| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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描述：OSMI-1（OSMI1；OSMI 1）是一种新型、高效、可透过细胞膜的喹啉酮-6-磺酰胺类O-GlcNAc转移酶（OGT）抑制剂，IC50值为2.7 μM。OSMI-1可诱导核孔蛋白62（Nup62）发生质量变化，导致O-GlcNAc残基丢失，并降低细胞内O-GlcNAcase的水平。
| 靶点 |
O-GlcNAc transferase (IC50 = 2.7 μM)
O-GlcNAc transferase (OGT) (inhibitor) [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
用 OSMI-1 (50 μM；CHO 细胞) 处理 24 小时后，细胞活力下降约 50% [1]。用 OSMI-1 (10-100 μM；24 小时；CHO 细胞) 处理可剂量依赖性地降低 O-GlcNAc 糖基化（整体 O-连接的 N-乙酰氨基葡萄糖）。OSMI-1 可抑制细胞中的 OGT 活性 [1]。
在利用纯化的 sOGT（OGT 的短亚型）和肽底物进行的放射性捕获实验中，OSMI-1 以剂量依赖的方式抑制 OGT 活性。[1] 使用固定饱和浓度的蛋白质受体 GST-Nup62 进行动力学分析表明，Vmax 随 OSMI-1 浓度的变化而变化，这表明 OSMI-1 与底物 UDP-GlcNAc 不具有竞争性。 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
哺乳动物和斑马鱼的毒性特征非常相似；事实上，斑马鱼经常被用作传统动物试验和基于细胞的评估之间的过渡物种。本研究使用斑马鱼模型研究了OSM1-1的体内急性毒性。OSM1-1在斑马鱼模型中的LC50值分别为0.031 mg/mL（56 μM，12小时）和0.025 mg/mL（45 μM，24小时）[2]。
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| 酶活实验 |
OGT活性测定[2]
采用高效液相色谱法(HPLC)初步分析化合物对OGT的抑制作用。根据先前描述的方法41，优化了反应条件。将200 μM CKII、300 nM OGT、1 mM UDP-GlcNAc、化合物(100 μM)和缓冲液(150 mM NaCl、1 mM EDTA、2.5 mM三(羟丙基)膦、25 mM Tris-HCl，pH 7.4)混合，并在室温下孵育1小时。反应混合物经甲醇沉淀后，上样至高效液相色谱仪（HPLC）（反相色谱柱为Zorbax SB-C18 StableBond分析柱，250 mm × 4.6 mm，以及Zorbax SB-C18分析保护柱，4.6 mm × 12.5 mm，5 μm）以定量糖肽产物的收率。流动相A为0.1%三氟乙酸水溶液，流动相B为0.1%三氟乙酸乙腈溶液。采用梯度洗脱（流速1 mL/min；0 min时流动相A/B = 90/10；20 min时流动相A/B = 70/30；检测波长214 nm）。 IC50 值使用 GraphPad 5 计算 (n = 3)[2]。 使用无细胞反应体系测定纯化蛋白受体 Nup62 上 O-GlcNAc 水平的抑制情况。反应混合物包含 10 μM Nup62、1 mM UDP-GlcNAc、500 nM OGT、缓冲液（150 mM NaCl、1 mM EDTA、2.5 mM 三羟丙基膦、25 mM Tris-HCl，pH 7.4）和化合物，于 37 °C 孵育 1 小时。然后加入 SDS-PAGE 上样缓冲液，并使用蛋白质印迹法检测 Nup62 上的 O-GlcNAc[2]。 基于 UDP-Glo 试剂盒的 OGT 活性测定按先前描述的方法进行[10]。按照制造商的方案，优化检测方法并在白色平底384孔板中进行。CKII肽用作受体。反应体系包含以下成分：250 nM OGT、125 μM CKII和40 μM UDP-GlcNAc，以及缓冲液（150 mM NaCl、1 mM EDTA、2.5 mM三(羟丙基)膦、25 mM Tris-HCl，pH 7.4）。使用微孔板发光仪测量发光值，每个样品重复三次。IC50值使用GraphPad 5计算。[2] OGT抑制实验采用放射性捕获法进行。将纯化的sOGT与生物素标记的肽底物UDP-[³H]GlcNAc以及不同浓度的OSMI-1孵育。将反应混合物点样至链霉亲和素包被的膜上，然后洗涤膜以去除未反应的UDP-[³H]GlcNAc。通过闪烁计数法测定膜上保留的放射性，该放射性对应于糖基化肽。IC₅₀值由剂量反应曲线计算得出。[1] |
| 细胞实验 |
细胞活力测定[1]
细胞类型： CHO 细胞 测试浓度： 50 μM 孵育时间： 24 小时 实验结果： 24 小时后，细胞活力下降约 50%。 蛋白质印迹分析[1] 细胞类型： CHO细胞 测试浓度： 10 μM、25 μM、50 μM、100 μM 孵育时间： 24小时 实验结果： O-GlcNAc酰化水平呈剂量依赖性降低。 整体O-GlcNAc酰化：将中国仓鼠卵巢（CHO）细胞用50 μM OSMI-1或对照化合物Ac4-5SGlcNAc处理24小时。制备细胞裂解液，并使用识别O-GlcNAc修饰蛋白的RL2抗体进行蛋白质印迹分析。OSMI-1处理导致整体O-GlcNAc酰化水平显著降低。在其他几种哺乳动物细胞系中也观察到了这种效应。[1] Nup62 糖基化：将 CHO 细胞用 50 μM OSMI-1 处理 24 小时。使用抗 Nup62 抗体通过 Western blot 分析细胞裂解液。OSMI-1 处理导致 Nup62 分子量降低，这与 O-GlcNAc 残基的丢失一致，可作为 OGT 抑制的生物标志物。[1] OGA 和 OGT 水平：将 CHO 细胞用 50 μM OSMI-1 处理 24 小时。使用抗 OGA 和抗 OGT 抗体通过 Western blot 分析细胞裂解液。OSMI-1 处理降低了细胞内 OGA 水平，而 OGT 水平不受影响，这是 OGT 抑制的另一个标志物。 [1] 凝集素印迹法检测糖链选择性：将CHO细胞用50 μM OSMI-1或Ac4-5SGlcNAc处理24小时。用一组九种生物素标记的凝集素（ConA、LCA、Jacalin、PHA-E、ECL、PHA-L、GSL-I、PNA、DBA）检测细胞裂解液，以评估细胞表面N-和O-糖链结构的变化。OSMI-1处理后，大多数凝集素检测到的条带变化甚微，表明其不会显著扰乱糖链结构。相反，Ac4-5SGlcNAc导致Jacalin、PHA-E和LCA识别的糖链发生显著变化。[1] 细胞活力：将CHO细胞用50 μM OSMI-1处理24小时。与未处理的对照组相比，细胞活力下降了约 50%。使用结构相关但无活性的类似物 PG34 来帮助区分 OGT 依赖性表型和脱靶效应。[1] |
| 动物实验 |
急性毒性试验[2]
所有动物实验程序均经大连理工大学生命科学与医学学院动物伦理委员会审查批准，并严格按照相关指南进行。选取受精后72小时的斑马鱼胚胎进行急性毒性试验。斑马鱼胚胎通过自然交配获得，并在28.5℃的胚胎水中培养。将斑马鱼胚胎排列于24孔板中（每孔20条），每孔加入1 mL含有不同浓度L01或OSMI-1的胚胎水，于28.5℃孵育24小时。DMSO（0.1%，v/v）溶液作为对照。使用倒置解剖显微镜直接在24孔板中观察斑马鱼。记录各浓度溶液中24小时内死亡斑马鱼的数量，并计算存活率（%）。斑马鱼急性毒性试验：将受精后72小时的斑马鱼胚胎暴露于不同浓度的OSMI-1中。分别在12小时和24小时记录死亡率。计算LC₅₀（半数致死浓度）。OSMI-1的LC₅₀在12小时为0.031 mg/mL (56 μM)，在24小时为0.025 mg/mL (45 μM)。[2] 斑马鱼急性毒性试验：将受精后72小时的斑马鱼胚胎暴露于不同浓度的OSMI-1中。分别在12小时和24小时记录死亡率。计算了LC₅₀（半数致死浓度）。OSMI-1的LC₅₀在12小时时为0.031 mg/mL (56 μM)，在24小时时为0.025 mg/mL (45 μM)。[2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
OSMI-1 具有细胞渗透性，并以活性状态进入细胞，因此与需要代谢转化为活性形式的前药 Ac4-5SGlcNAc 相比，其起效更快。[1]
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
用 50 μM OSMI-1 处理 CHO 细胞 24 小时后，细胞活力下降约 50%。[1]
结构相关但无活性的对照化合物 PG34 也表现出类似的细胞活力下降，这表明观察到的部分细胞毒性可能是由于脱靶效应而非单纯的 OGT 抑制所致。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
OSMI-1 是一种磺酰胺，由 2-氧代-1,2-二氢喹啉-6-磺酸的磺酸基团与 (2R)-2-氨基-N-(2-呋喃甲基)-2-(2-甲氧基苯基)-N-(2-噻吩甲基)乙酰胺的伯氨基缩合而成。OSMI-1 是一种细胞可渗透的 O-连接 β-N-乙酰氨基葡萄糖转移酶（O-GlcNAc 转移酶，OGT）抑制剂。它既是 EC 2.（转移酶）抑制剂，也是 EC 2.4.1.255（蛋白质 O-GlcNAc 转移酶）抑制剂。它是一种磺酰胺类化合物，属于喹啉、呋喃、噻吩、芳香醚和叔酰胺类化合物。
OSMI-1是一种O-GlcNAc转移酶（OGT）小分子抑制剂，由高通量筛选先导化合物经药物化学优化开发而成。其核心结构基于喹诺酮-6-磺酰胺（Q6S）骨架。[1] OGT是一种重要的哺乳动物酶，它通过将O-连接的N-乙酰氨基葡萄糖（O-GlcNAc）连接到核蛋白和胞质蛋白上来调节多种细胞过程。OGT活性异常与多种癌症相关，使其成为潜在的治疗靶点。 [1] OSMI-1 已通过多种检测方法验证为细胞内靶向 OGT 抑制剂：整体 O-GlcNAc 糖基化水平降低、高度糖基化蛋白 Nup62 的质量偏移以及 OGA（去除 O-GlcNAc 的酶）水平下降。[1] 与其他一些 OGT 抑制剂不同，OSMI-1 似乎不会显著改变细胞表面 N- 或 O-连接的聚糖结构，这表明它对 OGT 的选择性优于其他糖基转移酶。然而，一些细胞毒性可能源于脱靶效应，目前已有非活性类似物 (PG34) 可用于控制脱靶效应。[1] |
| 精确质量 |
563.118
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|---|---|
| 元素分析 |
C, 59.67; H, 4.47; N, 7.46; O, 17.03; S, 11.38
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| CAS号 |
1681056-61-0
|
| 相关CAS号 |
(Rac)-OSMI-1;2748153-92-4
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| PubChem CID |
118634407
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 折射率 |
1.652
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| LogP |
4.32
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| tPSA |
155
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
|
| 可旋转键数目(RBC) |
10
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| 重原子数目 |
39
|
| 分子复杂度/Complexity |
1000
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
COC1=CC=CC=C1[C@H](C(=O)N(CC2=CC=CO2)CC3=CC=CS3)NS(=O)(=O)C4=CC5=C(C=C4)NC(=O)C=C5
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| InChi Key |
IYIGLWQQAMROOF-HHHXNRCGSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C28H25N3O6S2/c1-36-25-9-3-2-8-23(25)27(28(33)31(17-20-6-4-14-37-20)18-21-7-5-15-38-21)30-39(34,35)22-11-12-24-19(16-22)10-13-26(32)29-24/h2-16,27,30H,17-18H2,1H3,(H,29,32)/t27-/m1/s1
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| 化学名 |
(R)-N-(Furan-2-ylmethyl)-2-(2-methoxyphenyl)-2-(2-oxo-1,2-dihydroquinoline-6-sulfonamido)-N-(thiophen-2-ylmethyl)acetamide
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| 别名 |
OSMI1 OSMI 1 OSMI-1
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~177.42 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.08 mg/mL (3.69 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.69 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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Squalene synthase-IN-2
BMS-214662 mesylate
五味子酚
洛那法尼
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