Antitubercular antibiotic

吡嗪酰胺对正在生长的结核分枝杆菌呈惰性，除非在酸性 pH 环境中，并且在体内显示出相当大的功效。酸性 pH 值会增加结核分枝杆菌细胞内 POA（PZA 的活性衍生物）的积累。据认为，POA 在酸性 pH 水平下会干扰结核分枝杆菌的膜能量并损害膜转运功能 [1]。

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Pyrazinamide/吡嗪酰胺(PZA)是一种重要的抗结核药物。与大多数抗菌药物不同，PZA尽管在体内表现出显著活性，但在体外除酸性pH条件下对结核分枝杆菌无活性。结核分枝杆菌对PZA具有独特敏感性，而其他分枝杆菌和非分枝杆菌则具有固有耐药性。酸性pH在PZA作用中的角色以及结核分枝杆菌对PZA独特敏感性的基础尚不清楚。我们发现，在结核分枝杆菌中，酸性pH通过吡嗪酰胺酶将PZA转化为活性衍生物吡嗪酸(POA)后，能增强POA的胞内积累。相反，在中性或碱性pH条件下，POA主要存在于结核分枝杆菌细胞外。耐PZA的结核分枝杆菌复合体不能将PZA转化为POA。与结核分枝杆菌不同，固有耐PZA的耻垢分枝杆菌虽能转化PZA为POA，但由于存在活跃的POA外排机制，即使在酸性pH下也无法积累POA。我们提出，POA外排机制缺陷是结核分枝杆菌对PZA独特敏感性的基础，而耻垢分枝杆菌的天然PZA耐药性则归因于高活性的外排泵。这些发现可能对新型抗分枝杆菌药物的设计具有指导意义。[1]

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Pyrazinamide/吡嗪酰胺(PZA)是一种独特的抗结核药物，在缩短结核疗程中起关键作用。PZA能杀灭其他结核药物无法杀灭的非复制持续菌，这使其成为治疗药物敏感结核和耐药结核(如耐多药结核)的任何药物组合中必不可少的成分。PZA通过抑制能量产生、反式翻译等多个靶点，可能还包括持续菌生存所需的泛酸/辅酶A，其作用方式不同于常规抗生素。PZA耐药性主要由编码吡嗪酰胺酶的pncA基因突变引起，该酶参与前药PZA向活性形式吡嗪酸的转化。在某些PZA耐药菌株中也发现了药物靶点核糖体蛋白S1(RpsA)的突变。最近发现，部分不携带pncA或rpsA突变的PZA耐药菌株存在panD突变，这可能提示第三个PZA耐药基因和潜在的新作用靶点。目前基于表型的PZA药敏试验因假耐药问题不可靠；pncA基因测序作为一种更快速、经济、可靠的分子检测方法，应用于PZA药敏测试，可指导改进耐多药和广泛耐药结核的治疗。最后，PZA的研究不仅对结核治疗，也对整个化疗领域具有重要启示。PZA作为靶向持续菌的药物原型和潜在的"转折点"，有望启发开发新型抗生素或药物，用于改进结核及其他持续性细菌感染的治疗。[2]

Pyrazinamide/吡嗪酰胺(PZA)在敏感和耐药结核分枝杆菌复合体中的积累与转化[1]
将生长于Sauton培养基2-3周的结核分枝杆菌H37Ra和牛分枝杆菌BCG培养物收获后，用Sauton培养基洗涤，并将细胞沉淀重悬于pH 6.6的Sauton培养基(5×10^9细胞/ml)。向细胞悬液中加入[14C]PZA至1μCi/ml浓度，37°C孵育。不同时间点取50μl样品，通过真空泵在0.45μm孔径硝酸纤维素滤膜上用Sauton培养基洗涤。通过闪烁计数测定细菌细胞相关的放射性量。

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利血平和缬氨霉素对耻垢分枝杆菌和结核分枝杆菌中POA积累的影响[1]
在pH 6.6的7H9液体培养基中，向浓缩细菌悬液(5×10^9细胞/ml)加入[14C]Pyrazinamide/PZA至终浓度2μCi/ml。耻垢分枝杆菌细胞与[14C]PZA孵育1分钟后，加入亚致死浓度利血平(20μM)，使大量PZA被细胞摄取并转化为POA。加入利血平后不同时间点取50μl样品，真空条件下点样于0.45μm孔径硝酸纤维素膜上。由于缓冲液洗涤会去除细胞相关的[14C]POA，故采用真空抽滤去除上清而不洗涤。剪取细胞悬液点样区域测定放射性。用相同方法(含10mM钾离子)测定亚致死浓度缬氨霉素(1μM)的作用。研究利血平和缬氨霉素对结核分枝杆菌[14C]POA积累影响时方法类似，但有以下修改：加入[14C]PZA 2小时后加入利血平(50μM)和缬氨霉素(1μM)以确保PZA充分转化为POA。取50μl悬液过滤后，用含0.1M LiCl的0.1M磷酸钾缓冲液(pH 7.0)洗涤膜上放射性细胞两次。

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pH对结核分枝杆菌中[14C]PZA转化和[14C]POA积累的影响[1]
将生长于添加白蛋白-葡萄糖-过氧化氢酶的7H9液体培养基的对数后期结核分枝杆菌H37Ra培养物(2-3周龄)离心，细胞重悬于不同pH值的7H9培养基(约5×10^9/ml)。加入[14C]PZA至2.5μCi/ml浓度。37°C孵育约16小时后，对经PBS洗涤的浓缩细菌细胞超声裂解制备的上清液和细菌裂解液进行薄层色谱分析(TLC)和放射自显影(方法见下文)。为检测pH对结核分枝杆菌细胞中POA积累的影响，向不同pH值的细菌悬液中加入[14C]POA(1μCi/ml)。不同时间点取50μl样品，经0.45μm孔径硝酸纤维素膜过滤，用含0.1M LiCl的0.1M磷酸钾缓冲液(pH 7.0)洗涤。本实验及其他实验中，细胞相关放射性均通过闪烁计数测定。POA的胞内浓度按1mg干细胞相当于3μl内水计算。

吸收、分布和排泄
吡嗪酰胺在胃肠道吸收迅速且良好。
口服剂量约70%经尿液排出，主要通过肾小球滤过，24小时内即可排出。
吡嗪酰胺在胃肠道吸收良好，并广泛分布于全身。口服500毫克后，2小时血浆浓度约为9-12微克/毫升，8小时约为7微克/毫升。
吡嗪酰胺在胃肠道吸收良好。健康成人单次口服500毫克后，2小时内血浆吡嗪酰胺浓度达到峰值，范围为9-12微克/毫升；8小时血浆平均浓度为7微克/毫升，24小时平均浓度为2微克/毫升。据报道，服用 20-25 mg/kg 剂量后，血浆浓度范围为 3-50 ug/ml。吡嗪酰胺的主要活性代谢物吡嗪酸的血浆浓度通常高于其母体药物，并在口服给药后4-8小时内达到峰值。
在一项针对健康空腹男性进行的单剂量研究中，异烟肼、利福平和吡嗪酰胺的吸收程度（以血浆浓度-时间曲线下面积衡量）在250毫克、600毫克或1500毫克剂量下，无论药物是以胶囊（利福平）或片剂（异烟肼和吡嗪酰胺）的形式单独给药，还是以每片含异烟肼50毫克、利福平120毫克和吡嗪酰胺300毫克的固定复方制剂的形式给药，均相似。
吡嗪酰胺广泛分布于包括肝脏、肺和脑脊液在内的身体组织和体液中。在少数患有结核性脑膜炎的成年患者中，口服约 41 mg/kg 吡嗪酰胺 2 小时后，血清和脑脊液中吡嗪酰胺的平均浓度分别为 52 μg/ml 和 39 μg/ml。据报道，口服给药 5 小时后，脑脊液中吡嗪酰胺的浓度与同期血浆中的药物浓度大致相等。在少数健康男性中，吡嗪酰胺的血浆蛋白结合率（通过超滤法测定）在 20 μg/ml 的吡嗪酰胺浓度下平均约为 17%。目前尚不清楚吡嗪酰胺是否能通过胎盘。吡嗪酰胺是否会分泌到乳汁中尚不清楚。
有关吡嗪酰胺（共12种）的更多吸收、分布和排泄（完整）数据，请访问HSDB记录页面。

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代谢/代谢物
肝脏代谢。
吡嗪酰胺水解为吡嗪酸，随后羟基化为5-羟基吡嗪酸，后者是主要的排泄产物。
吡嗪酰胺的主要代谢途径是转化为吡嗪酸，随后转化为羟基吡嗪酸，该反应由黄嘌呤氧化酶催化。
8名健康志愿者接受了单次35 mg/kg剂量的吡嗪酰胺治疗。本研究旨在评估该产品及其代谢物的药代动力学特征。收集尿液和血液样本直至60小时。吡嗪酰胺的药代动力学特征如下：CPmax = 50.1 μg/ml，tmax < 1 h，t1/2α = 3.2 h，t1/2β = 23 h，U(0-60 h) = 给药剂量的 1.6%。其主要代谢物吡嗪酸的药代动力学特征如下：CPmax = 66.6 μg/ml，tmax = 4 h，t1/2β = 12.3 h，U(0-60 h) = 给药剂量的 37.5%。所有现有数据均支持吡嗪酰胺代谢物吡嗪酸 (PA) 是抗结核分枝杆菌的活性成分这一观点。咖啡因是一种广泛使用的药物，也是大多数饮食中的常见成分，它与吡嗪酰胺 (PZA) 共享同一种代谢酶——黄嘌呤氧化酶 (XO)。

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生物半衰期
9-10 小时（正常情况下）
肾功能正常的患者血浆半衰期为 9-10 小时。
吡嗪酰胺的半衰期为 23 小时。……消除半衰期为 10 至 16 小时。
肾功能和肝功能正常的患者血浆半衰期为 9-10 小时。肾功能或肝功能受损的患者，该药物的血浆半衰期可能会延长。

肝毒性
使用吡嗪酰胺进行结核病联合治疗通常会导致血清转氨酶水平短暂且无症状升高。这些升高通常低于正常值上限的五倍。由于吡嗪酰胺仅与其他抗结核药物联合使用，其对血清酶升高的影响尚不完全清楚，但它常被认为是导致短暂性血清酶升高的原因。吡嗪酰胺治疗也会出现临床上明显的肝脏疾病，伴有症状和黄疸，因此在接受双联或三联抗结核治疗的情况下，吡嗪酰胺常被认为是导致肝损伤的罪魁祸首（病例1）。事实上，由于利福平联合吡嗪酰胺治疗潜伏性结核病的短期（2个月）联合疗法常导致严重的肝损伤，甚至危及生命，因此该疗法已被弃用（病例2）。吡嗪酰胺引起的肝损伤通常在用药 4 至 8 周后出现，有时仅在停药后才显现。肝酶升高模式通常为肝细胞性，临床表现类似于急性病毒性肝炎，与异烟肼肝毒性非常相似。超敏反应（皮疹、发热和嗜酸性粒细胞增多）以及自身抗体形成并不常见。肝活检显示急性肝炎的典型改变，包括门静脉和肝小叶炎症、肝细胞坏死以及不同程度的胆汁淤积。
可能性评分：A（临床上明显的肝损伤的已知病因）。

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妊娠和哺乳期影响
◉ 哺乳期用药概述
有限的信息表明，孕妇服用吡嗪酰胺可能会导致乳汁中药物浓度显著升高。如果哺乳期妇女服用此药，应监测纯母乳喂养的婴儿，以防出现罕见的黄疸、肝炎和关节痛病例。母乳中的吡嗪酰胺含量可能不足以治疗母乳喂养婴儿的结核病，但如果母亲和母乳喂养的婴儿都在服用此药，则应监测婴儿血清中的药物浓度，以评估是否存在过高的婴儿血清浓度。美国疾病控制与预防中心和其他专业机构指出，服用吡嗪酰胺的妇女不应停止母乳喂养。
◉ 对母乳喂养婴儿的影响
吡嗪酰胺作为多药联合疗法的一部分，用于治疗两名患有多重耐药结核病的孕妇，治疗贯穿整个孕期和产后。她们的两个婴儿均接受了母乳喂养（未说明喂养程度和持续时间）。两名儿童分别在1岁25个月和5岁1个月大时发育正常。
土耳其两名母亲分别在妊娠第30周和第34周被诊断出患有结核病。她们立即开始服用异烟肼300毫克、利福平600毫克和吡哆醇50毫克，每日一次，持续6个月；同时，她们还服用吡嗪酰胺25毫克/公斤和乙胺丁醇25毫克/公斤，每日一次，持续2个月。两名母亲都进行了母乳喂养（喂养程度未说明）。她们的婴儿接受了异烟肼5毫克/公斤的预防性治疗，每日一次，持续3个月。3个月后，结核菌素皮肤试验结果为阴性，两名婴儿在1岁时均未患结核病。未提及药物不良反应。
◉ 对哺乳和母乳的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。

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蛋白结合率
~10%（与血浆蛋白结合）

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药物相互作用
吡嗪酰胺可能升高血清尿酸浓度并降低痛风治疗的疗效；当吡嗪酰胺与抗痛风药物同时使用时，可能需要调整别嘌醇、秋水仙碱、丙磺舒、磺吡酮等药物的剂量以控制高尿酸血症和痛风。
与吡嗪酰胺同时使用可能降低环孢素的血清浓度，可能导致免疫抑制不足；应监测环孢素血清浓度。
一名35岁的索马里黑人女性，患有粟粒性结核病，在接受异烟肼、利福平、吡嗪酰胺和乙胺丁醇治疗数日后出现肝毒性。停用所有药物后，肝功能恢复正常，并在再次使用异烟肼后仍保持正常。加用利福平后肝毒性复发，但再次使用利福平（不加异烟肼）后耐受性良好。
吡嗪酰胺（PZA）在短期抗结核治疗中的应用已得到充分证实。所有现有数据均支持PZA代谢产物吡嗪酸（PA）是抗结核分枝杆菌的活性成分这一观点。这种情况需要对其代谢分布方面的潜在相互作用进行更深入的研究。咖啡因是一种广泛使用的药物，也是大多数饮食中的常见成分，它与吡嗪酰胺（PZA）共用同一种代谢酶——黄嘌呤氧化酶（XO）。本研究旨在探讨同时服用咖啡因是否以及如何影响PZA的代谢。本研究给雌性Sprague-Dawley大鼠分别给予不同剂量的PZA和咖啡因（PZA剂量为50或100 mg/kg，咖啡因剂量为0、50、100和150 mg/kg）。采用反相高效液相色谱法（RP-HPLC）对24小时尿液样本中的吡嗪酰胺（PZA）及其三种主要代谢物进行定量分析。同时给予100 mg/kg咖啡因和50 mg/kg PZA可显著增加（p<0.05）水溶性最高、毒性最低的PZA代谢物5-羟基吡嗪酸（5-OH-PA）的排泄量，从66.18±10.87 μmol/24 h增至94.56±8.65 μmol/24 h。当给予100 mg/kg PZA时，这种效应更为显著，5-OH-PA的排泄量从113.28±70 μmol/24 h增至173.23±17.82 μmol/24 h。这些结果表明，吡嗪酰胺的代谢分布受同时摄入咖啡因的影响。
有关吡嗪酰胺（共9种）的更多相互作用（完整）数据，请访问HSDB记录页面。

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非人类毒性值
大鼠口服LDLo 3 g/kg
小鼠口服LDLo 3 g/kg
小鼠腹腔注射LD50 1680 mg/kg
小鼠皮下注射LD50 2793 mg/kg

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肝毒性总结
吡嗪酰胺是一线抗结核药物，但必须与其他抗结核药物（如异烟肼或利福平）联合使用。吡嗪酰胺可引起血清转氨酶水平短暂且无症状的升高，是导致临床上明显的急性肝损伤的已知原因，这种损伤可能很严重，甚至致命。

[1]. Role of acid pH and deficient efflux of pyrazinoic acid in unique susceptibility of Mycobacterium tuberculosis to pyrazinamide. J Bacteriol. 1999 Apr;181(7):2044-9.

[2]. Mechanisms of Pyrazinamide Action and Resistance. Microbiol Spectr. 2014 Aug;2(4):MGM2-0023-2013.

治疗用途
抗结核药物
吡嗪酰胺与其他抗分枝杆菌药物联合使用，用于治疗结核病。吡嗪酰胺仅对分枝杆菌有效。/美国产品标签包含/
利福平、异烟肼和吡嗪酰胺的组合适用于所有类型结核病短期疗程的初始阶段。在此阶段（应持续2个月），应每日持续服用利福平、异烟肼和吡嗪酰胺的组合。如果怀疑为耐多药结核病，则需要使用其他药物。 /美国产品标签包含/
吡嗪酰胺已成为结核病短期（6个月）多药联合治疗的重要组成部分。

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药物警告
对乙硫异烟胺、异烟肼、烟酸（尼克酸）或其他化学结构相关的药物过敏的患者，也可能对本药过敏。
吡嗪酰胺仅应在能够密切观察患者的情况下使用。在开始吡嗪酰胺治疗前以及治疗期间每2-4周应检测血清AST（SGOT）、ALT（SGPT）和尿酸浓度。如果出现肝损伤迹象，应停止使用吡嗪酰胺。
肝毒性是最常见的报告不良反应，转氨酶水平升高是毒性的最早表现……吡嗪酰胺会降低尿酸的肾小管排泄，这可能诱发急性痛风性关节炎。其他不良反应包括恶心、呕吐、排尿困难、不适、发热和皮疹。
该药物抑制尿酸盐的排泄，导致几乎所有患者出现高尿酸血症；曾有发生急性痛风发作的情况。吡嗪酰胺的其他不良反应包括关节痛、厌食、恶心和呕吐、排尿困难、不适和发热。
有关吡嗪酰胺（共19条）的更多药物警告（完整）数据，请访问HSDB记录页面。

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药效学
吡嗪酰胺可杀死或抑制某些引起结核病（TB）的细菌的生长。它与其他药物联合用于治疗结核病。它是一种高度特异性的药物，仅对结核分枝杆菌有效。在体外和体内，该药物仅在弱酸性pH条件下有效。吡嗪酰胺在结核分枝杆菌中被激活为吡嗪酸，并干扰脂肪酸合成酶 FAS I。这会干扰细菌合成生长和复制所需的新脂肪酸的能力。

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吡嗪酰胺 (PZA) 是一种前药，在结核分枝杆菌中由 pncA 基因编码的吡嗪酰胺酶 (PZase)/烟酰胺酶的作用下转化为活性形式吡嗪酸 (POA)。

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虽然对 PZA 敏感的结核分枝杆菌和其他不敏感的分枝杆菌都具有 PZase，可以将 PZA 转化为 POA，但 PZA 对结核分枝杆菌的特异性似乎是在 POA 外排阶段决定的，结核分枝杆菌的 POA 外排能力远弱于不敏感的耻垢分枝杆菌。值得注意的是，两种吡嗪酰胺（PZA）耐药性——易感结核分枝杆菌的获得性PZA耐药性和非结核分枝杆菌的固有PZA耐药性——是由截然不同的机制引起的。易感结核分枝杆菌的获得性PZA耐药性是由pncA基因突变引起的，该突变使细菌无法将前药PZA转化为杀菌剂吡嗪酰胺（POA）。相比之下，耻垢分枝杆菌（M. smegmatis）以及可能许多其他非结核分枝杆菌的固有PZA耐药性是由于其POA外排机制更为活跃，从而阻止了POA在细胞内的积累。[1]

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吡嗪酰胺是一种白色粉末。在318°F（150°C）时升华。 （NTP，1992）吡嗪甲酰胺是一种单羧酸酰胺，由吡嗪酸（吡嗪-2-羧酸）的羧基与氨缩合而成。作为吡嗪酸的前药，吡嗪甲酰胺常用于结核病多药联合治疗方案中。它既是抗结核药物，也是前药。吡嗪甲酰胺属于吡嗪类化合物，是一种N-酰基氨单羧酸酰胺。吡嗪酰胺是一种抗菌处方药，已获得美国食品药品监督管理局（FDA）批准，用于治疗活动性结核病（TB）。 （活动性结核病也称为结核病。）结核病可能是 HIV 的机会性感染。吡嗪酰胺是一种用于治疗结核病的吡嗪类药物。吡嗪酰胺是一种抗分枝杆菌药物。吡嗪酰胺是一线抗结核药物，但必须与其他抗结核药物（如异烟肼或利福平）联合使用。吡嗪酰胺会导致血清转氨酶水平短暂且无症状升高，并且是导致临床上明显的急性肝损伤的已知原因，这种肝损伤可能很严重甚至致命。吡嗪酰胺是一种具有杀菌作用的合成吡嗪酸酰胺衍生物。吡嗪酰胺对缓慢繁殖的细胞内结核杆菌（不受其他药物影响）特别有效，但其作用机制尚不清楚。其杀菌作用依赖于细菌吡嗪酰胺酶的存在，该酶可去除酰胺基团生成活性吡嗪酸。吡嗪酰胺是结核病多药联合疗法的重要组成部分。(NCI04)ChEBIP 吡嗪酰胺是一种小分子药物，其临床试验阶段最高为 IV 期（涵盖所有适应症），于 1971 年首次获批，适用于治疗结核病和肺结核，并有 6 个在研适应症。ChEBIP 吡嗪甲酰胺是酿酒酵母中发现或产生的代谢物。ChEBIA 吡嗪是一种用于治疗结核病的抗结核药物。

C5H5N3O

123.1127

123.043

C, 48.78; H, 4.09; N, 34.13; O, 13.00

98-96-4

Pyrazinamide-d3;1432059-16-9

1046

White to off-white solid powder

1.4±0.1 g/cm3

273.3±43.0 °C at 760 mmHg

189-191 °C(lit.)

119.1±28.2 °C

0.0±0.6 mmHg at 25°C

1.648

-0.83

68.87

1

3

1

9

115

0

C1=CN=C(C=N1)C(=O)N

IPEHBUMCGVEMRF-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C5H5N3O/c6-5(9)4-3-7-1-2-8-4/h1-3H,(H2,6,9)

pyrazine-2-carboxamide

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ≥ 50 mg/mL (~406.14 mM)
H2O : ~6.67 mg/mL (~54.18 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (20.31 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (20.31 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (20.31 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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配方 4 中的溶解度: 27.5 mg/mL (223.38 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶.

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。