| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Spin trap agent
DMPO targets free radicals by forming stable adducts with them. It is a spin-trapping reagent used to study radical formation in enzymatic and cellular systems. The compound also has a role as a neuroprotective agent. Incubating lymphocytes with DMPO decreases DNA damage by NiCl₂. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
DMPO 处理细胞后可减弱 SIN-1 介导的细胞毒性和 ROS 生成,并通过提高 eNOS 活性和磷酸化 eNOS 水平恢复 NO 水平。单独使用 DMPO 处理可显著提高 NO 水平,并通过 Akt 激酶诱导 eNOS Ser¹¹⁷⁹ 的磷酸化。野生型和突变型人 eNOS 的转染研究证实了 eNOS 的双重作用:在 SIN-1 处理下产生超氧阴离子 (O₂⁻),在 DMPO 存在下产生 NO [4]。
与直接 ESR 不同,自旋捕获技术依赖于自旋捕获反应的绝对保真度。目前已发现并研究了 5,5-二甲基-1-吡咯啉 N-氧化物 (DMPO) 的两种导致自由基加合物伪影的替代反应:反向自旋捕获和 Forrester-Hepburn 亲核机制。这两种生成自由基加合物的替代途径都是单电子氧化和亲核加成的组合,顺序不限。在生物系统中,由于福雷斯特-赫本机制(由亲核试剂加成到DMPO上引发),已报道存在严重的假象。最近的研究表明,亚硫酸氢盐(水合二氧化硫)可以通过非自由基亲核反应与DMPO反应,并进一步提出生物系统中DMPO/(•)SO₃⁻的形成是一种假象,而非三氧化硫阴离子自由基((•)SO₃⁻)自旋捕获的结果。为了进一步证实自由基反应机制,研究人员利用DMPO的电子自旋共振(ESR)自旋捕获和氧吸收实验,重新研究了辣根过氧化物酶(HRP)/过氧化氢(H₂O₂)催化的亚硫酸氢盐单电子氧化反应。在没有DMPO的情况下,亚硫酸盐依赖性氧气和H₂O₂消耗的初始速率被确定为DMPO/(•)SO₃⁻自由基加合物形成初始速率的一半(通过ESR测定),这表明在我们的实验条件下,DMPO仅通过捕获(•)SO₃⁻来形成自由基加合物[1]。 将二甲基-1-吡咯啉N-氧化物(DMPO) 4位上取代的某些基团的自旋捕获剂与DMPO本身进行了比较,比较内容包括它们的自旋捕获能力和物理性质。采用Bonnett法合成了4,5,5-三甲基-1-吡咯啉N-氧化物(4MDMPO)和5,5-二甲基-4-苯基-1-吡咯啉N-氧化物(4PDMPO),并以2(5H)-呋喃酮为原料,通过一种独特的合成方法制备了5,5-二甲基-4-羟甲基-1-吡咯啉N-氧化物(4HMDMPO)。4MDMPO、4PDMPO和4HMDMPO的熔点均高于DMPO。基于1-辛醇-水体系的分配系数实验,它们的亲水性大小顺序为4HMDMPO > DMPO > 4MDMPO > 4PDMPO。此外,还检测到了多种自由基,如O2-·、HO·、·CH3、·CH2OH、·CH(CH3)OH和(CH3)3CO·。为了与DMPO本身捕获自由基的情况进行比较,我们用这些DMPO衍生物捕获了·OH自由基。·OH与三种DMPO衍生物的自旋加合物显示出与DMPO相似的ESR谱图。尽管自旋捕获产生了非对映异构体,但线宽的增加非常小。4MDMPO-O2-、4PDMPO-O2-、4HMDMPO-O2-和DMPO-O2-的谱图强度和衰减速率几乎相等。在4MDMPO、4PDMPO和4HMDMPO捕获·OH自由基的过程中,观察到的八线ESR谱图与众所周知的DMPO-OH的四线谱图[2]不同。在体外,DMPO用于检测酶促反应(例如乙醛氧化)产生的自由基,在细胞系统中则用于测量氧化应激。它是一种亲水性自旋捕获剂,可用于体外和体内研究。DMPO 能有效检测细胞培养物中的超氧阴离子和羟基自由基。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
左后爪注射福尔马林可诱发双相痛觉行为。腹腔注射DMPO可剂量依赖性地减轻第二阶段的痛觉行为,但对第一阶段无影响。DMPO(10-100 mg/kg,腹腔注射)对福尔马林诱导的大鼠痛觉过敏具有镇痛作用[3]。体内,DMPO常用于研究动物模型中的氧化应激。它可以用于清除体内产生的自由基,然后通过EPR光谱法进行检测。DMPO还被证实具有神经保护作用。
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| 酶活实验 |
无细胞DMPO检测方法是将自旋捕获剂与自由基生成体系孵育,例如用于超氧阴离子的黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶体系或用于羟基自由基的芬顿反应。然后通过EPR光谱分析生成的DMPO-自由基加合物,以鉴定自由基种类。
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| 细胞实验 |
将BAEC细胞用SIN-1(作为过氧亚硝酸根阴离子(ONOO⁻)的来源)处理,然后与DMPO孵育。采用MTT法评估SIN-1单独作用下的细胞毒性以及添加DMPO后的细胞保护作用。测定了转染野生型和突变型eNOS cDNA的HEK293细胞中ROS和NO的生成水平、四氢生物蝶呤的生物利用度、eNOS活性以及eNOS和Akt激酶的磷酸化水平[4]。
DMPO的体外细胞实验包括用该化合物处理细胞,然后将其暴露于氧化应激诱导剂。通过EPR光谱法测量DMPO-自由基加合物的形成,以量化细胞内特定自由基的产生。 |
| 动物实验 |
在腹腔注射生理盐水或不同剂量的DMPO(10 mg/kg、30 mg/kg、100 mg/kg)后,向左后爪注射5%福尔马林溶液。每隔5分钟记录一次反应次数,持续1小时。
成年雄性Sprague-Dawley大鼠(200~300 g)饲养于铺有柔软垫料的塑料笼中,可自由摄取食物和水。每笼饲养两只大鼠,置于环境控制室中,光照周期为12小时光照/12小时黑暗。所有实验程序均经忠南国立大学机构动物护理和使用委员会批准。40只成年大鼠被分为4组:1个自由状态对照组和3个不同DMPO剂量的实验组。大鼠被随机分配到以下处理组之一(每组n=10)。对照组(n = 10)在福尔马林试验前40分钟腹腔注射5 ml生理盐水。三个实验组分别在福尔马林试验前40分钟腹腔注射10 mg/kg、30 mg/kg和100 mg/kg的DMPO。腹腔推注的DMPO用生理盐水稀释5 ml。在右下腹部注射5 ml生理盐水或DMPO(21号针头)后,将大鼠放入透明的圆柱形塑料观察箱中。观察箱放置在架高的金属丝平台上。腹腔注射40分钟后,在大鼠左后爪足底注射50 μl 5%福尔马林溶液。注射福尔马林后,记录大鼠5分钟内的自发性足部抽搐次数,并每隔5分钟记录一次,持续60分钟。由于镇静或麻醉会影响机械阈值4),我们进行了额外的测试,以观察DMPO是否会诱导镇静或麻醉。与镇痛不同,镇静或麻醉会干扰姿势和翻正反射。我们使用五分制量表评估姿势和翻正反射。姿势五分制量表:0;姿势正常,可站立和梳理毛发;1;中度肌张力低下和共济失调。可支撑体重,但不能站立;2;可支撑体重,但严重共济失调;3;肌肉张力正常,但不能支撑体重,仅有轻微的自主运动;4;弛缓性肌张力低下,完全僵硬,无任何运动尝试。翻正反射五分制量表:0;侧卧时大鼠挣扎,随后迅速有力地翻正;1;侧卧时大鼠有中等程度的抵抗,迅速但不有力地翻正;2;大鼠侧卧时无抵抗,最终能成功翻正;3;翻正失败;4;无任何动作。数据以均值±标准误(SEM)表示。对照组和实验组之间的统计分析采用单因素方差分析(ANOVA),并进行Dunnett事后检验。P<0.05被认为具有统计学意义[3]。 DMPO的体内动物研究包括将该化合物(通常通过腹腔注射)给予动物,然后收集组织或体液进行EPR分析。这种方法用于研究各种疾病模型中的氧化应激。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
由于DMPO是一种研究试剂而非药物,其药代动力学特性尚未得到充分表征。该化合物具有细胞渗透性和亲水性,表明其可在体内分布。在推荐的储存条件下,DMPO性质稳定。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
DMPO 在自旋捕获所用的浓度下不具有显著毒性。该化合物被认为可安全用于研究用途。处理该化合物时,应遵循标准的实验室安全操作规程。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
5,5-二甲基-1-吡咯啉 N-氧化物是一种 1-吡咯啉亚硝基酮(1-吡咯啉 N-氧化物)化合物,由 5,5-二甲基-1-吡咯啉的 N-氧化形成。它可以用作自旋捕获剂,以研究由乙醛的酶促氧化产生的自由基。此外,它还具有神经保护和自旋捕获特性。其结构与 5,5-二甲基-1-吡咯啉相似。
DMPO是一种研究试剂,没有临床应用或监管批准。它广泛用作自旋捕获剂,以检测和识别化学、生物化学和生物系统中的自由基。其作为神经保护剂的作用使其成为神经科学研究的一个研究对象。 |
| 分子式 |
C6H11NO
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|---|---|
| 分子量 |
113.16
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| 精确质量 |
113.084
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| CAS号 |
3317-61-1
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| PubChem CID |
1774
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| 外观&性状 |
Colorless to light yellow solid if <25°C; liquid if >29°C; Melting Point: 25-29 °C
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| 密度 |
1.0±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
274.2±0.0 °C at 760 mmHg
|
| 熔点 |
25-29 °C(lit.)
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| 闪点 |
130.7±11.5 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±0.5 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.478
|
| LogP |
-1.14
|
| tPSA |
28.75
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
1
|
| 可旋转键数目(RBC) |
0
|
| 重原子数目 |
8
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| 分子复杂度/Complexity |
127
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CC1(C)CCC=[N+]1[O-]
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| InChi Key |
VCUVETGKTILCLC-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C6H11NO/c1-6(2)4-3-5-7(6)8/h5H,3-4H2,1-2H3
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| 化学名 |
2,2-dimethyl-1-oxido-3,4-dihydropyrrol-1-ium
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| 别名 |
5,5-Dimethyl-1-pyrroline-N-oxide; 3317-61-1; 5,5-Dimethyl-1-pyrroline N-oxide; DMPO; 5,5-Dimethyl-1-pyrroline-N-oxide; 5,5-Dimethyl-1-pyrroline-1-oxide; 2,2-Dimethyl-3,4-dihydro-2H-pyrrole 1-oxide; 2,2-dimethyl-1-oxido-3,4-dihydropyrrol-1-ium; MFCD00005279;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O: ≥ 100 mg/mL (883.70 mM)
DMSO: 100 mg/mL (883.70 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (22.09 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (22.09 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (22.09 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 8.8370 mL | 44.1852 mL | 88.3704 mL | |
| 5 mM | 1.7674 mL | 8.8370 mL | 17.6741 mL | |
| 10 mM | 0.8837 mL | 4.4185 mL | 8.8370 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。