| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
WCY-8-67 selectively targets ubiquitin‑specific protease 5 (USP5), a deubiquitinating enzyme that acts on ubiquitin chains. In t(8;21) acute myeloid leukemia (AML), USP5 was identified as the deubiquitinating enzyme of the AML1‑ETO (AE) fusion protein, a key oncogenic driver. By binding to the ubiquitin‑associated domain 2 (UBA2) region of USP5, WCY-8-67 prevents USP5 from recognizing ubiquitin, leading to dysfunction and aggregation of the target protein. The compound thus promotes ubiquitin‑mediated degradation of the AML1‑ETO oncoprotein, suppressing downstream oncogenic signaling. Downstream signaling pathways affected include JAK/STAT3 and PI3K/AKT, both of which are suppressed by WCY-8-67 treatment. Beyond USP5, the compound also targets apoptosis pathways and related signaling modulators including STAT, JAK, Akt, and PI3K.
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| 体外研究 (In Vitro) |
WCY-8-67（0.5-2 μM，24 小时）以剂量依赖的方式降低了 Kasumi-1 和 Skno-1 细胞中 AML1-ETO (AE) 蛋白的表达水平 [1]。WCY-8-67（0.5-2 μM，24 小时）抑制了 AE 阳性 AML 细胞的增殖（Kasumi-1：IC50 = 1.75 μM；Skno-1：IC50 = 0.99 μM；U937-AE：IC50 = 1.20 μM），但对 AE 阴性 AML 细胞（MV-4-11、MOLM-13、HL-60）的影响甚微 [1]。WCY-8-67（0.5-7.5 μM，24-48 小时）诱导 Kasumi-1 和 Skno-1 细胞凋亡和 G1 期细胞周期阻滞 [1]。 WCY-8-67（0.5-2 μM，7 天）可降低 Kasumi-1 和 Skno-1 细胞的集落形成能力，并减少琼脂糖集落形成实验中的恶性克隆数量 [1]。WCY-8-67（0.5-2 μM，24 小时）可减少 Kasumi-1 和 Skno-1 细胞中 CD34+CD38- 白血病干细胞 (LSC) 的数量，并增加 CD11b+ 分化细胞的数量 [1]。WCY-8-67（0-2.5 μM，24 小时）可抑制 Kasumi-1 和 Skno-1 细胞中的 JAK/STAT3 和 PI3K/AKT 信号通路 [1]。
WCY-8-67 对 t(8;21) AML 细胞表现出强效的体外活性，其 USP5 抑制的生化 IC50 值为 1.33 microM。在细胞增殖实验中，WCY-8-67 可抑制 AE 阳性 AML 细胞（Kasumi-1：IC50 = 1.75 microM；Skno-1：IC50 = 0.99 microM；U937-AE：IC50 = 1.20 microM）的生长，但对 AE 阴性 AML 细胞（MV-4-11、MOLM-13、HL-60）的影响可忽略不计。在浓度为 0.5-2 microM 的条件下，该化合物在 24 小时内呈剂量依赖性地降低 AML1-ETO 蛋白的丰度，诱导细胞凋亡和 G1 期细胞周期阻滞，并减少 CD34+CD38- 白血病干细胞 (LSC) 的数量，同时增加 CD11b+ 分化细胞的数量。在琼脂糖克隆形成实验中，浓度为 0.5-2 microM 的该化合物在 7 天内也能降低集落形成能力。机制上，WCY-8-67 抑制 JAK/STAT3 和 PI3K/AKT 信号通路，下调 MDM2 和抗凋亡蛋白 Bcl-2/Mcl-1 的表达，上调 p53 的表达，并促进 PARP1 的裂解和 caspase-3 的激活。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
WCY-8-67（20–40 mg/kg，口服，每日一次，持续12天）在Skno-1皮下异种移植模型中显示出强效的抗肿瘤活性[1]。WCY-8-67（40 mg/kg，口服，每日一次，持续42天）在Kasumi-1-luciferase-GFP原位异种移植模型中降低了肿瘤疲劳并延长了生存期[1]。WCY-8-67（20 mg/kg，腹腔注射，每日一次，持续14天）在t(8;21) AML异种移植（PDX）模型中延长了生存期并减轻了脾脏重量[1]。
WCY-8-67 在 t(8;21) AML 小鼠模型中展现出强大的体内抗白血病疗效。在 Skno-1 皮下异种移植模型中，口服 WCY-8-67（20-40 mg/kg，每日一次，持续 12 天）可显著抑制肿瘤生长。在 Kasumi-1-luciferase-GFP 原位异种移植模型中，口服 WCY-8-67（40 mg/kg，每日一次，持续 42 天）可降低肿瘤负荷并延长生存期。在 t(8;21) AML 患者来源异种移植 (PDX) 模型中，腹腔注射 WCY-8-67（20 mg/kg，每日一次，持续 14 天）可延长生存期并减轻脾脏重量增加。与单独使用 5-氮杂胞苷 (5-Aza) 相比，WCY-8-67 与 5-氮杂胞苷 (5-Aza) 联合使用可提高治疗效果。该化合物在这些动物模型中表现出优异的体内生物利用度和耐受性。 |
| 酶活实验 |
体外USP5生化抑制实验采用纯化的USP5酶进行。我们开发了一种高通量筛选（HTS）方法来评估USP5抑制效果，该方法通过测量不同剂量WCY-8-67存在下USP5的去泛素化活性来测定抑制效果。反应混合物包含USP5酶、泛素底物（通常为泛素-AMC或泛素连接的报告分子）和缓冲液。WCY-8-67的浓度各不相同（通常为0.1-10 uM）。在37℃孵育30-60分钟后，通过荧光（针对泛素-AMC）或检测释放产物来定量泛素底物的裂解。IC50值（1.33 uM）通过非线性回归分析，根据浓度-效应曲线计算得出。表面等离子共振（SPR）测定表明，USP5 的结合亲和力 Kd 值为 5.73 uM。结构和功能研究证实，USP5 的抑制机制涉及靶向泛素相关结构域 2（UBA2）区域。
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| 细胞实验 |
细胞凋亡分析[1]
细胞类型： Kasumi-1 和 Skno-1 细胞 测试浓度： 0、1.25、5、7.5 μM 孵育时间： 48 小时 实验结果： MDM2 下调，p53 上调。促进 PARP1 的裂解和 caspase-3 的激活。抗凋亡蛋白 Bcl-2 和 Mcl-1 减少。 对于体外细胞实验，Kasumi-1 和 Skno-1 细胞（t(8;21) AML 细胞系）在适宜的培养基（例如，含 10% FBS 和 1% 青霉素/链霉素的 RPMI-1640）中培养。将细胞接种于多孔板中，并用不同剂量范围的 WCY-8-67（通常为 0.5-7.5 uM）处理。对于增殖实验，细胞孵育 24-48 小时，并使用 CCK-8 或 MTT 法评估细胞活力，计算 IC50 值。对于凋亡分析，细胞处理 48 小时后，用 Annexin V-FITC 和碘化丙啶染色，然后进行流式细胞术分析。细胞周期分析在处理 24-48 小时后通过碘化丙啶染色进行。为了评估细胞分化情况，将细胞处理24小时后，用CD11b和CD34抗体染色，然后通过流式细胞术分析干细胞和分化细胞群的变化。为了分析信号通路，将细胞处理24小时后裂解，并使用针对JAK/STAT3和PI3K/AKT通路组分以及凋亡相关蛋白（PARP1、caspase-3、MDM2、p53、Bcl-2、Mcl-1）的抗体进行Western blotting分析。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： 将 Skno-1 细胞 (1 × 107) 皮下植入 6 周龄雌性 NU/NU 小鼠的侧腹部[1]
剂量： 20、40 mg/kg 给药途径： 口服，每日一次，12 天 实验结果： 肿瘤重量和体积减少。体重未见显著变化。 动物/疾病模型： 将表达荧光素酶-GFP的Kasumi-1细胞（2 × 106）经尾静脉注射到6周龄NOG小鼠[1]中。 剂量： 40 mg/kg 给药途径： 口服，每日一次，持续42天 实验结果： 脾脏重量和骨髓、脾脏及外周血中hCD45+白血病细胞百分比均降低。降低肿瘤负荷并延长生存期。 动物/疾病模型： 将原代 t(8;21) AML 细胞经尾静脉注射至 6 周龄 NOG 小鼠[1]。 剂量： 20 mg/kg 给药途径： 腹腔注射，每日一次，持续 14 天。 实验结果： 骨髓、脾脏和外周血中 hCD45+ 细胞浸润减少。延长生存期并减轻脾脏重量。 体内动物实验采用6周龄雌性NU/NU裸鼠构建异种移植模型。对于Skno-1皮下移植模型，将1×10⁷个Skno-1细胞皮下植入小鼠侧腹。待肿瘤达到可触及大小后，以20-40 mg/kg的剂量每日一次口服WCY-8-67，连续12天。每隔几天用游标卡尺测量肿瘤体积，并监测体重以评估耐受性。对于Kasumi-1-luciferase-GFP原位移植模型，以40 mg/kg的剂量每日一次口服WCY-8-67，连续42天，并通过生物发光成像评估肿瘤负荷。对于使用原代t(8;21) AML患者细胞的PDX模型，以20 mg/kg的剂量每日一次腹腔注射WCY-8-67，连续14天。采用Kaplan-Meier分析法记录生存率，并在终点测量脾脏重量。口服制剂通常将化合物悬浮于合适的载体中，例如0.5%甲基纤维素或其他标准口服制剂。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
WCY-8-67 具有优异的口服生物利用度和良好的体内药代动力学特性。在临床前小鼠模型中，该化合物口服给药后表现出良好的全身暴露量，因此可以采用每日一次的给药方案（每日一次口服 20-40 mg/kg），这与疗效研究结果一致。该化合物在室温下可稳定保存长达一个月，且生物活性不降低。储存建议：粉末在 -20℃ 下可保存长达三年；溶液在 -20℃ 下可保存长达六个月。该化合物应储存在密封容器中，避光，并置于干燥通风处。详细的药代动力学参数，例如半衰期、分布容积、清除率和蛋白结合率，尚未公开，但已在主要研究论文（Ma 等，Science Translational Medicine，2025）中进行了描述。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
根据安全数据表 (SDS)，WCY-8-67 根据全球化学品统一分类和标签制度 (GHS) 标准被归类为“非危险物质或混合物”。危害识别部分未列出任何具体的急性或慢性毒性。急救措施包括：吸入时，应立即转移至空气新鲜处，如呼吸困难，应立即进行心肺复苏 (CPR)；皮肤接触时，应立即用大量清水彻底冲洗并脱去受污染的衣物；眼睛接触时，应立即用清水冲洗眼睛至少 15 分钟并就医；误服时，如患者意识清醒，应立即用水漱口，切勿催吐，除非医务人员指示。燃烧时，该化合物可能会释放刺激性烟雾，消防员应佩戴自给式呼吸器和防护服。建议的个人防护装备包括手套、实验服和护目镜。避免产生粉尘和气溶胶，且仅在通风良好的区域使用。该化合物不得用于人类或兽医用途，仅供研究之用。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
WCY-8-67 是一种研究级化合物，尚未进入临床试验，也未获得任何监管机构（FDA、EMA、PMDA）批准用于人体治疗。它由 Ma 及其同事开发，是一种首创的选择性 USP5 抑制剂，并于 2025 年 9 月 24 日在《科学转化医学》（Science Translational Medicine，第 17 卷，第 817 期，eadt9100 页）上发表。该主要出版物详细介绍了 WCY-8-67 的完整合成、高通量筛选和临床前评估。其作用机制是靶向 USP5 的泛素相关结构域 2 (UBA2) 区域，导致 USP5 功能障碍和聚集，从而促进 t(8;21) AML 中 AML1-ETO 癌蛋白的泛素介导降解。当与 5-氮杂胞苷 (5-Aza) 联合使用时，WCY-8-67 可增强 PDX 模型中的治疗效果，提示其具有潜在的联合治疗策略。该化合物仅标明“仅供研究使用，不得用于人体”，可用于急性髓系白血病的临床前研究。
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| 分子式 |
C25H32FN7
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|---|---|
| 分子量 |
449.57
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| CAS号 |
3052618-54-6
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| 相关CAS号 |
WCY-8-67 TFA
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| 外观&性状 |
Typically exists as solids at room temperature
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2243 mL | 11.1217 mL | 22.2435 mL | |
| 5 mM | 0.4449 mL | 2.2243 mL | 4.4487 mL | |
| 10 mM | 0.2224 mL | 1.1122 mL | 2.2243 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Ubiquitin thiolesterase UCHL1
USP30-IN-20
Huib32
JOSD2-IN-1
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