| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| Other Sizes |
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| 体外研究 (In Vitro) |
Huib32 (BB01CA282) (0-50 μM,6-24 h) 以剂量依赖的方式选择性抑制 USP32FL 和 USP32CD(起始浓度为 0.1 μM),对其他 16 种检测到的去泛素化酶 (DUB) 无显著影响 [1]。Huib32 (0-50 μM,24 h) 在 MelJuSo 细胞中表现出强效的、剂量依赖性的内源性 USP32 靶标占有率 (IC50 ~ 0.1 μM),证实了其细胞渗透性和细胞内靶向活性 [1]。Huib32 (10 μM,4-72 h) 诱导晚期内体分散,并增强 RAB7 和其他底物(例如 RAB6、RAB32、RAB11A/B、TMEM192)的泛素化,证实了其在膜转运中的作用,并揭示了 USP32 的一个新潜在底物 [1]。 Huib32(10 μM,4-72 小时)显著改变了泛素化谱,在 4 小时和 72 小时富集并消耗了一种独特的 Lys-ε-Gly-Gly 肽段,影响包括 RAB11A/B 和 USP32 自身在内的底物,但并未改变总蛋白水平,表明其调控机制为非降解性泛素化 [1]。Huib32(10 μM,72 小时)特异性地增强了 GFP-RAB7 WT 的泛素化,但对 GFP-RAB7 2KR 突变体没有影响,验证了其对已确定的 USP32 底物的靶向作用 [1]。
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| 细胞实验 |
Western Blot 分析[1]
细胞类型: MelJuSo 细胞 测试浓度: 0、0.1、0.5、1、5、10 和 50 μM 孵育时间: 4、24 和 72 小时 实验结果: 在稳定表达 GFP-RAB7 的 MelJuSo 细胞中,孵育 4 小时后 RAB7 的泛素化显著增加,并持续至孵育 72 小时。在 GFP-RAB7 WT 中观察到 RAB7 泛素化水平大约增加了 2 倍,但在泛素化缺陷突变体 GFP-RAB7 2KR 中未观察到此现象。 免疫荧光[1] 细胞类型: MelJuSo 细胞 测试浓度: 0、5 和 10 μM 孵育时间: 72 小时 实验结果: 诱导晚期内体区室分散和肿胀,这种表型与 USP32 耗竭一致。 |
| 参考文献 |
| 分子式 |
C16H23N5O4S
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| 分子量 |
381.45
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~262.16 mM; with sonication)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.55 mM)(饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加),澄清溶液。 例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀;再向上述体系中加入 50 μL Tween-80,混合均匀;然后再继续加入 450 μL 生理盐水 定容至 1 mL。 生理盐水的配制:将 0.9 g 氯化钠,溶解于 ddH₂O 并定容至 100 mL,可以得到澄清透明的生理盐水溶液。 *生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.55 mM)(饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加),澄清溶液。 例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液 中,混合均匀。 2 g SBE-β-CD(磺丁基醚 β-环糊精)粉末定容于 10 mL 的生理盐水中,完全溶解至澄清透明。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.55 mM)(饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加),澄清溶液。 例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL玉米油中,混合均匀。 |