| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 体外研究 (In Vitro) |
PAT-505 在 Hep3B 细胞中的 IC50 为 2 nM，在人血液中为 9.7 nM，在小鼠血浆中为 62 nM，是一种强效、选择性、非竞争性、口服自分泌运动因子抑制剂。腺苷 A3 受体、MT1 褪黑激素受体、前列腺素 E2 EP4 受体、5-HT5a 血清素受体和 GABA 门控 Cl 通道结合均受到 PAT-505 的轻微抑制，PAT-505 对 ATX 的选择性高于其他 ENPP 蛋白[1]。 10 µM 时抑制范围为 50% 至 70%。
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| 体内研究 (In Vivo) |
PAT-505 抑制 ATX lysoPLD 活性，在小鼠血浆中的平均 IC50 为 62 nM，平均 IC90 为 630 nM，在大鼠血浆中为 ~770 nM。在非酒精性脂肪性肝炎 (NASH) 小鼠模型中，PAT-505（30 mg/kg，口服）可显着降低 PSR 阳性区域的百分比、纤维化评分和 α-SMA 免疫反应性[1]。
在这项研究中，我们描述了一种新型小分子ATX抑制剂PAT-505[3-（6-氯-2-环丙基-1-（1-乙基-1H-吡唑-4-基）-7-氟-1H-吲哚-3-基）硫代）-2-氟苯甲酸钠盐]的临床前药理学、药代动力学和药效学特性。PAT-505是一种强效、选择性、非竞争性抑制剂，口服后可显著抑制血浆和肝组织中的ATX活性。当在非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的Stelic小鼠动物模型中进行治疗时，PAT-505治疗导致纤维化略有但显著改善，肝细胞气球样变和肝脏炎症仅略有改善。在NASH的胆碱缺乏、高脂肪饮食模型中，PAT-505的治疗性治疗显著减少了肝纤维化，对脂肪变性、肝细胞气球样变或炎症没有显著影响。这些数据表明，抑制autotaxin具有抗纤维化作用，可能是治疗包括NASH在内的多种纤维化肝病的一种新的治疗方法 |
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| 酶活实验 |
Biochemical Assay with FS-3 Substrate/FS-3底物生化检测[2]
从最高浓度20μM开始，向孔中加入10μL的化合物稀释系列，1/5稀释。糖基化人ATX蛋白（见支持信息）的终浓度为0.4或0.64μg/mL。将酶稀释在50 mM Tris-HCl（2-氨基-2-（羟甲基）-1,3-丙二醇盐酸盐）pH 8.0、250 mM NaCl、5 mM KCl、1 mM MgCl2、1 mM CaCl2和0.1%无脂肪酸BSA中，总体积为20μL。将酶混合物加入化合物中，将所得混合物在室温下摇动孵育30分钟。通过加入20μL在上述相同缓冲液中稀释的0.75μM FS-3开始反应。在室温下孵育30分钟后，在Envision装置上读取荧光（激发485nm，发射520nM）。[2] LPC 16:0底物生化分析[2] 从最高浓度20μM开始，向孔中加入5μL的化合物稀释系列（1/5稀释）。糖基化人ATX蛋白（见支持信息）的终浓度为1或3μg/mL。酶在50 mM Tris-HCl pH 8.5、500 mM NaCl、5 mM KCl、10 mM CaCl2和0.1%无脂肪酸BSA中稀释，总体积为10μL。通过加入10μL在上述相同缓冲液中稀释的150μM LPC 16:0开始反应，并将混合物在37°C下孵育30分钟。通过加入25μL混合物来终止反应并定量胆碱，该混合物含有0.6 U/mL胆碱氧化酶、0.6 U/mL辣根过氧化酶（HRP）、1.8 mM TOOS（N-乙基-N-（2-羟基-3-磺丙基）-3-甲基苯胺，钠盐二水合物）、1.2 mM 4-氨基安替比林和20 mM EGTA（乙二醇双（2-氨基乙醚）-N，N，N′，N′-四乙酸，终止显影剂溶液），稀释在缓冲液中。如上所述。在室温下孵育30分钟后，在Envision装置上读取发光（激发555nm，激发光=70%）。[2] 大鼠血浆测定[2] 将大鼠血浆在冰上解冻，并加入含有待测化合物剂量范围的平板中。在37°C下孵育2小时后，用过量含LPA 17:0的甲醇作为内标沉淀10μL等分试样中的血浆蛋白。离心后，将相应的上清液稀释并注射到C18柱上。在等度条件下将分析物从柱中洗脱出来。没有为LPA 18:2制备校准曲线，所有定量都是基于峰面积比（LPA 18:2/LPA 17:0）进行的。对于每种浓度的化合物，LPA数据表示为减少百分比（减少百分比），使用公式：100-[（LPA比率）/（对照样品中的LPA比例）×100]。 |
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| 动物实验 |
在雄性C57BL/6小鼠中诱导非酒精性脂肪性肝炎（NASH）。简而言之，5周龄小鼠先饲喂普通饲料1周以适应环境，然后转为低胆碱、L-氨基酸限定的高脂饮食（CDAHFD），其中脂肪占总热量的60%，蛋氨酸含量为0.1%。CDAHFD喂养4周后，通过颌下静脉采血，从每只小鼠采集约200 μL血液，并分析血清中的肝酶水平。任何血清总胆红素水平>1 mg/dL的小鼠在给药前均被排除出研究。小鼠继续饲喂CDAHFD 5周后，随机分组（每组n=7-10）。从第 5 周到第 12 周，每天一次通过 0.5% 甲基纤维素 (MC) 灌胃给予载体或 PAT-505 (3-30 mg/kg)[1].
大鼠药代动力学/药效学与化合物 40（ PAT-505 的类似物）[2] 雄性 Sprague-Dawley 大鼠在受控环境中饲养，并以 5 mg/kg 的剂量给予化合物 40，该化合物 40 配制于 10% (2-羟丙基)-β-环糊精中，用柠檬酸将 pH 值调节至 3（1 mg/mL 的 40）。根据GALAPAGOS动物福利伦理委员会批准的方案，并经法国高等教育与研究部和省人口保护局同意，通过导管经颈静脉采集血样。采集时间点为给药后0.5、1和3小时，并将血样置于含肝素锂抗凝剂的试管中。采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定LPA 18:2血浆峰面积和化合物40血浆浓度。化合物40的血浆浓度根据包含8个浓度水平、振幅为3个对数单位的校准曲线进行测定。质控样品（三个浓度水平，每个浓度水平重复测定两次）的反算值用于判断整批样品是否合格。化合物40的定量下限为4 ng/mL（使用25 μL血浆）。将血浆蛋白用含内标的过量甲醇沉淀，并将相应的上清液注入C18色谱柱。通过增加有机流动相的比例，将分析物从高效液相色谱系统中洗脱出来。使用WinNonlin软件（Pharsight，版本5.2）进行非房室模型分析，对个体血浆浓度取平均值后计算药代动力学参数。汇总血浆浓度数据，并取每个采样时间点三只大鼠血浆浓度的平均值。为了分析LPA 18:2血浆峰面积，取10 μL血浆等分试样，用含内标LPA 17:0的过量甲醇沉淀血浆蛋白。离心后，将相应的上清液稀释并注入C18色谱柱。在等度条件下将分析物从色谱柱中洗脱出来。未对 LPA 18:2 制备校准曲线，所有定量分析均基于峰面积比值 (LPA 18:2/LPA 17:0) 进行。LPA 数据最终以减少百分比 (% 减少) 表示，计算公式为：100 – [((时间点 t 的 LPA 值)/(载体组在同一时间点 t 的 LPA 平均值)) × 100]。 |
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| 参考文献 | ||
| 其他信息 |
自泌素（ATX）是一种分泌型糖蛋白，可将溶血磷脂酰胆碱（LPC）转化为具有生物活性的磷脂溶血磷脂酸（LPA），并且是循环LPA的主要生成酶。抑制LPA信号通路在包括肺、肾、皮肤和腹膜在内的多个器官系统中具有显著的抗纤维化作用。然而，LPA的生成途径不止一种，ATX在局部组织LPA生成和纤维化中的作用仍不明确且存在争议。本研究描述了一种新型小分子ATX抑制剂PAT-505 [3-((6-氯-2-环丙基-1-(1-乙基-1H-吡唑-4-基)-7-氟-1H-吲哚-3-基)硫代)-2-氟苯甲酸钠盐]的临床前药理学、药代动力学和药效学特性。 PAT-505 是一种强效、选择性、非竞争性抑制剂，口服后可显著抑制血浆和肝组织中的 ATX 活性。在非酒精性脂肪性肝炎 (NASH) 的 Stelic 小鼠动物模型中，PAT-505 治疗可显著改善肝纤维化，但对肝细胞气球样变性和肝脏炎症的改善作用甚微。在胆碱缺乏、高脂饮食诱导的 NASH 模型中，PAT-505 治疗可显著降低肝纤维化程度，但对脂肪变性、肝细胞气球样变性或炎症无显著影响。这些数据表明，抑制自泌素具有抗纤维化作用，并可能代表一种治疗多种纤维化肝病（包括非酒精性脂肪性肝炎）的新型治疗方法。[1] 自泌素 (ATX) 是一种分泌酶，通过水解溶血磷脂酰胆碱 (LPC) 在血液中溶血磷脂酸 (LPA) 的生成中发挥重要作用。ATX-LPA 信号通路在药物研发领域引起了广泛关注，因为它与多种疾病相关，包括癌症、纤维化疾病和炎症等。通过高通量筛选 (HTS) 发现了一系列咪唑并[1,2-a]吡啶类 ATX 抑制剂。其中一种化合物与 ATX 的共晶结构揭示了一种新的结合模式：该化合物占据了 ATX 的疏水性口袋和通道，但并未与催化位点的锌离子发生相互作用。对结构-活性关系的探索发现了在生化和血浆测定中表现出高活性的化合物，例如化合物 40。化合物 40 在口服给药给大鼠后，还能降低血浆 LPA 水平。[2]
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| 分子式 |
C23H18CLF2N3O2S
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|---|---|
| 分子量 |
473.922729969025
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| 精确质量 |
473.077
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| 元素分析 |
C, 58.29; H, 3.83; Cl, 7.48; F, 8.02; N, 8.87; O, 6.75; S, 6.76
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| CAS号 |
1782070-22-7
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| 相关CAS号 |
1782070-22-7 (free);1782070-85-2 (sodium);
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| PubChem CID |
118094189
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| 外观&性状 |
Typically exists as Pale purple to off-white solids at room temperature
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| LogP |
5.3
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| tPSA |
85.4Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
32
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| 分子复杂度/Complexity |
704
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
BQMMCRXYIIKAOB-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C23H18ClF2N3O2S/c1-2-28-11-13(10-27-28)29-20(12-6-7-12)22(15-8-9-16(24)19(26)21(15)29)32-17-5-3-4-14(18(17)25)23(30)31/h3-5,8-12H,2,6-7H2,1H3,(H,30,31)
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| 化学名 |
3-[6-chloro-2-cyclopropyl-1-(1-ethylpyrazol-4-yl)-7-fluoroindol-3-yl]sulfanyl-2-fluorobenzoic acid
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| 别名 |
PAT-505; 1782070-22-7; 53T7TDA5QJ; 3-[6-Chloranyl-2-Cyclopropyl-1-(1-Ethylpyrazol-4-Yl)-7-Fluoranyl-Indol-3-Yl]sulfanyl-2-Fluoranyl-Benzoic Acid; UNII-53T7TDA5QJ; CHEMBL4642052; 3-((6-chloro-2-cyclopropyl-1-(1-ethyl-1H-pyrazol-4-yl)-7-fluoro-1H-indol-3-yl)thio)-2-fluorobenzoic acid; 3-[6-chloro-2-cyclopropyl-1-(1-ethylpyrazol-4-yl)-7-fluoroindol-3-yl]sulfanyl-2-fluorobenzoic acid;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~48.33 mg/mL (~101.98 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 4.83 mg/mL (10.19 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 48.3 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 4.83 mg/mL (10.19 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 48.3 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1101 mL | 10.5503 mL | 21.1006 mL | |
| 5 mM | 0.4220 mL | 2.1101 mL | 4.2201 mL | |
| 10 mM | 0.2110 mL | 1.0550 mL | 2.1101 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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