| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| 5g |
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| 10g |
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| 25g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Cysteine protease
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| 体外研究 (In Vitro) |
木瓜蛋白酶是一种肽酶 C1 家族半胱氨酸蛋白酶，可应用于烹饪、制药、纺织和化妆品领域。
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| 体内研究 (In Vivo) |
小鼠木瓜蛋白酶诱导的肺气肿是一个模型，再现了许多在患者身上发现的特征。骨髓源性单核细胞(BMMC)已被用于修复呼吸系统疾病的肺泡上皮，但尚未用于木瓜蛋白酶模型。因此，我们假设BMMC可以阻止木瓜蛋白酶诱导的实验性肺气肿的病理生理过程。雌性BALB/c小鼠分别于实验第1天和第7天气管内注射50 μL生理盐水(S组)或木瓜蛋白酶(P组，10 IU/50 μL生理盐水)。第14天，颈静脉注射雄性BALB/c小鼠(SC21和PC21) 2 × 106 BMMC或生理盐水(SS21和PS21)。在方案的第14天(S14和P14)和第21天(SS21、PS21、SC21和PC21)进行分析。qPCR检测BMMC受体动物肺中Y染色体的存在。测定肺组织功能剩余容量(FRC)、肺泡直径、细胞密度、弹性纤维含量、TNF-α、IL-1β、IL-6、MIP-2、KC、IFN-γ浓度、细胞凋亡、双氧化酶(DUOX1和DUOX2) mRNA表达、H2O2生成和DUOX活性。我们没有在受者的肺部检测到Y染色体。P14和PS21组FRC、肺泡直径、多形核细胞(PMN)及KC、MIP-2、IFN-γ水平升高;后者的变化被BMMC恢复。各组TNF-α、IL-1β和IL-6水平相近。P14和PS21小鼠的弹性纤维数量少于其他各组，BMMC未使PC21小鼠的弹性纤维数量增加。PS21动物DUOX活性和DUOX1、2 mRNA表达增加。细胞治疗恢复了DUOX的活性和DUOX1的mRNA表达。BMMC降低了DUOX2 mRNA的表达。PS21小鼠的细胞凋亡指数升高，PC21小鼠的细胞凋亡指数降低。P14和PS21组的静态柔度、弹性的粘弹性分量和克服粘弹性的压力均增加。这些变化和第21天发现的高阻压被BMMC恢复。总之，BMMC在木瓜蛋白酶引发的肺气肿中具有有效的抗炎、抗凋亡、抗氧化和恢复作用。[1]
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| 动物实验 |
动物经吸入七氟烷镇静后称重（BR模型），然后用胰岛素注射器向气管内注射生理盐水或木瓜蛋白酶。此过程持续约3分钟。[1]
15只雄性BALB/c小鼠（20-25 g）通过颈椎脱臼迅速处死。用Dulbecco改良Eagle培养基（DMEM）冲洗骨髓腔，从其股骨和胫骨中抽取骨髓单核细胞（BMMC）。获得均匀的细胞悬液后，将细胞离心（4,000 g，10分钟），重悬于DMEM中，加入Ficoll-Hypaque（Histopaque 1083），再次离心（5,000 g，30分钟），并加入无菌PBS。使用台盼蓝染色的Neubauer计数板计数细胞，以评估细胞活力。采用流式细胞术和特异性抗体进行细胞表征（Conget 和 Minguell，1999；Maron-Gutierrez 等，2011）。[1] 图 11 显示，60 只雌性 BALB/c 小鼠（20–25 g）被随机分为六组。在 S14 组（n = 10）、SS21 组（n = 10）和 SC21 组（n = 10）中，小鼠在实验方案的第 1 天和第 7 天经气管内注射 50 μL 无菌生理盐水（0.9% NaCl）。在P14组（n = 10）、PS21组（n = 10）和PC21组（n = 10）中，小鼠在实验方案的第0天和第7天注射50 μL含有10 IU木瓜蛋白酶（0.2 IU/μL）的无菌生理盐水（0.9% NaCl）。木瓜蛋白酶（USP 225310）已预先在含有10 mM EDTA、0.4 M NaCl和5 mM二硫苏糖醇的0.1 M磷酸钠缓冲液中于40°C活化10分钟（Machado等，2014）。在第14天，将2 × 10⁶个来自雄性BALB/c小鼠的骨髓单核细胞（BMMC）悬浮于50 μL无菌生理盐水（SC21和PC21组）或50 μL无菌生理盐水（0.9% NaCl）（SS21和PS21组）中，经颈静脉注射。在实验方案的第14天（S14和P14组）和第21天（SS21、PS21、SC21和PC21组）分析组织病理学参数和肺力学参数。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
II型肺泡细胞表达DUOX 1和DUOX 2酶，与气道细胞一样，这些酶位于细胞的顶端。尽管肺泡中存在DUOX 1和DUOX 2酶，但关于它们在该组织学水平上参与H₂O₂生成的信息仍然匮乏（Fischer，2009）。与气道上皮细胞中H₂O₂的生成量相比，这些酶在肺泡水平产生的H₂O₂量被认为较低（Fischer等，2007）。DUOX酶在肺气肿发病机制中的确切作用尚存争议，需要更多深入的研究来阐明。我们评估了DUOX1和DUOX2的mRNA表达，观察到暴露于木瓜蛋白酶的动物肺组织中DUOX1和DUOX2的mRNA表达增加（图5），这与其他研究小组的结果一致（Ameziane-El-Hassani等，2005；Harper等，2005；Rigutto等，2009）。给予2 × 10⁶个骨髓来源的单核细胞（BMMC）可减弱肺组织中DUOX1和DUOX2的mRNA表达。此外，与对照组相比，我们观察到木瓜蛋白酶处理组动物肺组织中H₂O₂生成增加，且钙离子刺激的DUOX活性也增强，这进一步证实了2 × 10⁶个BMMC可能具有抗氧化作用（图6）。NADPH氧化酶在气道中发挥着不同的作用（Fischer，2009）。尽管两种DUOX同工酶的结构高度相似，但在肺气道上皮细胞中，DUOX2产生的H₂O₂高于DUOX1（Ameziane-El-Hassani等，2005；Rigutto等，2009）。然而，正常气道上皮细胞中DUOX1的表达水平高于DUOX2（Schwarzer等，2004；Harper等，2005）。因此，在正常个体的气道中，DUOX1和DUOX2释放H₂O₂的能力可能相似。一些细胞因子选择性地调节DUOX1和DUOX2的表达水平；例如，IFN-γ正向调节DUOX2的表达（Harper等，2005）。我们发现，木瓜蛋白酶暴露小鼠体内IFN-γ水平升高，而BMMC可降低IFN-γ水平（表2），这与DUOX活性变化一致（图6）。简而言之，我们强调本研究结果的新颖性，因为迄今为止，尚无关于细胞疗法对木瓜蛋白酶诱导的小鼠肺气肿模型中NADPH氧化酶通路（特别是DUOX酶的调控）影响的报道。总之，2 × 10⁶个BMMC在木瓜蛋白酶诱导的肺气肿模型中表现出显著的抗炎、抗凋亡、抗氧化和修复作用，这可能是通过抑制DUOX1和降低DUOX2活性实现的。
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| 分子式 |
C9H14N4O3
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|---|---|
| 分子量 |
226.2325
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| 精确质量 |
451.217
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| CAS号 |
9001-73-4
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| PubChem CID |
5249653
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
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| 闪点 |
29 °C
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| 折射率 |
1.652
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| LogP |
-1.47
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| tPSA |
126
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
16
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| 分子复杂度/Complexity |
254
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
CQOVPNPJLQNMDC-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C9H14N4O3/c10-2-1-8(14)13-7(9(15)16)3-6-4-11-5-12-6/h4-5,7H,1-3,10H2,(H,11,12)(H,13,14)(H,15,16)
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| 化学名 |
2-(3-azaniumylpropanoylamino)-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O : ~50 mg/mL
DMSO : ~25 mg/mL |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 50 mg/mL (Infinity mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 4.4203 mL | 22.1014 mL | 44.2028 mL | |
| 5 mM | 0.8841 mL | 4.4203 mL | 8.8406 mL | |
| 10 mM | 0.4420 mL | 2.2101 mL | 4.4203 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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