尿苷掺入的mRNA与假尿苷掺入的mRNA联合使用可有效提高蛋白质表达并降低免疫原性[2]。体内实验表明，m5C/N1-甲基假尿苷修饰的mRNA比Ψ和m5C/Ψ修饰的mRNA更有效，N1-甲基假尿苷（1-甲基假尿苷）（20 μg；肌注或皮内注射，持续21天）也具有较高的翻译效率[2]。体内研究表明，与未修饰的mRNA相比，N1-甲基假尿苷修饰的mRNA可产生更高的蛋白质表达和更低的免疫原性。在动物模型中，含有N1-甲基假尿苷的mRNA疫苗在诱导免疫反应和抵御病毒攻击方面显示出更优的疗效。该化合物通过增加核糖体密度，以eIF2α依赖性和非依赖性机制增强翻译。免疫原性降低导致反应原性降低，耐受性更好。这些体内研究结果对于mRNA疫苗的成功至关重要。
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| 酶活实验 |
N1-甲基假尿苷的体外检测通常包括测量无细胞或细胞体系中修饰mRNA的翻译效率。含有N1-甲基假尿苷的荧光素酶或GFP报告基因mRNA在体外转录后转染至细胞。蛋白质表达通过发光或荧光法进行检测。核糖体密度通过多聚核糖体谱分析或核糖体足迹法进行检测。免疫激活通过ELISA或qPCR检测I型干扰素（例如IFN-α、IFN-β）的产生来评估。这些检测证实了该化合物增强翻译和降低免疫原性的能力。
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| 细胞实验 |
N1-甲基假尿苷的体外细胞分析在多种细胞类型中进行，包括原代细胞、树突状细胞以及HeLa或HEK293T等细胞系。将细胞转染编码报告蛋白的修饰或未修饰的mRNA。通过发光、荧光或Western blot检测蛋白质表达随时间的变化。评估细胞活力和细胞毒性。通过细胞因子（例如IFN-α、TNF-α）的分泌以及TLR和其他固有免疫传感器的激活来测量免疫激活。这些实验阐明了N1-甲基假尿苷修饰的功能益处。
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| 动物实验 |
动物/疾病模型： 7周龄BALB/c（Bagg白化）小鼠[1]
剂量： 20 μg 给药途径： 肌内注射或静脉注射，持续21天 实验结果： 具有较高的翻译能力。 在小鼠模型中进行了N1-甲基假尿苷修饰的mRNA的体内动物实验。编码报告蛋白（例如，荧光素酶）或抗原（例如，SARS-CoV-2刺突蛋白）的mRNA通过肌内注射或静脉注射给药。通过体内成像（针对荧光素酶）或ELISA（针对抗原特异性抗体）检测蛋白表达。通过测量抗体滴度和T细胞反应评估免疫反应。通过测量体重减轻、发热和细胞因子水平评估反应原性。这些研究对于mRNA疫苗的开发至关重要。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
N1-甲基假尿苷的药代动力学数据与mRNA疗法密切相关。当其掺入mRNA后，这种修饰的核苷会作为mRNA分子的一部分被递送至细胞内。mRNA在细胞质中翻译，生成的蛋白质产物会被分泌或滞留在细胞内。修饰后的核苷本身并非游离药物，而是mRNA的组成部分。细胞内mRNA的半衰期会受到这种修饰的影响，N1-甲基假尿苷有助于提高mRNA的稳定性和翻译效率。该化合物会通过mRNA降解途径进行代谢。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
N1-甲基假尿苷在mRNA疫苗领域已得到广泛的安全性评估。临床前和临床研究表明，该化合物具有良好的耐受性。该化合物不会引起显著的细胞毒性或基因毒性。与未修饰的RNA相比，其免疫原性降低，因此反应原性也较低。N1-甲基假尿苷的安全性已在全球数十亿剂mRNA疫苗的接种中得到证实。它被认为是mRNA疗法中一种安全有效的成分。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
1-甲基假尿苷是一种甲基假尿苷，其中甲基位于尿嘧啶环的N-1位。1-甲基假尿苷已在钝顶链霉菌（Streptomyces platensis）和林肯链霉菌（Streptomyces lincolnensis）中被报道，并有相关数据可供参考。某些化学修饰可以增强体外转录mRNA的稳定性并降低其免疫原性，从而促进具有治疗价值的蛋白质的表达。本文证明，就翻译能力而言，N1-甲基假尿苷（N1mΨ）优于其他几种核苷修饰及其组合。通过在无细胞翻译系统中对各种修饰转录本进行广泛分析，我们阐明了其对蛋白质表达的影响，并排除了mRNA稳定性机制的影响。我们发现，除了抑制免疫/eIF2α磷酸化依赖的翻译抑制外，掺入的N1mΨ核苷酸还能显著改变翻译过程的动态，增加mRNA上的核糖体停顿和密度。我们的结果表明，修饰后的mRNA上核糖体负载的增加使得翻译更容易启动，这可能是通过促进同一mRNA上的核糖体循环或从头募集核糖体来实现的。[1] 信使RNA（mRNA）作为一种治疗工具在基因治疗领域正日益受到关注。人们已经认识到，核碱基修饰可以通过降低免疫原性和提高RNA分子的稳定性（Kariko范式）来显著增强mRNA的特性，这对于这一变革至关重要。我们发现，单独修饰或与5-甲基胞苷（m5C）联合修饰的N(1)-甲基假尿苷（m1Ψ）mRNA，在转染细胞系或小鼠后，其报告基因表达水平分别比目前最先进的假尿苷（Ψ）和/或m5C/Ψ修饰的mRNA平台高约44倍（双修饰mRNA组）和约13倍（单修饰mRNA组）。我们还发现，与(m5C/)Ψ修饰的mRNA相比，(m5C/)m1Ψ修饰的mRNA在体外转染后降低了细胞内固有免疫原性并提高了细胞活力。(m5C/)m1Ψ修饰的mRNA蛋白表达能力的增强可能至少部分归因于其增强的逃避内体Toll样受体3（TLR3）激活和下游固有免疫信号传导的能力。我们相信，本文提出的(m5C/)m1Ψ-mRNA平台有望成为修饰mRNA疗法领域的新标准。[2] 新型冠状病毒SARS-CoV-2是COVID-19大流行的病原体，它推动了人类历史上最高效的疫苗研发运动之一。COVID-19 mRNA疫苗的关键在于使用修饰的核碱基N1-甲基假尿苷(m1Ψ)来增强其有效性。本文概述了m1Ψ在合成mRNA中的开发和功能。通过阐明这种新型元素在这些药物中的作用机制，我们旨在加深理解，并强调未来化学创新的机遇。[3] N1-甲基假尿苷是现代mRNA疗法（包括COVID-19疫苗）的关键成分。它通过增加核糖体密度来提高翻译效率，并促进eIF2α依赖性和非依赖性翻译起始。该化合物还能通过阻止TLR识别来降低免疫原性。它也被称为1-甲基假尿苷或m1Ψ。它的应用彻底改变了基于mRNA的药物研发。该化合物纯度高，可用于科研和生产。
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| 分子式 |
C₁₀H₁₄N₂O₆
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|---|---|
| 分子量 |
258.23
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| 精确质量 |
258.085
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| 元素分析 |
C, 46.51; H, 5.46; N, 10.85; O, 37.17
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| CAS号 |
13860-38-3
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| 相关CAS号 |
N1-Methylpseudouridine-5′-triphosphate trisodium;N1-Methylpseudouridine-5′-triphosphate;1428903-59-6;N1-Methylpseudouridine-d3
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| PubChem CID |
99543
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.576g/cm3
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| 熔点 |
189 °C
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| 折射率 |
1.618
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| LogP |
-2.6
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| tPSA |
124.78
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
18
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| 分子复杂度/Complexity |
409
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| 定义原子立体中心数目 |
4
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| SMILES |
CN1C=C(C(=O)NC1=O)[C@H]2[C@@H]([C@@H]([C@H](O2)CO)O)O
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| InChi Key |
UVBYMVOUBXYSFV-XUTVFYLZSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C10H14N2O6/c1-12-2-4(9(16)11-10(12)17)8-7(15)6(14)5(3-13)18-8/h2,5-8,13-15H,3H2,1H3,(H,11,16,17)/t5-,6-,7-,8+/m1/s1
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| 化学名 |
5-[(2S,3R,4S,5R)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-1-methylpyrimidine-2,4-dione
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| 别名 |
N1Methylpseudouridine; 1-Methylpseudouridine; 13860-38-3; N1-Methylpseudouridine; N1-methyl-pseudouridine; m(1)f; 09RAD4M6WF; 5-((2S,3R,4S,5R)-3,4-Dihydroxy-5-(hydroxymethyl)tetrahydrofuran-2-yl)-1-methylpyrimidine-2,4(1H,3H)-dione; 2,4(1H,3H)-Pyrimidinedione, 1-methyl-5-beta-D-ribofuranosyl-; N1 Methylpseudouridine
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~125 mg/mL (~484.1 mM)
H2O: ~50 mg/mL (~193.6 mM |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (8.05 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (8.05 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (8.05 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 50 mg/mL (193.63 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.8725 mL | 19.3626 mL | 38.7252 mL | |
| 5 mM | 0.7745 mL | 3.8725 mL | 7.7450 mL | |
| 10 mM | 0.3873 mL | 1.9363 mL | 3.8725 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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