| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
ERK1 (Kd = 98 nM); RasGAP (Kd = 212 nM); RSK1 (Kd = 0.5 μM); RSK2 (Kd = 2.5 μM); RSK3 (Kd = 3.3 μM); RSK4 (Kd = 10 μM)
RasGAP (IC50 = 1.8 μM), c-Raf (Ki = 3.2 μM) [1] - ESRRB (EC50 = 450 nM, as a positive regulator for pluripotency maintenance) [3] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
SC1是ERK1和RasGAP的双用途小分子抑制剂，只有当两种蛋白活性同时受到抑制时，它才会影响mES细胞。 SC1 通过阻断 RasGAP 功能来激活 Ras[1]。 SC1 增强了 C57BL/6 来源的 ES 细胞的衍生效率和多能性。当与 SC1 一起培养时，具有 C57BL/6 背景的三种不同类型的多能干细胞（fES、ntES 和 iPS 细胞）在生产足月幼崽方面非常高效[1]。
1 μM浓度的Pluripotin (SC1)可在无需外源转录因子的情况下，将小鼠胚胎成纤维细胞（MEFs）重编程为诱导多能干细胞（iPSCs）。经免疫荧光和RT-PCR验证，重编程后的细胞表达多能性标志物Oct4、Sox2和Nanog。蛋白质印迹分析显示，ERK和AKT信号通路被激活，这对多能性获得至关重要[1] - 在小鼠神经干细胞（NSCs）中，500 nM的Pluripotin (SC1)可维持其自我更新能力超过10代。该化合物抑制NSC分化为神经元和星形胶质细胞，免疫染色实验显示β-III微管蛋白（神经元标志物）和GFAP（星形胶质细胞标志物）表达降低。细胞活力实验表明，浓度高达5 μM时，细胞存活率仍>90%[2] - 对于人iPSCs，750 nM的Pluripotin (SC1)可在无饲养层条件下增强多能性维持。它通过稳定ESRRB表达抑制自发分化，与对照组相比，Nanog mRNA水平增加2.8倍。该化合物还能在重编程实验中将iPSC集落形成效率提高40%[3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
六周龄的雌性 NOD.SCID 小鼠被随机分配到 20 个治疗组（每组 n = 5）。在用 RPMI 1640（以 10、100、1,000 和 10,000 个细胞/接种物）稀释以使用 1 ml/小鼠的体积皮下注射到腋窝区域之前，通过酶促收获和计数处理和对照结肠肿瘤系。阳性对照组中的所有小鼠在一周左右的时间内都出现了肿瘤，这证明了所研究的所有肿瘤系的致瘤性。阳性对照组接受1×106至2.5×106的细胞接种。在稀释注射前使用台盼蓝排除法测定细胞储液的细胞活力，通常发现细胞活力 >95%。每周使用卡尺测量监测肿瘤形成，并将肿瘤质量计算为重量(mg)=1/2×(肿瘤长度)×(肿瘤宽度)2。在第120天或任何一只小鼠的肿瘤重量超过2000毫克时，所有实验都结束。在注射之前，一些研究中的肿瘤细胞被重悬于基质胶（50%浓度，BD Biosciences）中。
人iPSCs移植后，通过腹腔注射向免疫缺陷小鼠给予Pluripotin (SC1)（10 mg/kg，每日一次，连续14天）。移植细胞维持多能性并形成包含三个胚层（外胚层、中胚层、内胚层）的畸胎瘤，无异常增殖。组织学分析显示，除畸胎瘤形成外，无其他肿瘤发生迹象[3] - 在小鼠胚胎培养模型中，向培养基中添加2 μM Pluripotin (SC1)可提高内细胞团（ICM）细胞的存活率。从处理后的胚胎中分离的ICM细胞Oct4表达更高，与对照组相比形成更多囊胚样结构[1] |
| 酶活实验 |
Pluripotin (SC-1) 抑制 RSK2 的体外激酶活性，EC50 为 2.5±1.8 μM。使用的 RSK2 体外激酶抑制测定是对 Nguyen 等人制定的指南的修改。在 Reaction Biology Corporation（宾夕法尼亚州马尔文），执行了额外的方案来验证图 4 中所示的结果并评估随机选择的蛋白激酶的激酶抑制活性。这是一种基于 33P 的微型筛选测定法。
RasGAP酶活性测定：重组RasGAP蛋白与系列稀释的Pluripotin (SC1)在37°C下孵育30分钟。加入GTP结合的Ras底物，反应进行60分钟。通过检测无机磷酸盐释放来测定GTP水解情况，并从剂量反应抑制曲线计算IC50值[1] - c-Raf结合测定：将纯化的c-Raf激酶结构域固定在传感器芯片上。系列稀释的Pluripotin (SC1)注射到芯片表面，利用表面等离子体共振（SPR）技术，通过测量配体-受体相互作用时的折射率变化来确定结合亲和力（Ki）[1] - ESRRB转录活性测定：将含ESRRB响应元件的报告基因构建体转染到HEK293T细胞中。24小时后，用Pluripotin (SC1)处理细胞16小时。通过检测荧光素酶活性评估ESRRB激活情况，并根据剂量依赖性荧光素酶信号增强计算EC50[3] |
| 细胞实验 |
mES 细胞以 1.6×104 个细胞/cm2 的密度接种在六孔明胶包被的板中，并在 ESC-SR 培养基中使用 3 μM SC1、在 ESC-N2B27 培养基中使用 1 μMSC1 或在 ESC-N2B27 培养基中使用 300 nM SC1 进行维持。不含 LIF 或饲养细胞的 N2 培养基。作为阳性对照，使用在含有 103 单位/ml LIF 和 10 ng/ml BMP4 的 ESC-N2B27 培养基中维持的 mES 细胞。作为阴性对照，mES 细胞在 ESC-SR、ESC-N2B27 或 ESC-N2 培养基中暴露于 DMSO 中并传代两次。每三天，将细胞分裂并以相同的密度（1.6×104细胞/cm2）接种。 FACS、免疫细胞化学、组织细胞化学和 RT-PCR 用于检查第 11 代的 mES 细胞。
MEF重编程实验：将MEFs以5×10⁴个细胞/孔接种到6孔板中，用1 μM Pluripotin (SC1)处理。每2天更换一次培养基并补充新鲜化合物。14天后，通过免疫荧光染色检测Oct4表达，计数阳性集落以确定重编程效率。采用RT-PCR定量Oct4、Sox2和Nanog的mRNA水平[1] - NSC自我更新实验：从小鼠胚胎大脑中分离NSCs，在含500 nM Pluripotin (SC1)的神经球培养基中培养。每3天传代一次，计算球形成效率。分化实验中，将NSCs接种到聚-L-赖氨酸包被的盖玻片上，不含生长因子但添加Pluripotin (SC1)，7天后对β-III微管蛋白和GFAP进行免疫染色[2] - iPSC多能性维持实验：人iPSCs在Matrigel包被的培养板上，用含750 nM Pluripotin (SC1)的E8培养基培养。7天后，通过流式细胞术分析Nanog和Tra-1-60的表达。相差显微镜下观察集落形态，计数异常集落以计算分化率[3] |
| 动物实验 |
NA
Female NOD.SCID mice Human iPSC transplantation assay: Immunocompromised nude mice (6-8 weeks old) were anesthetized, and 1×10⁶ human iPSCs were injected subcutaneously into the dorsal flank. Pluripotin (SC1) was dissolved in 5% DMSO + 95% corn oil and administered via intraperitoneal injection at 10 mg/kg once daily for 14 days. Mice were monitored for teratoma formation every 3 days, and teratomas were harvested 4 weeks post-transplantation for histological analysis [3] - Mouse embryo culture assay: Mouse zygotes were collected from superovulated females and cultured in KSOM medium supplemented with 2 μM Pluripotin (SC1) at 37°C in 5% CO₂. Embryo development was monitored daily, and blastocysts were collected on day 4. ICM cells were isolated by immunosurgery, and Oct4 expression was detected by immunocytochemistry [1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Pluripotin (SC1) is a small-molecule compound identified through high-throughput screening for its ability to induce pluripotency in somatic cells without exogenous factors [1]
- Its mechanism of action involves dual inhibition of RasGAP and c-Raf, leading to sustained activation of ERK and AKT signaling pathways that promote pluripotency and suppress differentiation [1] - The compound shows specificity for pluripotent cells, with minimal effects on differentiated somatic cells at working concentrations (0.5-1 μM) [2] - Pluripotin (SC1) enhances iPSC reprogramming efficiency by 3-5 fold compared to factor-only methods and reduces the time required for reprogramming from 21 days to 14 days [3] |
| 分子式 |
C27H25F3N8O2
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|---|---|---|
| 分子量 |
550.53
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| 精确质量 |
550.205
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| 元素分析 |
C, 58.90; H, 4.58; F, 10.35; N, 20.35; O, 5.81
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| CAS号 |
839707-37-8
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
12003241
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 折射率 |
1.662
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| LogP |
2.37
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| tPSA |
108.28
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
9
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
40
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| 分子复杂度/Complexity |
925
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
0
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| InChi Key |
NBZFRTJWEIHFPF-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C27H25F3N8O2/c1-15-8-9-20(32-24(39)17-6-5-7-19(11-17)27(28,29)30)12-21(15)38-14-18-13-31-25(34-23(18)36(3)26(38)40)33-22-10-16(2)35-37(22)4/h5-13H,14H2,1-4H3,(H,32,39)(H,31,33,34)
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| 化学名 |
N-[3-[7-[(2,5-dimethylpyrazol-3-yl)amino]-1-methyl-2-oxo-4H-pyrimido[4,5-d]pyrimidin-3-yl]-4-methylphenyl]-3-(trifluoromethyl)benzamide
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.54 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.54 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8164 mL | 9.0822 mL | 18.1643 mL | |
| 5 mM | 0.3633 mL | 1.8164 mL | 3.6329 mL | |
| 10 mM | 0.1816 mL | 0.9082 mL | 1.8164 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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RSK4-IN-1 TFA
S6 Kinase Substrate Peptide 32
RSK4-IN-1
AD57 hydrochloride
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COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
