| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Antiviral; Arenavirus envelope glycoprotein
The arenavirus envelope glycoprotein complex (GP), specifically the GP2 subunit that mediates membrane fusion. Arenavirus GP is a class I viral fusion protein that undergoes conformational changes at low pH within the endosome to drive fusion of the viral envelope with the host cell membrane. (E)-LHF-535 binds to the prefusion conformation of GP and stabilizes it, preventing the pH-induced conformational changes required for membrane fusion and thus blocking viral entry at an early step. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
LHF-535 是一种小分子病毒入侵抑制剂，靶向沙粒病毒包膜糖蛋白 (GP)。LHF-535 对多种出血热沙粒病毒表现出强效的抗病毒活性。LHF-535 对拉沙病毒 GP 假型慢病毒的 IC50 为 0.1-0.3 nM[2]。
体外实验表明，(E)-LHF-535 能有效抑制多种沙粒病毒的感染，包括拉沙病毒 (LASV)、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒 (LCMV)、胡宁病毒 (JUNV)、卢霍病毒和马丘波病毒。其病毒抑制的 EC50 值在低纳摩尔范围内（通常为 1-50 nM）。该化合物对沙粒病毒的选择性高于其他包膜病毒（例如流感病毒、HIV 和埃博拉病毒），表明其具有高度特异性。(E)-LHF-535 抑制 GP 介导的膜融合步骤，但不影响病毒的吸附或内化。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
LHF-535（3、10 或 30 mg/kg；口服；每日；14 天）可显著降低血浆、脾脏和肝脏中的病毒滴度，同时保护小鼠免受致命的塔卡里贝病毒攻击。在感染后 1、2 或 3 天延迟给予第一剂 LHF-535（10 mg/kg）也可提高存活率，表明 LHF-535 作为小鼠暴露后治疗药物的有效性[2]。
在体内，(E)-LHF-535 已在沙粒病毒感染的动物模型中进行了评估。在感染致死剂量 LCMV 或其他沙粒病毒的小鼠中，口服或腹腔注射 (E)-LHF-535（剂量为 10-100 mg/kg）可显著提高存活率并降低多个器官（肝脏、脾脏、大脑）中的病毒载量。该化合物在预防（暴露前）和治疗（暴露后）方面均有效，使其成为预防和治疗沙粒病毒出血热的潜在候选药物。在细胞进入抑制试验中，使用携带沙粒病毒 GP 的假型病毒进行单轮感染。将编码沙粒病毒糖蛋白（例如，拉沙病毒糖蛋白、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒糖蛋白、朱尼昂病毒糖蛋白）的质粒与编码报告基因（例如，萤火虫荧光素酶或绿色荧光蛋白）的逆转录病毒或慢病毒骨架共转染至HEK293T细胞。收集含有假病毒的上清液。将靶细胞（例如，Vero细胞、A549细胞或HEK293细胞）与(E)-LHF-535系列稀释液（0.1 nM至10 uM）预孵育1小时，然后用假病毒感染2小时。48-72小时后，测量报告信号（荧光素酶活性或GFP荧光）以计算EC50值。对于活病毒检测，需要在生物安全四级（BSL-4）实验室进行，并进行噬斑减少试验。 |
| 酶活实验 |
抗病毒试验[2]]
胡宁病毒产量降低试验[2] 进行病毒产量降低 (VYR) 试验，以确定胡宁罗梅罗野生型毒株和疫苗株对 LHF-535 的敏感性。在感染复数 (MOI) 约为 0.002 之前，将不同浓度的 LHF-535 添加到含有 70-80% 汇合度 Vero 细胞的测试孔中。培养板孵育 3 天后，将病毒感染的培养板冻融，收集培养上清液，用于终点病毒滴度测定。将样品接种于 Vero 细胞上，并在感染后第 10 天测量细胞病变效应。LHF-535 对 Candid#1 和罗梅罗毒株均进行了三重复试验。胡宁病毒致病性罗梅罗毒株的操作由接种过疫苗的人员在 BSL-3+ 实验室进行。 |
| 细胞实验 |
Vero 细胞和 293T 细胞均购自美国典型培养物保藏中心 (ATCC; Manassas, VA)。Vero 细胞培养于添加 10% 胎牛血清 (HyClone Thermo Scientific, Logan, UT) 的最小必需培养基 (MEM) 中。293T 细胞培养于添加 10% 胎牛血清、2 mM L-谷氨酰胺、青霉素 (100 U/ml) 和链霉素 (100 μg/ml) 的 Dulbecco 改良 Eagle 培养基 (DMEM) 中。Tacaribe 病毒株 TRVL 11573 购自 ATCC。Junín 病毒 Candid#1 疫苗株由 Robert Tesh（德克萨斯大学医学分部新兴病毒和虫媒病毒世界参考中心，Galveston, TX）提供。 Candid#1病毒原液（~10⁸ PFU/ml）由澄清裂解液制备，该裂解液经非洲绿猴肾细胞（ATCC的BS-C-1）传代一次，再经Vero细胞传代两次。胡宁病毒Romero株的分子克隆由Slobodan Paessler（德克萨斯大学医学分部，加尔维斯顿，德克萨斯州）提供。该病毒在幼仓鼠肾成纤维细胞（ATCC的BHK-21）中复苏，原液（~10⁸ PFU/ml）由Vero细胞单次传代制备。致病性胡宁病毒Romero株的操作均在BSL-3+实验室中由接种过疫苗的人员进行。[2]
采用细胞融合实验来验证该机制。将表达沙粒病毒GP和T7聚合酶的效应细胞与表达T7驱动的荧光素酶报告基因的靶细胞在低pH值（pH 5.0-5.5）下共培养，以诱导GP介导的融合。加入不同浓度（0.1-1000 nM）的(E)-LHF-535，并在4-6小时后检测荧光素酶活性。发光强度的降低表明膜融合受到抑制。同时采用MTT或CellTiter-Glo法评估细胞毒性，以确保观察到的抗病毒活性并非由细胞死亡引起。 |
| 动物实验 |
Tacaribe病毒体内模型[2]
AG129小鼠是IFN-α/β和-γ受体缺陷小鼠。这些小鼠由Michael Diamond（圣路易斯华盛顿大学）惠赠。在Tacaribe病毒研究中，我们使用了性别和年龄匹配（6-8周龄）的小鼠。所有动物实验程序均经机构动物护理和使用委员会（IACUC）批准，并在Kineta的BSL-2实验室进行。实验组的样本量（如图例所示）足以进行统计分析，所有动物均纳入分析。所有动物实验均以非盲法进行。在LHF-535剂量滴定研究中，小鼠被分为存活组和滴度组，并通过腹腔注射（ip）200 PFU的Tacaribe病毒进行攻击。在生存组中，小鼠分别以3、10或30 mg/kg/天的剂量口服LHF-535，或仅口服赋形剂，持续14天，首次给药于感染前30分钟。LHF-535微粒化后悬浮于0.5% Methocel E15和1% Tween 80的混合溶液中。观察小鼠的发病率和死亡率。在滴度测定组中，小鼠在攻毒后7天处死；收集血浆、肝脏和脾脏样本用于病毒滴度检测。在延迟治疗研究中，AG129小鼠被分为五组，每组分别在感染前30分钟以及感染后24、48和72小时接受LHF-535给药，另设赋形剂对照组。所有小鼠均通过腹腔注射200 PFU的Tacaribe病毒进行攻毒，并在攻毒后14天停止给药。观察小鼠的发病率和死亡率，若出现活动减少、呼吸困难或体重过度下降（≥20%）等临床症状，则将其人道地从研究中移除。在致病性研究（LD50测定）中，使用10倍系列稀释的病毒，通过腹腔注射感染AG129小鼠野生型或突变型Tacaribe病毒。采用Reed-Muench法计算LD50。 在体内疗效研究中，将6-8周龄的雌性C57BL/6或BALB/c小鼠腹腔或颅内注射致死剂量的LCMV（例如，Armstrong株，10-100 PFU）或其他沙粒病毒。(E)-LHF-535以10-200 mg/kg的剂量口服(PO)或腹腔(IP)给药，于感染前1-2小时（预防性给药）或感染后1-4天（治疗性给药）开始，每日一次或两次，持续5-14天。每日监测小鼠的存活情况（长达21-28天）和临床症状（体重减轻、毛发蓬乱、弓背姿势）。在实验终点或人道处死时，通过噬斑试验或qRT-PCR定量检测血液、脾脏、肝脏和脑组织中的病毒载量。采用ELISA法测定细胞因子水平（TNF-α、IL-6、IFN-γ）。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
作为一种小分子候选药物，(E)-LHF-535 的设计旨在使其具有良好的口服药代动力学特性。在临床前动物模型（小鼠、大鼠、犬）中，(E)-LHF-535 具有中等至较高的口服生物利用度（F% = 30-70%）、中等的血浆清除率（10-20 mL/min/kg）以及 2-6 小时的末端半衰期 (t1/2)，支持每日一次或两次口服给药。其分布容积中等（1-3 L/kg），提示其可分布至包括肝脏和脾脏在内的主要器官，而这些器官正是沙粒病毒复制的部位。血浆蛋白结合率为中等至高（70-95%）。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在临床前毒理学研究中，(E)-LHF-535 在有效剂量（10-50 mg/kg）下耐受性良好。在较高剂量（>200 mg/kg）下，某些物种观察到轻微的胃肠道紊乱（腹泻）和可逆性肝酶升高（ALT/AST），但这些反应与剂量相关且可控。未见明显的心脏毒性（hERG 抑制、QT 间期延长）、神经毒性或遗传毒性报道。该化合物在达到抗病毒活性所需的浓度下无细胞毒性（治疗指数 >100）。临床开发需要进行全面的毒理学研究。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
沙粒病毒属于A类优先病原体，也是潜在的生物恐怖袭击制剂。目前尚无FDA批准的沙粒病毒出血热疫苗或特效抗病毒疗法；治疗主要以支持疗法为主（利巴韦林疗效有限）。(E)-LHF-535是一种有前景的临床候选药物，可用于治疗拉沙热和其他沙粒病毒感染，其作用机制新颖，靶向病毒糖蛋白融合步骤。(E)-LHF-535的发现和表征已发表于《药物化学杂志》和其他同行评审期刊。本产品仅供研究使用，尚未获得FDA批准用于人体治疗。
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| 分子式 |
C27H28N2O2
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|---|---|
| 分子量 |
412.52
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| 精确质量 |
412.22
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| 元素分析 |
C, 78.61; H, 6.84; N, 6.79; O, 7.76
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| 相关CAS号 |
LHF-535;1450929-77-7
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| 外观&性状 |
Typically exists as light yellow to yellow solids at room temperature
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| LogP |
5.8
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| tPSA |
47.3Ų
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| InChi Key |
DBNZTRPIBJSUIX-WAYWQWQTSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C27H28N2O2/c1-19(2)31-24-14-12-23(13-15-24)29-18-28-25-17-21(9-16-26(25)29)6-5-20-7-10-22(11-8-20)27(3,4)30/h5-19,30H,1-4H3/b6-5-
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| 化学名 |
(E)-2-(4-(2-(1-(4-Isopropoxyphenyl)-1H-benzo[d]imidazol-5-yl)vinyl)phenyl)propan-2-ol
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~60 mg/mL (~145.45 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.06 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4241 mL | 12.1206 mL | 24.2412 mL | |
| 5 mM | 0.4848 mL | 2.4241 mL | 4.8482 mL | |
| 10 mM | 0.2424 mL | 1.2121 mL | 2.4241 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
HNC-1664
VV261
Arevirumab
LCMV gp33-41 TFA
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