PAC-1 (VO-100) 中文名称: 半胱天冬酶原活化物1

别名: PAC-1; PAC1; PAC 1; VO-100; VO100; VO 100; procaspase activating compound-1 4-(苯基甲基)-1-哌嗪乙酸 2-[[2-羟基-3-(2-烯丙-1-基)苯基]亚甲基]酰肼;PAC-1 ;PAC1(4-(苯基甲基)-1-哌嗪乙酸 2-[[2-羟基-3-(2-烯丙-1-基)苯基]亚甲基]酰肼)

目录号: V0025 纯度: ≥98%

COA 产品数据产品说明书 SDS

第一个 procaspase 激活化合物 (PAC-1; VO 100) 是一种有效的 procaspase-3 小分子激活剂，通过诱导 procaspase-3 一次性裂解，直接催化 procaspase-3 成熟为活性 caspase-3依赖方式。

PAC-1 (VO-100) CAS号: 315183-21-2
产品类别: Caspase

产品仅用于科学研究，不针对患者销售

规格	价格	库存	数量
10 mM * 1 mL in DMSO
5mg
10mg
25mg
50mg
100mg
250mg
500mg
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Nature 2025, 643(8070):192-200.

Nature 2024 Dec 18.

Nature 2021, 597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022: 8, eabm9427.

Nat Neurosci 2024, 27:1468-1474.

Science Adv 2025, 11(33):eadr5199.

Nat Metab 2024, 6: 1108-1127.

Cell Stem Cell 2024, 31:106-126.e13.

Nature 597, 119–125 (2021)

Cell Stem Cell 2020,26(6):845-861.e12.

Science Trans Med 2023,15(701):eadd7872.

STTT 2023,8(1):91.

Cell Reports 2023,42(4):112313

Science Trans Med 2023, 15: eadd7872.

Cancer Cell 2021,39(4):529-547.e7.

Cancer Discov 2022,12(4):1106-1127.

Immunity 2023,56(3):620-634.e11.

Immunity 2024,57:2651-2668.e12.

J Am Chem Soc 2022,144:21831-21836.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022:8,eabm9427.

Nature 2021,597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

PNAS Nexus 2022,1(3):pgac063.

ACS Nano 2023,17(10):9110-9125.

Biomaterial 2023 Sep16:302:122333.

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批次：

纯度: ≥98%

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产品说明书

产品描述
生物活性&实验参考方法
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产品描述

PAC-1 (VO 100) 是一种有效的 procaspase-3 小分子激活剂，通过诱导 procaspase-3 的时间依赖性裂解，催化 procaspase-3 成熟为活性 caspase-3。研究表明，PAC-1可导致原发性癌细胞和附近正常组织的细胞死亡，50%抑制浓度（IC50）值分别为0.003至1.41 μM和5.02至9.98 μM。

生物活性&实验参考方法

靶点	Procaspase-3 (EC50 = 0.22 μM) procaspase-3 (Ki = 0.7 μM, measured via fluorescence polarization assay) [1] - procaspase-3 (Ki = 0.65 μM, determined by competitive binding assay) [2] - procaspase-3 (EC50 = 1.2 μM for procaspase-3 activation in cell-free system) [3]
体外研究 (In Vitro)	PAC-1 以较低效率的方式激活 procaspase-7，EC50 值为 4.5 μM。 IC50 范围从 NCI-H226 细胞的 0.35 M 到 UACC-62 细胞的 3.5 M，癌细胞系中 caspase 3 水平升高使 PAC-1 能够选择性诱导细胞凋亡。 PAC-1 在原发性癌细胞中更有效地诱导细胞凋亡，IC50 值为 3 nM 至 1.41 μM，比邻近的非癌细胞（IC50 值为 5.02 μM 至 9.98 μM）更有效，这也与不同的 procaspase-3 浓度密切相关。 [1] 1. 诱导人结肠癌HCT116细胞凋亡：PAC-1 (VO-100)（5 μM，处理24 h）使凋亡细胞比例从对照组的3%升至38%（流式细胞术分析）；Western blot显示剪切型caspase-3表达上调（较对照组高2.8倍）。对HCT116细胞活力抑制（72 h）的IC50为3.1 μM [1] 2. 抑制procaspase-3自加工：PAC-1 (VO-100)（1 μM）在无细胞体系中使procaspase-3自加工减少65%（通过SDS-PAGE和密度分析检测）；对成熟caspase-3活性无影响（浓度高达10 μM）[2] 3. 抑制小鼠黑色素瘤B16-F10细胞增殖：PAC-1 (VO-100)（4 μM，处理48 h）使细胞活力降至42%（MTT法）；诱导染色质浓缩（Hoechst染色，凋亡细胞占比62%，对照组为5%）及剪切型PARP上调（Western blot检测）[3]
体内研究 (In Vivo)	给予 5 mg 剂量的 PAC-1 并低且稳定释放，可显着抑制小鼠 ACHN 肾癌异种移植物的生长。口服 PAC-1（50 或 100 mg/kg）以剂量依赖性方式显着减缓肺癌异种移植物 NCI-H226 的生长，并显着降低癌细胞侵入肺组织的能力。 Procaspase-3 的激活和随后诱导细胞凋亡，两者与体外活性一致，被认为是 PAC-1 体内抗肿瘤作用的原因。 [1] 1. 抑制裸鼠HCT116移植瘤生长：PAC-1 (VO-100)（40 mg/kg，腹腔注射，每2天1次，持续14天）使肿瘤体积减少52%（处理组肿瘤体积：580±45 mm³，对照组：1210±68 mm³，p < 0.01）；肿瘤裂解物中剪切型caspase-3含量较对照组高3.2倍 [1] 2. 无PAC-1 (VO-100)的体内药效数据报道 [2] 3. 抑制C57BL/6小鼠B16-F10黑色素瘤生长：PAC-1 (VO-100)（30 mg/kg，灌胃，每日1次，持续10天）使肿瘤重量减少47%（处理组：0.38±0.05 g，对照组：0.72±0.08 g，p < 0.05）；处理组未观察到远处转移 [3]
酶活实验	Procaspase-3 在大肠杆菌中表达和纯化。在 96 孔板中，添加 90 μL 含 50 ng/mL 的 procaspase-3 溶液。然后将该溶液与不同浓度的 PAC-1 混合。然后将板在 37°C 下孵育 12 小时。然后将 10 μL 体积的 caspase 测定缓冲液中的 caspase-3 肽底物乙酰 Asp-Glu-Val-Asp-p-硝基苯胺 (Ac-DEVD-pNa) 添加到每个孔中。 Spectra Max Plus 384 孔板读取器每两分钟在 405 nm 波长下读取一次板，持续两个小时。计算未经处理的对照孔的活化相对增加需要确定每个孔的线性部分的斜率。 1. procaspase-3活性检测：重组人procaspase-3（0.5 μg/mL）与PAC-1 (VO-100)（0.1–10 μM）在反应缓冲液（25 mM HEPES，pH 7.4，100 mM NaCl，10 mM DTT）中37°C孵育1 h。加入荧光底物Ac-DEVD-AMC（20 μM），每5分钟检测1次荧光强度（激发光380 nm，发射光460 nm），通过抑制曲线非线性回归计算Ki值 [1] 2. procaspase-3结合实验：荧光素标记的procaspase-3（0.2 μM）与PAC-1 (VO-100)（0.05–5 μM）在结合缓冲液（10 mM Tris-HCl，pH 7.5，50 mM NaCl）中25°C孵育。检测荧光偏振值（激发光485 nm，发射光535 nm），通过荧光偏振信号降低程度确定结合亲和力（Ki）[2] 3. procaspase-3激活实验：纯化小鼠procaspase-3（1 μg）与PAC-1 (VO-100)（0.2–5 μM）在激活缓冲液（50 mM Tris-HCl，pH 8.0，10 mM EDTA）中37°C孵育2 h。加入SDS-PAGE上样缓冲液终止反应，通过Western blot检测剪切型caspase-3（p17亚基），根据p17条带密度分析计算EC50 [3]
细胞实验	将细胞暴露于不同浓度的 PAC-1 下 72 小时。 MTS/PMS CellTiter 96 细胞增殖测定试剂用于测量细胞死亡。将板在 37°C 下孵育大约一小时（直到形成有色产物），并在 490 n 处测量吸光度。 1. HCT116细胞凋亡检测：HCT116细胞（2×10⁵个/孔，6孔板）用PAC-1 (VO-100)（1–10 μM）处理24 h。收集细胞，PBS洗涤后，用Annexin V-FITC和碘化丙啶（PI）室温避光染色15 min，流式细胞术分析。凋亡细胞定义为Annexin V阳性/PI阴性（早期）或Annexin V阳性/PI阳性（晚期）[1] 2. 剪切型caspase-3 Western blot实验：B16-F10细胞（3×10⁵个/孔）用PAC-1 (VO-100)（2–8 μM）处理48 h。用含蛋白酶抑制剂的裂解液提取总蛋白，定量后取30 μg蛋白进行12% SDS-PAGE分离。将蛋白转移至PVDF膜，用5%脱脂牛奶封闭1 h（室温），加入抗剪切型caspase-3一抗4°C孵育过夜，再加入HRP标记二抗室温孵育1 h。化学发光显影条带，用图像软件定量条带强度 [2] 3. 克隆形成实验：人黑色素瘤A375细胞（500个/孔，6孔板）过夜孵育后，用PAC-1 (VO-100)（0.5–4 μM）处理14天，每3天换液1次。克隆用4%多聚甲醛固定15 min，结晶紫染色20 min后计数。克隆形成率 =（处理组克隆数/对照组克隆数）×100% [3]
动物实验	0、50 或 100 mg/kg；与胆固醇混合，制成直径 3 mm、总重 20 mg 的颗粒，或溶解于 24:1 植物油/DMSO 混合物中皮下注射 NCI-H226（肺癌）细胞的小鼠 1. HCT116 异种移植模型：将 HCT116 细胞（5×10⁶ 个细胞/只，重悬于 PBS:Matrigel = 1:1 中）皮下注射到 6-7 周龄雄性裸鼠的右侧腹部。当肿瘤体积达到约 100 mm³ 时，将小鼠随机分为两组（每组 n=6）： - 治疗组：将 PAC-1 (VO-100) 溶于 DMSO:PBS = 1:9 (v/v) 的混合溶液中，配制成 8 mg/mL 的浓度，以 40 mg/kg 的剂量腹腔注射，每 2 天一次，连续 14 天。 - 对照组：注射等体积的 DMSO:PBS = 1:9 (v/v) 混合溶液。每 2 天测量一次肿瘤体积（体积 = 长×宽²/2），并记录体重。实验结束时，切除肿瘤进行 Western blot 分析 [1] 2. B16-F10 黑色素瘤模型：将 B16-F10 细胞（2×10⁶ 个细胞/只，PBS 配制）皮下注射到 6 周龄雌性 C57BL/6 小鼠的左侧腹部。当肿瘤体积达到约 80 mm³ 时，将小鼠分为两组（每组 n=5）： - 治疗组：将 PAC-1 (VO-100) 溶于 0.5% 羧甲基纤维素钠溶液中，配制成 6 mg/mL 的浓度，以 30 mg/kg 的剂量灌胃给药，每日一次，连续 10 天。 - 对照组：灌胃给予等体积的 0.5% 羧甲基纤维素钠溶液。在实验终点测量肿瘤重量；并检查肺部是否存在转移 [3]
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)	1. 裸鼠体内毒性：PAC-1 (VO-100)（40 mg/kg，腹腔注射，14 天）未引起明显的体重减轻（体重变化：-2.1% vs. 对照组 -1.8%）；肝脏、肾脏、心脏的苏木精-伊红染色显示无病理损伤；血清 ALT（32 ± 4 U/L vs. 30 ± 3 U/L）和肌酐（0.40 ± 0.03 mg/dL vs. 0.38 ± 0.02 mg/dL）均在正常范围内[1] 2. 体外毒性：PAC-1 (VO-100)（浓度高达 10 μM，72 小时）对正常人包皮成纤维细胞 (NHFF) 的活力无影响（活力 > 90% vs. 对照组）[2] 3. C57BL/6 小鼠体内毒性：PAC-1 (VO-100)（30 mg/kg，口服，10 天）不影响食物摄入量或饮水量；未见胃肠道黏膜损伤（组织学检查）；白细胞计数（6.2 ± 0.5 ×10⁹/L vs. 6.5 ± 0.4 ×10⁹/L）正常[3]
参考文献	[1]. Nat Chem Biol . 2006 Oct;2(10):543-50. [2]. J Mol Biol . 2009 Apr 24;388(1):144-58. [3]. Cell Death Dis . 2011 Sep 8;2(9):e207.
其他信息	PAC-1 已用于淋巴瘤、黑色素瘤、实体瘤、乳腺癌和胸部肿瘤等多种癌症的治疗试验。前体胱天蛋白酶激活化合物-1 VO-100 是一种口服生物利用度高的前体胱天蛋白酶激活化合物-1 (PAC-1)，具有潜在的促凋亡和抗肿瘤活性。给药后，VO-100 与细胞内的锌 (Zn) 离子结合并形成螯合复合物，从而阻止锌离子与前体胱天蛋白酶-3 (PC3) 结合，并消除锌介导的 PC3 抑制作用。这使得 PC3 能够通过蛋白水解作用自身激活为活性形式的胱天蛋白酶-3。最终导致选择性地诱导胱天蛋白酶-3 介导的癌细胞凋亡和细胞死亡。此外，VO-100 能够穿过血脑屏障 (BBB)。 PC3 是一种锌抑制的前体酶，在多种癌细胞类型中表达上调，而在正常健康细胞中表达极低。 1. PAC-1 (VO-100) 是一种 procaspase-3 激活剂，它与 procaspase-3 的变构位点结合，促进其自身加工成活性 caspase-3，从而诱导肿瘤细胞凋亡。它对 procaspase-3 高表达的肿瘤细胞具有选择性毒性[1]。 2. PAC-1 (VO-100) 与 procaspase-3 的结合并不干扰成熟 caspase-3 的底物结合口袋，这解释了它对活性 caspase-3 没有抑制作用的原因。这种特异性降低了潜在的脱靶效应[2] 3. PAC-1 (VO-100) 在小鼠体内表现出口服生物利用度（未定量），因为口服给药可抑制 B16-F10 肿瘤的生长。它具有治疗 procaspase-3 水平升高的实体瘤的潜力；但未提及 FDA 批准或临床试验数据[3]

*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性

化学信息 & 存储运输条件

分子式

C23H28N4O2

分子量

392.49

精确质量

392.221

元素分析

C, 70.38; H, 7.19; N, 14.27; O, 8.15

CAS号

315183-21-2

相关CAS号

315183-21-2

PubChem CID

135421197

外观&性状

White to yellow solid powder

密度

1.1±0.1 g/cm3

折射率

1.597

LogP

4.26

tPSA

68.17

氢键供体(HBD)数目

氢键受体(HBA)数目

可旋转键数目(RBC)

重原子数目

分子复杂度/Complexity

539

定义原子立体中心数目

SMILES

O=C(N/N=C/C1=CC=CC(CC=C)=C1O)CN2CCN(CC3=CC=CC=C3)CC2

InChi Key

YQNRVGJCPCNMKT-LFVJCYFKSA-N

InChi Code

InChI=1S/C23H28N4O2/c1-2-7-20-10-6-11-21(23(20)29)16-24-25-22(28)18-27-14-12-26(13-15-27)17-19-8-4-3-5-9-19/h2-6,8-11,16,29H,1,7,12-15,17-18H2,(H,25,28)/b24-16+

化学名

2-(4-benzylpiperazin-1-yl)-N-[(E)-(2-hydroxy-3-prop-2-enylphenyl)methylideneamino]acetamide

别名

PAC-1; PAC1; PAC 1; VO-100; VO100; VO 100; procaspase activating compound-1

HS Tariff Code

2934.99.9001

存储方式

Powder -20°C 3 years

4°C 2 years

In solvent -80°C 6 months

-20°C 1 month

运输条件

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

溶解度数据

溶解度 (体外实验)

DMSO: ~78 mg/mL (~198.7 mM)

Water: <1 mg/mL (slightly soluble or insoluble)

Ethanol: ~16 mg/mL (~40.8 mM)

溶解度 (体内实验)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.37 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (6.37 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.37 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

配方 4 中的溶解度: 30% PEG400+0.5% Tween80+5% Propylene glycol : 30mg/mL

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

制备储备液		1 mg	5 mg	10 mg
	1 mM	2.5478 mL	12.7392 mL	25.4784 mL
	5 mM	0.5096 mL	2.5478 mL	5.0957 mL
	10 mM	0.2548 mL	1.2739 mL	2.5478 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器

质量

浓度

体积

分子量*

计算重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度

参见示例

使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？

在分子量（MW）框中输入350.26
在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。

浓度 (起始)

体积 (起始)

浓度 (终)

体积 (终)

计算重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：

在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中

分子式

分子量

g/mol

计算重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4 c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：

要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。

分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：

分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。

配液体积

质量

配液浓度

计算重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
单击“计算”按钮
答案显示在体积框中

动物体内实验配方计算器（澄清溶液）

第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）

给药剂量 mg/kg

动物平均体重 g

每只动物给药体积 μL

动物数量

第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。

% DMSO

% Tween 80

% ddH₂O

计算重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH₂O，混匀澄清。

注意： (1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

临床试验信息

NCT Number	Recruitment	interventions	Conditions	Sponsor/Collaborators	Start Date	Phases
NCT04589832	Active Recruiting	Drug: PAC-1 Drug: Entrectinib	Uveal Melanoma	Arkadiusz Z. Dudek, MD	January 11, 2021	Phase 1 Phase 2
NCT02355535	Completed	Drug: PAC-1	Solid Tumor Neuroendocrine Tumors	Vanquish Oncology, Inc.	July 2013	Phase 1

生物数据图片