| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
NSC 185058 is an antagonist of ATG4B.[1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
用 NSC 185058 处理 GSC JKB3 细胞 72 小时，可减少 ATG4B 诱导的 LC3-I 向脂化的 LC3-II 的转化，并抑制自噬底物 p62/SQSTM1 的降解。[1]
用 NSC 185058 或氯喹 (CQ) 处理 72 小时，对 GSC JKB3 细胞的活力和球体形成频率的降低程度相似。[1] 在 GSC JKB3 细胞中，通过 NSC 185058 抑制 ATG4B 可通过抑制 LC3B 脂化和增加 p62 水平来使细胞对电离辐射 (IR) 敏感。与单独使用 NSC 185058 或 IR 相比，联合治疗（NSC + IR）伴随者细胞活力的降低。[1] 在 GSC 23 细胞中，与单药治疗相比，IR 和 NSC 185058 联合治疗导致细胞活力下降。[1] 与单药治疗相比，在 GSCs 中，IR 和 NSC 185058 联合治疗由于 G2 期阻滞导致有丝分裂细胞显著减少，并显著增加细胞凋亡（通过膜联蛋白 V 染色测定）。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
ATG4B 的拮抗剂是 NSC185058。通过可逆地改变 ATG8 来促进自噬体，ATG4B 可以促进自噬。当放射治疗 (RT) 含有 ATG4B 结合的 NSC185058 时，其抗肿瘤活性会增强。在原位 GBM 异种移植模型中，NSC185058 被发现可降低星形母细胞瘤 (GBM) 细胞的致瘤性并增加 RT 的抗肿瘤活性 [1]。
在使用 GSC M83 细胞的皮下肿瘤异种移植模型中，用 NSC 185058（150 mg/kg，腹腔注射，隔天一次）治疗可显著抑制肿瘤生长。[1] NSC 185058 并未增强 STK26 (MST4) 敲除对 M83 异种移植瘤体内生长和自噬活性的影响。[1] 在颅内 GSC JKB3 异种移植模型中，NSC 185058 单药治疗（150 mg/kg，腹腔注射，每周一、三、五，持续3周）显示出抑制生长的效果。[1] 在同一颅内模型中，所有 NSC 185058 与放射治疗 (IR) 的联合治疗方案均显示出比单药治疗显著增强的抗肿瘤活性。其中，同时给药以及 IR 后接 NSC 185058 的方案效果最佳，这通过生物发光监测和生存分析得以证实。[1] 与单独使用 NSC 185058 或 IR 相比，用 NSC 185058 + IR 联合治疗的颅内 JKB3 和 23 GBM 肿瘤的增殖指数（通过 Ki-67 染色）显著降低。联合治疗还显著降低了 LC3B 水平，并增加了凋亡指标（γH2AX 和 cleaved caspase-3）。[1] 在临床前体内实验中，以显示显著抗肿瘤活性的剂量和频率给予 NSC 185058，无论是作为单药还是尤其是与放疗联合，实验动物均表现出良好的耐受性。[1] |
| 细胞实验 |
对于细胞活力实验，将经过相应处理的 GSCs 以每孔 2000 个细胞的密度接种在 96 孔板中。在指定时间点使用发光法细胞活力检测试剂评估细胞活力。[1]
对于球体形成实验（有限稀释实验），将神经胶质瘤球体解离后的细胞以不同密度（例如，对于特定 GSC 系，每孔 1、5、10、20 或 50 个细胞）接种在 96 孔板中。培养 7 至 14 天后，检查每个孔是否有肿瘤球体形成。使用极端有限稀释分析计算干细胞频率。[1] 对于细胞凋亡实验，将细胞与抗膜联蛋白 V 抗体和碘化丙啶一起孵育，并通过流式细胞术进行分析。未染色的细胞用作阴性对照。[1] 对于细胞周期分析，将培养的细胞用 DNA 染料染色 30 分钟，然后进行荧光激活细胞分选 (FACS) 分析。[1] 对于通过免疫印迹（Western blot）分析自噬标记物，将细胞裂解于含有蛋白酶和磷酸酶抑制剂的 RIPA 裂解液中。对蛋白样品进行定量，进行 SDS-PAGE 电泳，转印至 PVDF 膜，并用针对 LC3B 和 p62 等蛋白的抗体进行检测。[1] 对于分析 ATG4B 介导的 FRET-LC3B 融合蛋白底物的切割实验，将纯化的 FRET-LC3B 蛋白与来自 GSCs 的细胞裂解液在适当的缓冲液中混合。在 37°C 孵育后，终止反应，样品通过 SDS-PAGE 分离，并用考马斯亮蓝染色评估切割情况。[1] |
| 动物实验 |
在皮下肿瘤异种移植研究中，将1×10⁶个GSC M83细胞悬浮于100 μl PBS中，皮下注射至无胸腺裸鼠体内。当形成可触及的肿瘤后，隔天对荷瘤小鼠进行腹腔注射NSC 185058（150 mg/kg）或载体对照（花生油）。当肿瘤体积达到约1500 mm³或出现病理症状时，处死小鼠。肿瘤体积采用公式 V = ab²/2 进行估算，其中 a 和 b (a > b) 分别为肿瘤的长度和宽度。[1]
对于接受放射治疗和 NSC 185058 治疗的颅内异种移植模型，将立体定向移植了 GSC JK83 或 23 细胞的小鼠随机分为六组治疗组：1) 载体对照组（花生油），2) 单独使用 NSC 185058，3) 单独放射治疗组，4) 同时使用 NSC 185058 和放射治疗组，5) 先放射治疗后使用 NSC 185058，以及 6) 先使用 NSC 185058 后使用放射治疗。 NSC 185058 治疗组每周一、周三和周五腹腔注射 150 mg/kg 的药物，持续三周。放射治疗组每天接受 2 Gy 的放射治疗，连续五天。治疗在移植后一周开始。注射 D-荧光素后，通过生物发光成像监测肿瘤生长。监测小鼠的神经系统症状，并在出现症状时实施安乐死。[1] 生物发光成像中，荷瘤小鼠在异氟烷麻醉前注射 D-荧光素（300 mg/kg）。使用成像系统测量注射底物 15 分钟后的发光强度。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
NSC 185058 是一种靶向 ATG4B 的小分子抑制剂。[1]
该研究在胶质母细胞瘤 (GBM) 中发现了一条促自噬的 MST4-ATG4B 信号通路。使用 NSC 185058 进行 ATG4B 的药理学抑制可减弱自噬活性，降低 GBM 细胞的致瘤性，并增强原位 GBM 异种移植模型中放射疗法的抗肿瘤活性。[1] 联合用药（同时或序贯）会影响 NSC 185058 与放射疗法联合治疗的抗肿瘤活性。[1] 该研究表明 ATG4B 可作为 GBM 等恶性肿瘤联合治疗的可行靶点，并为开发靶向 ATG4B 的小分子药物作为临床药物提供了依据。[1] |
| 分子式 |
C11H9N3S
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|---|---|
| 分子量 |
215.27426
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| 精确质量 |
215.052
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| CAS号 |
39122-38-8
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| PubChem CID |
750538
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| 密度 |
1.323g/cm3
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| 沸点 |
378.2ºC at 760 mmHg
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| 闪点 |
182.5ºC
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| 折射率 |
1.72
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| LogP |
2.337
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| tPSA |
69.9
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
15
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| 分子复杂度/Complexity |
220
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
UGWOJXZJIZUKDP-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C11H9N3S/c15-11(9-5-1-3-7-12-9)14-10-6-2-4-8-13-10/h1-8H,(H,13,14,15)
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| 化学名 |
N-Pyridin-2-ylpyridine-2-carbothioamide
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| 别名 |
NSC185058; NSC-185058; NSC 185058;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 125 mg/mL (~580.67 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (9.66 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (9.66 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (9.66 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 4.6453 mL | 23.2266 mL | 46.4533 mL | |
| 5 mM | 0.9291 mL | 4.6453 mL | 9.2907 mL | |
| 10 mM | 0.4645 mL | 2.3227 mL | 4.6453 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Tepotinib hydrochloride monohydrate
BKN-1
NEO214
MJO445
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