PhIP

PhIP undergoes metabolic activation to form DNA adducts, specifically N-(2'-deoxyguanosin-8-yl)-PhIP (dG-C8-PhIP), through the action of Phase II enzymes such as N-acetyltransferases (NATs) and sulfotransferases (SULTs).

PhIP 通过多种途径影响 miRNA 的表达，这些途径大多相互重叠。PhIP 激活雌激素受体 α (ERα) 产生广泛分布的影响。PhIP 诱导的 miRNA 失调可能是乳腺癌中一条重要的非 DNA 损伤致癌通路 [2]。在 LNCaP 人前列腺癌细胞中，母体化合物 PhIP (1-10 µM) 处理 24 小时后未显示细胞毒性。然而，其 N-羟基化代谢物 HONH-PhIP 在 0.1-10 µM 浓度下诱导了显著的浓度依赖性细胞毒性。在浓度低至 5 nM 的 HONH-PhIP 处理的 LNCaP 细胞中检测到了 DNA 加合物 (dG-C8-PhIP) 的形成，其水平比其他 HONH-HAAs（例如 HONH-MeIQx、HONH-IQ 和 HONH-AαC）形成的加合物高出 20 倍。 dG-C8-PhIP 的生成具有时间和浓度依赖性，在处理后 8 小时达到峰值，之后逐渐下降，这可能是由于 DNA 修复或细胞分裂所致。用特异性酶抑制剂（例如五氯苯酚、甲芬那酸、Rhod-o-hp）预处理 LNCaP 细胞可使 dG-C8-PhIP 的生成减少 25-75%，表明 SULT1A1 和 NATs 参与了生物活化过程。

PhIP在啮齿动物的前列腺中形成DNA加合物，并诱导氧化应激、腺泡萎缩和前列腺炎症[1]。在hCYP1A小鼠中，与腹侧叶相比，PhIP在背外侧叶诱导炎症、上皮细胞损伤和前列腺上皮内瘤变。

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该研究分析了接受根治性前列腺切除术的前列腺癌患者的前列腺组织样本。在54例患者样本中，有13例检测到PhIP的DNA加合物（dG-C8-PhIP），其含量范围为每10⁸个DNA碱基0.2至12个加合物。在这些样本中未检测到其他杂环胺（MeIQx、AαC）的DNA加合物。这表明PhIP可以在人前列腺组织中形成DNA加合物，可能是由于食用熟肉后全身暴露于PhIP，并在前列腺中发生生物活化所致。

本研究利用LNCaP细胞和人前列腺组织的胞质组分评估了HONH-PhIP向DNA结合中间体的生物活化。反应体系包含胞质蛋白（1 mg/ml）、小牛胸腺DNA（1 mg/ml）和HONH-PhIP（0.1或1 µM），并加入以下辅因子：乙酰辅酶A（AcCoA，1 mM，用于NAT活性测定）、腺苷3-磷酸-5-磷酸硫酸酯（PAPS，0.2 mM，用于SULT活性测定）或腺苷5-三磷酸（ATP，1 mM，用于激酶活性测定）。反应在氩气保护下于37°C孵育30分钟。反应通过加入乙酸乙酯终止，DNA经沉淀、洗涤和酶解后，采用UPLC-ESI/MS分析定量dG-C8-PhIP加合物。结果表明，AcCoA依赖性激活（NAT介导）产生的加合物水平比PAPS依赖性激活（SULT介导）高10倍，而ATP依赖性激活（激酶介导）产生的加合物则低得多。
在完整的LNCaP细胞和人前列腺细胞溶胶中，使用特异性底物测定了II相酶（NAT1、NAT2、SULT1A1）的活性：NAT1使用4-氨基苯甲酸（PABA，200 µM），NAT2使用磺胺二甲嘧啶（SMZ，200 µM），SULT1A1使用4-硝基苯酚（4 µM）。反应在37°C下孵育，并通过高效液相色谱-紫外检测法定量代谢物的生成。在LNCaP细胞中，NAT1活性最高（1.64 nmol/min/mg蛋白），其次是SULT1A1（0.46 nmol/min/mg蛋白）和NAT2（0.07 nmol/min/mg蛋白）。未检测到UGT1A1和UGT1A9活性。
采用乙氧基试卤灵O-脱乙基酶（EROD）和甲氧基试卤灵O-脱甲基酶（MROD）测定法，评估了人前列腺微粒体和LNCaP细胞胞质溶胶中的CYP1和CYP1A2活性。反应混合物包含微粒体或胞质溶胶蛋白（1 mg/ml）、NADPH（1 mM）和底物（5 µM），溶于37°C的磷酸盐缓冲液中。采用荧光法监测试卤灵的生成。前列腺微粒体中EROD活性较低（最高达0.3 pmol/min/mg蛋白），而MROD活性（CYP1A2特异性）未检测到。

LNCaP细胞培养于添加了胎牛血清和抗生素的RPMI-1640培养基中。细胞毒性实验中，将细胞接种于96孔板中，并用HAAs或HONH-HAAs（0.1-10 µM）处理24小时。采用MTS法评估细胞活力，加入MTS试剂，孵育2小时后在490 nm处测量吸光度。DNA加合物实验中，将LNCaP细胞接种于6孔板中，并用HAAs（1或10 µM）或HONH-HAAs（0.1或1 µM）处理特定时间点。细胞经洗涤、刮取后，沉淀物储存于-80°C。使用商业试剂盒提取DNA，在同位素标记内标存在下进行酶解，并通过UPLC-ESI/MS分析进行加合物定量。
在酶抑制研究中，细胞先用抑制剂（五氯苯酚、甲芬那酸、Rhod-o-hp）预处理30分钟，然后加入HONH-PhIP（0.1 µM）。孵育后，按照上述方法处理细胞，进行DNA加合物分析或酶活性测定。
在稳定性研究中，用HONH-PhIP或HONH-MeIQx（1 µM）处理LNCaP细胞，并在不同时间点收集培养基。将样品与乙腈混合，离心，并用HPLC-UV检测分析上清液，以监测母体化合物和代谢物的水平。

吸收、分布和排泄
Fischer 344 大鼠经灌胃单次给予 0.60 mg/只的 (2-14)C-2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑并[4,5-b]吡啶 (PhIP)。分别于给药后 12、24、48 和 96 小时检测粪便、尿液、血液、血清蛋白、血红蛋白和组织中的放射性。尿液中检测到一种主要放射性成分和四种次要放射性成分，粪便中检测到一种主要放射性成分和两种次要放射性成分。粪便是主要的排泄途径，在给药后 24 小时内占总剂量的 78%，未代谢的 PhIP 占粪便总剂量的 51%。未代谢的PhIP也被证实是腹腔注射单剂量动物胆汁和粪便中的主要放射性成分。血液中仅存在少量PhIP，且血液中PhIP的主要持久结合形式与血红蛋白结合。给药12小时后，结肠和盲肠中的放射性浓度最高，其次是肾脏和肝脏。给药24小时后，组织中80-90%的放射性物质不溶于乙醇，表明其与大分子发生了共价结合。
……利用加速器质谱的高灵敏度，研究了PhIP在人体膳食剂量下的生物利用度和代谢途径。(2-14) 通过灌胃法向雄性C57BL/6小鼠给予C-PhIP（41 ng/kg）。在随后的96小时内收集组织和排泄物。在整个研究过程中，100%的给药剂量均经尿液（90%）和粪便（10%）排出。放射性碳标记的PhIP可迅速被胃肠道吸收，全血和尿液中的放射性碳浓度在暴露后1小时达到峰值。粪便中的¹⁴C浓度在12小时达到峰值。组织中的放射性碳浓度在3小时达到峰值，其中肠、胃和肝脏的浓度最高，其次是肾脏、胰腺、肺和脾脏。暴露后48-96小时，可在组织中检测到低浓度的PhIP衍生¹⁴C（占给药剂量的0.01-0.04%），这可能是由于其与蛋白质或DNA共价结合所致。在此剂量下，PhIP的计算半衰期为1.14小时。本研究采用组织提取和高效液相色谱法，探讨了在妊娠或哺乳期C57Bl/6小鼠腹腔单次注射PhIP（4.7-5.2 mg/kg体重）后，PhIP向胎儿和新生儿的转移情况。结果表明，未修饰的(3)H-PhIP可通过胎盘转移至胎儿；在妊娠晚期，胎儿体内PhIP水平最高。在妊娠晚期，对静脉注射(2-14)C-PhIP（1.4 mg/kg）的小鼠进行放射自显影分析显示，放射性高度且选择性地集中于胎儿眼部的色素区域，而在胎儿肝脏、胃肠道内容物、尿液和子宫液中也观察到中等水平的放射性。对新生小鼠进行高效液相色谱（HPLC）分析，这些小鼠腹腔注射了来自哺乳期母鼠的(3)H-PhIP（5.2 mg/kg），持续4小时。结果显示，新生小鼠体内存在未改变的PhIP，表明PhIP会分泌到母乳中。这些结果提示，妊娠和哺乳期接触PhIP可能导致这种食物诱变剂传递给胎儿和婴儿。肉类、鱼类或家禽的高温烹饪会产生杂环芳香胺（HAAs），这些物质可能经代谢活化为致突变或致癌的中间体。细胞色素P4501A2 (CYP1A2) 和N-乙酰转移酶 (NAT2) 主要参与此类生物转化……本研究旨在确定这两种酶的活性与两种杂环胺 (HAAs) 未代谢产物及其 II 期结合物尿排泄量之间的关系：MeIQx (2-氨基-3,8-二甲基咪唑并[4,5-f]喹喔啉) 和 PhIP (2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑并[4,5-b]吡啶)。受试者食用含有已知含量 MeIQx 和 PhIP 的肉类，并在餐后 0-12 小时和 12-24 小时收集尿液。尿液经酸处理以测定 MeIQx 和 PhIP 的水平，酸处理可将 II 期结合物定量水解为其各自的母体胺。含有HAAs的提取物经免疫亲和层析纯化，并用液相色谱-电喷雾电离串联质谱法进行分析。酸水解后，尿液中MeQx的浓度在0-12小时内增加了3-21倍。酸处理后，0-12小时内尿液中排出的MeQx总量（未代谢物及其N2-葡萄糖醛酸苷和氨基磺酸酯代谢物）为给药剂量的10.5 ± 3.5%（平均值 ± 标准差），而0-12小时内尿液中排出的PhIP总量（未代谢物及其酸不稳定结合物）为给药剂量的4.3 ± 1.7%（平均值 ± 标准差）。酸处理后，12-24小时内尿液中排出的PhIP总量为给药剂量的0.9 ± 0.4%（平均值 ± 标准差）。对所有受试者在0-12小时内MeQx和PhIP的排泄量（以摄入剂量的百分比表示）进行线性回归分析，结果显示二者之间存在较低但显著的相关性（r = 0.37，P = 0.005）。线性回归分析表明，尿液中总MeQx（未代谢物加上N2-葡萄糖醛酸苷和氨基磺酸酯代谢物）水平较低与CYP1A2活性较高相关，而尿液中总PhIP（未代谢物加上结合物）与CYP1A2活性无关。这些结果提示，在人体内，MeQx的代谢和分布受CYP1A2活性的影响大于PhIP。线性回归分析未发现NAT2活性与尿液中MeQx或PhIP（未代谢物加上酸不稳定结合物）的排泄水平之间存在关联。关于2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑并[4,5-b]吡啶（7种化合物）的吸收、分布和排泄的更完整数据，请参见HSDB记录页面。代谢/代谢物：本研究旨在评估十字花科蔬菜摄入量对20名非吸烟白人男性受试者PhIP代谢的影响。研究分为三个12天的阶段：两个阶段避免食用十字花科蔬菜（阶段1和阶段3），以及一个阶段摄入大量十字花科蔬菜（阶段2），受试者每日食用250克抱子甘蓝和250克西兰花。在每个研究阶段结束时，受试者食用一份含有4.90微克PhIP的熟肉餐，并收集长达48小时的尿液样本。十字花科蔬菜的摄入显著提高了肝脏CYP1A2的活性，唾液咖啡因动力学的变化证实了这一点。……在第1阶段和第3阶段，0-48小时尿液样本中N(2)-羟基-N(2)-PhIP-葡糖醛酸苷的排泄量是N(2)-羟基-PhIP-N(3)-葡糖醛酸苷的六倍。十字花科蔬菜的摄入显著增加了0-48小时尿液样本中N(2)-羟基-PhIP-N(2)-葡糖醛酸苷的排泄量，分别达到第1阶段和第3阶段观察到水平的127%和136%。相比之下，尿液中N(2)-羟基-PhIP-N(3)-葡糖醛酸苷的排泄量保持不变。在第一阶段和第三阶段，两种PhIP代谢物的尿排泄量约占PhIP剂量的39%，而在第二阶段，这一比例约为49%。本研究表明，摄入十字花科蔬菜可诱导人体内PhIP的I期和II期代谢。雄性Fischer 344大鼠单次注射0.03–30 mg/kg的(2–14)C-2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑并[4,5-b]吡啶((14C)PhIP)，并在48小时内测量尿液和粪便中的放射性。主要代谢物被鉴定和定量。剂量对尿液中代谢物的组成影响不大，但会影响粪便中代谢物的组成。PhIP在高剂量下代谢效率更高。此外，在单次给予(14)C-PhIP之前，分别用Aroclor 1254 (PCB)、3-甲基胆蒽 (MC)、苯巴比妥 (PB)、PhIP和玉米油对大鼠进行预处理，并与仅接受(14)C-PhIP的对照组进行比较。对各组尿液和粪便中的主要代谢物进行定量分析，并测定PhIP与血清蛋白、血红蛋白和特定组织的结合情况。MC和PCB预处理导致尿液中PhIP的4'-羟基化增加，N-羟基化代谢物减少。PB预处理导致N-羟基化代谢物增加，但4'-羟基化减少。MC和PCB预处理均导致PhIP与肝脏和肾脏的结合增加，但与其他组织的结合减少。PhIP预处理组与未处理组相比无显著差异；然而，PB预处理通常导致PhIP在组织中的结合减少。
……腺瘤性息肉病（APC）基因产物的功能丧失是人类结直肠癌早期常见的事件。小鼠的正常（Apc(+/+)）和癌前（Apc(Min/+)）结肠上皮细胞（其中Min代表多发性肠道肿瘤）可用于研究致癌作用的促进……本研究探讨了这两种小鼠细胞系中¹⁴C-PhIP的代谢。经2,3,7,8-四氯二苯并二恶英（TCDD）诱导的细胞将PhIP代谢为4'-OH-PhIP，后者是PhIP解毒的主要代谢产物。此外，还鉴定出了5-OH-PhIP，表明存在一种中间活性代谢物，该代谢物是由N-乙酰氧基-PhIP结合物降解产生的。这些代谢物在Apc(Min/+)细胞中的产生量显著高于其他细胞类型。研究还观察到了去甲基化代谢物，表明结肠中存在显著的CYP1家族依赖性代谢活性。在Apc(Min/+)细胞中观察到少量羟基葡糖醛酸苷-PhIP代谢物，而葡糖醛酸化是解毒途径中的重要步骤。定量实时逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)实验表明，TCDD诱导显著影响Apc(Min/+)细胞中CYP1A1、CYP1A2和CYP1B1的基因表达。这些细胞中N-乙酰转移酶-2的表达水平也较高。因此，在Apc(Min/+)细胞中测得的PhIP代谢生物活化能力越强，产生新的原位突变的可能性就越高。本研究还探讨了2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑并[4,5-b]吡啶(PhIP)在小鼠体内的代谢情况。在3-甲基胆蒽诱导的小鼠中，腹腔注射0.1、1.0和10 mg/kg (¹⁴C) PhIP后，24小时内尿液和粪便分别排出给药剂量的16%和42-56%。未代谢的母体化合物的尿液排泄量仅为给药剂量的0.5-0.8%。在所有剂量下，主要的尿代谢物均被鉴定为4'-(2-氨基-1-甲基咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)苯基硫酸盐，约占给药剂量的5%。在未诱导的小鼠尿液中，10 mg/kg剂量的PhIP有超过13%以硫酸盐结合物的形式排出。未诱导小鼠尿液中2-氨基-1-甲基-6-(4'-羟基)苯基咪唑并[4,5-b]吡啶（4'-羟基-PhIP）及其葡萄糖醛酸苷结合物（N-羟基-PhIP）的排泄量也高于诱导小鼠（4倍）。与肝微粒体制剂中代谢物生成增加相反，诱导后尿液中P450衍生的代谢物排泄量减少。在50 μM (3)H-PhIP浓度下，诱导微粒体产生的4'-羟基-PhIP和N-羟基-PhIP的量分别比未诱导微粒体产生的量高近7倍和3倍。在浓度低于10 μM时，诱导制备的微粒体几乎完全将PhIP转化为一种不被C18柱保留的未知代谢物。该代谢物在与 4'-羟基-PhIP 或 N-羟基-PhIP 孵育后也会产生，但在未诱导的动物微粒体中其生成速率要慢得多。(3) H-PhIP 与微粒体蛋白的共价结合呈浓度依赖性，在诱导的微粒体中比在未诱导的微粒体中高 2 至 4 倍。在用 (14)C-PhIP 诱导的小鼠肝脏和肾脏中，(14)H-PhIP 与微粒体蛋白的共价结合呈剂量依赖性。在 10 mg/kg PhIP 的剂量下，诱导小鼠肝脏中产生的加合物水平比未诱导小鼠高 1.7 倍，但在未诱导动物的肾脏中结合速率更高。这些研究表明，细胞色素 P450 和其他外源酶在 PhIP 的代谢、分布和活化中发挥着重要作用。有关 2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑并[4,5-b]吡啶（共 28 种代谢物）的更完整代谢物数据，请访问 HSDB 记录页面。已知的 2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑并[4,5-b]吡啶的人类代谢物包括 2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑并[4,5-b]吡啶的 N2-葡萄糖醛酸苷。

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生物半衰期
... 通过灌胃法（41 ng/kg）向 C57BL/6 雄性小鼠给予 (2-14)C-PhIP。在接下来的 96 小时内收集组织和排泄物样本……计算得出该剂量下 PhIP 的半衰期为 1.14 小时。

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在 LNCaP 细胞中评估了 HONH-PhIP 的代谢稳定性。 HONH-PhIP的半衰期估计为3.0小时，其主要代谢途径是还原为母体胺。在实验条件下未检测到环氧化代谢物或II相结合物。

相互作用
为了研究柑橘类黄酮柚皮苷抑制2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑并[4,5-b]吡啶（PhIP，食物中最丰富的致突变杂环胺）生成的机制，我们进行了化学模型反应。GC-MS分析表明，柚皮苷呈剂量依赖性地降低了苯乙醛的水平，苯乙醛是PhIP生成途径中的关键中间体。随后，对含有苯丙氨酸、葡萄糖和肌酐等PhIP前体的各种模型体系进行LC-MS分析，结果表明柚皮苷通过形成加合物来清除苯乙醛。同位素标记研究表明，推测的加合物包含一个源自苯丙氨酸的片段。苯乙醛与柚皮苷的直接反应进一步证实了柚皮苷可以与苯乙醛形成加合物，从而降低苯乙醛在PhIP生成中的活性。随后分离纯化了其中两种加合物。一维和二维核磁共振波谱分析确定它们的结构分别为8-C-(E-苯基乙烯基)柚皮苷 (1) 和6-C-(E-苯基乙烯基)柚皮苷 (2)，表明C-6和C-8是柚皮苷加合物形成的两个活性位点。在热加工牛肉模型中也发现了这两种加合物，提示苯乙醛捕获是柚皮苷抑制PhIP形成的关键机制。评估了亚硝酸钠(NaNO₂)和2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑并[4,5-b]吡啶(PhIP)联合治疗对雌性Sprague-Dawley (SD)大鼠乳腺肿瘤诱导的影响。 6周龄动物每周两次灌胃给予100 mg/kg体重的PhIP，持续4周，期间在饮用水中添加0%或0.2%的NaNO₂。对照组大鼠仅接受0.2% NaNO₂处理4周，或在整个48周的实验期间饮用不含任何添加物质的饮用水，且未接受致癌物处理。PhIP+NaNO₂组首次出现肿瘤的时间显著晚于PhIP组。实验期间，该组乳腺肿瘤的发生率、数量和体积均呈下降趋势，尽管在最终处死时各组之间无统计学差异。这些结果表明，NaNO₂不会增强PhIP诱导的大鼠乳腺癌，反而具有一定的抑制作用。五周龄雄性F344大鼠接受X射线照射，首次照射后16周，通过胃内灌注给予2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑并[4,5-b]吡啶（PhIP）。在25只接受X射线+PhIP治疗的动物中，4只在给药后12个月时于前胃出现幽门肿瘤。化学组和仅接受X射线照射的组均未发现此类病变。肠化生和部分肿瘤诱导因子CDX2呈阳性。这表明肠化生的存在可能增加结肠致癌物对胃肿瘤的敏感性。本研究旨在探讨先前观察到的槲皮素增加PhIP通过Caco-2单层细胞转运的现象是否能在体内大鼠模型中得到证实。同时给予大鼠1.45 μmol PhIP/kg体重和30 μmol槲皮素/kg体重可显著增加其血液中PhIP的AUC(0-8 hr)，达到单独给予PhIP组的131 ± 14%。给药后15、30、45和180分钟均检测到血液中PhIP水平显著升高。给药后4小时和8小时，两组间血液中PhIP水平的差异消失。利用Caco-2细胞和先前报道的PhIP转运动力学模型，进行了PhIP转运的体外和计算机模拟，结果表明槲皮素诱导的PhIP转运的相对增加取决于两种化合物的浓度。将体内实验中使用的 PhIP 和槲皮素浓度代入动力学模型，预测的槲皮素对 PhIP 转运的影响与体内观察到的实际影响一致，为 131%。由此得出结论：槲皮素可以提高大鼠体内前致癌物 PhIP 的生物利用度，表明这种先前被认为有益的食品成分可能具有潜在的不良反应。有关 2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑并[4,5-b]吡啶（共 20 种化合物）相互作用的更完整数据，请访问 HSDB 记录页面。

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PhIP 本身（1-10 µM）在处理 24 小时后对 LNCaP 细胞无细胞毒性。然而，其代谢物 HONH-PhIP 在同一细胞系中诱导了浓度依赖性的细胞毒性。DNA 加合物 (dG-C8-PhIP) 的形成表明其具有遗传毒性。在人类前列腺组织中检测到了PhIP-DNA加合物，表明体内可能存在DNA损伤。

[1]. Metabolic Activation of the Cooked Meat Carcinogen 2-Amino-1-Methyl-6-Phenylimidazo[4,5-b]Pyridine in Human Prostate. Toxicol Sci. 2018 Jun 1;163(2):543-556.

[2]. Papaioannou MD, et ak. The cooked meat-derived mammary carcinogen 2-amino-1-methyl-6-phenylimidazo[4,5-b]pyridine (PhIP) elicits estrogenic-like microRNA responses in breast cancer cells. Toxicol Lett. 2014 Aug 17;229(1):9-16.

根据世界卫生组织国际癌症研究机构（IARC）的数据，2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑并[4,5-b]吡啶（PhIP）具有致癌性。PhIP是一种咪唑并吡啶类化合物，其结构为1H-咪唑并[4,5-b]吡啶，其中1、2和6位分别被甲基、氨基和苯基取代。它是熟肉和熟鱼中含量最丰富的致突变杂环胺之一，具有致癌性和致突变性。它既是一种咪唑并吡啶类化合物，也是一种伯胺类化合物。PhIP（2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑并[4,5-b]吡啶）已被用于胰腺癌基础科学研究的临床试验中。 2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑并[4,5-b]吡啶是一种合成的类白色结晶固体，可溶于二甲基亚砜和甲醇。它少量生产用于研究用途。2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑并[4,5-b]吡啶在肌肉类食物（肉类和鱼类）的烹饪过程中天然产生。这种化学物质的产生量取决于烹饪温度、烹饪时间和烹饪方法（直接烹饪或间接烹饪）。它是典型西方饮食中最丰富的杂环胺之一。2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑并[4,5-b]吡啶也曾在加工食品调味剂、啤酒、葡萄酒和香烟烟雾中被检测到。它很可能是一种人类致癌物。 （NCI05）
1-甲基-6-苯基-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-2-胺是一种与食物相关的诱变剂，据报道是熟肉和熟鱼中最丰富的杂环胺。
另见：牛肉（部分）；熟鸡肉（部分）；熟鳗鱼（部分）……查看更多……

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作用机制
杂环胺（HCAs）是一类在肌酸、氨基酸和蛋白质热解过程中产生的致突变/致癌化合物。人类膳食中主要的杂环胺亚类包括氨基咪唑并[4,5-f]芳烃（AIA），例如2-氨基-3-甲基咪唑并[4,5-f]喹啉（IQ）、2-氨基-3,4-二甲基咪唑并[4,5-f]喹啉（MeIQ）、2-氨基-3,8-二甲基咪唑并[4,5-f]喹喔啉（MeIQx）、2-氨基-3,4,8-三甲基咪唑并[4,5-f]喹喔啉（DiMeIQx）和2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑并[4,5-b]吡啶（PhIP）。除DiMeIQx外，其他所有化合物均已被证实对动物具有致癌性……目前已知，代谢活化导致DNA加合物的形成是这些化合物致突变性和致癌性的关键。所有研究的AIA均能与鸟嘌呤碱基形成加合物，主要加合物形成于C8位。两种AIA，IQ和MeIQx，还能在鸟嘌呤的N2位形成小加合物。越来越多的文献报道了AIA-鸟嘌呤加合物诱导的突变谱。对AIA诱导的动物肿瘤的研究已开始将AIA-DNA加合物诱导的突变事件与肿瘤发生相关关键基因的突变联系起来……
PhIP具有强效的雌激素活性，可诱导雌激素（E2）调控基因的转录、E2依赖性细胞增殖、孕激素受体上调以及丝裂原活化蛋白激酶信号通路的激活……本报告……表明……低至10⁻¹¹ mol/L的PhIP剂量即可对大鼠垂体泌乳细胞模型（GH3细胞）产生直接影响，诱导细胞增殖以及催乳素的合成和分泌。 PhIP诱导的垂体细胞增殖以及催乳素的合成和分泌可被雌激素受体（ER）抑制剂减弱，表明PhIP对泌乳细胞反应的影响是由ERα介导的。鉴于雌激素、孕激素、催乳素与乳腺癌密切相关，PhIP的激素样活性从机制角度进一步支持了该化学物质的组织特异性致癌性。此外，近期流行病学研究报道，食用熟红肉与绝经前和绝经后女性乳腺癌之间存在关联，这与上述观察结果一致。除了其遗传毒性外，近期研究表明，PhIP 可在与食用熟肉后体内浓度相似的剂量下激活雌激素受体介导的信号通路。本研究旨在探讨此类剂量的 PhIP 是否能通过丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK) 细胞外信号调节激酶 (ERK) 通路影响雌激素受体非依赖性信号转导，从而影响人乳腺上皮细胞系 MCF10A 和前列腺癌细胞系 PC-3 的增殖和迁移。在增殖剂量（10⁻¹¹ 至 10⁻⁷ mol/L）的 PhIP 作用下，MAPK/ERK 激酶 1/2 和 ERK 的磷酸化水平迅速且短暂地升高。抑制该通路可显著降低 PhIP 诱导的 MCF10A 细胞增殖和 PC-3 细胞迁移。本研究数据表明，接近人类膳食暴露水平的PhIP可刺激细胞信号通路，导致细胞生长和迁移增加，而这些过程与肿瘤发生和发展密切相关。这些发现有力地支持了PhIP作为肿瘤起始因子和促进因子的作用，提示膳食暴露于该化合物可能促进人类癌症的发生发展。在大多数人类结直肠癌中，β-catenin/T细胞因子（Tcf）信号通路持续激活，并伴有Bcl-2表达的改变。同样，在大鼠中，2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑并[4,5-b]吡啶（PhIP）诱导的结肠肿瘤中β-catenin和Bcl-2的表达均升高。为了研究β-catenin/Tcf是否直接调控大鼠Bcl-2的转录，作者克隆并鉴定了相应的启动子区域，发现其与人BCL2的序列相似性为70.1%。 LiCl 和外源性 β-catenin（包括在 PhIP 诱导的结肠肿瘤中发现的致癌 β-catenin 突变体）均能增强 Bcl-2 启动子的活性。蛋白质/DNA 微阵列分析显示，E2F1 而非 β-catenin/Tcf 与大鼠 Bcl-2 启动子的相互作用最强。外源性 E2F1 可增强大鼠 Bcl-2 启动子的活性，但 E2F1 缺失突变体除外。正如预期的那样，β-catenin 可诱导其下游靶基因 c-Myc 以及 E2F1 和 Bcl-2 的表达，而靶向 c-Myc 或 E2F1 的 siRNA 可阻断这一过程。这些发现表明，PhIP 诱导的结肠肿瘤中 Bcl-2 的过表达可能是通过涉及 β-catenin、c-Myc 和 E2F1 的间接途径实现的。关于2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑并[4,5-b]吡啶类化合物（共7种）作用机制的更完整数据，请访问HSDB记录页面。

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PhIP（2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑并[4,5-b]吡啶）是一种杂环芳香胺，在全熟红肉中形成，被列为可能的人类致癌物（IARC 2A类）。它需要通过CYP介导的N-羟基化代谢活化为HONH-PhIP，随后进行II期结合（主要由NAT和SULT酶催化）形成活性酯，这些酯与DNA结合，最终形成加合物（dG-C8-PhIP）。本研究强调了前列腺特异性生物活化酶（NAT1、SULT1A1）在PhIP诱导的DNA损伤中的作用，这可能与前列腺癌的病因有关。在人前列腺组织中检测到 PhIP-DNA 加合物，支持了膳食中 PhIP 暴露可能对前列腺构成基因毒性风险的假设。

224.106

105650-23-5

1530

White to light yellow solid powder

1.3 g/cm3

468.9ºC at 760 mmHg

300ºC

237.4ºC

5.74E-09mmHg at 25°C

1.699

2.798

56.73

1

3

1

17

264

0

CN1C2=C(N=CC(=C2)C3=CC=CC=C3)NC1=N

UQVKZNNCIHJZLS-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C13H12N4/c1-17-11-7-10(9-5-3-2-4-6-9)8-15-12(11)16-13(17)14/h2-8H,1H3,(H2,14,15,16)

1-methyl-6-phenylimidazo[4,5-b]pyridin-2-amine

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~25 mg/mL (~111.48 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 0.56 mg/mL (2.50 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，将 100 μL 5.6 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入 900 μL 20% SBE-β-CD 生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 0.56 mg/mL (2.50 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 5.6 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。