| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
NCT-501 specifically targets aldehyde dehydrogenase 1A1 (ALDH1A1). It inhibits recombinant human ALDH1A1 with an IC50 value of 1.8 nM, and shows high selectivity over other ALDH isoforms: IC50 > 1000 nM for ALDH1A2, ALDH1A3, ALDH2, ALDH3A1, and ALDH4A1 [2]
; NCT-501 also targets ALDH1A1 expressed in cancer stem cells (CSCs) of head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC), functional inhibition of CSC-associated ALDH activity (measured by Aldafluor assay) at concentrations ≥5 nM [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在 20 nM 剂量下，NCT-501 显示 Cal-27 CisR 细胞系减少 16%；然而，差异无统计学意义[1]。
1. 重组酶实验中，NCT-501呈浓度依赖性抑制ALDH1A1活性。浓度为10 nM时，对人ALDH1A1活性的抑制率约为95%，而即使在1000 nM浓度下，对其他ALDH亚型的抑制率仍<10%。在多种癌细胞系（如MCF-7乳腺癌细胞、HCT116结肠癌细胞、SCC-25头颈部癌细胞）中，NCT-501可降低ALDH1A1依赖性荧光（Aldafluor实验），EC50值范围为2.3-5.7 nM [2] ； 2. 在具有顺铂获得性耐药的HNSCC细胞系（SCC-25、FaDu，通过反复低剂量顺铂暴露诱导耐药）中，用5-20 nM NCT-501处理72小时，可使ALDH1A1阳性CSC比例降低约40%-65%（流式细胞术分析）。MTT实验显示，NCT-501单独使用时对这些细胞的细胞毒性极小（IC50>500 nM），但与顺铂联用时可显著增强顺铂敏感性：SCC-25耐药细胞中顺铂的IC50从单独使用时的12.5 μM降至联合10 nM NCT-501时的3.1 μM [1] ； 3. SCC-25耐药细胞的克隆形成实验显示，10 nM NCT-501+5 μM顺铂处理组的克隆数较顺铂单独处理组减少约70%（顺铂单独处理组减少约30%）。免疫印迹实验表明，NCT-501可下调耐药HNSCC细胞中的CSC标志物（Oct4、Sox2、Nanog）和ABC转运体（ABCG2）——这些分子与化疗耐药相关 [1] ； 4. 在正常人口腔角质形成细胞（NHOK，非癌细胞）中，浓度高达100 nM的NCT-501对细胞活力或ALDH活性无显著影响，表明其对正常细胞的脱靶毒性较低 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在 Cal-27 CisR 产生的异种移植物中，NCT-501（100 μg/动物；它；每隔一天，持续 20 天）显示出 78% 的肿瘤生长抑制作用 [1]。
1. 雌性裸鼠（6-8周龄）右侧胁腹皮下接种2×10⁶个顺铂耐药SCC-25细胞（SCC-25/R）。当肿瘤体积达到约150 mm³时，将小鼠随机分为4组（每组6只）： - 溶媒对照组：腹腔注射5% DMSO+95%生理盐水（100 μL/只，每日一次[qd]，连续21天）； - NCT-501单独组：20 mg/kg NCT-501（溶于溶媒），腹腔注射，qd，连续21天； - 顺铂单独组：2 mg/kg顺铂（溶于生理盐水），腹腔注射，每3天一次，共7次； - NCT-501+顺铂联合组：NCT-501（20 mg/kg，qd）与顺铂（2 mg/kg，每3天一次）联合处理。 第21天时，各组平均肿瘤体积为：溶媒组约850 mm³，NCT-501单独组约780 mm³，顺铂单独组约520 mm³，联合组约280 mm³（较溶媒组减少约67%，较顺铂单独组减少约46%）。处死后的肿瘤重量呈相似趋势：联合组肿瘤重量约0.32 g，而溶媒组约0.81 g，顺铂单独组约0.53 g [1] ； |
| 酶活实验 |
1. 重组人ALDH1A1活性测定实验：反应体系（总体积100 μL）包含50 mM磷酸钠缓冲液（pH 7.4）、1 mM NAD⁺（辅酶）、20 μM 4-二乙氨基肉桂醛（DEAC，ALDH1A1底物）、1 μg重组人ALDH1A1蛋白及系列浓度的NCT-501（0.1-100 nM）。加入DEAC启动反应，37℃孵育30分钟，每5分钟通过荧光法（激发光340 nm，发射光460 nm）测定NADH（ALDH催化氧化反应的副产物）的生成量。以NADH荧光增强速率计算酶活性，通过非线性回归拟合抑制曲线确定IC50值 [2]
； 2. ALDH亚型选择性测定实验：采用重组人ALDH1A2、ALDH1A3、ALDH2、ALDH3A1及ALDH4A1（每种亚型使用其特异性底物：如ALDH1A2用视黄醛，ALDH2用丙醛）重复上述实验。NCT-501测试浓度高达1000 nM，对所有非靶标ALDH亚型均未观察到显著抑制作用（较溶媒组<10%）[2] ； |
| 细胞实验 |
1. 癌细胞ALDH1A1活性测定实验（Aldafluor实验）：癌细胞（如SCC-25、MCF-7）以5×10⁵细胞/孔接种于6-well板，贴壁过夜。细胞用NCT-501（0.5-50 nM）或溶媒（0.1% DMSO）处理24小时后收集，重悬于含ALDH底物（BODIPY-氨基乙醛）的Aldafluor实验缓冲液中；部分细胞同时加入二乙氨基苯甲醛（DEAB，泛ALDH抑制剂）作为阴性对照。37℃孵育45分钟后，通过流式细胞术量化ALDH1A1阳性细胞比例（Aldafluor高荧光群体）和平均荧光强度（MFI）[2]
； 2. HNSCC CSC克隆形成实验：通过流式细胞术将顺铂耐药SCC-25/R细胞分为ALDH1A1阳性（CSC富集）和ALDH1A1阴性群体。ALDH1A1阳性细胞以200细胞/孔接种于6-well板，用NCT-501（5-20 nM）±顺铂（2.5-10 μM）处理14天。用0.1%结晶紫染色计数>50个细胞的克隆，克隆形成效率（CFE）计算为（克隆数/接种细胞数）×100%。10 nM NCT-501+5 μM顺铂处理组ALDH1A1阳性细胞的CFE约为8%，而溶媒组约为35%，顺铂单独组约为18% [1] ； 3. 细胞活力实验（MTT）：顺铂耐药SCC-25/R和FaDu/R细胞以3×10³细胞/孔接种于96-well板。24小时后，细胞用NCT-501（1-1000 nM）单独处理或与顺铂（0.1-50 μM）联合处理72小时。每孔加入10 μL MTT试剂（5 mg/mL），37℃孵育4小时后移除上清，加入100 μL DMSO溶解甲臜结晶，在570 nm波长下测定吸光度。使用GraphPad Prism软件计算顺铂的IC50值 [1] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： 5-6周龄雄性Hsd：无胸腺裸鼠-Foxn1nu（携带Cal-27 CisR细胞的免疫缺陷小鼠）[1]
剂量： 100µg/只动物 给药途径： 瘤内注射（it）；隔日一次，持续20天 实验结果： 显示出Cal-27 CisR来源的异种移植瘤生长抑制率达78%。 1. 用于逆转化疗耐药性的HNSCC异种移植模型：雌性裸鼠（6-8周龄，18-22克）在实验前适应环境1周。将顺铂耐药的 SCC-25/R 细胞（2×10⁶ 个细胞溶于 100 μL PBS + 50% Matrigel 中）皮下注射到每只小鼠的右侧腹部。当肿瘤体积达到约 150 mm³（第 0 天）时，将小鼠随机分为四组（n=6）： - 载体组：腹腔注射 5% DMSO + 95% 生理盐水（100 μL/只，每日一次），持续 21 天； - NCT-501 单药组：将 20 mg/kg NCT-501 溶于 5% DMSO + 95% 生理盐水（100 μL/只），腹腔注射，每日一次，持续 21 天； - 顺铂单药组：将 2 mg/kg 顺铂溶于生理盐水（100 μL/只），每 3 天腹腔注射一次，共 7 次（21 天内总剂量为 14 mg/kg）； - 联合用药组：将 NCT-501（20分别给予小鼠 2 mg/kg（腹腔注射，每日一次）和顺铂（2 mg/kg，腹腔注射，每 3 天一次），持续 21 天。 每 3 天使用游标卡尺测量肿瘤体积，体积计算公式为（长度 × 宽度²）/2。每周记录体重以监测毒性。实验结束时，处死小鼠，切除肿瘤，称重，并储存在 -80°C 下，用于后续的 ALDH1A1 活性分析 [1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 体外毒性：NCT-501 对癌细胞的选择性远高于正常细胞。在正常人口腔角质形成细胞 (NHOK) 和人包皮成纤维细胞 (HFF) 中，其细胞活力 IC50 > 1000 nM，而 ALDH1A1 阳性癌细胞的 IC50 为 2.3-5.7 nM [1, 2]；2. 体内毒性：在头颈部鳞状细胞癌 (HNSCC) 异种移植研究中，各组均未观察到死亡或严重临床症状（例如嗜睡、腹泻、脱发）。NCT-501 单药治疗组和联合治疗组小鼠的平均体重较基线下降 < 5%，差异无统计学意义。安乐死时测得的血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、血尿素氮（BUN）和肌酐水平均在各组的正常范围内[1]
； 3. 血浆蛋白结合率：[1]和[2]中未描述NCT-501的血浆蛋白结合率数据 ； |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
1. NCT-501 是一种基于茶碱的小分子 ALDH1A1 抑制剂，旨在治疗依赖于 ALDH1A1 阳性癌症干细胞 (CSC) 的癌症（例如，头颈癌、乳腺癌、结肠癌）。其对 ALDH1A1 的选择性归因于其独特的结合模式：它占据 ALDH1A1 的底物结合口袋，并与在其他 ALDH 同工酶中保守性较低的关键残基（例如，Ser47、Tyr115）形成氢键 [2]；2. 在头颈癌中，获得性化疗耐药主要由 ALDH1A1 阳性 CSC 驱动——ALDH1A1 通过代谢化疗药物（例如，顺铂）的醛类中间体来解毒，并通过调节氧化还原稳态来维持 CSC 的干性。 NCT-501 通过抑制 ALDH1A1 来消除这种耐药性，从而降低癌症干细胞 (CSC) 的存活率并增强顺铂诱导的细胞毒性 [1]；
3. 在头颈部鳞状细胞癌 (HNSCC) 细胞系和异种移植瘤中的临床前数据表明，NCT-501（体外 10-20 nM，体内 20 mg/kg）能有效靶向 CSC 并逆转顺铂耐药性，且无明显毒性，这支持了其作为 ALDH1A1 阳性癌症标准化疗联合疗法的潜力 [1, 2]。 |
| 分子式 |
C21H32N6O3
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|---|---|---|
| 分子量 |
416.52
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| 精确质量 |
416.253
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| 元素分析 |
C, 60.56; H, 7.74; N, 20.18; O, 11.52
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| CAS号 |
1802088-50-1
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| 相关CAS号 |
NCT-501 hydrochloride;2080306-22-3
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| PubChem CID |
92044412
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
627.3±65.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
333.2±34.3 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.8 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.673
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| LogP |
1.25
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| tPSA |
82
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
30
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| 分子复杂度/Complexity |
688
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=C(C1([H])C([H])([H])C1([H])[H])N1C([H])([H])C([H])([H])N(C([H])([H])C2=NC3=C(C(N(C([H])([H])[H])C(N3C([H])([H])[H])=O)=O)N2C([H])([H])C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])C([H])([H])C1([H])[H]
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| InChi Key |
FSXIBBYWVGWQJL-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C21H32N6O3/c1-14(2)7-8-27-16(22-18-17(27)20(29)24(4)21(30)23(18)3)13-25-9-11-26(12-10-25)19(28)15-5-6-15/h14-15H,5-13H2,1-4H3
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| 化学名 |
8-[[4-(cyclopropanecarbonyl)piperazin-1-yl]methyl]-1,3-dimethyl-7-(3-methylbutyl)purine-2,6-dione
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (3.00 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 12.5mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (3.00 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 12.5 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4008 mL | 12.0042 mL | 24.0085 mL | |
| 5 mM | 0.4802 mL | 2.4008 mL | 4.8017 mL | |
| 10 mM | 0.2401 mL | 1.2004 mL | 2.4008 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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Succinate dehydrogenase-IN-4
Succinate dehydrogenase-IN-5
Succinate dehydrogenase-IN-2
甘草次酸
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