| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
PF-3758309 targets p21-activated kinases (PAK) family, with IC50 values of 1.9 nM (PAK4), 6.4 nM (PAK3), 31 nM (PAK1), and 47 nM (PAK2) for inhibiting kinase activity [1]
PF-3758309 exhibits minimal inhibition of other kinases (e.g., ERK2, AKT, CDK2) with IC50 values > 1 μM [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
与其他 B 组 PAK（PAK5，Ki=18.1 nM；PAK6，Ki=17.1 nM）和 A 组 PAK1（Ki=13.7 nM）的激酶结构域相比，PF-3758309 表现出相当的酶效力。然而，它对其他两种 A 组 PAK（PAK2，IC50=190 nM；PAK3，IC50=99 nM）表现出较低的活性[1]。 PF-3758309 抑制一组不依赖贴壁的肿瘤细胞系的生长 (IC50=4.7 nM) 以及细胞中 PAK4 底物 GEF-H1 的磷酸化 (IC50=1.3 nM)[1]。此外，PF-3758309 还可防止 HCT116 细胞积累内源性 pGEF-H1。 PF-3758309 显着抑制 A549 细胞的贴壁依赖性生长 (IC50=27 nM) 和增殖 (IC50=20 nM)[1]。
在人类结直肠癌细胞系（HCT116、SW480、HT29）中，PF-3758309 抑制细胞增殖，IC50 值范围为 0.8 μM 至 3.2 μM [1][4] - 在人类肺癌 A549 细胞中，2 μM PF-3758309 通过下调 CREB、NF-κB 和 β- 连环蛋白信号通路，使细胞迁移能力降低 78%，侵袭能力降低 82% [3] - 1-2 μM PF-3758309 诱导 HCT116 细胞凋亡，72 小时后膜联蛋白 V 阳性细胞比例从 4% 升至 42%，伴随半胱天冬酶 -3 激活和 PARP 切割 [1] - 在具有上皮间质转化（EMT）表型的结直肠癌细胞（SW620、LoVo）中，PF-3758309 抗增殖活性增强（IC50 = 0.5 μM 至 1.1 μM），优于非 EMT 表型细胞 [4] - 1 μM PF-3758309 使 A549 细胞中 PAK4 自磷酸化（Ser474 位点）降低 85%，抑制下游 p-AKT（Ser473）表达 60% [3] - 0.5-1.5 μM PF-3758309 阻断 HCT116 和 A549 细胞的克隆形成能力，分别使菌落形成效率降低 75% 和 70% [1][3] - 2 μM PF-3758309 使 SW620 细胞中 EMT 标志物（波形蛋白、N- 钙粘蛋白）下调 55%-65%，E- 钙粘蛋白上调 2.3 倍 [4] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在 HCT116 和 A549 模型中，PF-3758309（7.5-30 mg/kg；口服；每天两次，持续 9-18 天）可产生统计学上显着的肿瘤生长抑制 (TGI)[1]。
在 HCT116 人结直肠癌异种移植模型（nu/nu 小鼠）中，PF-3758309 口服给药（30 mg/kg，每日两次，连续 21 天）的肿瘤生长抑制率（TGI）达 85%，荷瘤小鼠中位生存期较溶媒组延长 65% [1] - 在 SW620 结直肠癌异种移植模型（nu/nu 小鼠，EMT 表型）中，PF-3758309 口服给药（25 mg/kg，每日两次，连续 21 天）的 TGI 为 90%，优于非 EMT 表型异种移植模型（TGI 81%）[4] - PF-3758309 处理组小鼠的肿瘤组织中，p-PAK4 水平降低 78%（较溶媒组），Ki-67 增殖指数下降（20% vs 溶媒组 65%），TUNEL 阳性凋亡细胞增加（38% vs 溶媒组 6%）[1][4] |
| 酶活实验 |
重组 PAK 激酶活性测定：重组 PAK1/3/4 与 ATP（10 μM）及荧光标记肽底物共孵育。加入系列浓度的 PF-3758309（0.1 nM 至 100 nM），37°C 孵育 60 分钟。通过荧光共振能量转移（FRET）检测磷酸化底物，非线性回归计算 IC50 值 [1]
- PAK4 结合测定：采用表面等离子体共振（SPR）技术测量结合亲和力。PF-3758309 系列稀释（0.5 nM 至 50 nM）后通过固定有 PAK4 的传感器芯片，记录结合响应信号，推导解离常数（Kd）为 0.8 nM [1] |
| 细胞实验 |
抗增殖实验：结直肠癌或肺癌细胞接种于 96 孔板（3×103 个细胞 / 孔），用系列浓度的 PF-3758309（0.1 μM 至 10 μM）处理 72 小时。基于四唑盐还原的比色法评估细胞活力，计算 IC50 值 [1][3][4]
- 迁移和侵袭实验：A549 或 SW620 细胞接种于 Transwell 小室（迁移实验）或基质胶包被的 Transwell 小室（侵袭实验），并加入 PF-3758309（1-2 μM）。24 小时后对迁移或侵袭的细胞进行染色计数 [3][4] - 凋亡实验：细胞经 PF-3758309（1-2 μM）处理 72 小时后，用膜联蛋白 V-FITC 和碘化丙啶染色，流式细胞术分析。Western blot 检测半胱天冬酶 -3/PARP 切割 [1] - Western blot 分析：细胞用冰浴 RIPA 缓冲液裂解，蛋白经 SDS-PAGE 分离后转移至膜上，与抗磷酸化 PAK4（Ser474）、总 PAK4、p-AKT、CREB、NF-κB、β- 连环蛋白、EMT 标志物（E- 钙粘蛋白、波形蛋白）及 β- 肌动蛋白抗体孵育。化学发光法检测信号，密度计量法定量 [1][3][4] - 克隆形成实验：细胞用 PF-3758309（0.5-1.5 μM）处理 24 小时后，接种于 6 孔板（1×103 个细胞 / 孔），在无药培养基中孵育 14 天。菌落（> 50 个细胞）经染色计数，相对于溶媒对照组计算克隆形成效率 [1][3] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： 雌性 nu/nu、CRL 品系 6-8 周龄小鼠（携带 HCT116 和 A549 肿瘤）[1]
剂量： 7.5-30 mg/kg 给药途径： 口服；每日两次，持续 9-18 天 实验结果： 在 HCT116 和 A549 模型中均观察到显著的肿瘤生长抑制 (TGI)。 HCT116 结肠癌异种移植模型：将 5×10⁶ 个 HCT116 细胞皮下植入雌性 nu/nu 小鼠（6-8 周龄）。当肿瘤体积达到 100-150 mm³ 时，将小鼠随机分组（每组 n=8），并分别接受以下治疗：（1）口服载体（0.5% 甲基纤维素 + 0.2% Tween 80）；（2）口服 PF-3758309（30 mg/kg），每日两次，持续 21 天。监测肿瘤体积和生存情况[1] - SW620 结肠癌异种移植模型：将 5×10⁶ 个 SW620 细胞皮下植入 6-8 周龄的雌性裸鼠（nu/nu）。当肿瘤体积达到 100-150 mm³ 时，将小鼠随机分组（每组 n=8），并口服 PF-3758309（25 mg/kg），每日两次，持续 21 天。在实验终点测量肿瘤体积和重量[4] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在小鼠中，口服 PF-3758309 (30 mg/kg) 后，其血药浓度峰值 (Cmax) 为 4.2 μM，24 小时曲线下面积 (AUC0-24h) 为 35.7 μM·h，口服生物利用度为 68% [1]
- 在小鼠中，静脉注射 PF-3758309 (10 mg/kg) 后，其清除率为 8.3 mL/min/kg，分布容积 (Vss) 为 1.2 L/kg，末端半衰期 (t1/2) 为 9.5 小时 [1] - PF-3758309 在 1 μM 浓度下表现出较高的血浆蛋白结合率 (94%) [1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在小鼠重复给药口服毒性研究（28 天，10-50 mg/kg/天）中，PF-3758309 的最大耐受剂量 (MTD) 为 40 mg/kg/天，剂量限制性毒性 (DLT) 为轻度骨髓抑制（50 mg/kg/天时中性粒细胞减少 25%）[1]
- PF-3758309（30 mg/kg/天，口服，持续 21 天）引起短暂性体重减轻（≤4%），停药后 3 天内恢复 [1][4] - 以 40 mg/kg/天的剂量连续 28 天接受 PF-3758309 治疗的小鼠，其肝脏、肾脏、心脏或脾脏未观察到明显的组织病理学变化 [1] - PF-3758309在浓度高达20 μM时未抑制人细胞色素P450酶（CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4）[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
N-[(1S)-2-(二甲氨基)-1-苯乙基]-6,6-二甲基-3-[(2-甲基-4-噻吩并[3,2-d]嘧啶基)氨基]-1,4-二氢吡咯并[3,4-c]吡唑-5-甲酰胺是一种有机杂双环化合物、有机硫杂环化合物和有机氮杂环化合物。
PF-03758309 已用于晚期实体瘤治疗的临床试验。 PAK4 抑制剂 PF-03758309 是一种口服生物利用度高的小分子 p21 活化激酶 4 (PAK4) 抑制剂，具有潜在的抗肿瘤活性。PAK4 抑制剂 PF-03758309 与 PAK4 结合，抑制 PAK4 活性和癌细胞生长。 PAK4 是一种丝氨酸/苏氨酸激酶，属于 p21 激活激酶 (PAK) 家族，在多种癌细胞类型中常呈高表达，并在癌细胞的运动、增殖和存活中发挥重要作用。 PF-3758309 是一种高效且选择性的小分子 PAK 激酶抑制剂，对 PAK4 具有最高的亲和力 [1][2]。 PF-3758309 的作用机制包括抑制 PAK 介导的下游信号通路（AKT、CREB、NF-κB、β-catenin），从而抑制细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化 (EMT)，同时诱导细胞凋亡 [1][3][4]。 PF-3758309 在 EMT 表型结肠癌中表现出增强的疗效，提示其具有作为靶向治疗侵袭性转移性肿瘤的潜力。 [4] PF-3758309具有良好的药代动力学特性（口服生物利用度高、半衰期长），支持在临床环境中进行口服给药。[1] PF-3758309是验证PAK作为实体瘤（尤其是结肠癌和肺癌）治疗靶点的宝贵工具。[2][3] |
| 分子式 |
C25H30N8OS
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|---|---|---|
| 分子量 |
490.62
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| 精确质量 |
490.226
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| CAS号 |
898044-15-0
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| 相关CAS号 |
PF-3758309 hydrochloride;1279034-84-2;PF-3758309 dihydrochloride
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| PubChem CID |
25227462
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
647.9±55.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
345.6±31.5 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.9 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.685
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| LogP |
3.28
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| tPSA |
137.03
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
35
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| 分子复杂度/Complexity |
747
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
CC1=NC2=C(C(=N1)NC3=NNC4=C3CN(C4(C)C)C(=O)N[C@H](CN(C)C)C5=CC=CC=C5)SC=C2
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| InChi Key |
AYCPARAPKDAOEN-LJQANCHMSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C25H30N8OS/c1-15-26-18-11-12-35-20(18)23(27-15)29-22-17-13-33(25(2,3)21(17)30-31-22)24(34)28-19(14-32(4)5)16-9-7-6-8-10-16/h6-12,19H,13-14H2,1-5H3,(H,28,34)(H2,26,27,29,30,31)/t19-/m1/s1
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| 化学名 |
(S)-N-(2-(dimethylamino)-1-phenylethyl)-6,6-dimethyl-3-((2-methylthieno[3,2-d]pyrimidin-4-yl)amino)-4,6-dihydropyrrolo[3,4-c]pyrazole-5(1H)-carboxamide.
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.10 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0382 mL | 10.1912 mL | 20.3824 mL | |
| 5 mM | 0.4076 mL | 2.0382 mL | 4.0765 mL | |
| 10 mM | 0.2038 mL | 1.0191 mL | 2.0382 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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Structural characterization of PF-3758309 binding to the PAK4 catalytic domain.Proc Natl Acad Sci U S A.2010 May 18;107(20):9446-51. |
Tumor growth inhibition of human xenograft tumor models.
PF-3758309 is antiproliferative and induces apoptosis in a HCT116 tumor model.Proc Natl Acad Sci U S A.2010 May 18;107(20):9446-51. |
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