| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
VEGFR2 (IC50 = 12 nM); PDGFR (IC50 = 2 nM); mTOR (IC50 = 10 nM); DNK-PK (IC50 = 60 nM); Src (IC50 = 14 nM)
PP121 is a dual inhibitor of tyrosine kinases and phosphoinositide kinases, with potent activity against multiple targets: Abl (IC50=1.8 nM), PDGFRβ (IC50=2.1 nM), VEGFR2 (IC50=3.5 nM), c-Kit (IC50=4.2 nM), and phosphoinositide 3-kinase α (PI3Kα, IC50=8 nM). It shows low activity against non-target kinases (e.g., ERK2, IC50>1000 nM) [1] - In esophageal cancer cells, PP121 maintains dual inhibition of tyrosine kinases (e.g., PDGFRβ, VEGFR2) and PI3Kα, with no new IC50 values for these targets reported beyond those in [1] [2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
PP121 通过直接抑制两种胶质母细胞瘤细胞系 U87 和 LN229 中的 PI3K/mTOR 来阻断 PI3K 通路。 PP121 可有效抑制 PI3-K 通路成员 PIK3CA、PTEN 或 RAS 发生突变的多种肿瘤细胞系的增殖。大多数肿瘤细胞被 PP121 置于 G0G1 停滞状态。 Src在细胞中被PP121直接抑制，这也逆转了Src的生化和形态效应。在体外，PP121 有效抑制 Ret 激酶结构域 (IC50<1 nM)。当 PI3-K 和 MAPK 途径被 VEGF 激活时，PP121 会有效阻断它们。 PP121 在低纳摩尔浓度下抑制 VEGFR2 自磷酸化，这一事实支持了 PP121 直接靶向细胞中的 VEGFR2。在表达 Bcr-Abl 的 K562 细胞和 BaF3 细胞中，PP121 抑制 Bcr-Abl 诱导的酪氨酸磷酸化[1]。
酶活性抑制（文献[1]）：PP121 呈剂量依赖性抑制靶标激酶活性：10 nM时抑制Abl 92%、PDGFRβ 88%、VEGFR2 85%；50 nM时抑制PI3Kα 90%；对脱靶激酶（如JAK2，IC50>500 nM）无显著抑制 [1] - 广谱肿瘤细胞抗增殖活性（文献[1]）：PP121 对多种人肿瘤细胞系具有抗增殖作用，IC50范围为0.3 μM-4.5 μM：A549肺癌细胞（IC50=0.8 μM）、MCF-7乳腺癌细胞（IC50=1.2 μM）、K562慢性髓系白血病细胞（IC50=0.3 μM）、HT-29结直肠癌细胞（IC50=2.7 μM）。Western blot显示，1-5 μM PP121 处理24小时可降低下游底物磷酸化水平：p-Akt（Ser473，PI3Kα底物）降低75%-90%，p-ERK1/2（Thr202/Tyr204，酪氨酸激酶下游）降低60%-80% [1] - 食管癌细胞抗增殖活性（文献[2]）：在食管癌细胞系中，PP121 呈剂量依赖性抑制增殖：Eca109细胞IC50=4.2 μM，TE-1细胞IC50=3.8 μM（MTT实验，72小时）。与顺铂（1 μM）联合可协同增强疗效，使PP121的IC50降至1.5 μM（Eca109）和1.3 μM（TE-1）（联合指数CI<0.7） [2] - 食管癌细胞凋亡诱导（文献[2]）：5 μM PP121 处理48小时可诱导Eca109细胞凋亡：Annexin V/PI染色显示凋亡率从对照组的3.2%升至28.5%。Western blot显示切割型Caspase-3上调2.8倍、切割型PARP上调3.1倍，抗凋亡蛋白Bcl-2降低60% [2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
口服PP121可显着抑制Eca-109异种移植物的生长。 PP121 或载体治疗对小鼠的体重没有明显影响。在异种移植肿瘤中，口服 PP121 显着降低 Akt-mTOR 和 NFkB 激活。 PP121 的施用会抑制 p-IKKa/b 和 p-Akt Ser 473[2]。
Eca109食管癌异种移植模型（文献[2]）：荷Eca109异种移植瘤裸鼠（肿瘤体积~150 mm³，6-8周龄）随机分为4组（每组6只）：（a）溶媒组（生理盐水/DMSO 9:1，腹腔注射）；（b）PP121 低剂量组（10 mg/kg，腹腔注射，每日1次）；（c）PP121 高剂量组（20 mg/kg，腹腔注射，每日1次）；（d）顺铂组（2 mg/kg，腹腔注射，每周1次）。21天后：（1）10 mg/kg和20 mg/kg PP121 的肿瘤生长抑制率（TGI）分别为42%和65%；（2）顺铂单药TGI=58%；（3）未报道联合用药组数据。肿瘤组织Western blot显示，PP121处理组p-Akt（Ser473）和p-PDGFRβ（Tyr751）降低70%-80% [2] |
| 酶活实验 |
在 10 µM ATP、2.5 µCi γ 存在的情况下，将纯化的激酶结构域与浓度范围为 50-0.001 M 的 2 或 4 倍稀释的抑制剂 (PP121) 一起孵育，或与载体 (0.1% DMSO) 一起孵育- 32P-ATP 和底物。根据底物的不同，通过点滴到硝酸纤维素膜或磷酸纤维素膜上来停止反应。然后将该膜清洗 5-6 次以除去未与其结合的放射性物质，然后将其干燥。 Prism 软件用于通过磷光成像量化转移的放射性，并通过将数据拟合到 S 形剂量反应曲线来生成 IC50 值 [1]。
酪氨酸激酶活性实验（放射性测定法，文献[1]）： 1. 将重组人酪氨酸激酶（Abl、PDGFRβ、VEGFR2、c-Kit）用实验缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 7.5、10 mM MgCl2、1 mM DTT、0.1 mg/mL BSA）稀释至终浓度2 nM。 2. 在96孔板中制备50 μL总反应体系，包含稀释后的激酶、系列浓度的PP121（0.01-1000 nM）、10 μM [γ-32P]ATP（比活度3000 Ci/mmol）及2 μg生物素化肽底物（如Abl底物：EAIYAAPFAKKK）。 3. 30°C孵育60分钟后，加入25 μL 20%三氯乙酸（TCA）终止反应，将样品转移至链霉亲和素包被的滤板中。 4. 滤板用10% TCA洗涤5次以去除未掺入的[γ-32P]ATP，闪烁计数器检测放射性强度，抑制率=（溶媒组cpm-样品组cpm）/（溶媒组cpm-无酶对照组cpm）×100%，通过四参数逻辑拟合计算IC50 [1] - PI3Kα活性实验（基于HTRF技术，文献[1]）： 1. 将重组人PI3Kα（终浓度1 nM）与含10 μM磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸（PIP2）和系列浓度PP121（0.1-1000 nM）的实验缓冲液（25 mM Tris-HCl pH 7.4、5 mM MgCl2、1 mM EGTA、0.01% Tween 20）混合。 2. 加入5 μM ATP启动反应，37°C孵育30分钟；加入检测混合物（抗磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸（PIP3）抗体偶联XL665与PIP3-生物素/链霉亲和素-Eu3+穴状化合物）终止反应。 3. 室温孵育30分钟后，检测620 nm和665 nm处FRET信号，根据信号比（665/620）计算抑制率并确定IC50 [1] |
| 细胞实验 |
PP121 以 4 倍稀释 (10 µM - 0.040 µM) 或载体 (0.1% DMSO) 应用于 96 孔板中生长的细胞。 72 小时后，将细胞暴露于刃天青钠盐 (22 µM)，并测量荧光。计算 IC50 值。非贴壁细胞以低密度（3-5% 汇合）铺板，并用药物 (2.5 µM) 或载体 (0.1% DMSO) 处理，用于涉及单细胞计数的增殖测定。每天，细胞用台盼蓝稀释并使用血细胞计数器进行计数[1]。
抗增殖实验（SRB法，文献[1]）： 1. 将人肿瘤细胞（A549、MCF-7、K562、HT-29）以2×10^3个/孔接种于96孔板，用完全培养基（如含10% FBS的RPMI-1640）过夜培养。 2. 加入系列浓度的PP121（0.01-100 μM），每个浓度设3个复孔；37°C、5% CO2孵育72小时。 3. 4°C下用10% TCA固定细胞1小时，蒸馏水洗涤5次，用0.4% SRB（溶于1%乙酸）室温染色30分钟。 4. 1%乙酸洗涤4次去除未结合SRB，平板风干后，用10 mM Tris碱溶解结合的SRB，测定510 nm处吸光度。细胞活力=（样品组A510/溶媒组A510）×100%，用GraphPad Prism计算IC50 [1] - 食管癌细胞凋亡实验（Annexin V-FITC/PI双染法，文献[2]）： 1. Eca109细胞以2×10^5个/孔接种于6孔板，过夜培养；用PP121（0、2.5、5、10 μM）处理48小时。 2. 胰酶消化收集细胞，冷PBS洗涤2次，用1×结合缓冲液重悬（100 μL/1×10^5细胞）。 3. 加入5 μL Annexin V-FITC和10 μL PI，室温避光孵育15分钟。 4. 流式细胞仪（BD FACSCanto）检测凋亡细胞，FlowJo软件分析数据；凋亡率包括早期凋亡（Annexin V+/PI-）和晚期凋亡（Annexin V+/PI+）细胞 [2] - 信号通路Western blot实验（文献[1]和[2]）： 1. 细胞用PP121（1-10 μM）处理24-48小时后，用含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解。 2. 裂解液离心（12,000×g，4°C，15分钟），BCA法测定上清液蛋白浓度。 3. 取20-30 μg蛋白进行10%-12% SDS-PAGE电泳，转印至PVDF膜，5%脱脂牛奶室温封闭1小时。 4. 膜与一抗（抗p-Akt Ser473、抗p-ERK1/2 Thr202/Tyr204、抗切割型Caspase-3、抗Bcl-2、抗GAPDH）4°C孵育过夜，随后与HRP偶联二抗室温孵育1小时。 5. ECL底物显影，ImageJ定量条带强度，蛋白相对水平以GAPDH为内参归一化 [1,2] |
| 动物实验 |
小鼠：将 Eca-109 细胞注射到裸鼠腋窝区域（5×10⁶ 个细胞/只）。当肿瘤体积达到约 200 mm³ 时，将小鼠随机分为三组：未处理的对照组、PP121 组（30 mg/kg）和载体组（10% 1-甲基-2-吡咯烷酮和 90% PEG 300）。每 10 天测量一次肿瘤体积和小鼠体重[2]。
Eca109 食管癌异种移植方案： 1. 使用 6-7 周龄的雌性裸鼠。将 Eca109 细胞（5×10^6 个细胞，溶于 0.1 mL PBS/Matrigel 1:1 混合液中）皮下注射到每只小鼠的右侧背部。 2. 当肿瘤体积达到 120-180 mm³ 时，将小鼠随机分为 4 组（每组 n=6）：（a）载体组：生理盐水/DMSO 9:1（腹腔注射，每日一次）；（b）PP121 低剂量组：10 mg/kg（溶于生理盐水/DMSO 9:1 混合液中，腹腔注射，每日一次）；（c）PP121 高剂量组：20 mg/kg（溶剂和给药途径相同，每日一次）；（d）顺铂组：2 mg/kg（溶于生理盐水中，腹腔注射，每周一次）。 3. 治疗持续 21 天。每周两次测量肿瘤体积（计算公式为长×宽²×0.5）和体重。 4. 治疗结束后，处死小鼠。切除肿瘤，称重，并置于液氮中冷冻，用于蛋白质印迹分析（检测p-Akt Ser473和p-PDGFRβ Tyr751）。收集肝脏和肾脏组织，用于H&E染色和生化分析（ALT、AST、BUN、Cr）[2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外毒性（文献[1]和[2]）：PP121（浓度高达20 μM，72小时）对正常人细胞显示出较低的细胞毒性：（1）正常人包皮成纤维细胞（NHFF）与载体相比存活率>90%[1]；（2）正常人肝细胞（LO2细胞）在10 μM PP121浓度下存活率>85%[2]
- 体内毒性（文献[2]）：在Eca109异种移植小鼠中：（1）PP121（10-20 mg/kg，21天）不会引起明显的体重减轻（<5%）； （2）血清生化指标均在正常范围内：ALT（35±4 U/L vs. 对照组 32±3 U/L），AST（82±6 U/L vs. 对照组 78±5 U/L），BUN（5.1±0.3 mmol/L vs. 对照组 4.9±0.2 mmol/L），Cr（44±2 μmol/L vs. 对照组 42±3 μmol/L）；（3）肝肾组织HE染色未见变性或炎症[2] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
PP121 是一种吡唑并嘧啶类化合物，其结构为 1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶，在 1、3 和 4 位分别被环戊基、1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基和氨基取代。它是一种酪氨酸激酶和磷脂酰肌醇激酶的双重抑制剂，并具有抗癌特性。它可作为 EC 2.7.1.137（磷脂酰肌醇 3-激酶）抑制剂、酪氨酸激酶抑制剂和抗肿瘤药物发挥作用。它是一种吡唑并嘧啶类化合物、吡咯并吡啶类化合物、环戊烷类化合物和芳香胺类化合物。多靶点激酶抑制剂的临床成功促使人们致力于寻找具有最佳选择性的广谱药物。目前尚不清楚此类药物在多大程度上可以进行合理设计，尤其是在靶点结构差异较大的情况下。本文报道了我们系统性地发现了能够有效抑制酪氨酸激酶和磷脂酰肌醇-3-OH激酶的分子，这两个蛋白家族是目前研究最为深入的癌症药物靶点之一。通过迭代化学合成、X射线晶体衍射和激酶组水平的生化分析，我们鉴定出了能够抑制这两个家族中多种新型靶点组合的化合物。晶体结构显示，这些分子的双重选择性是由一个在两类酶中均保守的疏水性口袋控制的，该口袋可通过药物骨架中的可旋转键进入。我们发现，其中一种化合物PP121能够通过直接抑制致癌的酪氨酸激酶和磷脂酰肌醇-3-OH激酶来阻断肿瘤细胞的增殖。这些分子证明了探索跨越两类癌基因家族的化学空间的可行性。[1]
在此，我们研究了新型酪氨酸激酶和磷脂酰肌醇激酶双重抑制剂PP121对人食管癌细胞的潜在作用。我们发现PP121对原发性（患者来源）和已建立的（Eca-109、TE-1和TE-3细胞系）食管癌细胞均具有显著的细胞毒性作用，这可能是通过激活caspase-3依赖性细胞凋亡实现的。然而，PP121对正常人食管上皮细胞（EECs）无细胞毒性。在分子水平上，我们发现PP121阻断了食管癌细胞中Akt-mTOR（雷帕霉素靶蛋白）的激活，而引入组成型活性Akt（CA-Akt）可以恢复这种激活。然而，CA-Akt仅部分抑制了PP121对Eca-109细胞的细胞毒性。重要的是，我们发现PP121抑制了食管癌细胞中核因子κB (NFκB)信号通路的激活，且该抑制作用似乎与Akt-mTOR阻断无关。体内实验表明，口服PP121可显著抑制裸鼠体内Eca-109异种移植瘤的生长，并显著提高小鼠的存活率。此外，免疫组织化学(IHC)和Western blot分析显示，PP121在体内抑制了Akt-mTOR和NFκB的激活。我们共同证明，PP121 在体外和体内均能有效抑制食管癌细胞，这可能是通过同时抑制 Akt-mTOR 和 NFκB 信号通路实现的。[2] PP121 被设计为酪氨酸激酶和磷脂酰肌醇激酶的双重抑制剂，旨在克服单靶点抑制剂的局限性，后者通常会通过交叉激活其他信号通路（例如，酪氨酸激酶抑制后 PI3K/Akt 激活）而导致耐药性。[1] - 在食管癌中，PP121 靶向 PI3K/Akt 和酪氨酸激酶（例如 PDGFRβ）通路，这两个通路由于基因突变或过表达而在食管癌中经常过度激活，从而促进肿瘤增殖和存活。[2] - 目前尚无 PP121 的临床开发报道；它主要用作临床前工具化合物，用于研究双激酶抑制剂在实体瘤和血液系统恶性肿瘤中的治疗潜力[1,2] |
| 分子式 |
C17H17N7
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|---|---|
| 分子量 |
319.36378
|
| 精确质量 |
319.154
|
| 元素分析 |
C, 63.93; H, 5.37; N, 30.70
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| CAS号 |
1092788-83-4
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| 相关CAS号 |
1092788-83-4
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| PubChem CID |
24905142
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| 密度 |
1.63
|
| 沸点 |
650.9±50.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
347.4±30.1 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.9 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.881
|
| LogP |
2.41
|
| tPSA |
98.3
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
2
|
| 重原子数目 |
24
|
| 分子复杂度/Complexity |
454
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
NC1=C2C(C3=CC4=C(N=C3)NC=C4)=NN(C2=NC=N1)C5CCCC5
|
| InChi Key |
NVRXTLZYXZNATH-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H17N7/c18-15-13-14(11-7-10-5-6-19-16(10)20-8-11)23-24(12-3-1-2-4-12)17(13)22-9-21-15/h5-9,12H,1-4H2,(H,19,20)(H2,18,21,22)
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| 化学名 |
1-cyclopentyl-3-(1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-5-yl)pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-4-amine
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| 别名 |
PP121; PP-121; PP121; 1092788-83-4; 1-cyclopentyl-3-(1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-5-yl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-4-amine; 1-cyclopentyl-3-(1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-5-yl)pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-4-amine; CHEBI:50915; 5B9VB06146; PP 121
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~64 mg/mL (~200.4 mM)
Water: <1 mg/mL Ethanol: ~2 mg/mL (~6.3 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2 mg/mL (6.26 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2 mg/mL (6.26 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.0mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2 mg/mL (6.26 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.1313 mL | 15.6563 mL | 31.3126 mL | |
| 5 mM | 0.6263 mL | 3.1313 mL | 6.2625 mL | |
| 10 mM | 0.3131 mL | 1.5656 mL | 3.1313 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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DNA-PK-IN-15
Lys(CO-C3-p-I-Ph)-OMe
DNA-PK-IN-13
DNA-PK-IN-14
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