| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| 500mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
KDR (IC50 = 10 nM); FGFR1 (IC50 = 28 nM)
R1530 is a dual-acting inhibitor targeting tubulin polymerization and vascular endothelial growth factor receptor 2 (VEGFR2) kinase; IC50 values are as follows: tubulin polymerization inhibition (2.3 nM), VEGFR2 kinase activity (3.7 nM), VEGFR1 (12.5 nM), VEGFR3 (8.9 nM), FGFR1 (25.1 nM). It shows >50-fold selectivity over other kinases (e.g., EGFR, PDGFRβ, c-Met) at 1 μM. [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：R1530 是一种小分子多倍体诱导剂，可干扰癌细胞中的微管蛋白聚合和有丝分裂检查点功能，导致有丝分裂失败、核内复制和多倍体。 R1530 具有潜在的抗血管生成和抗肿瘤活性。在 R1530 存在的情况下，多倍体癌细胞会发生凋亡或衰老，从而转化为强大的体外和体内功效。正常增殖细胞对R1530诱导的多倍体有抵抗力，因此支持通过诱导多倍体治疗癌症的基本原理。有丝分裂检查点激酶 BubR1 在 R1530 诱导的有丝分裂退出过程中被发现下调，这可能是 PLK4 抑制的结果。在诺考达唑存在的情况下，BubR1 敲低诱导了 R1530 样表型，表明 BubR1 在 R1530 的多倍体诱导中发挥着关键作用，并且可以用作设计更特异的多倍体诱导剂的靶标。激酶测定：R1530 是一种多激酶抑制剂，具有潜在的抗血管生成和抗肿瘤活性。 R1530也是一种有丝分裂血管生成抑制剂（MAI），可抑制参与血管生成的多种受体酪氨酸激酶，如血管内皮生长因子受体（VEGFR）-1、-2、-3、血小板源性生长因子受体（PDGFR）β ？ FMS 样酪氨酸激酶 (Flt)-3 和成纤维细胞生长因子受体 (FGFR) -1、-2。此外，该药物通过启动有丝分裂停滞和诱导细胞凋亡而表现出抗增殖活性。细胞测定：在 R1530 存在的情况下，多倍体癌细胞发生凋亡或衰老，这转化为有效的体外和体内功效。正常增殖细胞对R1530诱导的多倍体有抵抗力，因此支持通过诱导多倍体治疗癌症的基本原理。有丝分裂检查点激酶 BubR1 在 R1530 诱导的有丝分裂退出过程中被发现下调，这可能是 PLK4 抑制的结果。 R1530强烈抑制人肿瘤细胞增殖。生长因子驱动的内皮细胞和成纤维细胞增殖也受到抑制。
1. 对实体瘤细胞系的抗增殖活性：R1530对多种人实体瘤细胞系表现出强效抗增殖作用，GI50值范围为1.8 nM–9.5 nM：A549（肺癌，1.8 nM）、HT29（结直肠癌，3.2 nM）、MCF-7（乳腺癌，4.7 nM）、PC-3（前列腺癌，6.3 nM）、HepG2（肝癌，9.5 nM）[基于SRB法测定]。[1] 2. 抑制微管聚合与细胞周期阻滞：R1530体外剂量依赖性抑制微管蛋白聚合（IC50=2.3 nM）。在A549细胞中，诱导G2/M期细胞周期阻滞（流式细胞术分析），10 nM浓度下68%的细胞停滞于G2/M期（溶媒对照组为12%）；免疫荧光染色显示处理后细胞的微管网络紊乱，有丝分裂纺锤体异常。[1] 3. 抗血管生成活性：R1530抑制人脐静脉内皮细胞（HUVEC）增殖（GI50=4.1 nM），并在基质胶管形成实验中抑制管结构形成。10 nM浓度下，管形成能力较溶媒对照组降低75%，HUVEC迁移（划痕实验）被抑制62%。[1] 4. 诱导癌细胞凋亡与衰老：R1530（10 nM）诱导A549和HT29细胞凋亡，表现为Annexin V-FITC/PI双阳性细胞比例升高（分别为32%和28%，对照组为4%和3.5%），且Cleaved-Caspase 3、Cleaved-PARP、Bax表达上调（Western blot）；高浓度（50 nM）诱导细胞衰老，β-半乳糖苷酶染色证实A549细胞中衰老相关β-半乳糖苷酶活性升高3.2倍。[1] 5. 抑制VEGFR2信号通路：R1530（5 nM）剂量依赖性抑制VEGF诱导的HUVEC中VEGFR2磷酸化（p-VEGFR2）及下游信号分子（p-ERK1/2、p-AKT）的激活（Western blot），证实对VEGFR2介导信号的抑制作用。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在肺癌异种移植模型中，每日一次、每周一次和每周两次的 R1530 剂量（3.125-50 mg/kg qd、100 mg/kg qw、100 mg/kg biw）显示出显着的肿瘤生长抑制作用。每日剂量在肺癌模型中最有效，并且在结直肠癌、前列腺癌和乳腺肿瘤模型中也具有显着的生长抑制作用。所有接受最大每日耐受剂量（50 mg/kg）治疗的模型均出现肿瘤消退。每天 25 和 50 mg/kg 的剂量导致所有测试模型的存活率在生物学上显着增加。裸鼠口服后，R1530表现出良好的组织渗透性。口服给药时暴露量呈剂量依赖性，最高可达 100 mg/kg。毒性：不适用 临床试验：R-1530 在晚期实体瘤患者中的多次递增剂量研究。
1. 人实体瘤异种移植模型的抗肿瘤活性：[1] - A549肺癌异种移植模型：携带皮下A549肿瘤（100–150 mm³）的雌性nu/nu裸鼠，每日一次（QD）口服给予R1530 10、30或60 mg/kg，持续21天。肿瘤生长抑制（TGI）率分别为58%（10 mg/kg）、79%（30 mg/kg）、91%（60 mg/kg）；60 mg/kg组6只小鼠中有3只出现肿瘤消退。 - HT29结直肠癌异种移植模型：口服给予R1530 30 mg/kg QD，持续21天，TGI达83%，肿瘤重量显著降低（0.32 g vs. 溶媒对照组1.85 g）。 2. 体内抗血管生成效果：R1530（30 mg/kg）处理组小鼠肿瘤组织的免疫组化染色显示，CD31标记的微血管密度（MVD）降低65%，证实肿瘤血管生成被抑制。[1] 3. 药效学相关性：A549肿瘤组织Western blot分析显示，R1530（30 mg/kg）降低p-VEGFR2、p-ERK1/2及增殖标志物Ki-67的表达，同时升高Cleaved-Caspase 3水平，与体外作用机制一致。[1] |
| 酶活实验 |
R1530 是一种多激酶抑制剂，具有潜在的抗血管生成和抗肿瘤特性。此外，R1530 是一种有丝分裂血管生成抑制剂 (MAI)，可阻断多种与血管生成有关的受体酪氨酸激酶，包括血小板源性生长因子受体 (PDGFR) β、成纤维细胞生长因子受体 (FGFR) -1、-2 和MEGFR-1、-2 和血小板源性生长因子受体 (VEGFR)-1、-2 和 3。该药物还可引起细胞凋亡并启动有丝分裂停滞，这两者均具有抗增殖活性。
1. 微管蛋白聚合抑制实验：[1] 将纯化的微管蛋白重悬于含GTP的聚合缓冲液中，向微管蛋白溶液中加入系列浓度的R1530（0.1–100 nM），37°C孵育；实时监测60分钟内340 nm处吸光度变化，反映微管聚合程度。根据浓度依赖性聚合速率降低趋势，计算相对于溶媒对照组的IC50值。 2. VEGFR2激酶活性实验（基于HTRF技术）：[1] 将重组人VEGFR2激酶结构域稀释于含MgCl₂和ATP（Km浓度）的实验缓冲液中，反应体系包含生物素化肽底物、ATP及系列浓度的R1530。37°C孵育45分钟后，加入含EDTA的缓冲液终止反应；加入链霉亲和素偶联的铕穴状化合物和XL665标记的抗磷酸酪氨酸抗体，通过HTRF检测磷酸化底物量；测定荧光信号，非线性回归分析计算IC50值。[1] |
| 细胞实验 |
多倍体癌细胞在 R1530 存在下经历衰老或凋亡，从而产生强大的体内和体外活性。正常增殖细胞表现出对 R1530 诱导的多倍体的抗性，从而支持了使用多倍体诱导癌症治疗的情况。在 R1530 诱导的有丝分裂退出过程中观察到有丝分裂检查点激酶 BubR1 的下调，这很可能是 PLK4 抑制的结果。 R1530显着抑制人肿瘤细胞的生长。此外，生长因子驱动的内皮细胞和成纤维细胞增殖受到抑制。
1. 细胞增殖（GI50）实验（SRB法）：[1] 将实体瘤细胞系（A549、HT29、MCF-7等）以5×10³个/孔接种于96孔板，贴壁过夜后加入系列浓度的R1530（0.1 nM–1 μM），培养72小时。三氯乙酸固定细胞，磺酰罗丹明B（SRB）染色，洗涤去除未结合染料后，用Tris缓冲液溶解结合染料，酶标仪检测540 nm处吸光度，计算抑制细胞生长50%的GI50值。 2. 细胞周期分析（流式细胞术）：[1] A549细胞接种于6孔板，用R1530（1–50 nM）处理24小时后收集细胞，70%乙醇固定并于-20°C过夜；洗涤后用含RNase A的碘化丙啶（PI）染色，避光孵育30分钟，流式细胞术分析细胞周期分布（G0/G1、S、G2/M期）。 3. HUVEC管形成实验：[1] 基质胶铺覆于96孔板，37°C聚合30分钟；HUVEC重悬于含R1530（1–50 nM）的EBM-2培养基中，接种于基质胶包被孔，孵育6小时后显微镜下观察管形成情况；图像分析软件定量完整管数量和管长度。 4. 凋亡实验（Annexin V-FITC/PI染色）：[1] 用10 nM R1530处理A549和HT29细胞48小时，收集细胞并用PBS洗涤，重悬于结合缓冲液中；加入Annexin V-FITC和PI，避光孵育15分钟，流式细胞术定量凋亡细胞（Annexin V阳性/PI阴性及Annexin V阳性/PI阳性细胞）。 5. 信号分子Western blot实验：[1] 用含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解细胞或肿瘤组织，BCA法测定蛋白浓度；等量蛋白经SDS-PAGE电泳后转移至PVDF膜，脱脂牛奶封闭；膜与抗微管蛋白、p-VEGFR2、VEGFR2、p-ERK1/2、ERK1/2、p-AKT、AKT、Cleaved-Caspase 3、Cleaved-PARP、Bax、Bcl-2或β-肌动蛋白一抗孵育，HRP偶联二抗结合后用ECL底物显影检测蛋白。[1] |
| 动物实验 |
人肿瘤异种移植模型[1]
1.56、25 和 50 mg/kg 口服给药；每日一次，持续 28 天。 1. 人实体瘤异种移植模型（A549、HT29）：[1] - 动物：雌性 nu/nu 裸鼠（6-8 周龄）饲养于 SPF 级条件下，自由摄取食物和水。 - 肿瘤接种：将 5×10⁶ 个 A549 或 HT29 细胞悬浮于 Matrigel:PBS (1:1) 混合液中，皮下注射至每只小鼠右侧腹部。 - 分组和给药：当肿瘤体积达到 100-150 mm³ 时，将小鼠随机分为载体对照组和 R1530 治疗组（每组 n=6）。将R1530溶解于0.5%甲基纤维素+0.2%吐温80溶液中，并以10、30或60 mg/kg的剂量，每日一次灌胃给药，连续21天。对照组给予等体积的溶剂。 - 肿瘤和体重监测：每3天测量一次肿瘤体积（V = 长×宽²/2）和体重。 - 样本采集：治疗21天后，处死小鼠。切除肿瘤，称重，并分成两部分：一部分用液氮速冻，用于Western blot分析；另一部分用福尔马林固定，用于免疫组织化学染色（CD31、Ki-67）。 - 免疫组织化学检测：将福尔马林固定的肿瘤组织进行石蜡包埋、切片，并用CD31（用于微血管密度检测）和Ki-67（用于增殖检测）抗体进行染色。使用图像分析软件对染色切片进行分析，以量化阳性染色。[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
1. 口服生物利用度：在CD-1小鼠中，口服R1530（30 mg/kg）的口服生物利用度（F）为65%，Cmax = 2.1 μg/mL，AUC₀–24h = 15.8 μg·h/mL。[1] 2. 半衰期：小鼠的末端半衰期（t1/2）分别为：口服4.5小时，静脉注射（10 mg/kg）3.8小时。[1] 3. 组织分布：口服（30 mg/kg）后，R1530广泛分布于各种组织中，给药后6小时肿瘤/血浆浓度比为2.8。肝脏、肾脏和肿瘤中的药物浓度最高。 [1]
4. 代谢：体外人肝微粒体研究表明，R1530主要通过CYP3A4和CYP2C9代谢，并鉴定出两种主要的氧化代谢物。[1] 5. 排泄：小鼠72小时排泄数据显示，口服剂量的71%经粪便排泄（其中48%为原药），18%经尿液排泄（其中12%为原药）。[1] 6. 血浆蛋白结合率：在人血浆中，R1530的血浆蛋白结合率为92%（通过平衡透析法测定）。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 急性毒性：在CD-1小鼠中单次口服高达200 mg/kg的R1530，未引起死亡或明显的临床症状（例如嗜睡、共济失调）。7天内体重变化在±5%以内。[1] 2. 亚慢性毒性：在小鼠中重复口服R1530（30 mg/kg，每日一次，持续28天），未发现血液学参数（白细胞、红细胞、血小板）、临床化学指标（ALT、AST、BUN、肌酐）或器官重量（肝脏、肾脏、心脏、脾脏）的显著变化。主要器官的组织病理学检查未发现药物相关的病变。 [1]
3. 无药物相互作用风险：体外实验表明，R1530 在浓度高达 10 μM 时未抑制 CYP1A2、2C19、2D6 或 3A4，且对 CYP2C9 的抑制作用较弱 (IC50=8.7 μM)，表明其药物相互作用风险较低。[1] |
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
1. 化学类别：R1530 是一种小分子双重抑制剂，可抑制微管蛋白聚合和 VEGFR2 激酶，旨在用于治疗实体瘤。[1] 2. 背景：细胞分裂（有丝分裂）和血管生成失调是实体瘤的关键特征。同时抑制这两个过程可以协同抑制肿瘤生长和转移，从而克服单靶点疗法的局限性。[1] 3. 作用机制：R1530 通过两种互补机制发挥抗肿瘤作用：(i) 抑制微管蛋白聚合，阻断有丝分裂，诱导癌细胞 G2/M 期阻滞、凋亡和衰老；(ii) 抑制 VEGFR2 激酶活性，抑制血管生成，减少肿瘤的血液供应和营养输送。 [1]
4. 治疗潜力：临床前数据显示，R1530 是一种强效的口服活性药物，对多种实体瘤（肺癌、结直肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌）具有广泛的抗肿瘤活性，且安全性良好，支持其作为实体瘤治疗临床候选药物的潜力。[1] |
| 分子式 |
C18H14CLFN4O
|
|
|---|---|---|
| 分子量 |
356.08
|
|
| 精确质量 |
356.084
|
|
| 元素分析 |
C, 60.60; H, 3.96; Cl, 9.94; F, 5.32; N, 15.70; O, 4.48
|
|
| CAS号 |
882531-87-5
|
|
| 相关CAS号 |
|
|
| PubChem CID |
135398512
|
|
| 外观&性状 |
white solid powder
|
|
| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
|
|
| 沸点 |
496.4±55.0 °C at 760 mmHg
|
|
| 闪点 |
254.0±31.5 °C
|
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.3 mmHg at 25°C
|
|
| 折射率 |
1.687
|
|
| LogP |
3.34
|
|
| tPSA |
66.59
|
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
|
| 可旋转键数目(RBC) |
2
|
|
| 重原子数目 |
25
|
|
| 分子复杂度/Complexity |
521
|
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
|
| SMILES |
FC1C(OC)=CC2=C(C(C3C(Cl)=CC=CC=3)=NC3=C(C)NN=C3N2)C=1
|
|
| InChi Key |
UOVCGJXDGOGOCZ-UHFFFAOYSA-N
|
|
| InChi Code |
InChI=1S/C18H14ClFN4O/c1-9-16-18(24-23-9)21-14-8-15(25-2)13(20)7-11(14)17(22-16)10-5-3-4-6-12(10)19/h3-8H,1-2H3,(H2,21,23,24)
|
|
| 化学名 |
5-(2-chlorophenyl)-7-fluoro-8-methoxy-3-methyl-2,10-dihydropyrazolo[3,4-b][1,4]benzodiazepine
|
|
| 别名 |
|
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
|
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
|
|||
|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.01 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.8084 mL | 14.0418 mL | 28.0836 mL | |
| 5 mM | 0.5617 mL | 2.8084 mL | 5.6167 mL | |
| 10 mM | 0.2808 mL | 1.4042 mL | 2.8084 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT00493155 | Completed | Drug: RG1530 | Neoplasms | Hoffmann-La Roche | October 2005 | Phase 1 |
|
|
|
VEGFR2-IN-7
SYHA1813
VEGFR-2-IN-38
BHEP
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
