Norgestrel   中文名称: 炔诺孕酮

Nrf2 (NF-E2-related factor 2): Norgestrel modulates Nrf2 signaling by increasing its phosphorylation at serine 40, promoting nuclear translocation, and enhancing expression of its target antioxidant proteins. No direct binding IC50/Ki values are provided. [2]
SOD2 (Superoxide Dismutase 2): Norgestrel increases expression of SOD2, a mitochondrial antioxidant enzyme regulated by Nrf2. [2]
Progesterone Receptor Membrane Component 1 (PGRMC1): Norgestrel is known to act through this non-classical receptor, though this study focuses on antioxidant effects. [2]

用炔诺酮（20 µM；24 小时；661W 细胞）处理后，血清剥夺后的细胞存活率显著提高，表明炔诺酮对受损的 661W 细胞具有神经保护作用 [1]。炔诺酮（20 µM；24 小时；661W 细胞）处理可降低细胞凋亡产生的 caspase-3 和 PARP 裂解 [1]。当感光细胞用炔诺酮（20 µM）处理 6 小时后，661W 细胞中 bFGF mRNA 的表达显著增加 [1]。

用炔诺酮（100 mg/kg；腹腔注射；6、24 或 48 小时；Balb/c 小鼠）治疗可抑制光照引起的活性氧（ROS）生成，进而阻止感光细胞死亡。主要的抗氧化转录因子 Nrf2 受炔诺酮的翻译后调控，导致其磷酸化、核转位，并提高其效应蛋白超氧化物歧化酶 2 (SOD2) 的水平 [2]。

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光诱导视网膜变性模型（Balb/c 小鼠）：小鼠在光照损伤（5000 lx 冷白荧光灯照射 2 小时）前 1 小时腹腔注射炔诺酮（100 mg/kg）或溶剂（50 μL DMSO/花生油）。然后将小鼠置于黑暗中，并在光照损伤后 6、24 或 48 小时处死，用于分析。 [2]
抑制活性氧（ROS）生成：二氢乙锭染色显示，与载体对照组小鼠相比，炔诺酮在光损伤后6、24和48小时可抑制感光细胞层和外核层中光诱导的ROS生成。[2]
抑制感光细胞死亡：TUNEL检测显示，炔诺酮在光损伤后24和48小时可抑制感光细胞的光诱导凋亡。炔诺酮治疗组小鼠的外核层厚度得以维持。[2]
保护感光细胞形态：抗视紫红质（用于视杆细胞）和花生凝集素（用于视锥细胞）免疫荧光染色显示，炔诺酮可预防光诱导的形态损伤，包括视紫红质移位、视锥细胞碎裂和突触小泡丢失。 [2]
线粒体ROS减少：使用MitoSox对视网膜单细胞悬液进行流式细胞术分析显示，与对照组相比，炔诺酮在光损伤后6小时（p < 0.001）、24小时（p < 0.01）和48小时（p < 0.01）均显著降低了线粒体ROS水平。[2]
Nrf2表达诱导：免疫荧光染色显示，炔诺酮在光损伤后所有时间点（6、24、48小时）均显著增加了感光细胞层中Nrf2的表达。定量分析显示，所有时间点的Nrf2表达均显著增加。[2]
SOD2表达诱导：免疫荧光染色显示，炔诺酮在光损伤后所有时间点均增加了感光细胞内节（线粒体所在位置）中SOD2的表达。定量分析显示，所有时间点的SOD2表达均显著增加。 [2]
对SOD1表达无影响：在光损伤后的任何时间点，炔诺酮均未增加SOD1的表达。[2]
Nrf2磷酸化和核转位：亚细胞组分的Western blot分析显示，在光损伤后6、24和48小时，炔诺酮增加了核组分中磷酸化Nrf2（Ser40）的水平。免疫荧光染色证实，炔诺酮处理的小鼠光感受器细胞核中pNrf2增加。[2]
Nrf2无转录调控：qRT-PCR结果显示，在任何时间点，载体组和炔诺酮处理组小鼠的nrf2 mRNA表达均无变化，表明存在翻译后调控。[2]

细胞活力检测[1]
细胞类型： 661W 细胞
测试浓度： 20 µM
孵育时间： 24 小时
实验结果： 血清剥夺后细胞活力显著增加。

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蛋白质印迹分析[1]
细胞类型： 661W 细胞
测试浓度： 20 µM
孵育时间： 24 小时
实验结果： 凋亡诱导的 PARP 和 caspase-3 裂解减少。

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RT-PCR[1]
细胞类型： 661W 细胞
测试浓度： 20 µM
孵育时间： 6 小时
实验结果： bFGF mRNA 在 1 小时内显著上调。

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视网膜单细胞悬液制备：将视网膜置于冰冷的 DMEM 培养基中解剖，加入 2.5 mL 含 50 μL DNase II 的 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 溶液，于 37°C 消化 15 分钟。弃去消化液后，加入 2.5 mL 含 50 μL DNase II 的 DMEM 培养基，用移液器吹打匀浆。待大块细胞碎片沉淀后，收集 2 mL 单细胞悬液。细胞活力通过台盼蓝排除法评估（活力约为 80%）。[2]
线粒体 ROS 的 MitoSox 染色：将单细胞悬液与 5 μM MitoSox 在 37°C 下孵育 15 分钟。使用 FACScan 流式细胞仪测量荧光（激发波长 488 nm，发射光在 670LP 通道收集）。在设门的光感受器区域计数 10,000 个事件。使用 FlowJo 软件分析结果。[2]
细胞涂片制备：为验证细胞完整性，取 200 μL 单细胞悬液，使用细胞离心机制备细胞涂片。用视紫红质抗体和 Hoechst 染色细胞涂片，以确认光感受器细胞保持完整。[2]

动物/疾病模型： balb/c（Bagg ALBino）小鼠出生后在昏暗循环光照下饲养[2]
剂量： 100 mg/kg；
给药途径： 腹腔注射；6、24 或 48 小时（小时）
实验结果： 通过丝氨酸 40 位点磷酸化和激活，增加 Nrf2 的表达，进而增加其靶标抗氧化剂超氧化物歧化酶 2 (SOD2) 的表达，并降低线粒体氧化应激。

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光损伤模型：** Balb/c 小鼠出生后在昏暗循环光照（<10 lx，12 小时开/12 小时关）下饲养。4-7 周龄时，小鼠在光照前进行 18 小时的暗适应。小鼠在光照损伤前1小时腹腔注射50 μL溶剂（25 μL DMSO/25 μL花生油）或50 μL炔诺酮（100 mg/kg）。光照前，在红光照射下用0.5%环戊通散瞳。视网膜光损伤通过冷白荧光灯（5000 lx）照射2小时诱导。光照后，小鼠在黑暗中分别饲养6、24或48小时，然后通过颈椎脱臼处死。[2] * **DHE给药用于ROS检测：** 光照损伤后，小鼠在弱光条件下处死前3.5-4小时，腹腔注射两次20 mg/kg二氢乙锭（DHE），两次注射间隔30分钟。之后将小鼠放回黑暗中直至处死。 [2]
* **组织采集：** 将摘除的眼球固定于 4% 多聚甲醛溶液中 1.5 小时，在 4°C 下用 30% 蔗糖溶液进行过夜低温保护，然后冷冻于 Shandon Cryomatrix 冷冻膜中，并使用低温恒温切片机切成 7 μm 厚的切片。切片保存于 -80°C。[2]
* **亚细胞组分分离：** 使用含有 Halt 蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物的组织特异性试剂盒，对速冻视网膜（每个时间点每组约 4 个视网膜，混合）进行亚细胞组分分离。根据试剂盒说明书制备胞质和核组分。[2]

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光损伤模型：Balb/c 小鼠出生后饲养于弱光循环光照（<10 lx，12 小时开/12 小时关）环境中。小鼠在4-7周龄时，于光照前进行18小时的暗适应。光照损伤前1小时，小鼠腹腔注射50 μL溶剂（25 μL DMSO/25 μL花生油）或50 μL炔诺酮（100 mg/kg）。光照前，在红光照射下用0.5%环戊通散瞳。视网膜光损伤通过冷白荧光灯（5000 lx）照射2小时诱导。光照后，小鼠在黑暗中分别饲养6、24或48小时，然后通过颈椎脱臼处死。[2]
DHE给药用于ROS检测：光照损伤后，小鼠在弱光条件下处死前3.5-4小时，腹腔注射两次20 mg/kg二氢乙锭（DHE），两次注射间隔30分钟。小鼠被放回黑暗处死。[2]
组织采集：摘除眼球后，用4%多聚甲醛固定1.5小时，在4℃下用30%蔗糖溶液进行过夜低温保护，然后冷冻于Shandon Cryomatrix冷冻保护剂中，并使用低温恒温切片机切成7 μm厚的切片。切片保存于-80℃。[2]
亚细胞组分分离：使用含有Halt蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物的组织特异性试剂盒，对速冻视网膜（每个时间点每组约4个视网膜，混合）进行亚细胞组分分离。根据试剂盒说明书制备胞质和核组分。[2]

吸收、分布和排泄
炔诺酮经胃肠道吸收，在肝脏代谢，并以葡萄糖醛酸苷和硫酸盐结合物的形式经尿液和粪便排出。在7名服用¹⁴C-炔诺酮的受试者中，5天内有43%的剂量经尿液排出；放射性生物半衰期为24小时。酶水解仅释放了32%的尿放射性，另有25%以硫酸盐结合物的形式排出。尿液中排出的代谢物极性显著低于服用相关化合物炔诺酮或乙炔后排出的代谢物。从尿液中分离出四氢炔诺酮（13β-乙基-17α-乙炔基-5β-gonan-3α,17β-二醇）的3αOH,5β和3βOH,5β异构体，并采用质谱、薄层色谱和气液色谱法进行鉴定。与乙炔或乙炔相比，服用炔诺酮后血浆放射性下降更快。约2%的给药剂量转化为酸性化合物。口服或静脉注射炔诺酮后，放射性排泄率或代谢物无显著差异。通过竞争性蛋白结合系统测定不同合成类固醇（用于激素避孕）从性激素结合球蛋白（SHBG）上置换氚标记睾酮的能力，研究了这些类固醇与SHBG的结合情况。仅有 19-去甲睾酮衍生物表现出显著的从性激素结合球蛋白 (SHBG) 中置换睾酮的能力，其中右炔诺酮 (d-Ng) 的置换能力最强。在既往血浆 d-Ng 水平稳定的女性中，SHBG 水平升高导致 SHBG 水平升高 2 至 6 倍。由此得出结论，SHBG 是 d-Ng 的主要载体蛋白。d-Ng 强大的睾酮置换活性也可能解释了含 d-Ng 的口服避孕药中观察到的雄激素副作用。

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代谢/代谢物
(14) 对 7 名受试者给予 C-去甲炔诺酮，5 天内 43% 的剂量经尿液排出……酶水解仅释放出 32% 的尿放射性，另有 25% 以硫酸盐结合物的形式排出。尿液中排泄的代谢物极性远低于服用相关化合物炔诺酮或其代谢物后产生的代谢物。从尿液中分离出四氢炔诺酮（13β-乙基-17α-乙炔基-5β-gonan-3α,17β-二醇）的3αOH,5β和3βOH,5β异构体，并通过质谱、薄层色谱和气液色谱法进行了鉴定。服用炔诺酮后，血浆放射性下降速度比服用炔诺酮或其代谢物后更快。约2%的给药剂量转化为酸性化合物。口服或静脉注射炔诺酮后，放射性排泄速率或代谢物含量无显著差异。在非洲绿猴（Cercopithecus aethiops）中研究了dl-、d-和l-炔诺酮的代谢。单次口服¹⁴C-dl-炔诺酮（1 mg/kg）后，¹⁴C的总尿排泄量（51.4 ± 5.0%）显著高于服用d-对映体后的排泄量（37.5 ± 5.4%），但与服用l-对映体后的排泄量（44.2 ± 8.9%）无显著差异。在所有情况下，尿液中大部分放射性物质以游离形式存在（48–62%），另有13–27%由β-葡萄糖醛酸酶制剂释放。未检测到硫酸盐结合物。至少有一条主要代谢途径（¹⁶β-羟基化）和一条次要代谢途径（¹⁶α-羟基化）表现出立体选择性，这意味着它们对¹⁴I-对映体有效，但对d-对映体无效。三种代谢物，即16β-羟基炔诺酮、16α-羟基炔诺酮和16-羟基四氢炔诺酮（推测为16β），仅在服用14Cdl-炔诺酮的动物尿液样本中检测到。服用14Cd-炔诺酮后，发现3α,5β-四氢炔诺酮是主要的尿液代谢物。这些观察结果与先前报道的关于dl-炔诺酮在女性尿液中代谢的结果进行了比较。研究了兔肝微粒体组分对炔诺酮立体异构体（d、l和dl的消旋混合物）的体外代谢。具有生物活性的1-炔诺酮的代谢速度比无活性的d-炔诺酮更快。这主要是因为左炔诺孕酮更容易转化为其A环还原代谢物。两种异构体的羟基化程度没有差异；孵育30分钟后，每种异构体约有40%转化为其羟基化代谢物。然而，两种异构体之间存在差异：左炔诺孕酮主要转化为16β-羟基类固醇，而右炔诺孕酮则转化为16α-羟基类固醇。两种异构体在C-6位的羟基化程度相似。外消旋混合物的代谢介于左炔诺孕酮和右炔诺孕酮异构体之间。比较了兔肝组织中19-去甲睾酮衍生的合成孕激素的体外代谢速率。1小时内，炔诺酮的代谢速率与19-去甲睾酮相当，而右炔诺孕酮和炔诺酮的代谢速率略低。左炔诺孕酮的代谢速率低于5%。在所有情况下，反应产物均为四氢类固醇。炔诺酮经左炔诺孕酮代谢。骨骼肌、肺和小肠也能代谢炔诺酮和右孕酮，但速度比肝组织慢。脂肪组织能代谢少量炔诺酮，但心脏和脾脏不能。在所研究的任何肝外组织中，炔诺酮和左炔诺孕酮均未被代谢。
一项体外研究使用少量人空肠黏膜，研究了三种用于口服避孕药（OC）的类固醇的代谢。进行这项研究的原因是已知人胃肠道黏膜能代谢多种药物。孵育后，约40%的炔雌醇、9.8%的左炔诺孕酮和7%的炔雌醇被代谢。所有这些代谢反应均与对照组存在显著差异。结果表明，炔雌醇的代谢与所用组织的重量相关。这些结果与已知的炔雌醇显著首过效应相符。已知首过效应较小或无首过效应的炔诺酮，其肠道代谢率也较低。在所用的实验条件下，未观察到炔雌醇或左炔诺孕酮的I期代谢。
肝脏代谢。
排泄途径：约45%的左炔诺孕酮及其代谢物经尿液排泄，约32%经粪便排泄，主要以葡萄糖醛酸苷结合物的形式存在。

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生物半衰期
(14) 向7名受试者服用C-炔诺酮，5天内43%的剂量经尿液排泄；该放射性物质的生物半衰期为24小时。

毒性概述
与孕激素和雌激素受体结合。靶细胞包括女性生殖道、乳腺、下丘脑和垂体。一旦孕激素（例如左炔诺孕酮）与其受体结合，它们就会减缓下丘脑促性腺激素释放激素 (GnRH) 的释放频率，并抑制排卵前黄体生成素 (LH) 的激增。 毒性数据
LD50 >5000 mg/kg（大鼠口服） 相互作用 与已知可诱导药物代谢酶（尤其是细胞色素P450酶）的物质合用，例如抗惊厥药（如苯巴比妥、苯妥英、卡马西平）和抗感染药（如利福平、利福布汀、奈韦拉平、依非韦伦），可能会增加雌激素和孕激素的代谢。利托那韦和奈非那韦虽然是已知的强效抑制剂，但与这些药物合用时也会出现诱导作用。当与类固醇激素合用时，含有贯叶连翘的草药制剂可能会诱导雌激素和孕激素的代谢。苯妥英和利福平会增加血清中性激素结合球蛋白 (SHBG) 的浓度；这会显著降低某些孕激素的游离药物血清浓度，对于使用孕激素避孕的患者来说，这尤其值得关注。/孕激素/ 目前尚无利福布汀与孕激素相互作用的数据，但由于其结构与利福平相似，因此在与孕激素合用时可能需要采取类似的预防措施。……/孕激素/

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非人类毒性值
大鼠口服 LD50 5010 mg/kg
大鼠腹腔注射 LD50 11,200 mg/kg
小鼠腹腔注射 LD50 7300 mg/kg
小鼠口服 LD50 5010 mg/kg

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[1]. The synthetic progesterone Norgestrel is neuroprotective in stressed photoreceptor-like cellsand retinal explants, mediating its effects via basic fibroblast growth factor, protein kinase A and glycogen synthase kinase 3β signalling. Eur J Neurosci. 2016 Apr;43(7):899-911.

[2]. The synthetic progestin norgestrel modulates Nrf2 signaling and acts as an antioxidant in a model of retinal degeneration. Redox Biol. 2016 Dec;10:128-139.

治疗用途

口服合成避孕药；合成孕激素
低剂量炔诺酮（炔诺酮和炔雌醇片）适用于选择使用本产品作为避孕方法以防止怀孕的女性。/美国产品标签包含/
/环丙孕酮适用于/围绝经期和绝经后妇女雌激素缺乏症状的激素替代疗法 (HRT)。
/环丙孕酮适用于/预防绝经后妇女骨质疏松症，适用于未来骨折风险高且无法耐受或不宜使用其他已批准的骨质疏松症预防药物的妇女。
炔诺酮…/适用于/预防怀孕。仅含孕激素的口服避孕药也称为迷你避孕药或仅含孕激素的口服避孕药 (POP)。 /服用前/
药物警告
服用口服避孕药后，吸烟会增加发生严重心血管副作用的风险。这种风险会随着年龄的增长和吸烟量的增加（每天15支或以上）而增加，尤其在35岁以上的女性中更为显著。强烈建议服用口服避孕药的女性不要吸烟。
服用口服避孕药会增加多种严重疾病的风险，包括心肌梗死、血栓栓塞、中风、肝肿瘤和胆囊疾病。但是，对于没有潜在危险因素的健康女性来说，发生严重疾病或死亡的风险非常小。如果存在其他潜在危险因素，例如高血压、高脂血症、高胆固醇血症、肥胖和糖尿病，则发病率和死亡率会显著增加。
如果女性患有以下疾病，则不应服用口服避孕药：血栓性静脉炎或血栓栓塞性疾病；有深静脉血栓形成或血栓栓塞性疾病史；脑血管或冠状动脉疾病；已知或疑似乳腺癌；子宫内膜癌或其他已知或疑似雌激素依赖性肿瘤；不明原因的异常生殖器出血；妊娠期胆汁淤积性黄疸或既往服用口服避孕药后出现的黄疸；肝腺瘤、肝癌或良性肝肿瘤；或已知或疑似妊娠。
口服避孕药最常见的不良反应是恶心。使用阴道或经皮雌孕激素避孕药的女性也有恶心的报道。目前推荐的高剂量性交后雌孕激素联合用药方案的主要风险似乎是中度至重度胃肠道不良反应，包括严重呕吐和恶心，分别在接受短期疗程的女性中发生率为12-22%和30-66%，这可能会限制患者的依从性和治疗效果。在两项前瞻性随机研究中，与高剂量雌激素-孕激素联合用药方案（100微克炔雌醇和0.5毫克左炔诺孕酮，每12小时两次）相比，高剂量性交后孕激素单药治疗方案（0.75毫克左炔诺孕酮，每12小时两次）的恶心和呕吐发生率较低。其他胃肠道不良反应包括呕吐、腹部绞痛、腹痛、腹胀、腹泻和便秘。也有牙龈炎和干槽症的报道。食欲和体重也可能发生变化。/雌激素-孕激素联合制剂/
有关诺孕酮（52项）药物警告的更完整数据，请访问HSDB记录页面。

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背景：诺孕酮是FDA批准的合成孕激素类似物。此前研究表明，炔诺酮在视网膜色素变性模型中具有神经保护作用，可通过上调神经营养因子bFGF和LIF来挽救感光细胞免于死亡。[2]
作用机制（抗氧化）：本研究表明，炔诺酮通过调节Nrf2信号通路在视网膜中发挥强效抗氧化作用。它可增加Nrf2在丝氨酸40位的磷酸化（可能通过PKC途径），从而导致Nrf2核转位并增加线粒体抗氧化酶SOD2的表达。这可减少线粒体活性氧（ROS），并保护感光细胞免受氧化应激诱导的细胞死亡和形态损伤。[2]
翻译后调控：炔诺酮不影响nrf2 mRNA水平，而是通过翻译后修饰来提高Nrf2蛋白的稳定性和活性。该研究还指出，炔诺酮抑制GSK3β，这可能通过阻止Nrf2的核输出而促进其持续激活。[2]
对SOD2而非SOD1的选择性：炔诺酮可增加SOD2（线粒体）而非SOD1（胞质）的水平，这与其对线粒体活性氧（ROS）的影响以及SOD2对感光细胞存活的重要性相一致。[2]
治疗潜力：研究结果表明，炔诺酮可能成为治疗视网膜色素变性和其他视网膜退行性疾病的潜在选择，因为其抗氧化作用不区分不同的遗传病因。[2]
资金支持：本研究由爱尔兰科学基金会和对抗失明协会资助。[2]

C21H28O2

312.453

312.208

6533-00-2

13109

White to off-white solid powder

1.1±0.1 g/cm3

459.1±45.0 °C at 760 mmHg

205-207 °C

195.4±21.3 °C

0.0±2.6 mmHg at 25°C

1.571

3.92

37.3

1

2

2

23

609

6

CC[C@@]12CC[C@@H]3C4CCC(=O)C=C4CC[C@H]3[C@@H]2CC[C@]1(C#C)O

WWYNJERNGUHSAO-XUDSTZEESA-N

InChI=1S/C21H28O2/c1-3-20-11-9-17-16-8-6-15(22)13-14(16)5-7-18(17)19(20)10-12-21(20,23)4-2/h2,13,16-19,23H,3,5-12H2,1H3/t16-,17+,18+,19-,20-,21-/m0/s1

(8R,9S,10R,13S,14S,17R)-13-ethyl-17-ethynyl-17-hydroxy-1,2,6,7,8,9,10,11,12,14,15,16-dodecahydrocyclopenta[a]phenanthren-3-one

Norgestrel SH 850 SH 70850

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~100 mg/mL (~320.05 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.00 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.00 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.00 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。