| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
HCV NS3 serine protease (overall inhibition constant Ki = 7 ± 1 nM for genotype 1b; Ki = 0.7 nM for genotype 1a; Ki = 3 nM for genotype 2a; Ki = 7 nM for genotype 3a) [2]
HCV NS3 serine protease (Ki = 6 nM, HNE/HCV = 600) [1] Narlaprevir targets the HCV NS3/4A serine protease, a crucial enzyme in the hepatitis C virus replication cycle. It is a potent inhibitor with a Ki of 6 nM. By inhibiting NS3/4A protease, it disrupts viral replication. It is primarily metabolized by the cytochrome P450-3A4 system. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验：在72小时的实验中，使用1b型HCV复制子系统，纳拉普韦（SCH 900518）抑制复制子RNA的EC50为20±6 nM，EC90为40±10 nM。MTS实验未观察到复制子细胞的细胞毒性（50%细胞毒性浓度>25 μM）。 [2] 长期暴露于 1.2 × EC90 的纳拉普韦 (SCH 900518) 可导致 RNA 水平在第 14 天下降 2 个对数单位。5 × EC90 的剂量可导致 RNA 水平在第 14 天下降 3 个对数单位。[2] 当干扰素 α-2b 与纳拉普韦 (SCH 900518) 联合用药时，与单独使用该化合物相比，复制子 RNA 的抑制作用呈浓度依赖性增强。在 50%、75% 和 90% 抑制水平下计算的联合指数 (CI) 分别为 0.3 ± 0.1、0.6 ± 0.2 和 0.6 ± 0.1，表明至少具有叠加活性。 [2]在含有3 × EC90浓度的纳拉普韦（SCH 900518）的培养基中培养携带复制子的细胞3周后，耐药克隆的出现率约为0.13%。浓度增加至6 × EC90和15 × EC90时，耐药克隆的出现率分别降低了约14倍和65倍。与单独使用该化合物相比，当3 × EC90浓度的该化合物与干扰素α-2b（30 IU/ml）联合使用时，耐药克隆的出现率降低了约10倍。 [2]
用纳拉普韦 (SCH 900518)筛选复制子细胞，导致耐药突变体过度生长，这些突变体携带T54A/S突变（EC90值增加约10倍）和A156S/T/V突变（耐药性更高）。在高浓度筛选条件下观察到双突变（T54A和A156T），即使在40 μM浓度下也具有耐药性。[2] 纳拉普韦 (SCH 900518)与针对博赛普韦产生的突变体存在交叉耐药性。 EC90 值倍数增加：V36M（8 倍）、T54A（11 倍）、R155K（15 倍）、A156S（70 倍）、A156T（>1,000 倍）、D168V（1 倍）、V170A（10 倍）、V36M+R155K（130 倍）。[2] 临床前耐药性研究表明，纳拉普韦 (SCH 900518)在酶活性测定和复制子测定中均对博赛匹韦产生的突变体存在交叉耐药性，但由于其内在效力高于博赛匹韦，因此对许多突变体仍保持较高的活性。[1] 纳拉普韦 (SCH 900518)在体外 CYP 或 hERG 活性测定中未显示任何显著问题。 [1] 与含有P'烯丙基部分的早期化合物不同，在大鼠、犬和猴体内，纳拉普韦 (SCH 900518) 未观察到谷胱甘肽或酰基葡萄糖醛酸苷结合物，表明不存在活性代谢物问题。[1] 纳拉普韦 (SCH 900518) 能有效抑制酮酰胺，Ki 值为 7 nM [2]。纳拉普韦 (SCH 900518) 能有效抑制复制子 RNA，EC90 值为 40 nM [2]。 体外实验表明，纳拉普韦能有效抑制 HCV NS3/4A 蛋白酶，Ki 值为 6 nM。体外 CYP 或 hERG 活性测定未发现显著问题。研究已证实其能够靶向病毒蛋白酶，有效干扰病毒复制过程。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
体内研究：在一项大鼠体内研究中，口服给药后，纳拉普韦 (SCH 900518) 的 AUC 为 6.5 μM·h，生物利用度为 46%，表现出良好的效果。给药后 8 小时 (C8h)，大鼠肝脏药物浓度为 750 ng/g。[1]
犬口服 纳拉普韦 (SCH 900518) 的暴露量为中等（AUC = 0.9 μM·h，F = 29%）。[1] 在猴子中，纳拉普韦 (SCH 900518) 的 AUC 为 1.1 μM·h，口服生物利用度为 46%。 [1] 纳拉普韦（SCH 900518）口服给药（大鼠 10 mg/kg，犬 3 mg/kg，猴 3 mg/kg）时，显示出中等的口服生物利用度（大鼠 46%，犬 29%）[1]。静脉注射给药（大鼠 4 mg/kg，犬 1 mg/kg）后，纳拉普韦（SCH 900518）的半衰期为中等（大鼠 4.8 小时，犬 2 小时）[1]。体内研究已证实纳拉普韦可用于治疗慢性丙型肝炎。作为一种 NS3/4A 蛋白酶抑制剂，它能降低感染患者的病毒载量。该药原计划与其他抗病毒药物联合使用。 |
| 酶活实验 |
酶活性测定：制备了基因型 1 至 3 的重组单链 HCV NS3 和 NS4A 蛋白酶。HCV 蛋白酶活性测定采用 200 μl 反应体系。通常，将 100 μl 蛋白酶加入到 100 μl 含有显色底物乙酰基-DTEDVVPV(正缬氨酸)-O-4-苯基偶氮苯酚的测定缓冲液中。使用微孔板读数仪监测 60 分钟内的吸光度变化。[2]
进程曲线分析：首先将不同浓度抑制剂存在下产物生成随时间变化的曲线拟合到修正的 Morrison 方程，以获得初始速率 (vi)、稳态速率 (vs) 和达到稳态的表观速率常数 (kobs)。无抑制剂对照组的初始速率为未受抑制的初始速率 (vo)。将 vi/vo 与抑制剂浓度作图，并根据公式 2 拟合，得到初始快速结合步骤的表观抑制常数 Kiapp。将 vs/vo 与抑制剂浓度作图，并根据公式 3 拟合，得到后续缓慢异构化步骤的总体表观抑制常数 Kiapp。将 kobs 与抑制剂浓度作图，并根据公式 4 拟合，得到异构化速率常数 k3（从 EI 到 EI）和 k4（从 EI 到 EI），同时固定或浮动 Kiapp。使用公式 5a 和 5b，输入底物浓度和预先确定的米氏常数 (Km)，将 Kiapp 和 Kiapp 转换为 Ki 和 Ki。抑制常数 Ki 用作抑制剂效力的衡量指标。为了计算 koff（酶-抑制剂复合物解离的总速率常数），使用公式 6，根据 Ki 和合理的 k1 范围（10^5 至 10^8 M^-1 s^-1）估算 k2（EI 解离为 E 和 I 的速率）。koff 使用公式 7 计算。解离半衰期的下限 (t1/2) 使用公式 8 计算。[2] 两步结合后慢异构化模型为 E + I ↔ EI ↔ EI。[2] 纳拉普韦 (SCH 900518) 对 1b 基因型 NS3 蛋白酶的总抑制常数 (Ki) 估计为 7 ± 1 nM（n = 12 次实验）。该化合物从酶-抑制剂复合物中解离的半衰期下限估计为 1 至 2 小时。 [2] 纳拉普韦的体外酶活性测定法用于测量其对HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶活性的抑制作用。将重组NS3/4A蛋白酶与该化合物以及模拟病毒多聚蛋白切割位点的肽底物一起孵育。定量分析底物的切割情况，并计算Ki值。 |
| 细胞实验 |
细胞实验：构建了复制子（基因型 1b）。为了测定抗复制子活性，将复制子细胞接种于 96 孔 I 型胶原蛋白包被板中。接种 24 小时后加入 Narlaprevir (SCH 900518)，孵育 3 天，然后裂解细胞，并通过实时 PCR 测定复制子 RNA 水平。EC50 为使循环阈值 (CT) 值较预期基线 CT 值增加 1 所需的药物浓度。EC90 为使 CT 值较预期基线 CT 值增加 3.2 所需的药物浓度。[2]
对于与 α 干扰素联合治疗，将复制子细胞用 Narlaprevir (SCH 900518) 处理 3 天，并以 1:2.5 的比例进行 5 点滴定。在每个化合物浓度下，滴定加入α干扰素。采用实时PCR（TaqMan法）检测复制子RNA水平，以GAPDH RNA作为内参。相对复制子RNA抑制率（dCT）计算公式为：dCT = NS5B CT - GAPDH CT。使用非排他性公式计算α干扰素与多种固定浓度化合物组合的联合指数（CI）值。[2] 为了筛选对Narlaprevir (SCH 900518)具有耐药性的复制子细胞，将亚融合的1b基因型复制子细胞单层和亲代细胞系Huh-7与不同浓度的化合物（耐药性研究中EC90 = 65 nM）共同培养，并分别加入或不加入α干扰素。所有细胞在达到95%融合度时以1:10的比例传代。筛选后存活的菌落被混合并扩增，用于进一步分析。为了鉴定赋予耐药性的NS3蛋白酶结构域突变，从混合菌落中分离总细胞RNA，并通过RT-PCR进行扩增。RT-PCR产物经纯化和测序，或克隆到TOPO TA载体中，并对来自5-6个细菌菌落的质粒DNA进行测序。[2] 使用HCV复制子系统进行纳拉普韦的体外细胞试验。用纳拉普韦处理含有HCV复制子的细胞，并通过qRT-PCR检测病毒RNA复制。同时评估细胞毒性。确定EC₅₀值。 |
| 动物实验 |
动物实验方案：在大鼠体内研究中，纳拉普韦（SCH 900518）以10毫克/千卡的剂量口服（po）或以4毫克/千卡的剂量静脉注射（iv）。赋形剂：口服，0.4%羟丙甲纤维素（HPMC）或20%羟丙甲纤维素（HPBCD）；静脉注射，40%羟丙甲纤维素（HPBCD）。[1]
在犬体内研究中，纳拉普韦（SCH 900518）以3毫克/千卡的剂量口服（po）或以1毫克/千卡的剂量静脉注射（iv）。赋形剂：口服，0.4%羟丙甲纤维素（HPMC）或20%羟丙甲纤维素（HPBCD）；静脉注射，40%羟丙甲纤维素（HPBCD）。[1] 在猴体内研究中，纳拉普韦（SCH 900518）以3毫克/千卡的剂量口服（po）。载体：口服，0.4% HPMC 或 20% HPBCD。[1] 复制子细胞用不同浓度的纳拉普韦 (SCH 900518)处理。每 2 至 3 天用该化合物补充复制子细胞，并在细胞汇合后进行传代。[2] 动物/疾病模型：大鼠、犬、猴[1] 剂量：大鼠口服/静脉注射 10/4 mg/kg；犬口服/静脉注射 3/1 mg/kg；猴子口服 3 mg/kg 给药途径： 静脉注射 (iv) 或口服 (po) 实验结果： 大鼠和犬的半衰期 (T1/2) 分别为 4.8 小时和 2 小时。 纳拉普韦的体内动物实验已在丙型肝炎病毒 (HCV) 感染动物模型中进行。然而，由于 HCV 的宿主范围有限，这些研究通常使用替代病毒或人源化小鼠模型。动物经口服给药后，检测病毒载量。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
ADME/药代动力学：在大鼠中，纳拉普韦 (SCH 900518)（口服/静脉注射，10/4 mpk）：AUC = 6.5 μM·h；F = 46%；Cmax = 1.3 μM；t1/2 = 4.8 小时；浓度 (6 小时)/EC90 = 11；大鼠肝脏浓度 (C8 小时) = 750 ng/g。[1]
在犬中，纳拉普韦 (SCH 900518)（口服/静脉注射，3/1 mpk）：AUC = 0.9 μM·h；F = 29%；Cmax = 0.8 μM；t1/2 = 2 小时。 [1] 在猴子中，纳拉普韦 (SCH 900518)（口服，3 mpk）的 AUC = 1.1 μM·h；F = 46%。[1] 纳拉普韦 (SCH 900518)在大鼠中显示出非常好的暴露量（AUC = 6.5 μM·h），并且与博赛匹韦相比，在猴子中显著提高了暴露量（AUC = 1.1 μM·h）。[1] 博赛匹韦和纳拉普韦 (SCH 900518)的血浆蛋白结合数据（体外，人）基本相似。[1] 纳拉普韦的药代动力学特性已在临床前动物和人体中得到表征。它具有口服生物利用度。详细的药代动力学参数，例如半衰期、清除率和口服生物利用度，均根据血浆浓度-时间曲线确定。它主要通过 CYP3A4 代谢。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
毒性/毒代动力学：MTS 法检测显示，在复制子细胞中，Narlaprevir (SCH 900518) 未观察到细胞毒性（50% 细胞毒性浓度 > 25 μM）。[2]
Narlaprevir (SCH 900518) 在体外 CYP 或 hERG 活性测定中未显示任何显著问题。[1] 与含有 P' 烯丙基部分的早期化合物不同，在大鼠、犬和猴中，Narlaprevir (SCH 900518) 未观察到谷胱甘肽或酰基葡萄糖醛酸苷结合物，表明不存在活性代谢物问题。[1] 博赛匹韦和 Narlaprevir (SCH 900518) 的血浆蛋白结合数据（体外，人）基本相似。 [1] 在临床研究中，纳拉普韦总体耐受性良好。已进行标准毒理学评估以支持临床开发。该化合物已在治疗慢性丙型肝炎的临床试验中进行评估。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
纳拉普韦 (SCH 900518) 是一种酮酰胺类蛋白酶抑制剂，它与 NS3 蛋白酶活性位点的丝氨酸残基 (Ser139) 形成可逆的共价键。该共价酶-抑制剂复合物的半衰期为 1 至 2 小时。[2] 通过蛋白酶结合复合物的 X 射线晶体结构（PDB 代码 3LON）证实了纳拉普韦 (SCH 900518) 与活性位点的结合。P4 环己基部分的位置使其能够与酶的 S4 口袋形成额外的疏水接触，并且 P4 砜氧原子之一与 Cys-159 紧密相邻，形成氢键相互作用。 [1]
纳拉普韦 (SCH 900518) 是一种单一异构体（与 P1 位点为非对映异构体混合物的博赛普韦不同），以结晶形式获得。整个合成过程无需硅胶纯化。[1] 临床前耐药性研究表明，纳拉普韦 (SCH 900518) 在酶活性测定和复制子测定中均对博赛普韦产生的突变体存在交叉耐药性。然而，由于其固有效力高于博赛普韦，因此对许多突变体仍保持较高的活性。[1] 纳拉普韦 (SCH 900518) 目前正在进行 II 期人体临床试验。 [1] 纳拉普韦是一种氮杂双环己烷化合物，其结构为(1R,5S)-6,6-二甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷，在2S和3位分别被[(3S)-1-(环丙基氨基)-1,2-二氧代庚烷-3-基]氨基酰基和N-({1-[(叔丁基磺酰基)甲基]环己基}氨基甲酰基)-3-甲基-L-缬氨酸基团取代。它是一种丙型肝炎病毒(HCV) NS3/4A丝氨酸蛋白酶抑制剂（Ki = 6 nM），用于治疗慢性丙型肝炎。它具有多种活性，包括作为丙型肝炎蛋白酶抑制剂、抗病毒药物、EC 3.4.22.69（SARS冠状病毒主蛋白酶）抑制剂和抗冠状病毒药物。它是一种砜、脲类化合物、叔酰胺、氮丙啶双环己烷、吡咯烷酰胺、仲酰胺以及环丙烷类化合物。 纳拉普韦（SCH 900518）是一种第二代丙型肝炎病毒NS3丝氨酸蛋白酶抑制剂。它最初是为治疗由1型基因病毒引起的慢性丙型肝炎而开发的。尽管显示出一定的疗效，但其研发可能已被更新的直接抗病毒药物所取代。它尚未获准用于临床。 |
| 分子式 |
C36H61N5O7S
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|---|---|
| 分子量 |
707.96384
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| 精确质量 |
707.429
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| 元素分析 |
C, 61.08; H, 8.69; N, 9.89; O, 15.82; S, 4.53
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| CAS号 |
865466-24-6
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| PubChem CID |
11857239
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
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| 折射率 |
1.558
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| LogP |
3.61
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| tPSA |
186.21
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
4
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
15
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| 重原子数目 |
49
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| 分子复杂度/Complexity |
1400
|
| 定义原子立体中心数目 |
5
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| SMILES |
CCCC[C@@H](C(=O)C(=O)NC1CC1)NC(=O)[C@@H]2[C@@H]3[C@@H](C3(C)C)CN2C(=O)[C@H](C(C)(C)C)NC(=O)NC4(CCCCC4)CS(=O)(=O)C(C)(C)C
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| InChi Key |
RICZEKWVNZFTNZ-LFGITCQGSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C36H61N5O7S/c1-10-11-15-24(27(42)30(44)37-22-16-17-22)38-29(43)26-25-23(35(25,8)9)20-41(26)31(45)28(33(2,3)4)39-32(46)40-36(18-13-12-14-19-36)21-49(47,48)34(5,6)7/h22-26,28H,10-21H2,1-9H3,(H,37,44)(H,38,43)(H2,39,40,46)/t23-,24-,25-,26-,28+/m0/s1
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| 化学名 |
(1R,2S,5S)-3-(N-(((1-((tert-butylsulfonyl)methyl)cyclohexyl)amino)carbonyl)-3-methyl-l- valyl)-N-((1s)-1-((cyclopropylamino)(oxo)acetyl)pentyl)-6,6-dimethyl-3- azabicyclo(3.1.0)hexane-2-carboxamide
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| 别名 |
SCH-900518; SCH 900518; Narlaprevir; 865466-24-6; SCH 900,518; SCH-900,518; SCH900,518; SCH900518
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 50 mg/mL (~70.63 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.53 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.53 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.4125 mL | 7.0625 mL | 14.1251 mL | |
| 5 mM | 0.2825 mL | 1.4125 mL | 2.8250 mL | |
| 10 mM | 0.1413 mL | 0.7063 mL | 1.4125 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
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