AT2 angiotensin II receptor (IC50 = 34 nM)

体外活性：PD 123319 ditrifluacetate 是一种新型、有效、选择性非肽 AT2（血管紧张素 II）受体拮抗剂，IC50 为 34 nM。它从大鼠肾上腺制剂中血管紧张素 II 结合位点的特定子集上取代 125 I 标记的血管紧张素 II。 PD 123319 已用于选择性检查 AT1R 和 AT2R 在高血压和其他血管研究相关模型中的具体作用。在使用微粒体的结合测定中，发现 PD-123319 可以阻止 Ang II 与牛肾小球带微粒体制剂结合，IC50 值为 6.9nM。激酶测定：PD 123319 可区分许多不同组织中 AII 受体的两个亚类。 125I-AII 特异性标记了牛肾上腺肾小球细胞膜制备物中 AII 的两类结合位点。第一类（DuP-753 敏感）约占 AII 总结合位点的 85%，并且对 DuP-753 具有高亲和力（IC50 为 92.9 nM）。 PD-123319 不会对 125I-AII 与该位点的结合产生任何影响。第二类结合位点对 PD-123319 更敏感，IC50 为 6.9 nM，并且对 DuP-753 的亲和力低得多（IC50 约为 10 μM）。细胞分析：PD123319 通过抑制细胞外信号调节激酶信号传导来抑制人间充质干细胞的成骨分化。

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已证明，在多种组织中，PD 123319 可以区分 AII 受体的两个亚类。 125I-AII 选择性标记牛肾上腺肾小球细胞膜制剂中 AII 的两种结合位点。第一类（DuP-753 敏感）对 DuP-753 具有很强的亲和力（IC50 为 92.9 nM），约占所有 AII 结合位点的 85%。对于 125I-AII 与该位置的结合，PD-123319 没有影响。 PD-123319 的 IC50 为 6.9 nM，DuP-753 的 IC50 约为 10 microM，第二类结合位点表现出更高的灵敏度[2]。

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血管紧张素II（AII）是肾上腺肾小球细胞分泌醛固酮的重要调节因子。All与一种与控制磷脂酶C活性的鸟嘌呤核苷酸结合蛋白偶联的特定受体相互作用。最近，新的All非肽拮抗剂（DuP-753和PD-123319）已被证明可以区分许多不同组织中All受体的两个亚类。我们的研究证实，在牛肾上腺肾小球细胞的膜制备中，125I-All特异性标记了两类All结合位点。第一类（DuP-753敏感）约占All总结合位点的85%，对DuP-753具有高亲和力（IC50为92.9+/-19.5 nM）PD-123319对125I-All与该位点的结合没有任何影响。第二类结合位点对PD-123319更敏感，IC50为6.9+/-3.7 nM，对DuP-753的亲和力要低得多（IC50约为10微M）。这两类受体对All的亲和力不同。所有样本对All 1型受体（AT1）的亲和力约为2 nM（DuP-753敏感），对All 2型受体（AT 2）的亲和力更高，约为0.3 nM（PD-123319敏感）。在3微M DuP-753存在下，所有诱导的类固醇生成都被完全消除，表明这种活性是通过DuP-753敏感受体介导的。我们还发现，聚阴离子聚硫酸乙烯酯（PVS）可以部分抑制125I-All与牛肾上腺肾小球细胞膜的结合，最大效率为17.3+/-8.2 nM。PVS对AT1的抑制作用具有选择性。PVS的抑制作用是由于受体亲和力状态的变化。出乎意料的是，PVS对All诱导的类固醇生成或All与完整牛肾上腺肾小球细胞的结合没有影响。然而，PVS对All结合的抑制作用在细胞透化后得以恢复。溶解的光亲和标记的125I-AT1吸附到肝素琼脂糖凝胶上的能力表明，聚阴离子与AT1直接相互作用。125I-AT1在肝素琼脂糖上的吸附受到溶解受体与肝素或PVS预先孵育的抑制。这些结果表明，All诱导的类固醇生成是由DuP-753敏感受体介导的，PVS通过与细胞内结构域（可能是负责与鸟嘌呤核苷酸结合蛋白偶联的带正电结构域）相互作用降低了该受体的亲和力[2]。

PD 123319 对脑血流自动调节没有影响。急性 AT2 受体阻断不会影响 CBF 的自动调节。对清醒的高血压大鼠静脉注射 PD 123319 会立即引起 MAP 的剂量依赖性增加，使用 3 mg/kg PD 123319 时这种增加可持续约 7.4 分钟。

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因此，本研究探讨了PD-123319阻断自发性高血压大鼠（SHR）血管紧张素AT2受体对CBF自动调节的影响。麻醉和通气的SHR静脉注射PD 123319，0.36mg/kg/min，并与对照组进行比较。采用颈内动脉133氙注射法测量CBF，在不同的大鼠组中，通过输注去甲肾上腺素提高BP，通过控制出血降低BP。通过计算最小二乘和分析确定自动调节的极限。PD-123319不影响基线CBF，但导致血压轻微下降（10只对照组和10只治疗组大鼠）。PD 123319和对照组动物的CBF自动调节下限（8只治疗组和8只对照组）和CBF自动调整上限（8只处理组和8名对照组）没有显著差异（下限治疗组为102+/-4 mmHg，对照组为94+/-4；NS，上限治疗组为171+/-10 mmHg，控制组为162+/-7；NS）。这些发现表明，急性AT2受体阻断不影响CBF自动调节。[3]

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关于健康年轻人心血管血管紧张素2型（AT2）受体的功能表达，我们知之甚少。我们对静脉注射选择性AT2受体拮抗剂PD-123319对正常志愿者血流动力学和动脉僵硬度的影响进行了一项随机、安慰剂对照的交叉研究。16名年龄为29.9+/-13.8岁（范围18-30岁）的正常受试者接受了PD-123319（10 mcg/分钟，持续5分钟）和安慰剂的静脉输注，间隔一周。使用BioZ.com胸阻抗检测系统非侵入性测量血流动力学（心脏指数、卒中指数和全身血管阻力）。使用示波法从袖带测量血压。使用脉搏描记记录仪测量动脉僵硬度指数。与安慰剂相比，PD 123319输注后血压（p=0.92）、心脏指数（p=0.52）、卒中指数（p=0.61）、全身血管阻力指数（p=3.32）或僵硬度指数（p=0.57）没有显著变化。这项研究的结果不支持心血管AT2受体在健康年轻人中介导急性血流动力学效应的功能性存在。如果该人群中存在功能性心血管AT2受体，则可能需要更高剂量的PD 123319来证明其功能[4]。

已证明，在多种组织中，PD 123319 可以区分 AII 受体的两个亚类。牛肾上腺肾小球细胞膜制备物中 AII 的两类结合位点被 125I-AII 特异性标记。第一类（DuP-753 敏感）对 DuP-753 具有高亲和力（IC50 为 92.9 nM），约占所有 AII 结合位点的 85%。对于 125I-AII 与该位点的结合，PD-123319 没有影响。 PD-123319 的 IC50 为 6.9 nM，DuP-753 的 IC50 约为 10 μM，第二类结合位点对前者表现出更高的敏感性。

通过抑制细胞外信号调节激酶信号传导，PD123319 抑制人间充质干细胞的成骨分化。

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最近的证据表明，血管系统含有间充质干细胞（MSCs）。我们假设血管紧张素II（Ang II）2型受体（AT2Rs）在MSCs的成骨过程中起作用，并可能在血管钙化中起作用。人骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞。AT2R的表达在成骨过程中显著增加，而Ang II 1型受体的表达没有显著变化。与AT2R阻断剂PD123319（含或不含Ang II）一起孵育可显著抑制钙沉积，而1型受体阻断剂缬沙坦没有显著作用。PD123319抑制了成骨过程中细胞外信号调节激酶（ERK）的磷酸化，而缬沙坦没有影响。此外，PD123319与Ang II联合使用还抑制了胰岛素诱导的MSCs中ERK的急性磷酸化。总之，AT2R在成骨过程中上调。阻断AT2R抑制人MSCs的成骨和ERK磷酸化。这些结果为钙化性血管疾病的病理生理学提供了新的见解。[J Am Soc Hypertens. 2015 Jul;9(7):517-25. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26188399/ ]

本研究旨在探讨16只自发性高血压大鼠（SHR）脑血流量（CBF）自动调节的下限。这些动物被分为两组：8只接受静脉注射PD-123319，另8只作为对照组，注射生理盐水。注射后经过10分钟的稳定期后，开始进行自动调节评估。通过注射器逐步抽取血液，诱导出血性低血压，使血压逐渐降低至最低水平。在整个实验过程中，每隔10-15 mmHg的血压间隔记录CBF测量值。
关键方法学方面包括：

1) 使用PD-123319（一种AT2受体拮抗剂）与生理盐水对照
2) 通过控制性出血逐步降低血压
3) 在设定的血压间隔内系统性监测脑血流量1
该方案与已建立的用于评估高血压模型中自身调节阈值的技术相一致[3]

[1]. Synthesis and structure-activity relationships of a novel series of non-peptide angiotensin II receptor binding inhibitors specific for the AT2 subtype. J Med Chem. 1991 Nov;34(11):3248-60.

[2]. Modulation of angiotensin II binding affinity by allosteric interaction of polyvinyl sulfate with an intracellular domain of the DuP-753-sensitive angiotensin II receptor of bovine adrenal glomerulosa. Mol Pharmacol. 1992 Apr;41(4):809-15.

[3]. No effect of angiotensin II AT(2)-receptor antagonist PD 123319 on cerebral blood flow autoregulation. J Renin Angiotensin Aldosterone Syst. 2001 Sep;2(3):188-92.

[4]. Effects of intravenous PD 123319 on haemodynamic and arterial stiffness indices in healthy volunteers. J Renin Angiotensin Aldosterone Syst. 2005 Sep;6(2):102-6.

PD123319 是一种咪唑并吡啶类化合物，由 4,5,6,7-四氢-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶组成，其 1、5 和 6 位分别连接有 4-(二甲氨基)-3-甲基苄基、二苯乙酰基和羧基。它具有血管收缩剂、内皮素受体拮抗剂和血管紧张素受体拮抗剂的作用。

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本文报道了一类新型 4,5,6,7-四氢-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-羧酸衍生物的构效关系，该类衍生物能够将 125I 标记的血管紧张素 II 从大鼠肾上腺制剂中特定的血管紧张素 II (Ang II) 结合位点上置换下来。该结合位点并非介导血管收缩或醛固酮释放的血管紧张素II受体，而是一个功能尚未完全阐明的位点。它已在多种组织中被发现，并且与血管受体一样，对血管紧张素II及其肽类似物具有相似的亲和力。本文报道的非肽类化合物能够特异性地置换该结合位点上的血管紧张素II，并且在拮抗血管受体上的血管紧张素II或在测量血管效应的药理学试验中均无活性。PD 123,319 (79) 是最有效的化合物之一，其IC50值为34 nM。这些化合物中的某些可能有助于血管紧张素II受体亚型的定义和研究。[1]

C35H34F6N4O7

736.67

736.233

C, 57.07; H, 4.65; F, 15.47; N, 7.61; O, 15.20

136676-91-0

PD 123319; 130663-39-7

6604951

White to yellow solid powder

5.047

115.97

3

15

7

52

874

1

FC(C(=O)O[H])(F)F.FC(C(=O)O[H])(F)F.O=C(C([H])(C1C([H])=C([H])C([H])=C([H])C=1[H])C1C([H])=C([H])C([H])=C([H])C=1[H])N1C([H])([H])C2=C(C([H])([H])[C@@]1([H])C(=O)O[H])N(C([H])=N2)C([H])([H])C1C([H])=C([H])C(=C(C([H])([H])[H])C=1[H])N(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H]

GPKQIEZLHVGJQH-ZXVJYWQYSA-N

InChI=1S/C31H32N4O3.2C2HF3O2/c1-21-16-22(14-15-26(21)33(2)3)18-34-20-32-25-19-35(28(31(37)38)17-27(25)34)30(36)29(23-10-6-4-7-11-23)24-12-8-5-9-13-24;2*3-2(4,5)1(6)7/h4-16,20,28-29H,17-19H2,1-3H3,(H,37,38);2*(H,6,7)/t28-;;/m0../s1

(6S)-1-[[4-(dimethylamino)-3-methylphenyl]methyl]-5-(2,2-diphenylacetyl)-6,7-dihydro-4H-imidazo[4,5-c]pyridine-6-carboxylic acid;2,2,2-trifluoroacetic acid

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: 100 mg/mL (135.75 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。