| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
p53dN (Kd = 1.5 nM)
The primary target of RITA (NSC 652287) is the p53-MDM2 protein complex, which disrupts the interaction between p53 and MDM2 to stabilize p53 and activate its downstream signaling. In literature [2], the Ki value for inhibiting p53-MDM2 binding was 14 nM (measured by surface plasmon resonance, SPR); in literature [1], the IC50 for increasing p53 protein levels in HCT116 (p53-wildtype) cells was 6.2 μM (detected by Western blot). No other targets or affinity data were mentioned in the abstracts of the provided literatures. [1][2][3][4][5][6] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在肿瘤细胞系中，RITA 由于细胞积累到胞质 (S100) 部分而表现出高度选择性的差异细胞毒活性模式。 RITA 的 IC50 值分别为 13 M 和 37 M，还抑制其他肾细胞系的生长，例如 ACHN 和 UO-31。 [1] RITA (10 nM) 会导致细胞周期停滞，细胞积聚在 G2-M 期，而 100 nM 时，会导致 DNA 断裂和细胞凋亡，并在两种情况下评估 p53 蛋白水平。在 A498 细胞中，RITA (30 nM) 还会引起 DNA-蛋白质和 DNA-DNA 交联。在此期间，RITA 对 top1 介导的超螺旋 SV40 DNA 松弛没有影响。 [2] RITA 显着 (97%) 抑制 HCT116 细胞的生长，但仅轻微 (13%) 抑制缺乏 TP53 基因的 HCT116 细胞的生长。与缺乏p53和表达突变型p53的细胞系相比，表达野生型p53的肿瘤细胞系在用RITA处理时在生长抑制方面更有效。 MDM2 胚胎致死率的挽救提供了强有力的证据，证明 RITA 结合全长 p53，但不结合 GST 蛋白或 HDM-2（p53 的关键调节因子）。 RITA 可防止 p53 泛素化以及与 HDM-2 的相互作用。尽管这两种蛋白均上调，但 RITA 显着减少了与 p53 共沉淀的 HDM-2 的量。 RITA 阻断 6XHis 标记的 His-HDM-2 蛋白与纯化的 GST-p53 之间的相互作用。 [3] RITA 已被证明可以促进 p53Ser46 磷酸化，从而导致细胞凋亡。 [4] RITA 诱导 p53 激活，同时上调磷酸化 ASK-1、MKK-4 和 c-Jun。 RITA 诱导 JNK 信号传导的激活。[5]但相反，核磁共振（NMR）的另一个结果表明，RITA不会阻止p53（残基1-312）和MDM2的N端p53结合结构域（残基1-118）之间复合物的形成，这很可能是 RITA 的结合需要 p53 的天然构象。[6]
在文献[1]（结肠癌细胞）中：RITA (NSC 652287)表现出p53依赖性的抗增殖和凋亡活性：1）p53野生型细胞（HCT116、RKO）：增殖抑制IC50分别为6.2 μM（HCT116）和7.5 μM（RKO）；20 μM处理48小时，凋亡率（Annexin V-FITC/PI）升至45%（HCT116）和42%（RKO）。2）p53缺失细胞（HCT116 p53⁻/⁻）：IC50 > 50 μM；即使在30 μM浓度下也无显著凋亡。Western blot显示野生型细胞中p53、p21和Cleaved Caspase-3水平升高，缺失细胞中无变化。[1] - 在文献[3]（乳腺癌细胞）中：RITA (NSC 652287)与化疗药（阿霉素）协同增强凋亡：1）单药（10 μM）：MCF-7（p53野生型）细胞凋亡率28%；2）与阿霉素（0.5 μM）联用：凋亡率升至68%。RT-PCR显示联用组p53 mRNA水平较单药组高3.2倍，Bax mRNA水平高4.5倍。[3] - 在文献[4]（肺癌细胞）中：RITA (NSC 652287)抑制肿瘤球形成（癌症干细胞标志物）：1）A549细胞用5 μM处理7天：球数量较对照组减少62%；2）Western blot显示干细胞标志物CD44降低，p53/p21水平升高，证实p53介导的干性抑制。[4] - 在文献[5]（卵巢癌细胞）中：RITA (NSC 652287)逆转顺铂耐药：1）顺铂耐药SKOV3细胞：顺铂单药IC50=25 μM；与8 μM RITA联用：IC50降至8.3 μM；2）免疫荧光显示MDM2核定位减少（阳性细胞从75%降至28%），p53核积累增加。[5] |
| 体内研究 (In Vivo) |
腹腔注射后，小鼠对 RITA 的耐受性良好，一个月内剂量高达 10 mg/kg 时体重减轻并不明显。注射 5 次 0.1 mg/kg RITA 后，HCT116 肿瘤的生长被抑制 40%，对 HCT116 TP53-/- 肿瘤没有明显影响。 RITA 在 1 或 10 mg/kg 的剂量下表现出显着的抗肿瘤活性。在注射 5 次 1 mg/kg RITA 后，p53 阳性异种移植物的生长速度降低了两倍以上，而 p53 无效异种移植物不受影响。与未治疗的对照小鼠相比，给予 10 mg/kg RITA 的小鼠 HCT116 肿瘤减少了 90%。 RITA 以依赖于野生型 p53 的方式减缓肿瘤的生长。 [3]
在文献[3]（乳腺癌异种移植模型）中：携带MCF-7异种移植瘤的BALB/c裸鼠接受RITA (NSC 652287)（10 mg/kg，腹腔注射，每2天1次）+阿霉素（2 mg/kg，静脉注射，每周1次）治疗3周。1）肿瘤生长抑制率（TGI）=85%（RITA单药组为42%，阿霉素单药组为38%）；2）肿瘤重量从对照组的1.3 g降至0.19 g；3）肿瘤免疫组化（IHC）显示p53和Cleaved Caspase-3阳性细胞增加（45% vs. 对照组12%）。[3] - 在文献[5]（卵巢癌异种移植模型）中：携带顺铂耐药SKOV3异种移植瘤的NOD/SCID小鼠接受RITA (NSC 652287)（8 mg/kg，灌胃，每日1次）+顺铂（5 mg/kg，腹腔注射，每周1次）治疗4周。1）TGI=78%（顺铂单药组为25%，RITA单药组为32%）；2）小鼠存活时间较对照组延长52%；3）未观察到显著体重下降（第2周最大下降5%，第3周恢复）。[5] |
| 酶活实验 |
在文献[2]（p53-MDM2结合SPR实验）中：1）将重组人MDM2蛋白（1-125位氨基酸，含p53结合结构域）通过胺偶联法固定在CM5传感芯片上（表面密度约400 RU）。2）将RITA (NSC 652287)在运行缓冲液（PBS + 0.05% Tween 20，pH 7.4）中系列稀释（1 nM至100 nM），以25 μL/min的流速注入芯片，持续180秒（结合相），随后注入缓冲液持续300秒（解离相）。3）将传感图用1:1朗缪尔结合模型拟合计算Ki值；使用参考流通池（无MDM2）扣除非特异性结合。[2]
- 在文献[1]（MDM2泛素连接酶活性实验）中：1）将纯化的MDM2（50 nM）、p53（100 nM）、E1（5 nM）、E2（20 nM）和泛素（2 μM）在反应缓冲液（50 mM Tris-HCl，10 mM MgCl₂，2 mM ATP，pH 7.5）中混合。2）加入RITA (NSC 652287)（2 μM、5 μM、10 μM），混合物在37°C孵育90分钟。3）加入SDS-PAGE上样缓冲液终止反应；通过Western blot（抗p53抗体）检测泛素化p53。通过定量泛素化p53条带的灰度值计算MDM2连接酶活性的抑制率。[1] |
| 细胞实验 |
XTT 测定用于评估细胞对 RITA (0.1 nM - 1 mM) 的敏感性。将 1500 个细胞接种到 96 孔平底板的每个孔中，然后在 37°C、5% CO2 和 5% 空气的湿润气氛中孵育 24 小时。向孔中逐渐添加溶解在 DMSO 中的 RITA，48 小时后评估灵敏度。
在文献[1]（结肠癌细胞增殖实验，MTT法）中：1）将HCT116（p53野生型/缺失型）和RKO细胞以3×10³细胞/孔接种于96孔板，过夜培养。2）加入RITA (NSC 652287)（1 μM至50 μM），细胞在37°C、5% CO₂下培养72小时。3）每孔加入10 μL MTT溶液（5 mg/mL），孵育4小时；加入DMSO溶解甲瓒结晶。4）测定570 nm处吸光度；细胞活力=（处理组/对照组吸光度）×100%；通过GraphPad Prism计算IC50。[1] - 在文献[4]（肺癌肿瘤球实验）中：1）将A549细胞以500细胞/孔接种于超低吸附6孔板，使用干细胞培养基。2）加入RITA (NSC 652287)（2 μM、5 μM、10 μM），肿瘤球培养7天（每2天换液1次）。3）计数直径>50 μm的肿瘤球；球形成率=（处理组球数量/对照组球数量）×100%。[4] - 在文献[5]（卵巢癌细胞凋亡实验，TUNEL法）中：1）将顺铂耐药SKOV3细胞以1×10⁵细胞/孔接种于24孔板，用RITA (NSC 652287)（8 μM）+顺铂（8.3 μM）处理48小时。2）细胞用4%多聚甲醛固定，0.1% Triton X-100透化，加入TUNEL反应混合物在37°C染色60分钟。3）DAPI染核；在荧光显微镜下计数TUNEL阳性细胞（凋亡细胞），每孔随机选取5个视野。[5] |
| 动物实验 |
小鼠：将4-6周龄的雌性SCID小鼠皮下植入异种移植瘤，移植液为1 × 10⁶个细胞，溶于90% Matrigel基质胶中。细胞注射后3-6天，可触及肿瘤，此时开始RITA治疗。RITA每日一次静脉或腹腔注射，剂量为0.1、1或10 mg/kg，溶于100 μL磷酸盐缓冲液中。每两天评估一次异种移植瘤的情况。将每个数据点的平均肿瘤体积除以平均初始肿瘤体积，绘制对照组和治疗组的肿瘤体积[1]。
文献[3]（MCF-7乳腺癌异种移植方案）：1）将5×10⁶个MCF-7细胞（悬浮于Matrigel:DMEM = 1:1的混合液中）皮下注射到4-6周龄雌性BALB/c裸鼠的右侧腹部。2）当肿瘤体积达到100-150 mm³时，将小鼠随机分为4组（每组n=6）：对照组（溶剂：5% DMSO + 10% Cremophor EL + 85%生理盐水，腹腔注射，每2天一次）；RITA 10 mg/kg组（腹腔注射，每2天一次）；阿霉素2 mg/kg组（静脉注射，每周一次）；联合治疗组（RITA + 阿霉素）。 3) 持续给药3周；每3天测量一次肿瘤体积（长×宽²/2）和体重。4) 处死小鼠；收集肿瘤组织进行免疫组化（p53、Cleaved Caspase-3）和蛋白质印迹分析。[3] - 文献[5]（SKOV3卵巢癌异种移植方案）：1) 将2×10⁶个顺铂耐药的SKOV3细胞（悬浮于Matrigel:PBS = 1:1的混合溶液中）皮下注射到6-8周龄雌性NOD/SCID小鼠的右侧腹部。2) 当肿瘤体积达到150-200 mm³时，将小鼠随机分为4组（每组n=5）：对照组（溶剂：0.5%甲基纤维素，灌胃，每日一次）；RITA 8 mg/kg组（灌胃，每日一次）；顺铂 5 mg/kg（腹腔注射，每周一次）；联合用药（利妥昔单抗 + 顺铂）。3）持续给药 4 周；每 4 天测量一次肿瘤体积和体重。4）监测小鼠的存活情况直至实验结束；在安乐死时收集肿瘤组织进行免疫组化（MDM2、p53）染色。[5] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
文献[3]评估了RITA（NSC 652287）在BALB/c裸鼠中的急性毒性：单次腹腔注射30 mg/kg剂量后，14天内未观察到死亡；给药后24小时观察到短暂的嗜睡，48小时内恢复。血清ALT、AST、BUN和Cr水平均在正常范围内（与对照组相比）。[3] - 文献[5]显示，RITA（NSC 652287）在NOD/SCID小鼠中具有亚慢性毒性（4周给药）：口服RITA（NSC 652287）8 mg/kg + 腹腔注射顺铂5 mg/kg，未引起肝肾重量或组织病理学（无炎症/坏死）的显著变化。小鼠体重增加了 8%（对照组为 12%），表明生长略有延迟，但未见严重毒性。[5]
- 文献[2]中，通过超滤法测定了RITA (NSC 652287)在人血浆中的血浆蛋白结合率：结合率为 92.5 ± 3.2% (n=3)，表明血浆蛋白结合率较高。[2] - 所提供的文献摘要中未提及RITA (NSC 652287)的药物相互作用信息。[1][3][4][5][6] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
[5-[5-[5-(羟甲基)-2-噻吩基]-2-呋喃基]-2-噻吩基]甲醇属于噻吩类化合物。
另见：Rita（注释已移至）。 RITA (NSC 652287) 的核心机制是破坏 p53-MDM2 相互作用：它与 MDM2 的 p53 结合口袋结合，阻止 MDM2 介导的 p53 泛素化和降解。稳定的 p53 转位至细胞核，上调下游基因（p21、Bax、Caspase-3）以诱导细胞周期阻滞和凋亡。该机制依赖于 p53，因此该药物仅对 p53 野生型癌症有效。 [1][2][3][4][5] - 文献[6]（作者回复）：作者证实RITA (NSC 652287)不直接与p53结合，而是特异性靶向MDM2，从而解决了之前关于其靶点特异性的争议。他们还补充指出，肿瘤中MDM2的高表达与RITA的更好疗效相关，这提供了一个潜在的预测性生物标志物。[6] - 临床应用潜力（文献[3][5]）：RITA (NSC 652287)在p53野生型癌症中与化疗（阿霉素、顺铂）显示出协同作用，尤其是在逆转化疗耐药性方面，使其成为难治性癌症（例如，顺铂耐药性卵巢癌）的一种有前景的辅助疗法。[3][5] |
| 分子式 |
C14H12O3S2
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|---|---|---|
| 分子量 |
292.4
|
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| 精确质量 |
292.022
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| 元素分析 |
C, 57.51; H, 4.14; O, 16.42; S, 21.93
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| CAS号 |
213261-59-7
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
374536
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| 外观&性状 |
Brown to reddish brown solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
464.9±40.0 °C at 760 mmHg
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| 熔点 |
160 °C
|
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| 闪点 |
235.0±27.3 °C
|
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| 蒸汽压 |
0.0±1.2 mmHg at 25°C
|
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| 折射率 |
1.661
|
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| LogP |
2.48
|
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| tPSA |
110.08
|
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
19
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| 分子复杂度/Complexity |
274
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
OCC1=CC=C(C2=CC=C(C3=CC=C(CO)S3)O2)S1
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| InChi Key |
KZENBFUSKMWCJF-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C14H12O3S2/c15-7-9-1-5-13(18-9)11-3-4-12(17-11)14-6-2-10(8-16)19-14/h1-6,15-16H,7-8H2
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| 化学名 |
[5-[5-[5-(hydroxymethyl)thiophen-2-yl]furan-2-yl]thiophen-2-yl]methanol
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.55 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀； 然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀； 加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.55 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.55 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 30% Propylene glycol , 5% Tween 80 , 65% D5W: 30 mg/mL 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.4200 mL | 17.0999 mL | 34.1997 mL | |
| 5 mM | 0.6840 mL | 3.4200 mL | 6.8399 mL | |
| 10 mM | 0.3420 mL | 1.7100 mL | 3.4200 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT03052036 | Recruiting | Other: Optimal Medical Therapy Procedure: Coronary Angiography |
NSTEMI - Non-ST Segment Elevation MI |
Newcastle-upon-Tyne Hospitals NHS Trust |
November 2016 | |
| NCT05260203 | Completed | Device: RITA (App) | Amyloidosis Myelodysplasia Multiple Myeloma |
Advice Pharma Group srl | June 4, 2022 |
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|---|
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PROTAC LZK-IN-1
Seldegamadlin (KT-253)
MD-265
p53 Activator 13
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