| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
- Cdc25B2 (in vitro IC50 = 206 ± 75 nM). [1]
- Cdc25A (Ki = 29 ± 7 nM). [1] - Cdc25B (Ki = 95 ± 14 nM). [1] - Cdc25C (Ki = 89 ± 18 nM). [1] - VHR phosphatase (IC50 = 4.0 ± 0.1 µM; 20-fold selectivity over Cdc25B2). [1] - PTP1B phosphatase (IC50 > 100 µM; 450-fold selectivity over Cdc25B2). [1] - NSD2 (WT) (IC50 = 0.17 µM). [2] - NSD2 (E1099K) (IC50 = 0.11 µM). [2] - NSD2 (T1150A) (IC50 = 0.17 µM). [2] - NSD1 (IC50 = 0.11 µM). [2] - NSD3 (IC50 = 0.26 µM). [2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
NCI 60 细胞人类肿瘤组显示 NSC 663284 的平均 IC50 为 1.5 ± 0.6 μM（3-100 μM；48 小时），而人乳腺癌 MDA-MB-435 和 MDA-N 细胞的 IC50 为 0.2 μM 。 1.7 μM 是已培养的人乳腺 MCF-7 细胞的 IC50 值 [1]。 NSC 663284 对 Cdc25B2 的相对 IC50 值 (IC50=0.21 μM) 大于 PTP1B (IC50>4.0 μM) 或 VHR (IC50=4.0 μM) [1]。
- 酶活性抑制：NSC-663284 对 Cdc25B2 的体外 IC50 为 206 ± 75 nM。它对 Cdc25A、Cdc25B 和 Cdc25C 表现出混合竞争性动力学，Ki 值分别为 29、95 和 89 nM。与 VHR（IC50 = 4.0 µM，20倍选择性）和 PTP1B（IC50 > 100 µM，450倍选择性）相比，该化合物对 Cdc25B2 具有选择性。[1] - 甲基转移酶抑制：使用 HotSpot 放射性标记法测定，NSC-663284（文中称为 DA3003-1）抑制全长野生型 NSD2 的 IC50 为 0.17 µM，抑制 NSD2 E1099K 突变体的 IC50 为 0.11 µM，抑制 NSD2 T1150A 突变体的 IC50 为 0.17 µM。它还能抑制 NSD1（IC50 = 0.11 µM）和 NSD3（IC50 = 0.26 µM）。一个包含38种甲基转移酶的谱图显示，该化合物以亚微摩尔级效力抑制了其中27种酶。[2] - 细胞增殖抑制：在处理48小时后，NSC-663284 在 NCI 60 种人类肿瘤细胞系中的平均 IC50 为 1.5 ± 0.6 µM。最敏感的细胞是人乳腺癌细胞 MDA-MB-435 和 MDA-N（IC50 = 0.2 µM）。对于人乳腺癌 MCF-7 细胞，48小时的生长抑制 IC50 为 1.7 µM。即使仅暴露3小时，其对 MCF-7 细胞的 IC50 也约为 35 µM。其区域异构体 DA3003-2 在暴露3小时后的细胞毒性低3倍。[1] - 抑制细胞内 Cdc25A 活性：在 HeLa 细胞的化学互补实验中，使用10 µM NSC-663284 处理1小时，逆转了由异位过表达 Cdc25A 引起的磷酸化 Erk（pERK）水平下降，使其恢复到基础水平。该化合物对模拟转染细胞中的 pERK 水平无显著影响。[1] - 体外GSH消耗：将5 µM DA3003-1 与小鼠肝脏胞质液或纯化的谷胱甘肽S-转移酶及谷胱甘肽共同孵育，导致母体化合物快速代谢，并形成脱氯的谷胱甘肽结合物。[3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
NSC 663284（静脉注射；2、3 和 5 mg/kg）可抑制通过 SCID 静脉皮下注射获得的人类浮动 HT29 异种移植物的生长。单剂量 5 mg/kg 后，NSC 663284 在组织或静脉中超过 5 分钟无法识别。与肾癌和肝癌相比，荷瘤 SCID 小鼠接受 NSC 663284 治疗后，HT29 肿瘤中的谷胱甘肽水平下降更多且持续时间更长 [3]。
- 对HT29异种移植瘤的抗肿瘤药效：在皮下接种人结肠癌 HT29 异种移植瘤的 C.B.-17 SCID 小鼠中，以5 mg/kg 的剂量每4天静脉注射一次 DA3003-1，共6次，观察到显著的肿瘤生长抑制。第25天的最大平均 T/C%（治疗组肿瘤体积/对照组肿瘤体积）为 50%。肿瘤体积倍增时间显著延长至 29.1 ± 3.9 天，而溶剂对照组为 16.4 ± 3.4 天（p ≤ 0.05）。其疗效略低于吉西他滨（50 mg/kg）。5 mg/kg 组中有两只小鼠在第25天和第28天濒死并被安乐死。2和3 mg/kg 剂量的效果较差。在 MDA-MB-435 乳腺癌异种移植瘤模型中未观察到显著的抗肿瘤活性。[3] - 组织中的GSH消耗：对荷 HT29 瘤小鼠静脉注射 5 mg/kg DA3003-1 后，肝脏、肾脏和肿瘤组织中的还原型谷胱甘肽浓度下降。这种下降在肿瘤组织中最为持久，处理后4小时仍保持在较低水平，而肝脏和肾脏的水平已恢复正常。红细胞中的 GSH 未检测到下降。[3] |
| 酶活实验 |
- Cdc25磷酸酶体外实验：使用 o-甲基荧光素磷酸盐作为底物，在96孔微孔板中测定 GST 融合的 Cdc25A、Cdc25B2、Cdc25C、VHR 以及人重组 PTP1B 的活性。在室温下孵育60分钟后，使用多孔板读数仪在激发波长 485/20 nm、发射波长 530/30 nm 处测量产物（o-甲基荧光素）的荧光发射。[1]
- HotSpot甲基转移酶实验（放射性同位素法）：使用标准底物浓度（5 µM 肽/蛋白底物，或 0.05 mg/ml 核小体/核心组蛋白）和 1 µM SAM。将待测化合物溶于 DMSO，通过声学技术加入到酶/底物混合物中，预孵育20分钟。加入 [³H] SAM 启动反应，在30°C下孵育1小时。通过滤膜结合法检测反应。使用图形软件进行数据分析。[2] - Methyltransferase-Glo 实验：在1,536孔板中以多步骤形式进行。将23 nl 化合物针式转移到含 666.7 nM 核小体和 10.7 nM 全长野生型 NSD2 酶的反应缓冲液中。孵育30分钟后，加入 1 µl 的 4 µM SAM 启动15分钟的反应。然后加入 MTase-Glo 试剂将 SAH 转化为 ADP。30分钟后，加入 MTase-Glo 检测溶液将 ADP 转化为 ATP，再孵育30分钟后检测发光信号。[2] - EPIgenous HTRF甲基转移酶实验：在白色1,536孔板中进行。针式转移化合物后，加入含核小体和 NSD2 酶的反应缓冲液，孵育30分钟。加入 SAM 启动反应15分钟。然后加入检测缓冲液一，孵育10分钟。加入抗 SAH/Lumi4-Tb 溶液，最后加入 SAH-d2 结合物。孵育1小时后检测 HTRF 信号。[2] - Amplex Red氧化还原活性实验：将23 nl 化合物针式转移到含 HBSS 的黑色1,536孔板中，立即读取荧光（READ 0）。加入含 Amplex Red、DTT 和辣根过氧化物酶的 2X 溶液，孵育15分钟后再次读取荧光（READ 1）。使用校正后的荧光值（READ 1 减去 READ 0）计算活性。[2] - 表面等离子体共振：将人重组 NSD2-SET 结构域通过标准胺偶联固定在传感器芯片上。在含 50 mM Tris pH 8.8、50 mM NaCl、0.5 mM TCEP、5 mM MgCl2、0.05% P20、2% DMSO 的运行缓冲液中进行单循环动力学测量。化合物进行3倍系列稀释后，以 80 µl/min 的流速注射80秒，解离200-600秒。使用1:1动力学结合模型分析数据。DA3003-1 的结合动力学显示 KD 为 370 nM。[2] |
| 细胞实验 |
- 抗增殖实验（MCF-7细胞）：将人乳腺癌 MCF-7 细胞接种于微孔板中贴壁过夜。然后用溶剂或 NSC-663284 连续处理或处理3小时。孵育48小时后，将培养基替换为含 MTT 的无血清培养基，再避光孵育3小时。在540 nm 波长下分光光度法测定总细胞数。48小时 IC50 为 1.7 µM，3小时暴露 IC50 约为 35 µM。[1]
- 化学互补实验（HeLa细胞）：用编码全长野生型 Cdc25A 的质粒或模拟对照瞬时转染 HeLa 细胞。转染后的细胞用10 µM NSC-663284 或溶剂处理1小时。然后通过 Western blot 分析全细胞裂解液中的磷酸化 Erk、总 Erk 和 β-微管蛋白。Cdc25A 过表达导致 Erk 磷酸化水平降低超过50%，而 NSC-663284 处理逆转了这种下降，使 pERK 恢复到基础水平。[1] - 细胞内H3K36me2水平降低及细胞毒性实验（U-2 OS细胞）：将人骨肉瘤 U-2 OS 细胞用 DA3003-1 按10个浓度点、3倍稀释系列（0.0025 - 50 µM）处理96小时。通过 Western blot 分析全细胞裂解液中的 H3K36me2 和总 H3。光密度分析显示 H3K36me2 呈剂量依赖性降低，IC50 为 545 nM。然而，较高药物浓度导致细胞毒性，CC50 为 270 nM。[2] |
| 动物实验 |
- HT29异种移植瘤药效研究：将皮下接种人结肠癌 HT29 肿瘤碎片（约300 mm³）的 C.B.-17 SCID 小鼠随机分为治疗组（n=9-10）。DA3003-1 以 2、3 或 5 mg/kg 的剂量静脉注射，溶于无菌5%葡萄糖溶液（0.01 ml/g 体重）。给药方案为每4天一次，共6次。每周记录两次体重和肿瘤体积。阳性对照为吉西他滨，50 mg/kg，静脉注射，相同给药方案。[3]
- MDA-MB-435异种移植瘤药效研究：对接种 MDA-MB-435 人乳腺癌异种移植瘤的 C.B.-17 SCID 小鼠进行类似处理，阳性对照为紫杉醇，20 mg/kg，每7天静脉注射一次。DA3003-1 未观察到显著的肿瘤生长抑制。[3] - 荷瘤小鼠药代动力学研究：将荷 HT29 瘤的 C.B.-17 SCID 小鼠禁食过夜，单次静脉注射 5 mg/kg 的 DA3003-1。在给药后 2、5、10、15、30、45、60、120、240、420 和 1440 分钟处死小鼠（每组2只）。收集血液（心脏穿刺）、肝脏、肾脏、脾脏、肺和肿瘤，称重并速冻用于分析。[3] - MTD测定的毒性研究：雌性 Balb/C 和 C.B.-17 SCID 小鼠单次静脉注射 5、7、10 或 20 mg/kg 的 DA3003-1（溶于无菌5%葡萄糖，0.01 ml/g 体重）。确定最大耐受剂量为 5 mg/kg。接受 7 mg/kg 的小鼠体重下降超过10%，接受 10 或 20 mg/kg 的小鼠在第4天濒死。[3] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
- 血浆和组织分布：在荷 HT29 瘤小鼠单次静脉注射 5 mg/kg DA3003-1 后，给药后2分钟在血浆（0.44, 0.49 µg/ml）、红细胞（0.14, 0.18 µg/ml）、肝脏（0.12, 0.14 µg/g）、肾脏（0.23, 0.25 µg/g）和肺（1.70, 1.72 µg/g）中检测到该药物。此时肿瘤中未检测到母体化合物。给药后5分钟，血浆浓度减半（0.21 µg/ml），肝脏和肾脏中已检测不到。到15分钟时，血浆或任何正常组织中均检测不到该药物。[3]
- 体外代谢：DA3003-1 可被小鼠肝脏亚细胞组分快速代谢。胞质液中的代谢速度远快于微粒体，且对 NADPH 的偏好略高于 NADH。与胞质液孵育导致母体化合物减少，并出现一个极性更强的代谢物。LC/MS 分析鉴定该主要代谢物为脱氯的谷胱甘肽结合物（m/z 595，双电荷正离子 [m+2H] 为 297.5）。[3] - GST在代谢中的作用：将 DA3003-1 与纯化的谷胱甘肽S-转移酶和谷胱甘肽一起孵育，在 2-5 分钟内几乎完全转化为相同的谷胱甘肽结合物，证实了 GST 在此代谢途径中的作用。无 GST 时未发生显著结合。[3] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
- 最大耐受剂量：在 Balb/c 和 C.B.-17 SCID 小鼠中，DA3003-1 单次静脉注射的最大耐受剂量为 5 mg/kg。接受 7 mg/kg 的小鼠体重下降超过10%。单次 10 或 20 mg/kg 剂量是致命的，小鼠在第4天濒死。[3]
- 药效研究中的治疗相关毒性：在 HT29 异种移植瘤药效研究中，接受 5 mg/kg DA3003-1（每4天一次，共6次）治疗的两只小鼠在研究第25天和第28天濒死并被安乐死。任何治疗组（2、3 或 5 mg/kg）均未观察到显著的体重下降。[3] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
6-氯-7-[2-(4-吗啉基)乙基氨基]喹啉-5,8-二酮是一种喹诺酮类化合物。
NSC-663284 是一种强效的喹啉二酮类 Cdc25 磷酸酶抑制剂。 - 化学名称和别名：NSC-663284 也称为 DA3003-1，化学名为 6-氯-7-(2-吗啉-4-基乙基氨基)喹啉-5,8-二酮。其区域异构体为 7-氯-6-(2-吗啉-4-基乙基氨基)喹啉-5,8-二酮 (DA3003-2)。[1] - 拟议的作用机制：NSC-663284 通过抑制 Cdc25 磷酸酶，阻止细胞周期蛋白依赖性激酶（如 Cdk1/Cdc2）的去磷酸化和激活，从而导致细胞周期阻滞于 G1 和 G2/M 期。它还能产生活性氧，并参与 Cdc25A 催化结构域的迈克尔加成反应。[1][3] - 药效团与构效关系：喹啉-5,8-二酮药效团对 Cdc25 抑制活性至关重要。7-位被氨基取代（如 2-吗啉-4-基乙基氨基）可显著提高效力和选择性。氯原子在 7-位的区域异构体 (DA3003-2) 对 Cdc25B2 的体外活性低3倍，且作为生长抑制剂的效力也较弱。计算静电势图表明，实现最大抑制剂活性需要一个缺电子的 7-位。[1] |
| 分子式 |
C15H16CLN3O3
|
|---|---|
| 分子量 |
321.758842468262
|
| 精确质量 |
321.088
|
| 元素分析 |
C, 55.99; H, 5.01; Cl, 11.02; N, 13.06; O, 14.92
|
| CAS号 |
383907-43-5
|
| PubChem CID |
379077
|
| 外观&性状 |
Pink to red solid powder
|
| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
478.8±45.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
243.4±28.7 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.2 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.626
|
| LogP |
0.33
|
| tPSA |
71.53
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
22
|
| 分子复杂度/Complexity |
488
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
ClC1C(C2=CC=CN=C2C(C=1NCCN1CCOCC1)=O)=O
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| InChi Key |
BMKPVDQDJQWBPD-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C15H16ClN3O3/c16-11-13(18-4-5-19-6-8-22-9-7-19)15(21)12-10(14(11)20)2-1-3-17-12/h1-3,18H,4-9H2
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| 化学名 |
6-Chloro-7-(2-morpholin-4-yl-ethylamino)quinoline-5,8-dione
|
| 别名 |
SPS8I1; DA30031; NSC-663284; NSC-663,284; DA3003-1; CY8W2F69MW; 6-Chloro-7-((2-morpholinoethyl)amino)quinoline-5,8-dione; SPS-8I1; DA3003 1;NSC 663284; SPS 8I1; DA-3003-1; NSC663284;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 100 mg/mL (~310.79 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.77 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.77 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.77 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.1079 mL | 15.5395 mL | 31.0791 mL | |
| 5 mM | 0.6216 mL | 3.1079 mL | 6.2158 mL | |
| 10 mM | 0.3108 mL | 1.5540 mL | 3.1079 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Claramine hydrochloride
OncoACP3 TFA
(GalNAc)3-CPT
Deoxyfunicone
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