| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The primary target of the PACAP-38 (31-38) fragment is the PAC1 receptor (also known as ADCYAP1R1), a class B GPCR that preferentially binds PACAP over vasoactive intestinal peptide (VIP). This fragment binds to the PAC1 receptor with low micromolar affinity, acting as a partial agonist. Upon binding, it activates adenylate cyclase, increasing intracellular cAMP and elevating cytosolic Ca2+. This signaling pathway leads to increased phosphorylation of extracellular regulated kinase (ERK) and activation of the epidermal growth factor receptor (EGFR). It also increases alpha-secretase activity.
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| 体外研究 (In Vitro) |
PACAP-38(31–38)、人源、小鼠源和大鼠源TFA（100 nM；2分钟；NCI-H838细胞）可使EGFR、HER2和ERK发生酪氨酸磷酸化[1]。用PACAP-38(31–38)、人源、小鼠源和大鼠源TFA（100 nM；30分钟；NCI-H838细胞）诱导EGFR酪氨酸磷酸化可使ROS水平升高51%[1]。在人源、小鼠源和大鼠源PACAP-38(31–38)的作用下，TFA（10 nM；48小时）可刺激NCI-H838细胞的生长[1]。人源、小鼠源和大鼠源TFA（300 nM；4小时）与PACAP-38(31–38)共同作用可增加脑细胞中APPsα的产生[2]。通过 cAMP 积累和胞质游离钙离子浓度升高，PACAP-38(31–38)、人源、小鼠源和大鼠源 TFA（0.01–10 nM；HEK 293 细胞）刺激神经细胞表达内源性 PAC1 受体。它还能以剂量依赖的方式诱导细胞内 Ca2+ 浓度升高，EC50 值为 0.81 nM[2]。PACAP-38(31–38)、人源、小鼠源和大鼠源 TFA（0.01 nM；48 小时）能强效刺激 SCG 神经元释放 NPY[3]。人源、小鼠源和大鼠源 TFA（100 nM；14 天）与 PACAP-38(31–38) 联用可导致交感神经元持续激活 NPY 和分泌儿茶酚胺[3]。
在来自颈上神经节 (SCG) 的原代交感神经元细胞培养物中，PACAP-38 (31-38) TFA (0.01 nM；48 小时) 可强效刺激神经肽 Y (NPY) 的释放。该片段 (100 nM；14 天) 也可诱导交感神经元持续分泌 NPY 和儿茶酚胺。这些刺激作用强效、有效且持久。C 端序列 (31-38) 似乎对 PACAP 的长期神经营养作用至关重要，尤其是在促进神经元分化和存活方面。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
该片段主要用于离体培养系统，而非整体动物研究。在NGF过表达（NGF-OE）转基因小鼠中，全长PACAP拮抗剂(6-38)的作用已得到充分证实，但(31-38)片段（因为它是一种激动剂片段，而非拮抗剂片段）通常在离体组织中进行研究。在体内向交感神经元施用该片段可刺激NPY和儿茶酚胺的持续产生，促进交感神经元的发育和分化，并增强神经生长因子（NGF）信号传导。
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| 酶活实验 |
由于片段性质，这通常不是标准方案；典型的全长受体结合试验如下：将稳定表达人 PAC1 受体（5-20 ug 蛋白）的 CHO 或 HEK293 细胞膜与 50-100 pM ¹2⁵I-PACAP-27（放射性标记配体）在结合缓冲液（20 mM HEPES，pH 7.4，100 mM NaCl，5 mM MgCl2，1 mM CaCl2，0.1% BSA，0.1 mg/mL 杆菌肽）中于室温下孵育 60 分钟，同时加入浓度递增（0.1 nM - 10 uM）的 PACAP-38 (31-38) TFA 或未标记的 PACAP-38。结合的放射性配体通过预先浸泡在0.3%聚乙烯亚胺溶液中的GF/C滤膜进行快速过滤分离。滤膜用冰冷的结合缓冲液洗涤3次。放射性通过γ计数器定量。非特异性结合使用1 uM未标记的PACAP-38测定。IC50值通过曲线拟合计算；Ki值使用Cheng-Prusoff方程计算。
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| 细胞实验 |
细胞活力检测[1]
细胞类型： NCI-H838 细胞 测试浓度： 10 nM 孵育时间： 48 小时 实验结果： NCI-H838 细胞数量增加了 72%。 蛋白质印迹分析[1] 细胞类型： NCI-H838 细胞 测试浓度： 100 nM 孵育时间： 2 分钟 实验结果： EGFR、HER2 和 ERK 的酪氨酸磷酸化水平分别增加了 377%、299% 和 216%。 从新生（P0-P2）大鼠或小鼠的颈上神经节（SCG）中分离出原代交感神经元。SCG经酶消化（胶原酶/分散酶，30分钟，37℃）和研磨后解离。将细胞（2×10⁵个细胞/孔，24孔板）培养于添加了B27补充剂、2 mM谷氨酰胺和50 ng/mL NGF的Neurobasal培养基中。体外培养7天（DIV7）后，洗涤神经元，并用PACAP-38 (31-38) TFA（0.01、0.1、1、10、100 nM）处理48小时或14天（用于长期分泌研究）。采用ELISA法测定培养基中NPY和儿茶酚胺的水平。钙成像时，将细胞用 Fura-2 AM（5 uM，30 分钟，37℃）孵育，并记录 340/380 nm 处的荧光强度比值。应同时孵育 PAC1 拮抗剂（PACAP(6-38)，1 uM）以确认受体特异性。 |
| 动物实验 |
针对全长PACAP肽段已有标准动物实验方案，但(31-38)片段通常用于离体组织培养。体内交感神经元刺激实验采用NGF-OE转基因小鼠（过表达NGF）。将PACAP-38 (31-38) TFA（100 nM，溶于10 μL PBS）鞘内(it)或腹腔(ip)注射，每日一次，持续14天。采用qPCR、Western blot和免疫组织化学方法检测交感神经节（颈上神经节、星状神经节、腹腔神经节）中NPY和酪氨酸羟化酶(TH)的表达。采用ELISA法测定血浆儿茶酚胺和NPY水平。采用免疫组织化学方法检测TH和NPY，评估靶组织（如心脏、血管）中交感神经的密度。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
目前尚未报道这种短链线性8氨基酸肽的药代动力学数据。由于肽酶的快速降解，其在血浆或脑脊液中的半衰期预计小于10分钟。为了达到持久作用（例如，14天的NPY分泌），该肽必须每日给药或通过持续输注（渗透泵）给药。三氟乙酸盐形式可确保其在水性缓冲液中的溶解性。目前尚无详细的药代动力学数据；对于体内应用，该化合物通常用于离体组织培养模型，而非全身动物药理学研究。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无该PACAP片段的具体毒性数据。在细胞培养所用的浓度（0.01-100 nM）下，未观察到细胞毒性或形态学变化。鉴于该化合物来源于内源性神经肽，预计其毒性较低。高浓度可能导致交感神经元过度兴奋，进而引起NPY过度释放和潜在的心血管效应，但这一点尚未得到系统研究。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
PACAP-38 (31-38) TFA 是一种严格意义上的研究级肽工具。全长 PACAP-38 肽是一种神经营养因子和神经递质，在发育、应激反应和神经保护中发挥着重要作用。该 C 端片段可作为绘制 PACAP 功能域图谱的宝贵探针，尤其适用于绘制负责持续性细胞反应和瞬时性细胞反应的区域。TFA 盐是肽合成的标准形式。该肽有人类、小鼠和大鼠三种序列，这三种序列在该区域完全相同。请以冻干粉末形式储存于 -20℃；使用前用无菌水或 PBS 缓冲液复溶。
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| 分子式 |
C49H84F3N17O13
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| 分子量 |
1176.29
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| 相关CAS号 |
PACAP-38 (31-38), human, mouse, rat;138764-85-9
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O :~100 mg/mL (~85.01 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 100 mg/mL (85.01 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.8501 mL | 4.2507 mL | 8.5013 mL | |
| 5 mM | 0.1700 mL | 0.8501 mL | 1.7003 mL | |
| 10 mM | 0.0850 mL | 0.4251 mL | 0.8501 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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