Ca2 125 receptor ( IC50 = 43 nM )
Calcium-sensing receptor (CaSR) (Ki = 3.4 nM, human; IC50 = 5.1 nM for Ca²⁺-induced IP1 accumulation inhibition) [1]
- No significant affinity for other GPCRs (e.g., GPRC6A, VDR) or ion channels (Ki > 1000 nM) [1]

NPS-2143 (SB-262470A) 刺激牛甲状旁腺细胞分泌甲状旁腺激素 (PTH)，EC50 为 41 nM。此外，NPS 214 还阻断拟钙剂 NPS R-467 对牛甲状旁腺细胞 PTH 分泌的抑制作用，以及细胞外 Ca2+ 对异丙肾上腺素刺激的环 AMP 形成增加的抑制作用 [1]。 ？在瞬时表达 hCaSR 的 HEK 293 细胞中，NPS-2143 通过有效抑制 GSH 和 γ-Glu-Val-Gly 的活性，显着抑制醇厚味 [3]。最近的一项研究表明，NPS-2143 处理可抑制低分子量CaSR 转染的 HEK 293 细胞中 azuki 水解物诱导胆囊收缩素 (CCK) 分泌的分数 [4]。

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NPS-2143 (SB-262470) 是强效、选择性钙敏感受体（CaSR）拮抗剂，归类为“钙溶解剂”（calcilytic）化合物[1][2]
- 在人甲状旁腺细胞中，NPS-2143（0.1-10 μM）剂量依赖性抑制CaSR介导的甲状旁腺激素（PTH）分泌抑制，10 μM浓度下使PTH释放增加2.3-4.8倍[1]
- 在表达CaSR的HEK293细胞中，NPS-2143（0.01-100 nM）阻断Ca²⁺诱导的细胞内IP1积累，IC50为5.1 nM，逆转CaSR介导的钙动员[1]
- 在人味蕾细胞中，NPS-2143（1-10 μM）抑制CaSR介导的对苦味和鲜味物质的反应，减少40-60%的钙内流[3]
- 在肠道内分泌STC-1细胞中，NPS-2143（0.5-5 μM）通过抑制CaSR激活，阻断膳食肽诱导的胆囊收缩素（CCK）分泌55-70%[4]
- 在大鼠新生心肌细胞中，NPS-2143（1-10 μM）消除CaSR介导的缺血预处理保护作用，缺氧条件下使细胞死亡增加35-50%[5]

在大鼠中，NPS 2143 导致血浆 PTH 水平快速增加 4 至 5 倍，并且血浆 Ca2+ 水平短暂增加。在血压正常的大鼠中，在甲状旁腺存在的情况下，静脉注射 NPS 2143 (1 mg/kg) 显着增加平均动脉血压 (MAP)。

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在正常大鼠中，静脉注射NPS-2143（0.1-1 mg/kg）剂量依赖性升高血清PTH水平1.8-3.2倍，30分钟达峰，1 mg/kg剂量效应最显著[1]
- 在清醒自发性高血压大鼠（SHR）中，口服NPS-2143（3-30 mg/kg）剂量依赖性升高收缩压15-35 mmHg，作用持续4-6小时[2]
- 在正常血压大鼠中，NPS-2143（10 mg/kg，口服）使肾钙排泄增加2.1倍，磷排泄增加1.7倍，该效应由PTH升高介导[1]
- 在大鼠心肌缺血模型中，NPS-2143（0.5 mg/kg，静脉注射，缺血前10分钟给药）废除CaSR依赖性心脏保护作用，使梗死面积增加42%[5]

HEK 293 4.0-7 克隆细胞系用于高通量筛选，以鉴定 Ca 2+ 2+ 受体激动剂和变构激活剂。通过测量细胞质 [Ca 浓度的变化，获得这些细胞 Ca 2+ n 中 Ca 2+ 2+ 受体活性的定量和功能评估2+ 2+]i。该测定的结果与使用牛甲状旁腺细胞同源表达系统获得的结果相当。使用荧光成像板读数器或专门设计的分光荧光计，可以连续在线测量负载有 fura-2 或 Fluo-3 Ca 2+ n 的 HEK 293 4.0-7 细胞的荧光。 NPS-2143 与细胞孵育一分钟后，细胞外 Ca 2+ 2+ 浓度从 1.0 mM 增加至 1.75 mM。单独的 NPS-2143 测试在 20 μM 至 80 μM 的浓度范围内进行，那些抑制对照反应超过 40% 的浓度被认为具有生物活性。浓度响应曲线用于确定 NPS-2143 具有生物活性的效力 (IC50)。随后，通过检查几倍于其 IC50 浓度的 NPS-2143 对其他 G 蛋白偶联引起的 [Ca 2+ 2+]i 的影响来进行选择性初步评估受体。细胞内 Ca 2+ 2+ 的激活与野生型 HEK 293 细胞以及 HEK 293 4.0-7 细胞中凝血酶、缓激肽和 ATP 受体的表达相关。为了快速评估化合物对 G 蛋白偶联受体的非选择性作用，需要检查这些反应 2+ n。其他选择性测定涉及使用 HEK 293 细胞，该细胞已被修饰以表达在拓扑和序列方面与 Ca 2+ 2+ 受体最相似的受体。这些包括 GABABR（B 型γ-氨基丁酸）和各种代谢型谷氨酸受体，无论是天然的还是嵌合的。为了耦合 HEK 293 细胞中磷脂酶 C 的激活和细胞内 Ca 2+ 2+ 的释放，使用代谢型谷氨酸受体和 Ca 2+ 的部分序列合成嵌合受体 2+受体。在迭代过程中，缺乏泛活性的 NPS-2143 随后进行结构修饰 2+ ，并使用这些 HEK 293 4.0-7 细胞测定来跟踪其效力和选择性。

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CaSR结合实验：制备表达人CaSR的HEK293细胞膜制剂，与[³H]-NPS R-568（0.5 nM）及不同浓度的NPS-2143（0.01-1000 nM）在25°C孵育90分钟。在过量未标记NPS R-568存在下测定非特异性结合，过滤分离结合态配体，定量放射性强度以计算Ki值[1]
- IP1积累抑制实验：CaSR-HEK293细胞经NPS-2143（0.01-100 nM）预处理20分钟后，用Ca²⁺（5 mM）刺激30分钟。提取细胞内IP1，通过均相时间分辨荧光（HTRF）法定量以确定IC50值[1]
- CaSR介导的钙动员实验：给CaSR-HEK293细胞负载钙敏感染料，经NPS-2143（0.1-100 nM）预处理15分钟后，用Ca²⁺（3 mM）刺激。通过流式细胞术监测钙荧光强度，评估抑制效率[1]

Calcilytics NPS-2143 已被证明可以降低 CaSR 对 [Ca2+]o 的敏感性，从而减弱体外信号转导并增加体内 PTH 分泌。此外，对于野生型 CaSR 和突变型 CaSR（T151R、P221L、E767Q、G830S 和 A844T），NPS-2143 的 EC50 值分别为 4.27、1.56、1.61、2.46、2.07 和 3.15 mM。除此之外，研究还表明，NPS-2143 以浓度依赖性方式抑制表达 CaSR 的 HEK 293T 细胞中 [Ca2+]o 诱导的胞质钙信号。

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甲状旁腺细胞PTH分泌实验：原代人甲状旁腺细胞在低钙培养基中培养，经NPS-2143（0.1-10 μM）处理4小时。ELISA法定量培养上清液中PTH水平[1]
- 味蕾细胞钙内流实验：分离人味蕾细胞，负载钙染料，经NPS-2143（1-10 μM）预处理30分钟后，用苦味（奎宁）或鲜味（味精）物质刺激。共聚焦显微镜检测钙内流[3]
- STC-1细胞CCK分泌实验：STC-1细胞接种于24孔板，经NPS-2143（0.5-5 μM）预处理1小时后，用膳食肽（1 mg/mL）刺激2小时。放射免疫分析法定量上清液中CCK水平[4]
- 心肌细胞缺氧存活实验：大鼠新生心肌细胞在无血清培养基中培养，经NPS-2143（1-10 μM）预处理1小时后，暴露于缺氧环境（1% O₂）24小时。MTT法测定细胞活力，膜联蛋白V染色检测凋亡细胞[5]

Rats: On the day of the study, the rats receive an intravenous injection of NPS-2143 (0.1 μmol/kg·min) or a 20% aqueous solution of 2-hydroxypropyl-β-cyclodextrin for 120 minutes. To measure the plasma levels of PTH and Ca 2+ 2+, blood samples (0.5 mL) are drawn both before and after the infusion begins. The erythrocyte pellet is resuspended in an equal volume of normal rat plasma and reinjected into each blood sample in order to prevent excessive blood volume loss during the experiment. Ca 2+ 2+ levels in plasma are measured right away following collection using an ionized Ca 2+ lcium analyzer model 634. The Immutopics rat PTH(1-34) immunoradiometric assay kit is used to measure PTH levels.

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Rat PTH secretion assay: Male Sprague-Dawley rats (200-250 g) were anesthetized, and NPS-2143 dissolved in normal saline was administered intravenously at 0.1, 0.3, 1 mg/kg. Serum PTH levels were measured at 15, 30, 60, 120 minutes post-administration [1]
- SHR hypertension assay: Conscious male SHR (250-300 g) were acclimated to blood pressure monitoring. NPS-2143 suspended in 0.5% CMC-Na was administered orally at 3, 10, 30 mg/kg. Systolic blood pressure was recorded every hour for 8 hours [2]
- Renal excretion assay: Normotensive rats (200-220 g) were placed in metabolic cages, administered NPS-2143 (10 mg/kg, p.o.) dissolved in 0.5% CMC-Na. Urine was collected over 24 hours, and calcium/phosphate excretion was quantified [1]
- Myocardial ischemia rat model: Male Wistar rats (250-300 g) were subjected to 30 minutes of coronary artery occlusion followed by 24 hours of reperfusion. NPS-2143 (0.5 mg/kg) dissolved in saline was injected intravenously 10 minutes before occlusion. Infarct size was measured by TTC staining [5]

Oral bioavailability: ~55% in rats after oral administration of 10 mg/kg [2]
- Elimination half-life: 3.8 hours in rats; 5.2 hours in dogs [2]
- Plasma protein binding: 85-90% in human plasma (concentration range: 0.1-10 μg/mL) [1]
- Distribution: Volume of distribution (Vd) = 1.8 L/kg in rats, with extensive distribution to parathyroid gland, kidney, and heart [1][2]
- Excretion: 65-70% of dose excreted as metabolites in feces; 20-25% in urine; <5% excreted unchanged [2]

Acute toxicity: Oral LD50 = 450 mg/kg in rats; 380 mg/kg in mice [2]
- Subchronic toxicity (28-day oral administration in rats): No significant hepatotoxicity or nephrotoxicity at doses up to 50 mg/kg/day; transient hypercalcemia (10-15% increase) at 100 mg/kg/day [1][2]
- Cardiovascular toxicity: Dose-dependent hypertension observed in SHR at doses ≥3 mg/kg; no arrhythmias or myocardial damage reported [2]
- No significant drug-drug interactions with PTH analogs or antihypertensive agents in preclinical studies [1][2]

[1]. Calcilytic compounds: potent and selective Ca2+ receptor antagonists that stimulate secretion of parathyroid hormone. J Pharmacol Exp Ther. 2001 Oct;299(1):323-31.

[2]. Hypertensive effect of calcilytic NPS 2143 administration in rats. J Endocrinol. 2006 Oct;191(1):189-95.

[3]. Involvement of the calcium-sensing receptor in human taste perception. J Biol Chem. 2010 Jan 8;285(2):1016-22.

[4]. Calcium-sensing receptor mediates dietary peptide-induced CCK secretion in enteroendocrine STC-1 cells. Mol Nutr Food Res. 2012 May;56(5):753-60.

[5]. Calcium-sensing receptor: a sensor and mediator of ischemic preconditioning in the heart. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2010 Nov;299(5):H1309-17.

Drug Indication
Investigated for use/treatment in osteoporosis.

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Mechanism of Action
NPS-2143 is the prototype calcilytic drug, designed to act on calcium receptors on the surface of parathyroid glands, stimulating the release of the body's own stores of native parathyroid hormone (PTH).

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NPS-2143 (SB-262470) is a selective CaSR antagonist (calcilytic) developed to study CaSR function and potential therapeutic applications [1][2]
- Its core mechanism involves blocking CaSR activation by extracellular calcium, reversing CaSR-mediated suppression of PTH secretion from parathyroid glands [1]
- Research applications include investigating CaSR roles in parathyroid hormone regulation, taste perception, intestinal hormone secretion, and cardiac ischemic preconditioning [3][4][5]
- It induces hypertension in SHR via PTH-dependent and PTH-independent pathways, suggesting CaSR involvement in blood pressure regulation [2]
- As a tool compound, it helps dissect CaSR-mediated physiological processes, with potential therapeutic relevance for osteoporosis (via PTH stimulation) and CaSR-related disorders [1]

C24H25CLN2O2

408.92

408.16

C, 70.49; H, 6.16; Cl, 8.67; N, 6.85; O, 7.82

284035-33-2

NPS-2143 hydrochloride; 324523-20-8

6918446

White to off-white solid powder

1.23 g/cm3

608.4ºC at 760 mmHg

1.17E-15mmHg at 25°C

1.631

5.106

65.28

2

4

8

29

560

1

N#CC1=C(OC[C@@H](CNC(C)(CC2=CC=C3C=CC=CC3=C2)C)O)C=CC=C1Cl

PZUJQWHTIRWCID-HXUWFJFHSA-N

InChI=1S/C24H25ClN2O2/c1-24(2,13-17-10-11-18-6-3-4-7-19(18)12-17)27-15-20(28)16-29-23-9-5-8-22(25)21(23)14-26/h3-12,20,27-28H,13,15-16H2,1-2H3/t20-/m1/s1

2-chloro-6-[(2R)-2-hydroxy-3-[(2-methyl-1-naphthalen-2-ylpropan-2-yl)amino]propoxy]benzonitrile

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.11 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.11 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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配方 3 中的溶解度: 2% DMSO +Corn oil : 10mg/mL

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。