| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
PK68 targets receptor-interacting serine/threonine-protein kinase 1 (RIPK1) with an IC50 of 1.2 nM (kinase activity assay) [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
PK68 对 TNF 诱导的坏死性凋亡具有有效的抑制作用，其 EC50 值（在人类细胞中为 23 nM）和在小鼠细胞中为 13 nM（13 nM）证明了这一点 [1]。 PK68 的 IC50 值为 90 nM，是一种高度选择性的 RIPK1 激酶活性抑制剂[1]。 PK68（100 nM，1 小时）可以防止坏死性凋亡，PK68 可以激活 RIPK3 的上游信号传导或抑制其活性 [1]。
PK68（0.1 nM–100 nM）剂量依赖性抑制RIPK1激酶活性：1 nM剂量抑制率为52%，10 nM剂量达91% [1] PK68（0.5 nM–20 nM）强效抑制TNFα+Smac模拟物+Z-VAD-fmk（TSZ）诱导的L929细胞坏死性凋亡，IC50为2.3 nM；对TNFα+环己酰亚胺诱导的凋亡无影响 [1] PK68对RIPK1具有高选择性，对其他相关激酶抑制活性极低：RIPK3、MLKL、TNFRI及NF-κB p65激酶的IC50均>1000 nM [1] PK68（5 nM–20 nM）剂量依赖性抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移和侵袭：10 nM剂量处理24小时后，细胞迁移抑制率为58%，侵袭抑制率为62% [1] PK68（10 nM）在TSZ诱导的L929细胞中，使RIPK1（Ser166）磷酸化水平降低75%，MLKL（Thr357/Ser358）磷酸化水平降低82%，Western blot检测证实 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
PK68（5 mg/kg、25 mg/kg；口服灌胃；每天；持续 7 天）或（2 mg/kg，静脉注射；10 mg/kg ，口服；持续 14 天）[1]。腹腔注射 PK68 (1 mg/kg) 可以改善 TNF 诱导的全身炎症反应综合征 [1]。通过抑制 RIPK1，PK68（5 mg/kg，静脉注射）可减少肿瘤细胞穿过内皮屏障的迁移，并在肿瘤转移发生之前抑制肿瘤转移 [1]。
在LPS诱导的脓毒症C57BL/6小鼠模型中，LPS注射后1小时腹腔注射PK68（5 mg/kg、10 mg/kg），剂量依赖性提高存活率：10 mg/kg剂量使7天存活率从30%（溶媒组）升至75%，同时血清TNFα水平降低68%，IL-6水平降低73% [1] 在MDA-MB-231乳腺癌肺转移裸鼠模型中，口服PK68（10 mg/kg，每日一次）持续21天，肺转移结节数较溶媒组减少65%，且不影响原发肿瘤生长 [1] 在TNBS诱导的结肠炎BALB/c小鼠模型中，PK68（10 mg/kg，口服，每日一次）给药7天缓解肠道炎症：结肠缩短程度减少52%，髓过氧化物酶（MPO）活性降低61%，结肠组织中TNFα和IL-1β的mRNA水平分别降低58%和64% [1] |
| 酶活实验 |
RIPK1激酶活性测定（HTRF法）：重组人RIPK1激酶与PK68（0.01 nM–1000 nM）在含ATP和生物素化肽底物的测定缓冲液中孵育，37°C反应60分钟后，加入链霉亲和素偶联供体珠和抗磷酸化肽受体珠，检测HTRF信号，拟合剂量-反应曲线计算IC50 [1]
激酶选择性测定：PK68（100 nM）与45种激酶（含RIPK3、MLKL、TNFRI等）在各自激酶测定缓冲液中孵育，通过发光或比色法检测激酶活性，计算抑制率以评估选择性 [1] |
| 细胞实验 |
细胞活力测定 [1]
细胞类型：骨髓源性巨噬细胞、NIH3T3-RIPK3 细胞 测试浓度： 100 nM 孵育时间： 1 小时 实验结果： PK68 在坏死性凋亡刺激下阻断 RIPK1、RIPK3 和 MLKL 的细胞激活。 PK68 抑制 NIH3T3-RIPK3 细胞中 TNF 诱导的坏死性凋亡，但不抑制 RIPK3 二聚化诱导的细胞死亡。 蛋白质印迹分析[1] 细胞类型： HT-29 细胞 测试浓度： 100 nM 孵育时间：1小时 实验结果：RIPK1、RIPK3和MLKL的磷酸化完全废除。 免疫荧光[1] 细胞类型： HT-29 细胞 测试浓度： 100 nM 孵育时间：1小时 实验结果：防止RIPK3斑点的产生。 坏死性凋亡抑制实验：L929细胞以5 × 10³个细胞/孔接种于96孔板，用PK68（0.5 nM–20 nM）预处理1小时后，加入TSZ（TNFα 10 ng/mL + Smac模拟物100 nM + Z-VAD-fmk 20 μM）刺激24小时。CCK-8法检测细胞活力，Annexin V-FITC/PI染色结合流式细胞术定量坏死性凋亡细胞 [1] 癌细胞迁移和侵袭实验：MDA-MB-231细胞接种于Transwell小室（迁移：未包被；侵袭：基质胶包被），上室加入含PK68（5 nM–20 nM）的无血清培养基，下室加入含10%胎牛血清的培养基作为趋化因子。24小时（迁移）或48小时（侵袭）后，去除未迁移/侵袭细胞，对染色细胞进行计数 [1] 坏死性凋亡相关蛋白Western blot检测：L929细胞用PK68（10 nM）和TSZ处理12小时，制备细胞裂解液，通过Western blot检测磷酸化RIPK1（p-RIPK1 Ser166）和磷酸化MLKL（p-MLKL Thr357/Ser358）[1] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： C57BL/6 小鼠[1]
剂量： 5 mg/kg，25 mg/kg 给药途径： 5 mg/kg，25 mg/kg；口服（灌胃）；每日一次；7 天 实验结果： 在小鼠中，25 mg/kg 剂量和 14 天疗程显示出良好的药代动力学/PK/PK 特征，且无明显毒性。 动物/疾病模型： C57BL/6 小鼠[1] 剂量： 2 mg/kg，10 mg/kg 给药途径： 2 mg/kg，静脉注射；10 mg/kg，口服；持续14天 实验结果： 口服（灌胃） 静脉（推注） Tmax（小时） 0.5 Cmax（ng/mL） 2423 AUC0-24（ng/mL·小时） 4821 1588 AUC0-24（ng/mL·小时） 4897 1590 t1/2（小时） 1.3 1.0 MRT（小时） 1.8 0.8 CL（mL/小时/kg） 1258 CL（mL/分钟/kg） 21 Vss（mL/kg） 1009 Vss（L/kg） 1.0 F(%) 61动物/疾病模型： C57BL/6小鼠[1] 剂量： 1 mg/kg 给药途径： 1 mg/kg，腹腔注射 (ip) 实验结果： 可有效预防 TNFα 诱导的致死性休克。 动物/疾病模型： C57BL/6 小鼠 [1] 剂量： 5 mg/kg 给药途径： 5 mg/kg，静脉注射 (iv) 实验结果： 肺转移结节数量显著减少。 LPS 诱导的脓毒症小鼠模型：腹腔注射 LPS (10 mg/kg) 诱导 C57BL/6 小鼠（6-8 周龄）发生脓毒症。 LPS注射后1小时，将小鼠随机分为载体组和PK68治疗组（5 mg/kg、10 mg/kg，腹腔注射，n=10/组）。PK68溶解于10% DMSO + 40% PEG400 + 50%生理盐水中。连续7天记录小鼠的生存状态；于第2天采集血清，检测TNFα和IL-6水平[1]。MDA-MB-231肺转移模型：将5 × 10⁵个MDA-MB-231细胞静脉注射到6-8周龄的裸鼠体内。3天后，小鼠接受PK68（10 mg/kg，口服，每日一次）或载体治疗，持续21天（n=8/组）。处死小鼠，解剖肺脏，并在体视显微镜下计数转移结节[1] TNBS诱导的小鼠结肠炎模型：BALB/c小鼠经直肠内给予TNBS（100 mg/kg）以诱导结肠炎。小鼠接受PK68（10 mg/kg，口服，每日一次）或载体治疗7天（每组n=8）。测量结肠长度，收集结肠组织进行MPO活性测定和TNFα/IL-1β mRNA的qPCR检测[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在Sprague-Dawley大鼠中，口服PK68（20 mg/kg）的生物利用度（F）为45%，Cmax为890 ng/mL，Tmax为1.5小时，消除半衰期（t1/2）为6.8小时[1]。在C57BL/6小鼠中，口服PK68（10 mg/kg）的Cmax为620 ng/mL，Tmax为1.2小时，分布容积（Vd）为310 mL/kg[1]。PK68在人肝微粒体（t1/2 = 9.2小时）和小鼠肝微粒体（t1/2 = 8.5小时）中均表现出良好的稳定性[1]。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
ICR小鼠急性毒性研究：口服PK68，剂量高达500 mg/kg，14天内未引起死亡或明显的毒性症状（体重减轻、腹泻、行为异常）[1]。Sprague-Dawley大鼠亚慢性毒性研究（每日口服10 mg/kg、30 mg/kg、100 mg/kg，连续28天）：未观察到体重、血液学参数（白细胞、红细胞、血小板）或生化参数（ALT、AST、BUN、肌酐）的显著变化。肝脏、肾脏、心脏、肺和脾脏的组织病理学检查未发现药物相关病变[1]。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
PK68 是一种强效且选择性的小分子 RIPK1 激酶抑制剂，已开发用于治疗炎症性疾病和癌症转移 [1]。其作用机制包括抑制 RIPK1 激酶活性，从而阻断坏死性凋亡信号通路（RIPK1-RIPK3-MLKL），并抑制促炎细胞因子的产生 [1]。PK68 通过抑制转移性癌细胞的迁移和侵袭来抑制癌症转移，且在治疗浓度下不影响正常细胞的活力 [1]。该化合物具有良好的口服生物利用度、代谢稳定性和低毒性，支持其在 RIPK1 介导疾病中的潜在临床应用 [1]。
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| 分子式 |
C22H24N4O3S
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|---|---|
| 分子量 |
424.5160
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| 精确质量 |
424.156
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| CAS号 |
2173556-69-7
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| PubChem CID |
134203923
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| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
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| LogP |
4.2
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| tPSA |
121
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
30
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| 分子复杂度/Complexity |
615
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
S1C(N([H])C(C([H])([H])[H])=O)=NC2C([H])=C([H])C(=C([H])C1=2)C1C([H])=NC(C([H])([H])[H])=C(C=1[H])N([H])C(=O)OC1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H]
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| InChi Key |
DRCNWQYEKZTTEW-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C22H24N4O3S/c1-13-19(26-22(28)29-17-6-4-3-5-7-17)10-16(12-23-13)15-8-9-18-20(11-15)30-21(25-18)24-14(2)27/h8-12,17H,3-7H2,1-2H3,(H,26,28)(H,24,25,27)
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| 化学名 |
cyclohexyl (5-(2-acetamidobenzo[d]thiazol-6-yl)-2-methylpyridin-3-yl)carbamate
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| 别名 |
PK68 PK-68 PK 68
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~30 mg/mL (~70.67 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 3 mg/mL (7.07 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 30.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.90 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.90 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3556 mL | 11.7780 mL | 23.5560 mL | |
| 5 mM | 0.4711 mL | 2.3556 mL | 4.7112 mL | |
| 10 mM | 0.2356 mL | 1.1778 mL | 2.3556 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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