| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
CTX-0294885 hydrochloride is a broad-spectrum kinase inhibitor that does not have a single specific target; instead, it binds to the ATP-binding pocket of many protein kinases. Through quantitative proteomics, CTx-0294885-bound beads were shown to selectively enrich kinases from cell lysates. In MDA-MB-231 cells, CTX-0294885 captured 235 protein kinases, including all members of the AKT family.
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| 体外研究 (In Vitro) |
利用CTX-0294885盐酸盐作为激酶捕获方法进行的大规模激酶组分析研究，在MDA-MB-231细胞中通过TiO2富集（定量质谱分析）发现了185种总蛋白激酶和179种磷酸化肽激酶[1]。所有先前使用其他激酶捕获试剂的研究未能鉴定的AKT家族成员均可被CTX-0294885盐酸盐捕获[1]。
在体外，CTX-0294885 盐酸盐通常不用于细胞活力检测，而是用作激酶捕获试剂。将 CTX-0294885 添加到三种常用激酶抑制剂的混合物中，可将激酶鉴定数量增加到 261 个，这是迄今为止报道的来自单一细胞系的最大激酶组覆盖率。结合磷酸肽富集和使用这四种抑制剂的亲和纯化，可以鉴定 183 个激酶上的 799 个高置信度磷酸化位点。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
盐酸CTX-0294885尚未进行直接体内疗效研究，其主要用途是体外蛋白质组学：将其固定在Sepharose珠上，构建亲和基质，用于从细胞裂解液或组织匀浆中进行激酶组分析。因此，该化合物的体内活性数据不适用。然而，已鉴定的激酶靶点可能与治疗药物的开发相关。
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| 酶活实验 |
体外酶结合实验（非细胞基、基于磁珠的亲和捕获）：CTX-0294885 的固定化：该化合物通过伯胺偶联与 NHS 活化的 Sepharose 磁珠结合。按照 NHS 活化 Sepharose 磁珠制造商（例如 Cytiva 公司）的说明，将 CTX-0294885 盐酸盐溶解于偶联缓冲液（0.2 M NaHCO3，0.5 M NaCl，pH 8.3）中，浓度为 1-5 mg/mL。洗涤 NHS-Sepharose 磁珠后，将其与 CTX-0294885 溶液在室温下孵育 2-4 小时，或在 4℃ 下过夜，期间需进行翻转混匀。未反应的 NHS 基团用 0.1 M Tris-HCl（pH 8.0）或 1 M 乙醇胺（pH 8.0）在室温下孵育 1 小时进行淬灭。将 CTX-0294885-琼脂糖珠用 PBS 充分洗涤，然后储存在含有 0.02% 叠氮化钠作为防腐剂的 PBS 中，温度为 4℃。从细胞裂解液中捕获激酶：将细胞（例如，MDA-MB-231，1×10⁸ 个细胞）在裂解缓冲液（50 mM HEPES，pH 7.5，150 mM NaCl，1 mM EDTA，1% NP-40，1 mM Na3VO4，1 mM NaF 和蛋白酶/磷酸酶抑制剂混合物）中裂解。测定蛋白质浓度（通常为 5-10 mg/mL）。将等量的细胞裂解液（例如，5 mg 总蛋白）与 50-100 uL（沉淀体积）的 CTX-0294885-琼脂糖珠在 4℃ 下轻柔旋转孵育过夜。用裂解缓冲液洗涤珠子 3 次，再用 PBS 洗涤 2 次。将珠子置于 SDS-PAGE 上样缓冲液（例如，2% SDS，50 mM DTT）中，95℃ 加热 5 分钟洗脱结合的蛋白。用胰蛋白酶消化洗脱的蛋白，并通过 LC-MS/MS 分析所得肽段，以鉴定和定量激酶。采用定量蛋白质组学方法（例如，SILAC 或 TMT 标记）比较不同样本的激酶组富集谱。该方案能够鉴定激酶靶点并评估其选择性。通过使用对照珠（例如，模拟偶联的 Sepharose 或抑制剂阴性的 Sepharose）来评估非特异性结合。
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| 细胞实验 |
对于基于细胞的检测，CTX-0294885 盐酸盐用于完整细胞的激酶组分析。细胞在裂解前用该化合物处理，然后按上述方法进行亲和捕获。然而，CTX-0294885 主要用作固定化亲和试剂，而非可溶性处理剂。对于细胞靶标结合研究：细胞用不同浓度的 CTX-0294885 盐酸盐（例如，0.1-10 uM）处理 1-4 小时。然后裂解细胞，并将裂解液与 CTX-0294885-琼脂糖珠孵育。与载体处理的对照组相比，激酶与琼脂糖珠结合的减少表明可溶性化合物的竞争性结合，从而可以评估细胞靶标结合情况并估算 EC50 值。可使用 CTX-0294885（0-20 uM，处理 24-72 小时）处理细胞，并通过细胞活力检测（MTT 或 CellTiter-Glo）评估其细胞毒性；然而，这并非其主要用途。通常情况下，CTX-0294885 在低浓度下不具有高细胞毒性，因为它是一种广谱 ATP 竞争性抑制剂，但在高浓度下可能会抑制关键激酶。作为参考，该化合物可用于鉴定可作为治疗靶点的激酶；任何已鉴定的激酶靶点均应使用更具选择性的抑制剂进行验证。
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| 动物实验 |
盐酸CTX-0294885不作为治疗剂直接用于体内动物研究；它是一种亲和蛋白质组学试剂。然而，如果使用CTX-0294885鉴定出感兴趣的激酶靶点，则应在合适的动物模型（例如，癌症异种移植模型）中，使用该靶点的选择性抑制剂进行体内疗效研究。CTX-0294885本身不用于动物疗效研究。如有必要，可向啮齿动物（例如小鼠，10-50 mg/kg，通过灌胃或腹腔注射）给药CTX-0294885盐酸盐进行药代动力学研究，并通过LC-MS/MS测定血浆浓度，但此类研究并非该试剂的标准方法。其主要用途是从经其他药物处理的动物的细胞或组织裂解液中进行体外亲和捕获。例如，可以裂解用新型药物治疗的荷瘤小鼠的组织，并将裂解液与 CTX-0294885-琼脂糖珠一起孵育，以分析治疗引起的激酶组变化。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
CTX-0294885 盐酸盐的分子量为 437.93 Da（游离碱）。CAS 编号：1439934-41-4（游离碱）。盐酸盐形式可提高水溶性。该化合物以固体（粉末）形式供应，应储存于 -20℃（长期储存：粉末 -20℃ 可保存 3 年，4℃ 可保存 2 年）。储备液应储存于 -80℃ 下，最长可保存 6 个月；或储存于 -20℃ 下，最长可保存 1 个月。溶解度：DMSO ≥ 90 mg/mL（完全溶解）；水：以盐酸盐形式溶解（待测试）。用于珠粒固定化时，通常将该化合物溶解于 DMSO 中配制成储备液（例如，10-50 mM），然后稀释于水性偶联缓冲液中。对于细胞处理，CTX-0294885 溶解于 DMSO 中，并稀释到培养基中；最终 DMSO 浓度应 ≤0.1% 以避免细胞毒性。对于激酶组分析，该化合物共价连接到 NHS 活化的 Sepharose 上，以生成稳定的亲和基质。必须优化固定化方案，以保持该化合物对多种激酶的结合活性。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
CTX-0294885 盐酸盐是一种仅供实验室使用的研究级化合物，不可用于人体诊断或治疗。在典型的研究浓度（细胞处理浓度为微摩尔级）下，该化合物被认为无毒；然而，作为一种广谱激酶抑制剂，在高浓度下可能会影响细胞增殖和存活。应遵循标准安全操作规程（佩戴手套、实验服和护目镜）。未经适当的毒理学评估，不得将该化合物用于体内给药。目前尚无急性毒性数据；动物实验应遵循标准化学品安全规程。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
CTX-0294885 盐酸盐（CAS 1439934-41-4）是一种广谱激酶抑制剂和亲和捕获试剂，专为全激酶组蛋白激酶分析而开发。主要特点：(1) 新型双苯胺基嘧啶骨架；(2) 广谱激酶抑制活性；(3) 可固定在琼脂糖凝胶珠上，用于从细胞裂解液中亲和纯化激酶；(4) 可从单个癌细胞系中鉴定 235-261 种激酶；(5) 已用于鉴定激酶上的磷酸化位点，包括 BMP2K、MELK、HIPK2 和 PRKDC 上先前未报道的磷酸化位点。常见应用：激酶组分析、激酶靶点发现、蛋白质组学和生物标志物鉴定。纯度：HPLC 纯度 >98.0%。该产品是一种强大的新型试剂，可用于分析激酶组信号网络，这可能有助于开发靶向治疗策略。
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| 分子式 |
C22H25CL2N7O
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|---|---|
| 分子量 |
474.39
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| 相关CAS号 |
CTX-0294885;1439934-41-4
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O :~55 mg/mL (~115.94 mM)
DMSO :~9.17 mg/mL (~19.33 mM) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 0.92 mg/mL (1.94 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 9.2 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 0.92 mg/mL (1.94 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 9.2 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 0.92 mg/mL (1.94 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 50 mg/mL (105.40 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1080 mL | 10.5399 mL | 21.0797 mL | |
| 5 mM | 0.4216 mL | 2.1080 mL | 4.2159 mL | |
| 10 mM | 0.2108 mL | 1.0540 mL | 2.1080 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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