PD158780

EGFR (IC50 = 8 μM); ErbB2 (IC50 = 49 nM); ErbB3 (IC50 = 52 nM); ErbB4 (IC50 = 52 nM)

PD158780 抑制人表皮样癌 A431 中 EGF 受体的自身磷酸化，IC50 为 13 nM。 PD158780 对 Swiss 3T3 成纤维细胞中的 EGF 受体表现出高度特异性。它在低纳摩尔浓度下阻断依赖于 EGF 的过程，例如受体自磷酸化和胸苷掺入。相反，对于依赖于血小板衍生生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的过程，微摩尔水平是必需的。 PD158780 的 IC50 分别为 49 和 52 nM，可抑制 SK-BR-3 和 MDAMB-453 乳腺肿瘤中调蛋白刺激的磷酸化，表明该物质可有效对抗其他 EGF 受体家族成员 [1]。

PD158780 在多种乳腺肿瘤类型中表现出抗克隆形成活性，具有 ErbB 家族的独特表达模式。 PD158780无论是腹腔注射还是口服给药，对A431表皮样癌均表现出良好的治疗效果。当人 EGFR 转染至小鼠成纤维细胞时，PD158780 具有可量化的重要作用。在等毒性剂量水平下，PD158780 对雌激素依赖性 MCF-7 乳腺癌具有显着的治疗效果 [1]。

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体内海马内注射ErbB抑制剂PD158780，损害CA3-CA1突触的mGluRI-LTD，影响目标识别测试中的探索行为。[2]

酶促反应在96孔过滤板中进行，最终体积为0.1 mL。反应混合物包括20 mM HEPES (pH 7.4)， 50 μM钒酸钠，40 mM氯化镁，10 μM ATP（含0.5 μCi[³²P]ATP）， 20 μg聚谷氨酸/酪氨酸，1 ng EGF受体酪氨酸激酶，以及不同浓度的抑制剂PD158780和/或ATP。首先将除ATP外的所有组分加入孔中，然后在25°C下摇匀10分钟。通过加入[³²P]ATP启动反应，并在25°C下振荡培养10分钟。加入0.1 mL 20%三氯乙酸（TCA）停止反应，4℃冷冻至少15分钟以保证底物沉淀。最后，用0.125 mL的10% TCA洗涤5次，并测量[³²P]掺入量。

所有细胞系在添加10%胎牛血清的DMEM/F12 1:1混合物中培养成单层。为了进行生长抑制试验，将10 μL的试验化合物（PD158780）连续稀释到24孔板中，然后加入悬浮在2 mL培养基中的细胞。然后将板在37°C的潮湿环境中孵育72小时。孵育后，通过直接细胞计数[1]定量细胞生长。

实验第0天，将肿瘤碎片皮下植入小鼠右侧腋窝区域。随后通过腹腔注射或灌胃给予PD158780。之后监测肿瘤进展[1]。

[1]. Biochemical and antiproliferative properties of 4-[ar(alk)ylamino]pyridopyrimidines, a new chemical class of potent and specific epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitor. Biochem Pharmacol. 1997 Oct 15;54(8):877-87.

[2]. Neuregulin 1/ErbB signalling modulates hippocampal mGluRI-dependent LTD and object recognition memory. Pharmacol Res. 2018 Apr:130:12-24.

PD158780 是一种吡啶并嘧啶类化合物，其结构为吡啶并[3,4-d]嘧啶-4,6-二胺，其中4位和6位的氨基分别被间溴苯基和甲基取代。它是一种强效、可透过细胞膜的、可逆的 ATP 竞争性 EGFR 酪氨酸激酶活性抑制剂（对 EGFR、ErbB2 (HER2) 和 Erb4 (HER4) 的 IC50 值分别为 0.008、49 和 52 nM）。它不抑制 FGF 或 PDGF 介导的酪氨酸磷酸化。PD158780 可诱导 MCF10A 细胞发生 G1 期细胞周期阻滞，并抑制 A431 人表皮癌细胞的增殖。它具有抗肿瘤活性，同时也是一种 EC 2.7.10.1（受体蛋白酪氨酸激酶）抑制剂。它是一种吡啶并嘧啶类化合物，属于仲胺类化合物，溴苯类化合物，二胺类化合物和芳香胺类化合物。

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酪氨酸激酶抑制剂PD 69896、153717和158780属于4-[芳(烷基)氨基]吡啶并嘧啶类化合物，已对其酶学性质、靶点特异性和抗肿瘤细胞增殖作用进行了表征。这些化合物是针对纯化的表皮生长因子(EGF)受体酪氨酸激酶的ATP竞争性抑制剂，并能抑制A431人表皮样癌细胞中EGF受体的自身磷酸化，IC50值分别为2085、110和13 nM。细胞暴露于这些化合物后，抑制作用立即出现；而洗去化合物后，受体自身磷酸化活性的恢复取决于抑制效力。因此，去除PD 69896后活性立即完全恢复，但暴露于PD158780后则需要8小时才能恢复。PD 158780对Swiss 3T3成纤维细胞中的EGF受体具有高度特异性，在低纳摩尔浓度下即可抑制EGF依赖性受体自磷酸化和胸苷掺入，而抑制血小板衍生生长因子和碱性成纤维细胞生长因子依赖性过程则需要微摩尔浓度。PD 158780抑制SK-BR-3和MDA-MB-453乳腺癌细胞中heregulin刺激的磷酸化，IC50值分别为49 nM和52 nM，表明该化合物对EGF受体家族的其他成员也具有活性。该系列化合物对A431细胞的抗增殖作用与其对EGF受体自磷酸化的抑制效力完全相关。 PD158780 可减少由 EGF、EGF 受体或 neu 癌基因转化的成纤维细胞在软琼脂中的克隆形成，但对 ras 或 raf 转化的成纤维细胞无影响，进一步证明了其高度特异性。此外，该化合物对几种具有不同 erbB 家族表达模式的乳腺肿瘤的克隆形成具有活性，表明其对表达这些受体的肿瘤具有抗癌作用。[1]

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神经营养因子神经调节蛋白 (NRG) 及其受体 ErbB 酪氨酸激酶调节神经传递、突触可塑性和认知功能，它们的改变与多种神经精神疾病相关。在神经精神疾病的动物模型中，I 组代谢型谷氨酸受体 (mGluRI) 依赖性机制也发生改变，尤其是 mGluRI 诱导的谷氨酸能长期抑制 (mGluRI-LTD)，这是一种在学习和记忆中起关键作用的突触可塑性形式。尽管有这些证据，但NRGs/ErbB信号通路与mGluRI-LTD之间的潜在联系却从未被考虑过。本研究旨在验证NRGs/ErbB信号通路是否调控海马中mGluRI的功能，从而控制CA1锥体神经元的兴奋性和突触可塑性以及mGluRI依赖性行为。我们通过分析NRG1/ErbB信号通路的药理学调控对锥体神经元兴奋性和mGluRI激动剂诱导的CA3-CA1突触LTD的影响，研究了NRG1/ErbB信号通路与mGluRI在海马CA1锥体神经元中的功能性相互作用。此外，我们通过评估在小鼠物体识别测试（一种依赖于海马mGluRI的学习任务）中，海马内注射泛ErbB抑制剂后小鼠的行为，验证了ErbB信号通路参与mGluRI依赖性学习过程。我们发现NRG1增强了mGluRI对CA3-CA1突触锥体神经元兴奋性和突触可塑性的依赖性功能。此外，内源性ErbB信号通路本身通过mGluRI调节CA1锥体神经元的兴奋性和LTD，因为ErbB抑制会降低mGluRI诱导的神经元兴奋性和mGluRI-LTD。在小鼠海马内注射ErbB抑制剂PD158780会损害CA3-CA1突触的mGluRI-LTD，并影响物体识别测试中的探索行为。因此，我们的研究结果表明，NRG1/ErbB 信号在调节海马 mGluRI 依赖性突触和认知功能方面起着关键作用，其改变可能导致不同脑部疾病的发病。[2]

C14H12BRN5

330.1826

329.028

C, 50.93; H, 3.66; Br, 24.20; N, 21.21

171179-06-9

4707

Light yellow to yellow solid powder

1.611g/cm3

499.6ºC at 760 mmHg

176 °C

255.9ºC

4.1E-10mmHg at 25°C

1.768

3.718

62.73

2

5

3

20

316

0

CNC1=NC=C2C(=C1)C(=NC=N2)NC3=CC(=CC=C3)Br

KFHMLBXBRCITHF-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C14H12BrN5/c1-16-13-6-11-12(7-17-13)18-8-19-14(11)20-10-4-2-3-9(15)5-10/h2-8H,1H3,(H,16,17)(H,18,19,20)

4-N-(3-bromophenyl)-6-N-methylpyrido[3,4-d]pyrimidine-4,6-diamine

PD 158780; 171179-06-9; PD158,780; pd 158,780; N4-(3-bromophenyl)-N6-methylpyrido[3,4-d]pyrimidine-4,6-diamine; PD-158,780; AC1L1IRV; CHEBI:92843; DTXSID20274443; PD158780; PD-158780.

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~16.67 mg/mL (~50.49 mM)

配方 1 中的溶解度: 1.67 mg/mL (5.06 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 16.7 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: 1.67 mg/mL (5.06 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 16.7mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。