| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
DNA Methyltransferase 32 nM (IC50) DNMT1 1.5 nM (Kd) DNMT3A 92 nM (IC50) DNMT3B 1000 nM (IC50) G9a 16 nM (IC50)
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| 体外研究 (In Vitro) |
CM-579 对 DNMT1 的 Kd 为 1.5 nM。 CM-579 同样抑制这些酶，DNMT3A 的 IC50 为 92 nM，DNMT3B 的 IC50 为 1000 nM[1]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
CM-272 (CM-579 类似物)在体内具有抗白血病作用。[1]
将all来源的CEMO细胞（10 × 106）静脉注射于免疫缺陷的Rag2−/−γ - c−/−小鼠，每天给予2.5 mg kg−1 CM-272，注射后3天开始，持续28天。对照动物按相同方案给予生理盐水。与对照动物相比，CM-272治疗诱导小鼠的总生存期（OS）有统计学意义的增加(中位OS；92±5.7天vs 55±10.5天；P=0.0009)（图4a）。测定全肝提取物中H3K9me2和5mC的水平。通过流式细胞术（FACS）分析肝脏匀浆中的肿瘤浸润情况，发现60-80%的人细胞（hCD45+）浸润。治疗1周后，从动物身上获得的白血病细胞中，这两种标记都降低了（补充图10f）。治疗后的动物没有明显的体重减轻（补充图10g）。我们在como -1细胞的第二次体内复制中获得了类似的结果（补充图11a）。为了分析CM-272在体内的剂量依赖性功效，我们重复了同样的研究，给药1 mg kg - 1 CM-272（补充图12）。我们没有观察到动物体重的差异（补充图12a），也没有观察到1 mg kg - 1或2.5 mg kg - 1 CM-272与对照组之间的血液学参数的显著变化（补充图12b）。正如预期的那样，在2.5 mg kg - 1 CM-272处理的小鼠组中，CM-272血浆浓度更高（补充图12c）。然而，与2.5 mg kg - 1 CM-272不同，1 mg kg - 1 CM-272不能延长小鼠的存活时间（补充图12d）。这些结果表明CM-272的有效性是剂量依赖性的，2.5 mg kg - 1剂量的CM-272足以显示出积极的抗肿瘤功效。在第二种异种模型中，将10 × 106个aml来源的MV4-11细胞静脉注射Rag2 - / - γ - c - / -小鼠，14天后的动物用2.5 mg kg -1 CM-272治疗28天。与ALL细胞一样，CM-272治疗延长了小鼠的生存期(治疗组和未治疗组的中位生存期分别为78±12天和57±0.9天；P=0.0005)（图4b）。我们在MV4-11细胞的第二次体内复制中获得了类似的结果（补充图11b），没有任何毒性迹象（补充图10h）。最后，将OCI-Ly10活化的b细胞DLBCL细胞系2.5 × 106个细胞同样静脉注射到Rag2−/−γc−/−小鼠体内。与对照组相比，在8周内用相同剂量的CM-272治疗也延长了治疗小鼠的生存期(中位生存期；59±8天vs 49±6天；P=0.010)（图4c）。我们在OCI-Ly10细胞的第二次体内复制中获得了类似的结果（补充图11c），没有任何毒性迹象（补充图10i）。虽然对淋巴瘤细胞的影响在统计学上是显著的，但其效果不如AML和ALL细胞那么强。这些结果表明，CM-272通过抑制G9a/GLP和dnmt的甲基转移酶活性，在体内对不同类型的血液系统恶性肿瘤具有有效的抗肿瘤活性。除了上述信息外，与其他sam依赖的表观遗传酶相比，最小的混杂性（补充表4a和4b），进一步对癌症中其他药物靶点的脱靶选择性分析（一组97种激酶，补充表12-14）证实了G9a（和GLP）和dnmt是CM-272的主要靶点。 |
| 酶活实验 |
G9a和DNMT1酶活性测定[1]
采用时间分辨荧光能量转移法（TR-FRET）测定G9a和DNMT1活性。对于G9a，在G9a酶促反应后，将生物素化组蛋白单甲基H3K9肽与crypate标记的抗二甲基组蛋白H3K9抗体和链亲和素XL665孵育，观察TR-FRET。对于DNMT1，将Lumi4-Tb（供体）标记的s -腺苷型同型半胱氨酸特异性抗体与d2标记的s -腺苷型同型半胱氨酸（受体）一起孵育，使用EPIgeneous methyltransferase assay，观察到TR-FRET。详情请参阅补充资料。 针对G9a、DNMT1和GLP的放射性配体结合试验由Reaction Biology Corporation （http://www.reactionbiology.com）进行。 表观遗传选择性面板[1] 选择性的cm - 272和CM-579 对37表观遗传酶目标包括Bromodomain-containing酶(ATAD2A、ATAD2B BAZ2B, BRD1, BRD2(1型+ BD2), BRD4(1型+ BD2), BRDT(1型),CREBBP, TRIM24, TAF1),组蛋白甲基转移酶(EZH1, EZH2, GLP、PRMT1 PRMT3, PRMT4, PRMT5, PRMT6, PRMT8, SETD2, SET7/9, SUV39H1, SUV39H2和MLL-WARD), DNA甲基转移酶(种能阻碍DNMT3B DNMT3A和)和组蛋白demethylase (JMJD2A、JMJD2B JMJD2C, JMJD2D, JMJD2E, JMJD3, JMJD1A, LSD1, Jarid1A,Jarid1B和Jarid1C)由BPS Bioscience （http://www.bpsbioscience.com/index.ph）进行。 HDAC1和HDAC6酶活性测定[1] HDAC1和HDAC6酶的活性是用特定的荧光标记的底物来测定的，底物含有乙酰化的赖氨酸侧链，经过hdac去乙酰化。详情请参阅补充资料。 激酶选择性分析[1] 在DiscoverRx （http://www.discoverx.com/home）上使用KINOMEscan筛选平台，在10 μM的测试浓度下，对分布在kinome中的97个选定的激酶（其中90个是非突变激酶）进行CM-272的选择性分析。 直接结合分析[1] 采用微尺度热泳术（MST）定量CM-579 与DNMT1（全长）之间的生物分子相互作用。MST分析使用Monolith NT.115仪器进行。 ADME分析[1]< br > 以下ADME研究：CYP对人肝微粒体5种细胞色素p450 （1A2, 2C9, 2C19, 2D6和3A4, 10 μM）的抑制作用，血浆蛋白结合，动力学溶解度，Pampa渗透性和人和小鼠肝微粒体稳定性的研究由无锡公司（http://www.wuxi.com/）完成。 hERG阻断试验[1] 使用PredictorTM hERG荧光偏振商业检测试剂盒测定化合物对hERG钾通道的影响。 |
| 细胞实验 |
细胞增殖测定[1]
细胞类型： CEMO-1、MV4-11 和 OCI-Ly10 细胞系 测试浓度： 125 nM、250 nM , 500 nM（CEMO-1 细胞）； 135 nM、270 nM、540 nM（MV4-11 细胞）； 100 nM、400 nM、1000 nM（OCI-Ly10 细胞） 孵育时间：12 小时、24 小时、48 小时和 72 小时 实验结果：以剂量和时间依赖性方式抑制细胞增殖。 细胞周期分析 [1] 细胞类型： CEMO-1、MV4-11 和 OCI-Ly10 细胞系 测试浓度： > 125 nM、250 nM、500 nM（CEMO-1 细胞）； 135 nM、270 nM、540 nM（MV4-11 细胞）； 100 nM、400 nM、1000 nM（OCI-Ly10 细胞） 孵育时间： 24 小时 实验结果： 阻断细胞周期进程。 细胞凋亡分析[1] 细胞类型： CEMO-1、MV4-11 和 OCI-Ly10 细胞系 测试浓度： 125 nM、250 nM、500 nM（CEMO-1 细胞）； 135 nM、270 nM、540 nM（MV4-11 细胞）； 100 nM、400 nM、1000 nM（OCI-Ly10 细胞） 孵育时间：12 小时、24 小时、48 小时和 72 小时 实验结果：以剂量和时间依赖性方式诱导 ALL、AML 和 DLBCL 细胞系凋亡。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： 雌性 BALB/Ca-Rag2−/−γc−/− 小鼠（6-8 周龄），接种 CEMO-1 细胞[1]
剂量： 2.5 mg/kg 给药途径： 静脉注射；每日一次；持续 28 天 实验结果： 可显著提高小鼠的总生存期 (OS)。 CM-272 和 CM-579 在血浆样本中的药代动力学研究 [1] 使用配备电喷雾电离 (ESI) 源的 Xevo-TQ MS 三重四极杆质谱仪和 Acquity UPLC 测定血浆样本中的 CM-272 和 CM-579。将CM-272和CM-579固体溶于生理盐水中配制成溶液。单次静脉注射给药，药物剂量分别为1 mg kg⁻¹或2.5 mg kg⁻¹（CM-272）或1 mg kg⁻¹（CM-579）。在注射后24小时内，于预定时间点采集血液样本（CM-272：0.25、2、4、6、8和24小时；CM-579：0.25、1、2、4和8小时）。采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱（50 × 2.1 mm，1.7 μm粒径），以0.6 ml min⁻¹的流速进行梯度洗脱，实现色谱分离。使用WinNonlin软件，将血药浓度-时间数据拟合到非房室模型，获得药代动力学参数。详细信息见补充信息。 体内实验[1] 人急性淋巴细胞白血病（ALL）CEMO-1（生理盐水对照组，n=6；CM-272治疗组，n=6）、急性髓系白血病（AML）MV4-11（生理盐水对照组，n=8；CM-272治疗组，n=8）和弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）OCI-Ly10（生理盐水对照组，n=6；CM-272治疗组，n=6）异种移植小鼠模型的构建方法如下：将细胞稀释于100 μl生理盐水中，经尾静脉注射至6-8周龄雌性BALB/cA−Rag2−/−γc−/−小鼠体内，具体方法见补充信息。CM-272的给药方法详见补充信息。统计分析采用medcalc统计软件进行。 CM-272 毒性试验：血液学和肝脏参数[1] 在对 Rag2−/−γc−/− 小鼠进行 4 周的每日静脉注射 2.5 mg kg−1 CM-272 治疗后，经过 7 天的洗脱期，按照补充信息中所述测量血液学和肝脏参数。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在进行药代动力学研究之前，研究人员确定了CM-272的最大耐受剂量（MTD），为2.5 mg kg⁻¹（静脉注射）；然而，对于CM-579，我们无法给予高于1 mg kg⁻¹（静脉注射）的剂量。研究人员使用MTD剂量进行的药代动力学研究（补充表9-11）显示，CM-579的清除率为5.7 L h⁻¹ kg⁻¹，CM-272的清除率为0.91 L h⁻¹ kg⁻¹。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在评估我们双重抑制剂的体内疗效之前，研究人员考察了这两种分子的治疗窗口及其药代动力学 (PK) 参数。因此，我们使用非肿瘤性肝细胞系 THLE-2（LC50 分别为 1.78 和 1.30 μM）以及来自健康供体的外周血单核细胞 (PBMC)（LC50 分别为 1.90 和 7.39 μM）（补充表 2）研究了 CM-272 和 CM-579 的毒性，并将其与体外抗肿瘤细胞系的活性进行了比较（补充表 3）。研究人员发现，CM-272 和 CM-579 均具有可接受的治疗窗口（约 1 个对数单位）。在进行药代动力学研究之前，我们确定了CM-272的最大耐受剂量（MTD），为2.5 mg kg⁻¹（静脉注射）；然而，对于CM-579，研究人员无法给予超过1 mg kg⁻¹（静脉注射）的剂量。我们使用MTD剂量进行的药代动力学研究（补充表9-11）显示，CM-579的清除率为5.7 L h⁻¹ kg⁻¹，CM-272的清除率为0.91 L h⁻¹ kg⁻¹。[1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
CM-272 属于氨基喹啉类化合物，其喹啉衍生物的 2、4、6 和 7 位分别被 5-甲基呋喃-2-基、(1-甲基哌啶-4-基)氨基、甲氧基和 3-(吡咯烷-1-基)丙氧基取代。它是一种具有抗肿瘤活性的双重 G9a/DNA 甲基转移酶抑制剂。它能抑制 G9a、DNMT1、DNMT3A、DNMT3B 和 GLP（IC50 值分别为 8 nM、382 nM、85 nM、1200 nM 和 2 nM）。它具有诱导细胞凋亡、诱导铁死亡、抗肿瘤、抑制EC 2.1.1.43（增强子Zeste同源物2）和抑制EC 2.1.1.37（DNA（胞嘧啶-5-）甲基转移酶）等活性。它是一种N-烷基吡咯烷类化合物，属于呋喃类、氨基喹啉类、芳香醚类、哌啶类、叔胺类、仲胺类和二醚类化合物。
表观遗传学在癌症中发挥着不可否认的作用，且表观遗传改变具有可逆性，这促进了表观遗传药物的研发。本研究设计并合成了高效、新型、选择性强且可逆的化学探针，可同时抑制G9a和DNMTs甲基转移酶的活性。体外实验表明，先导化合物CM-272可抑制血液肿瘤（急性髓系白血病-AML、急性淋巴细胞白血病-ALL和弥漫性大B细胞淋巴瘤-DLBCL）细胞增殖并促进细胞凋亡，诱导干扰素刺激基因表达和免疫原性细胞死亡。CM-272显著延长了AML、ALL和DLBCL异种移植模型的生存期。我们的研究成果首次发现了G9a/DNMTs双重抑制剂，并证实该系列化合物有望成为血液肿瘤治疗领域亟待解决的难题。[1]转录组分析结果一致表明，CM-272处理后，AML、ALL和DLBCL细胞均出现肿瘤I型干扰素反应，伴有ISG表达和免疫原性细胞死亡（ICD）的诱导，提示其具有共同的抗肿瘤作用机制。尽管免疫原性细胞死亡（ICD）尚未被描述为表观遗传药物的作用机制，但这些结果或许至少部分可以预测，因为近期研究表明，干扰素刺激基因（ISG）的表达受H3K9me2的表观遗传调控（参考文献30），这支持了G9a抑制在激活I型干扰素反应和ICD中的作用。因此，我们推测，使用无法产生抗肿瘤免疫反应的免疫缺陷小鼠可能低估了CM-272对肿瘤细胞的疗效，因此需要评估免疫功能正常的模型，以探索我们化合物的全部潜在治疗效果33。基于近期研究表明I型干扰素反应有助于提高化疗药物的疗效32，CM-272与此类药物和/或免疫调节剂（例如检查点抑制剂）联合使用可能是一种有吸引力的治疗策略。 总之，CM-272是一种强效的新型首创双重可逆抑制剂，可抑制G9a (GLP)和DNMTs，它至少部分通过诱导免疫原性细胞死亡来延长血液系统恶性肿瘤体内模型的生存期。这些化合物代表了一种安全有效地靶向癌症的新方法，为治疗多种预后不良的人类肿瘤铺平了道路。[1] |
| 分子式 |
C29H43CL3N4O3
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|---|---|
| 分子量 |
602.04
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| 精确质量 |
600.2400
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| CAS号 |
2448471-08-5
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| 相关CAS号 |
CM-579;1846570-40-8
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| PubChem CID |
138454770
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| tPSA |
63Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
10
|
| 重原子数目 |
39
|
| 分子复杂度/Complexity |
654
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
XKSDREMVFCQUPC-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C29H40N4O3.3ClH/c1-21-7-8-27(36-21)26-18-24(30-20-22-9-14-32(2)15-10-22)23-17-28(34-3)29(19-25(23)31-26)35-16-6-13-33-11-4-5-12-33;;;/h7-8,17-19,22H,4-6,9-16,20H2,1-3H3,(H,30,31);3*1H
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| 化学名 |
6-methoxy-2-(5-methylfuran-2-yl)-N-[(1-methylpiperidin-4-yl)methyl]-7-(3-pyrrolidin-1-ylpropoxy)quinolin-4-amine;trihydrochloride
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| 别名 |
CM-579 trihydrochloride; CM579 triHCl; CM 579 3HCl; 2448471-08-5;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O :~37.5 mg/mL (~62.29 mM)
DMSO :~33.33 mg/mL (~55.36 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.15 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.15 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: 16.67 mg/mL (27.69 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶 (<60°C). 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.6610 mL | 8.3051 mL | 16.6102 mL | |
| 5 mM | 0.3322 mL | 1.6610 mL | 3.3220 mL | |
| 10 mM | 0.1661 mL | 0.8305 mL | 1.6610 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
BI-9466
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SKLB-03220
(Rac)-NSD2-PWWP1-IN-4
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