| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The primary target of NR1 is the small G-protein Rheb (Ras homolog enriched in brain), a critical upstream activator of mTORC1. Rheb functions as a molecular switch that, in its GTP-bound active state, directly binds to and stimulates the kinase activity of mTORC1. NR1 binds directly to the switch II domain of Rheb with an IC50 of 2.1 μM in the Rheb-IVK assay, preventing the conformational changes required for Rheb-mediated mTORC1 activation. This interaction selectively inhibits the activation of mTORC1 without affecting mTORC2, which is regulated by distinct upstream mechanisms. In cellular models, NR1 suppresses the phosphorylation of the mTORC1 substrate T389pS6K1, a key downstream effector of mTORC1 that regulates protein synthesis and cell growth. Simultaneously, NR1 enhances the phosphorylation of S473pAKT in a dose-dependent manner. This paradoxical increase in AKT phosphorylation is a well-documented consequence of mTORC1 inhibition, as mTORC1 normally exerts negative feedback on AKT signaling through S6K1-mediated phosphorylation of insulin receptor substrate-1 (IRS-1). By relieving this feedback inhibition, NR1 promotes AKT activation, which may have implications for cell survival and metabolism. NR1 does not affect mTORC2 activity, as mTORC2 is the kinase responsible for S473 phosphorylation of AKT, and its activity remains intact in the presence of NR1.
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| 体外研究 (In Vitro) |
NR1（1–10 μM；48 小时）可降低 Jurkat 细胞的体积 [1]。MCF-7、TRI102 和 PC3 细胞暴露于 NR1（0.37-30 μM）90 分钟后，T389pS6K1 的磷酸化受到抑制，而 S473pAKT 的磷酸化则得到促进 [1]。NR1（1-30 μM；2.5 小时）可降低 MCF-7 细胞的蛋白质合成 [1]。体外实验表明，NR1 能有效且选择性地抑制 mTORC1 信号通路。在 Rheb-IVK（体外激酶）活性测定中，NR1 对 Rheb 的抑制 IC50 值为 2.1 μM，证实了其与分子靶点的直接相互作用。在包括MCF-7、TRI102和PC3细胞在内的细胞模型中，NR1以剂量依赖的方式抑制关键mTORC1底物T389pS6K1的磷酸化，同时增强S473pAKT的磷酸化。这种磷酸化事件的双向调节可作为NR1活性的可靠药效学标志物，并证实了其作为选择性mTORC1抑制剂的作用机制。NR1在这些细胞模型中降低蛋白质合成和细胞体积，这与mTORC1在促进合成代谢和细胞生长方面的既定作用相一致。该化合物对蛋白质合成的影响可通过嘌呤霉素掺入试验或放射性氨基酸代谢标记等方法进行定量。其对细胞体积的影响可通过流式细胞术或基于显微镜的形态计量分析进行评估。NR1不影响mTORC2活性，这由其对mTORC2特异性底物无影响所证实。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在肾脏和骨骼肌中，NR1（30 mg/kg；腹腔注射；单次给药）显著降低了mTORC1活性，并且在骨骼肌中，NR1导致T37/464E-BP1的条带发生显著迁移[1]。
体内实验表明，NR1在腹腔注射后具有显著的生物活性。在30 mg/kg剂量下，NR1显著降低了受试动物肾脏和骨骼肌中的mTORC1活性，这表现为mTORC1底物T389pS6K1磷酸化水平的降低。这种组织特异性抑制证实NR1能够到达体内靶组织，并在生理相关条件下调节mTORC1信号通路。该化合物在多种组织中抑制mTORC1的能力表明其具有良好的生物分布特性，并且能够作用于肾脏和肌肉组织中的靶点。 NR1 的体内活性使其成为研究 Rheb-mTORC1 信号通路在各种疾病（包括癌症、代谢紊乱和神经系统疾病，这些疾病均与 mTORC1 功能失调有关）中生理和病理作用的宝贵工具。NR1 是研究 Rheb 介导的信号通路和 mTORC1 靶向治疗的有效探针。该化合物的口服生物利用度和体内活性使其成为开发新型 mTORC1 靶向疗法的有前景的先导化合物。 |
| 酶活实验 |
NR1的体外酶/受体结合实验采用Rheb-IVK（体外激酶）测定法来量化化合物的抑制活性。在这些实验中，将重组Rheb蛋白与不同浓度的NR1孵育，并测定其激活mTORC1激酶活性的能力。通过绘制抑制剂浓度与残余Rheb活性的剂量-反应曲线，确定IC50值为2.1 μM。结合实验也可采用表面等离子共振（SPR）或等温滴定量热法（ITC）直接测定NR1与Rheb的亲和力，并确认其与开关II结构域的结合。使用荧光标记探针或放射性标记配体的竞争性结合实验可以进一步表征结合相互作用，并确定NR1-Rheb结合的化学计量比。这些生化实验提供了关于化合物作用机制、结合动力学和选择性特征的关键信息。
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| 细胞实验 |
细胞活力检测[1]
细胞类型： Jurkat 细胞 测试浓度： 1、3 和 10 μM 孵育时间： 48 小时 实验结果： 以剂量依赖的方式有效缩小 Jurkat 细胞的体积。 蛋白质印迹分析[1] 细胞类型： MCF-7、TRI102 和 PC3 细胞 测试浓度： 0.37、1.1、3.3、10 和 30 μM 孵育时间： MCF-7 和 TRI102 90 分钟； 24 小时 PC3 实验结果：呈剂量依赖性地抑制 T389pS6K1 的磷酸化，并增加 S473pAKT 的磷酸化。 蛋白质印迹分析[1] 细胞类型：MCF-7 测试浓度：1、3、10 和 30 μM 孵育时间：2.5 小时（然后用 35S-Met 标记混合物标记细胞 30 分钟） 实验结果：蛋白质合成呈剂量依赖性降低。 NR1 的体外细胞实验在 MCF-7（乳腺癌）、TRI102 和 PC3（前列腺癌）细胞等细胞系中进行。将细胞用不同浓度的NR1处理，并使用磷酸化特异性抗体通过蛋白质印迹法检测mTORC1和mTORC2底物的磷酸化状态。T389pS6K1磷酸化的抑制可作为mTORC1抑制的指标，而S473pAKT磷酸化的增强则证实了反馈抑制的解除。蛋白质合成通过嘌呤霉素掺入实验或O-炔丙基嘌呤霉素（OPP）标记结合流式细胞术或荧光显微镜进行检测。细胞大小通过基于流式细胞术的前向散射测量或基于图像的形态计量分析进行评估。这些细胞实验证实NR1在细胞环境中与其靶标结合，并对mTORC1信号通路、蛋白质合成和细胞生长产生预期的下游效应。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：雄性C57BL/6小鼠（6-7周龄；禁食16小时）[1]
剂量：30 mg/kg 给药途径：腹腔注射；单次给药 实验结果：浓度超过5 µM，作用2小时后，肾脏和骨骼肌中的mTORC1活性显著降低，骨骼肌中的T37/464E-BP1蛋白出现明显的条带迁移。 在小鼠体内进行了NR1的动物实验，以评估其对不同组织中mTORC1信号通路的影响。动物通过腹腔注射给予NR1，剂量为30 mg/kg。治疗后，采集肾脏和骨骼肌等组织，并通过蛋白质印迹法或酶联免疫吸附试验（ELISA）检测T389pS6K1的磷酸化水平来评估mTORC1活性。在这些组织中观察到的mTORC1活性显著降低证实NR1能够有效抑制其靶点。可以开展进一步研究，评估该化合物对异种移植模型中肿瘤生长、饮食诱导肥胖模型中代谢参数或mTORC1失调相关的神经退行性疾病模型中神经系统结局的影响。此外，还可以进行药代动力学研究，以确定该化合物在不同给药途径下的生物利用度、半衰期和组织分布。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
NR1的药代动力学性质表明，其分子量为578.30，分子式为C25H19BrCl2N2O3S。该化合物是一种具有药物样理化性质的小分子，其分子量低于500 Da，这通常被认为有利于口服生物利用度。该化合物可溶于DMSO，便于用于体外试验和体内给药制剂。对于体内研究，NR1可配制成合适的载体进行腹腔注射，如30 mg/kg的腹腔注射方案所示。该化合物的纯度通常≥95%，确保实验研究结果的可靠性和可重复性。应优化其储存条件以保持稳定性，粉末通常储存在适宜的温度下，而储备液则储存在-20°C或-80°C下以保持长期稳定性。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
NR1的毒理学特征主要来源于其在临床前研究中作为研究化合物的应用。在体内研究使用的剂量（30 mg/kg，腹腔注射）下，该化合物耐受性良好，现有文献中未报道任何显著不良反应。然而，要将NR1推进至临床开发阶段，需要进行全面的毒理学评估。鉴于其作为mTORC1抑制剂的作用机制，潜在的靶向毒性可能包括免疫抑制、代谢紊乱和伤口愈合受损，这些都是mTORC1抑制的已知效应。需要通过针对其他激酶和G蛋白的广泛选择性分析来评估其脱靶效应。为了确定该化合物的安全性，需要进行标准的毒理学研究，包括在啮齿类和非啮齿类动物中进行的急性毒性和重复给药毒性试验、遗传毒性评估（Ames试验、微核试验）以及心血管安全性评估（hERG通道抑制试验、遥测研究）。鉴于 mTORC1 在这些生理过程中的作用，监测该化合物对免疫功能、葡萄糖代谢和肾功能的影响尤为重要。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
NR1 是一种研究化合物，用作 Rheb 和 mTORC1 的选择性抑制剂。它也被称为 Rheb 抑制剂 NR1。该化合物直接与 Rheb 的开关 II 结构域结合，选择性抑制 mTORC1 的激活，而不影响 mTORC2。NR1 以剂量依赖的方式抑制 T389pS6K1 的磷酸化，并增强 S473pAKT 的磷酸化。在细胞模型中，NR1 可降低蛋白质合成和细胞体积；而在体内（30 mg/kg，腹腔注射），它可显著降低肾脏和骨骼肌中的 mTORC1 活性。NR1 是研究 Rheb 介导的信号通路和 mTORC1 治疗靶点的宝贵探针。该化合物尚未获准用于临床，可从研究化学品供应商处获得，用于临床前研究。
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| 分子式 |
C25H19BRCL2N2O3S
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|---|---|
| 分子量 |
578.304962396622
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| 精确质量 |
575.967
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| CAS号 |
2216763-38-9
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| PubChem CID |
132281917
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
6.9
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| tPSA |
87.8
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
34
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| 分子复杂度/Complexity |
739
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
BrC1=CC(=CC2=C1C=C(C(=O)O)N2CC1C=CC(C(N(C)C)=O)=CC=1)SC1C=CC(=C(C=1)Cl)Cl
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| InChi Key |
MJYFVDNMTKLGTH-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C25H19BrCl2N2O3S/c1-29(2)24(31)15-5-3-14(4-6-15)13-30-22-11-17(34-16-7-8-20(27)21(28)10-16)9-19(26)18(22)12-23(30)25(32)33/h3-12H,13H2,1-2H3,(H,32,33)
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| 化学名 |
4-bromo-6-(3,4-dichlorophenyl)sulfanyl-1-[[4-(dimethylcarbamoyl)phenyl]methyl]indole-2-carboxylic acid
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| 别名 |
NR 1; NR-1; NR1
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~50 mg/mL (~86.46 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.32 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7292 mL | 8.6459 mL | 17.2918 mL | |
| 5 mM | 0.3458 mL | 1.7292 mL | 3.4584 mL | |
| 10 mM | 0.1729 mL | 0.8646 mL | 1.7292 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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