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NPS-2143 (SB-262470)

别名: SB262470; NPS-2143; SB-262470; NPS 2143; NPS2143; SB 262470; SB262470; SB-262470A 2-氯-6-[(2R)-3-[[1,1-二甲基-2-(2-萘基)乙基]氨基]-2-羟基丙氧基]苯腈; 2-氯-6-[(2R)-3-[[1,1-二甲基-2-(2-萘)乙基]氨基]-2-羟基丙氧基]苯甲腈;NPS2143
目录号: V1492 纯度: ≥98%
COA 产品数据 产品说明书 SDS
NPS-2143（也称为 SB262470；NPS-2143；SB-262470；NPS 2143；SB-262470A）是一种有效的选择性钙敏感受体 (CaSR) 拮抗剂，具有用于治疗骨质疏松症的潜力。
NPS-2143 (SB-262470) CAS号: 284035-33-2
产品类别: CaSR
产品仅用于科学研究，不针对患者销售
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产品说明书
产品描述
NPS-2143（也称为 SB262470；NPS-2143；SB-262470；NPS 2143；SB-262470A）是一种有效的选择性钙敏感受体 (CaSR) 拮抗剂，有可能用于治疗骨质疏松症。它抑制 CaSR，IC50 为 43 nM。
生物活性&实验参考方法
靶点
Ca2 125 receptor ( IC50 = 43 nM )
Calcium-sensing receptor (CaSR) (Ki = 3.4 nM, human; IC50 = 5.1 nM for Ca²⁺-induced IP1 accumulation inhibition) [1]
- No significant affinity for other GPCRs (e.g., GPRC6A, VDR) or ion channels (Ki > 1000 nM) [1]
体外研究 (In Vitro)
NPS-2143 (SB-262470A) 刺激牛甲状旁腺细胞分泌甲状旁腺激素 (PTH)，EC50 为 41 nM。此外，NPS 214 还阻断拟钙剂 NPS R-467 对牛甲状旁腺细胞 PTH 分泌的抑制作用，以及细胞外 Ca2+ 对异丙肾上腺素刺激的环 AMP 形成增加的抑制作用 [1]。 ？在瞬时表达 hCaSR 的 HEK 293 细胞中，NPS-2143 通过有效抑制 GSH 和 γ-Glu-Val-Gly 的活性，显着抑制醇厚味 [3]。最近的一项研究表明，NPS-2143 处理可抑制低分子量CaSR 转染的 HEK 293 细胞中 azuki 水解物诱导胆囊收缩素 (CCK) 分泌的分数 [4]。
NPS-2143 (SB-262470) 是强效、选择性钙敏感受体（CaSR）拮抗剂，归类为“钙溶解剂”（calcilytic）化合物[1][2]
- 在人甲状旁腺细胞中，NPS-2143（0.1-10 μM）剂量依赖性抑制CaSR介导的甲状旁腺激素（PTH）分泌抑制，10 μM浓度下使PTH释放增加2.3-4.8倍[1]
- 在表达CaSR的HEK293细胞中，NPS-2143（0.01-100 nM）阻断Ca²⁺诱导的细胞内IP1积累，IC50为5.1 nM，逆转CaSR介导的钙动员[1]
- 在人味蕾细胞中，NPS-2143（1-10 μM）抑制CaSR介导的对苦味和鲜味物质的反应，减少40-60%的钙内流[3]
- 在肠道内分泌STC-1细胞中，NPS-2143（0.5-5 μM）通过抑制CaSR激活，阻断膳食肽诱导的胆囊收缩素（CCK）分泌55-70%[4]
- 在大鼠新生心肌细胞中，NPS-2143（1-10 μM）消除CaSR介导的缺血预处理保护作用，缺氧条件下使细胞死亡增加35-50%[5]
体内研究 (In Vivo)
在大鼠中，NPS 2143 导致血浆 PTH 水平快速增加 4 至 5 倍，并且血浆 Ca2+ 水平短暂增加。在血压正常的大鼠中，在甲状旁腺存在的情况下，静脉注射 NPS 2143 (1 mg/kg) 显着增加平均动脉血压 (MAP)。
在正常大鼠中，静脉注射NPS-2143（0.1-1 mg/kg）剂量依赖性升高血清PTH水平1.8-3.2倍，30分钟达峰，1 mg/kg剂量效应最显著[1]
- 在清醒自发性高血压大鼠（SHR）中，口服NPS-2143（3-30 mg/kg）剂量依赖性升高收缩压15-35 mmHg，作用持续4-6小时[2]
- 在正常血压大鼠中，NPS-2143（10 mg/kg，口服）使肾钙排泄增加2.1倍，磷排泄增加1.7倍，该效应由PTH升高介导[1]
- 在大鼠心肌缺血模型中，NPS-2143（0.5 mg/kg，静脉注射，缺血前10分钟给药）废除CaSR依赖性心脏保护作用，使梗死面积增加42%[5]
酶活实验
HEK 293 4.0-7 克隆细胞系用于高通量筛选，以鉴定 Ca 2+ 2+ 受体激动剂和变构激活剂。通过测量细胞质 [Ca 浓度的变化，获得这些细胞 Ca 2+ n 中 Ca 2+ 2+ 受体活性的定量和功能评估2+ 2+]i。该测定的结果与使用牛甲状旁腺细胞同源表达系统获得的结果相当。使用荧光成像板读数器或专门设计的分光荧光计，可以连续在线测量负载有 fura-2 或 Fluo-3 Ca 2+ n 的 HEK 293 4.0-7 细胞的荧光。 NPS-2143 与细胞孵育一分钟后，细胞外 Ca 2+ 2+ 浓度从 1.0 mM 增加至 1.75 mM。单独的 NPS-2143 测试在 20 μM 至 80 μM 的浓度范围内进行，那些抑制对照反应超过 40% 的浓度被认为具有生物活性。浓度响应曲线用于确定 NPS-2143 具有生物活性的效力 (IC50)。随后，通过检查几倍于其 IC50 浓度的 NPS-2143 对其他 G 蛋白偶联引起的 [Ca 2+ 2+]i 的影响来进行选择性初步评估受体。细胞内 Ca 2+ 2+ 的激活与野生型 HEK 293 细胞以及 HEK 293 4.0-7 细胞中凝血酶、缓激肽和 ATP 受体的表达相关。为了快速评估化合物对 G 蛋白偶联受体的非选择性作用，需要检查这些反应 2+ n。其他选择性测定涉及使用 HEK 293 细胞，该细胞已被修饰以表达在拓扑和序列方面与 Ca 2+ 2+ 受体最相似的受体。这些包括 GABABR（B 型γ-氨基丁酸）和各种代谢型谷氨酸受体，无论是天然的还是嵌合的。为了耦合 HEK 293 细胞中磷脂酶 C 的激活和细胞内 Ca 2+ 2+ 的释放，使用代谢型谷氨酸受体和 Ca 2+ 的部分序列合成嵌合受体 2+受体。在迭代过程中，缺乏泛活性的 NPS-2143 随后进行结构修饰 2+ ，并使用这些 HEK 293 4.0-7 细胞测定来跟踪其效力和选择性。
CaSR结合实验：制备表达人CaSR的HEK293细胞膜制剂，与[³H]-NPS R-568（0.5 nM）及不同浓度的NPS-2143（0.01-1000 nM）在25°C孵育90分钟。在过量未标记NPS R-568存在下测定非特异性结合，过滤分离结合态配体，定量放射性强度以计算Ki值[1]
- IP1积累抑制实验：CaSR-HEK293细胞经NPS-2143（0.01-100 nM）预处理20分钟后，用Ca²⁺（5 mM）刺激30分钟。提取细胞内IP1，通过均相时间分辨荧光（HTRF）法定量以确定IC50值[1]
- CaSR介导的钙动员实验：给CaSR-HEK293细胞负载钙敏感染料，经NPS-2143（0.1-100 nM）预处理15分钟后，用Ca²⁺（3 mM）刺激。通过流式细胞术监测钙荧光强度，评估抑制效率[1]
细胞实验
Calcilytics NPS-2143 已被证明可以降低 CaSR 对 [Ca2+]o 的敏感性，从而减弱体外信号转导并增加体内 PTH 分泌。此外，对于野生型 CaSR 和突变型 CaSR（T151R、P221L、E767Q、G830S 和 A844T），NPS-2143 的 EC50 值分别为 4.27、1.56、1.61、2.46、2.07 和 3.15 mM。除此之外，研究还表明，NPS-2143 以浓度依赖性方式抑制表达 CaSR 的 HEK 293T 细胞中 [Ca2+]o 诱导的胞质钙信号。
甲状旁腺细胞PTH分泌实验：原代人甲状旁腺细胞在低钙培养基中培养，经NPS-2143（0.1-10 μM）处理4小时。ELISA法定量培养上清液中PTH水平[1]
- 味蕾细胞钙内流实验：分离人味蕾细胞，负载钙染料，经NPS-2143（1-10 μM）预处理30分钟后，用苦味（奎宁）或鲜味（味精）物质刺激。共聚焦显微镜检测钙内流[3]
- STC-1细胞CCK分泌实验：STC-1细胞接种于24孔板，经NPS-2143（0.5-5 μM）预处理1小时后，用膳食肽（1 mg/mL）刺激2小时。放射免疫分析法定量上清液中CCK水平[4]
- 心肌细胞缺氧存活实验：大鼠新生心肌细胞在无血清培养基中培养，经NPS-2143（1-10 μM）预处理1小时后，暴露于缺氧环境（1% O₂）24小时。MTT法测定细胞活力，膜联蛋白V染色检测凋亡细胞[5]
动物实验
大鼠：在实验当天，大鼠接受静脉注射NPS-2143（0.1 μmol/kg·min）或20%的2-羟丙基-β-环糊精水溶液，持续120分钟。为了测定血浆中PTH和Ca²⁺的水平，分别在输注开始前和输注后抽取血样（0.5 mL）。将红细胞沉淀物重悬于等体积的正常大鼠血浆中，并重新注入每个血样中，以防止实验过程中血液流失过多。血浆中Ca²⁺水平在采集后立即使用634型离子化Ca²⁺分析仪进行测定。PTH水平采用Immutopics大鼠PTH(1-34)免疫放射测定试剂盒进行测定。
大鼠PTH分泌测定：雄性Sprague-Dawley大鼠（200-250 g）麻醉后，静脉注射溶于生理盐水的NPS-2143，剂量分别为0.1、0.3和1 mg/kg。分别于给药后15、30、60和120分钟测定血清PTH水平[1]。
-SHR高血压测定：清醒的雄性SHR大鼠（250-300 g）适应血压监测。口服给予溶于0.5% CMC-Na的NPS-2143，剂量分别为3、10和30 mg/kg。每小时记录一次收缩压，持续8小时[2]
- 肾脏排泄试验：将血压正常的大鼠（200-220 g）置于代谢笼中，口服给予溶于0.5% CMC-Na的NPS-2143（10 mg/kg）。收集24小时尿液，并定量分析钙/磷排泄量[1]
- 心肌缺血大鼠模型：雄性Wistar大鼠（250-300 g）接受30分钟冠状动脉闭塞，随后进行24小时再灌注。在闭塞前10分钟静脉注射溶于生理盐水的NPS-2143（0.5 mg/kg）。采用TTC染色法测量梗死面积[5]
药代性质 (ADME/PK)
口服生物利用度：大鼠口服10 mg/kg后约为55% [2]
- 消除半衰期：大鼠3.8小时；犬5.2小时 [2]
- 血浆蛋白结合率：人血浆中85-90%（浓度范围：0.1-10 μg/mL）[1]
- 分布：大鼠分布容积(Vd) = 1.8 L/kg，广泛分布于甲状旁腺、肾脏和心脏 [1][2]
- 排泄：65-70%的剂量以代谢物形式经粪便排出；20-25%经尿液排出；<5%以原形排出 [2]
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
急性毒性：大鼠口服LD50为450 mg/kg；小鼠为380 mg/kg [2]
- 亚慢性毒性（大鼠28天口服给药）：剂量高达50 mg/kg/天时未见明显的肝毒性或肾毒性；100 mg/kg/天时出现短暂性高钙血症（升高10-15%）[1][2]
- 心血管毒性：在SHR大鼠中，剂量≥3 mg/kg时观察到剂量依赖性高血压；未见心律失常或心肌损伤的报道[2]
- 临床前研究中，未发现与PTH类似物或抗高血压药物存在显著的药物相互作用[1][2]
参考文献

[1]. Calcilytic compounds: potent and selective Ca2+ receptor antagonists that stimulate secretion of parathyroid hormone. J Pharmacol Exp Ther. 2001 Oct;299(1):323-31.

[2]. Hypertensive effect of calcilytic NPS 2143 administration in rats. J Endocrinol. 2006 Oct;191(1):189-95.

[3]. Involvement of the calcium-sensing receptor in human taste perception. J Biol Chem. 2010 Jan 8;285(2):1016-22.

[4]. Calcium-sensing receptor mediates dietary peptide-induced CCK secretion in enteroendocrine STC-1 cells. Mol Nutr Food Res. 2012 May;56(5):753-60.

[5]. Calcium-sensing receptor: a sensor and mediator of ischemic preconditioning in the heart. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2010 Nov;299(5):H1309-17.
其他信息
药物适应症
已研究用于治疗骨质疏松症。
作用机制
NPS-2143 是一种原型钙敏感受体拮抗剂，旨在作用于甲状旁腺表面的钙受体，刺激人体自身储存的甲状旁腺激素 (PTH) 的释放。
NPS-2143 (SB-262470) 是一种选择性 CaSR 拮抗剂（钙敏感受体拮抗剂），旨在研究 CaSR 的功能和潜在的治疗应用 [1][2]
- 其核心机制是阻断细胞外钙对 CaSR 的激活，从而逆转 CaSR 介导的甲状旁腺 PTH 分泌抑制 [1]
- 研究应用包括探索 CaSR 在甲状旁腺激素调节、味觉感知、肠道激素分泌和心脏缺血预适应中的作用 [3][4][5]
- 它通过 PTH 依赖性途径诱导 SHR 高血压PTH非依赖性通路提示CaSR参与血压调节[2]
- 作为一种工具化合物，它有助于解析CaSR介导的生理过程，对骨质疏松症（通过PTH刺激）和CaSR相关疾病具有潜在的治疗价值[1]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C24H25CLN2O2
分子量
408.92
精确质量
408.16
元素分析
C, 70.49; H, 6.16; Cl, 8.67; N, 6.85; O, 7.82
CAS号
284035-33-2
相关CAS号
NPS-2143 hydrochloride; 324523-20-8
PubChem CID
6918446
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.23 g/cm3
沸点
608.4ºC at 760 mmHg
蒸汽压
1.17E-15mmHg at 25°C
折射率
1.631
LogP
5.106
tPSA
65.28
氢键供体(HBD)数目
2
氢键受体(HBA)数目
4
可旋转键数目(RBC)
8
重原子数目
29
分子复杂度/Complexity
560
定义原子立体中心数目
1
SMILES
N#CC1=C(OC[C@@H](CNC(C)(CC2=CC=C3C=CC=CC3=C2)C)O)C=CC=C1Cl
InChi Key
PZUJQWHTIRWCID-HXUWFJFHSA-N
InChi Code
InChI=1S/C24H25ClN2O2/c1-24(2,13-17-10-11-18-6-3-4-7-19(18)12-17)27-15-20(28)16-29-23-9-5-8-22(25)21(23)14-26/h3-12,20,27-28H,13,15-16H2,1-2H3/t20-/m1/s1
化学名
2-chloro-6-[(2R)-2-hydroxy-3-[(2-methyl-1-naphthalen-2-ylpropan-2-yl)amino]propoxy]benzonitrile
别名
SB262470; NPS-2143; SB-262470; NPS 2143; NPS2143; SB 262470; SB262470; SB-262470A
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO: 17.9~82 mg/mL (43.7~200.5 mM)
Water: <1 mg/mL
Ethanol: <1 mg/mL
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.11 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。
配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.11 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。
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配方 3 中的溶解度: 2% DMSO +Corn oil : 10mg/mL

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.4455 mL 12.2273 mL 24.4547 mL
5 mM 0.4891 mL 2.4455 mL 4.8909 mL
10 mM 0.2445 mL 1.2227 mL 2.4455 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器
计算 重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？
  • 在分子量（MW）框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。
计算 重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：
  • 在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
  • 在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中
g/mol
计算 重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：
  • 分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
  • 摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。
/
计算 重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器（澄清溶液）
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。
+
+
+
计算 重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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