| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Class I PI3K (p110α, IC₅₀ = 0.173 µM; p110β, more potent than LY294002; p110δ, expressed in WEHI231 cells)
CK2 (IC₅₀ = 0.149 µM for CK2(h), 1.127 µM for CK2α2(h)) GSK3β (inhibition confirmed by kinase selectivity screening) VCP (valosin-containing protein, identified as a novel target via affinity pull-down) ALDH2 (aldehyde dehydrogenase 2, identified as a major bound protein) Brd4 (bromodomain-containing protein 4, identified in pull-down assay) Type III phosphatidylinositol 4-kinase (230 kDa isoform, identified in pull-down) mTOR (detected by immunoblotting in pull-down assay) Various dehydrogenases and ATP/nucleotide-binding proteins (identified via proteomic screening)[1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
对4T1乳腺癌细胞和4306卵巢癌细胞，PI-828 (0.01-100 μM)具有细胞毒作用[2]。单独使用较高量的 PI-828 (6.25-12.5 µM) 会诱导细胞凋亡，而 PI-828（0.78-3.12 µM；48 小时）会降低 caspase 3 的激活 [3]。
PI-828 被设计为LY294002的类似物，并被固定到环氧活化的琼脂糖珠上，用于化学蛋白质组学筛选的亲和基质。在放射性激酶实验中，其对I类PI3K的抑制活性强于LY294002，尤其是对p110β。固定化的PI-828-基质用于从HeLa和WEHI231细胞裂解液中下拉直接蛋白靶点。鉴定出的靶点包括PI3K亚型（p110α、p110β、p110δ）、mTOR、CK2、GSK3β、VCP、ALDH2、Brd4以及多种脱氢酶。使用游离的LY294002或PI-828进行的竞争性洗脱实验证实了结合特异性。PI-828还能抑制CK2活性，对人CK2的IC₅₀为0.149 µM，对CK2α2的IC₅₀为1.127 µM。使用重组野生型和ATP结合突变体蛋白验证了与VCP的结合，表明这种相互作用不依赖于ATP结合赖氨酸残基。对接研究表明PI-828可结合到VCP的ATP结合口袋。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在同系4T1乳腺癌小鼠模型中，使用PI-828-SNPs（以相当于5 mg/kg PI-828的剂量，每48小时给药一次，共3次）治疗，在体内对Akt磷酸化产生了抑制作用，与游离PI-828治疗相比，转化为更优的肿瘤生长抑制。然而，与其低效力一致，PI-828或PI-828-SNPs的抗肿瘤疗效显著低于PI103-SNPs。[2]
在使用4T1荷瘤小鼠进行的胰岛素耐受试验中，单次剂量的游离PI-828或PI-828-SNP（剂量相当于5 mg/kg母体抑制剂）均未影响对胰岛素的葡萄糖反应，这与游离PI103观察到的胰岛素抵抗形成对比。[2] |
| 酶活实验 |
PI-828和LY294002对PI3K的抑制作用通过放射性测定法确定，使用纯化的重组I类IA和IB型酶，ATP浓度为1 µM。激酶反应在室温（24°C）下进行1小时，并通过加入PBS终止。IC₅₀值通过S型剂量反应曲线拟合（可变斜率）确定。
CK2和GSK3β的抑制作用通过激酶选择性筛选确定。在10 µM ATP条件下，测试了抑制剂（10 µM PI-828和LY294002）对一组激酶的抑制活性。[1] |
| 细胞实验 |
细胞活力测定 [2]
细胞类型： 4T1 乳腺癌细胞和 4306 卵巢癌细胞 测试浓度： 0.01、0.1、1、10 和 100 μM 孵育时间： 实验结果： 证明具有细胞毒性作用。 细胞凋亡分析[3] 细胞类型：人胚胎癌NCCIT细胞 测试浓度： 0.78、1.56、3.12、6.25、 12.5 μM 孵育持续时间： 48 小时 实验结果： 0.78 至 3.12 μM 浓度范围可降低 caspase 3 的激活；较高浓度会导致细胞凋亡。 对于大规模下拉实验，HeLa细胞（2.5×10⁶个）在裂解缓冲液A（20 mM Hepes pH 7.5, 150 mM NaCl, 0.25% Triton X-100, 1 mM EDTA, 1 mM EGTA, 1 mM DTT，含蛋白酶和磷酸酶抑制剂）中裂解。WEHI231细胞悬浮培养于RPMI 1640培养基中，补充10%胎牛血清、2 mM L-谷氨酰胺、50 µM 2-巯基乙醇和抗生素。总细胞提取物（15 mg）调整至1 M NaCl，并与300 µl 50%的PI-828-基质珠浆孵育4小时。对于竞争性实验，裂解液预先与1 mM LY294002或PI-828在含有10 mM ATP和20 mM MgCl₂的裂解缓冲液A中孵育。亲和复合物在高盐裂解缓冲液和标准裂解缓冲液中充分洗涤。洗脱采用两种方式：使用2× Laemmli上样缓冲液煮沸洗脱，或使用含有ATP和MgCl₂的裂解缓冲液中的游离抑制剂（LY294002、PI-828、PI103或LY303511）进行特异性洗脱。[1] 结合蛋白通过一维凝胶电泳分离，胶体考马斯亮蓝染色，并通过胶内酶切后进行LC-ESI-MS/MS分析鉴定。鉴定标准为：至少有两个独立的肽段质量匹配到蛋白质（质量误差±100 mDa，允许一个漏切位点），MOWSE得分超过阈值（P=0.05），且预测的蛋白质分子量与凝胶位置相符。[1] |
| 动物实验 |
在4T1乳腺癌模型中，将4周龄BALB/c小鼠皮下植入4T1细胞（1×10⁵个细胞）。植入后第9天开始治疗。将动物随机分为治疗组。接受PI-828-SNPs治疗的组，每48小时静脉注射一次纳米颗粒，剂量相当于5 mg/kg的PI-828抑制剂。[2]
在胰岛素耐量试验中，将携带4T1肿瘤的随机喂养小鼠，通过尾静脉注射单剂量的空纳米颗粒（对照组）、游离的PI-828或PI-828-SNPs（剂量相当于5 mg/kg的母体抑制剂）。在给药后的特定时间点，向小鼠注射新鲜配制的胰岛素溶液（0.75 U/kg，溶于生理盐水）。使用血糖仪测量胰岛素注射前和注射后 45 分钟的血糖水平。[2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
与PI103不同，使用游离的PI-828或PI-828-SNPs治疗并未诱导胰岛素抵抗。治疗动物的体重未见显著变化。对接受PI103-SNPs治疗的动物（主要研究对象）的肝脏、肾脏和脾脏切片进行组织学分析（TUNEL检测），结果显示未见细胞凋亡增加的迹象；细胞凋亡标志物（cleaved caspase-3、PARP）的Western blotting检测结果显示各治疗组之间无差异，表明该纳米颗粒制剂策略对这些器官无急性毒性。[2]
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
8-(4-氨基苯基)-2-(4-吗啉基)-1-苯并吡喃-4-酮属于色酮类化合物。
PI-828是广泛使用的PI3K抑制剂LY294002的类似物，其设计特点是在外环苯基取代基的4位引入胺连接基，以便将其固定在固相载体上进行化学蛋白质组学研究。本研究主要将其用作亲和力工具，以鉴定LY294002的新型细胞靶点，揭示其与VCP、ALDH2和Brd4等蛋白的脱靶相互作用，这些相互作用可能导致已报道的LY294002的PI3K非依赖性效应。该研究证明了固定化的PI-828作为蛋白质组学平台在绘制化合物相互作用组图谱和验证抑制剂特异性方面的实用性。[1] |
| 分子式 |
C19H18N2O3
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|---|---|
| 分子量 |
322.35782
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| 精确质量 |
322.132
|
| CAS号 |
942289-87-4
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| PubChem CID |
25181195
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| 外观&性状 |
White to yellow solid powder
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| 密度 |
1.316g/cm3
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| 沸点 |
534.2ºC at 760 mmHg
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| 闪点 |
276.9ºC
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| 折射率 |
1.658
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| LogP |
3.525
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| tPSA |
68.7
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
24
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| 分子复杂度/Complexity |
493
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
WUKMIBOGGXMBAC-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H18N2O3/c20-14-6-4-13(5-7-14)15-2-1-3-16-17(22)12-18(24-19(15)16)21-8-10-23-11-9-21/h1-7,12H,8-11,20H2
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| 化学名 |
8-(4-aminophenyl)-2-(4-morpholinyl)-4H-1-benzopyran-4-one
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| 别名 |
PI-828; PI 828; PI828
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 12.5 mg/mL (~38.78 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (3.88 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 12.5 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (3.88 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 12.5 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.1021 mL | 15.5106 mL | 31.0212 mL | |
| 5 mM | 0.6204 mL | 3.1021 mL | 6.2042 mL | |
| 10 mM | 0.3102 mL | 1.5511 mL | 3.1021 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Bamirastine
戊双氟酚
PROTAC-PEG3-Amino
MT-3014
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COA
粤公网安备 44011102003439号
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