| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
CDK9- Cyclin T1 (IC50 = 0.020 μM); cdk4-cyclin D1 (IC50 = 0.063 μM); CDK1-Cyclin B (IC50 = 0.079 μM); cdk2-cyclin A (IC50 = 0.224 μM); cdk2-cyclin E (IC50 = 2.500 μM); cdk6-cyclin D3 (IC50 = 0.396 μM); CDK9-cyclin H (IC50 = 2.900 μM)
Cyclin-dependent kinases (Cdks) Potent inhibitor of Cdk4-D1 and Cdk1-B. The study does not provide specific IC50 values for these kinases but references an earlier publication. [2] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
P276-00 对 Cdk4-D1 的选择性比对 Cdk2-E 的选择性高 40 倍[1]。与正常成纤维细胞相比，它对癌细胞具有高度选择性[1]。它对多种人类癌细胞系，包括 HCT-116、U2OS、H-460、HL-60、HT-29、SiHa、MCF-7、Colo-205、SW-480、PC-3、Caco2 和 T-24，均表现出强效的抗增殖作用。 IC50 范围为 300 至 800 nmol/L。P276-00 以 ATP 竞争性方式下调 Cdk4 和细胞周期蛋白 D1，并降低 Cdk4 特异性磷酸化位点 pRb Ser780 的水平。P276-00 还通过激活细胞 caspase-3 活性和形成 DNA 梯状条带诱导细胞凋亡[1]。
Riviciclib HCl (P276-00) 在碘化丙啶 (PI) 检测中对 16 种人类肿瘤细胞系表现出强效的抗增殖活性。平均IC₇₀值为0.50 µg/mL (1.1 µmol/L)，其效力约为顺铂（平均IC₇₀ = 11.9 µg/mL，40 µmol/L）的30倍。最敏感的细胞系包括结肠癌（DLD1、HCT-116、CXF 94L）、肺癌（LXFA 629L）、乳腺癌（MCF-7、MAXF 401NL）和黑色素瘤（MEXF 462NL）。它对顺铂耐药的结肠癌（DLD1、CXF 94L）和乳腺癌（MCF-7）细胞系也有效。 在利用22种人肿瘤异种移植衍生细胞系进行的克隆形成实验中，Riviciclib HCl (P276-00)以剂量依赖的方式显著抑制了克隆形成。在浓度为 1 µmol/L 时，该化合物对 41% (9/22) 的模型有效；在浓度为 10 µmol/L 时，对 91% (20/22) 的模型有效。相比之下，顺铂在 1 µmol/L 时无活性，在 10 µmol/L 时仅对 9% (2/22) 的模型有效。P276-00 对中枢神经系统肿瘤 (CNXF SF268)、非小细胞肺癌 (LXFE 397)、乳腺癌 (MAXF 401)、黑色素瘤 (MEXF 276, MEXF 462)、前列腺癌 (PRXF 22RV1)、肾癌 (RXF 393, RXF 944LX) 和肉瘤 (SXF 1301) 尤其有效。在利用异步细胞群进行细胞周期分析时，Riviciclib HCl (P276-00) (1.5 µmol/L) 可诱导生长缓慢的 PC-3 前列腺癌细胞发生 G2/M 期阻滞，且在 72 小时内细胞凋亡极少。相反，在生长迅速的 HL-60 白血病细胞中，该药物从 6 小时起即可诱导显著的细胞凋亡，24 小时时凋亡率超过 75%。 在解除 G0 期阻滞的同步化 H-460 非小细胞肺癌细胞中，Riviciclib HCl (P276-00) (1.5 µmol/L) 可导致 G1 期阻滞，且细胞凋亡随时间推移而增加（48 小时时为 27.4%，72 小时时为 34.8%）。在同步化的 WI-38 正常肺成纤维细胞中，该化合物也引起了 G1 期阻滞，但细胞凋亡仍然微乎其微（72 小时时为 3-4%）。 在恢复实验中，用 1.5 µmol/L P276-00 处理 48 小时后，进行无药恢复，H-460 癌细胞显示出显著的细胞凋亡（恢复 0 小时时为 27.7%），而 WI-38 正常细胞则没有（恢复 0 小时时为 5.5%），证实了该化合物对癌细胞的选择性。[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
P276-00 以 50 mg/kg/天的剂量腹腔注射（ip）20 次，可显著抑制小鼠结肠癌（CA-51）的生长。然而，在小鼠肺癌模型（Lewis 肺癌）中，以 60 mg/kg（30 mg/kg，每日两次）的剂量隔日腹腔注射 7 次，也表现出显著的生长抑制作用[2]。此外，它还能抑制人非小细胞肺癌 H-460 和人结肠癌 HCT-116 异种移植瘤的生长[2]。根据疗效研究，其最大耐受剂量为 78 mg/kg/d[2]。
小鼠结肠癌 (CA-51) 模型： 携带 CA-51 肿瘤的 BALB/c 小鼠接受 Riviciclib HCl (P276-00) 治疗，剂量为 50 mg/kg，每日腹腔注射，持续 20 天。结果显示，第 33 天肿瘤生长抑制率显著达到 81%，肿瘤/细胞比 (T/C) 为 19%。 小鼠 Lewis 肺癌模型：已建立 Lewis 肺癌的小鼠接受两种治疗方案：每日腹腔注射 35 mg/kg，持续 14 天；或隔日腹腔注射 30 mg/kg，每日两次（60 mg/kg/天），持续 7 次。每日两次给药方案疗效更佳，第 17 天肿瘤生长抑制率达到 70%，而每日一次给药方案的抑制率为 43%。 人结肠癌 (HCT-116) 异种移植模型：携带 HCT-116 异种移植瘤的 SCID 小鼠接受 Riviciclib HCl (P276-00) 治疗，剂量为 35 mg/kg，每日一次，连续 10 天。结果显示，第 21 天肿瘤生长显著抑制（P < 0.05），抑制率超过 70%，治疗组平均肿瘤重量为 517.2 ± 70.3 mg，而对照组为 1,349 ± 130.9 mg。 人非小细胞肺癌 (H-460) 异种移植模型：携带 H-460 异种移植瘤的 SCID 小鼠接受 Riviciclib HCl (P276-00) 治疗，剂量为 50 mg/kg，每日一次，连续 20 天；或 30 mg/kg，每日两次，连续 20 天。两种治疗方案疗效相近，在第 40 天分别达到 75.7% 和 68.4% 的肿瘤生长抑制率。[2] |
| 酶活实验 |
Cdk4-D1/Cdk2-E 酶活性测定采用 Millipore Multiscreen 96 孔板进行。每个步骤均使用一块滤板。用 100 μL 激酶缓冲液（含 50 mmol/L HEPES (pH 7.5)、10 mmol/L MgCl2 和 1 mmol/L EGTA）预润湿滤板孔后，抽真空。将滤板置于真空歧管上，并施加真空。每个孔加入 50 μL 溶于激酶缓冲液的 GST-Rb（0.5 μg GST-Rb/50 μL），该 GST-Rb 与 GSH-Sepharose 珠结合。将含有ATP（冷+热）和4倍磷酸酶抑制剂混合物（40 μmol/L未标记ATP、10 μCi/mL γ32P-ATP、40 mmol/L h-甘油磷酸钠、4 mmol/L DTT、0.4 mmol/L NaF、0.4 mmol/L原钒酸钠）的反应混合物（用激酶缓冲液稀释）加入每个孔中，总体积约为25 μL。然后，再加入25 μL含有测试化合物（用激酶缓冲液稀释至最终浓度的4倍）或仅含激酶缓冲液（对照）的溶液。为启动反应，向每个孔中加入50 μL（100 ng）溶于激酶缓冲液的人源Cdk4-D1/Cdk2-E酶。反应在30°C下进行30分钟。反应结束后，将滤板风干，放入 Multiscreen 适配器板中，再次抽真空。然后用 TNEN 缓冲液清洗滤板三次，该缓冲液由 20 mmol/L Tris（pH 8.0）、100 mmol/L NaCl、1 mmol/L EDTA 和 0.5% Nonidet-P40 组成。加入 30 μL Packard Microscint-O 闪烁液后，用 Top-Seal A 封膜覆盖滤板。使用 Top Count 闪烁计数器对 96 孔滤板中的 32P-GST-Rb 进行定量。每种化合物的初始浓度均为 1 μmol/L。对抑制率达到 50% 或以上的化合物进行更多分析，以确定其 IC50 值。
Cdk4-D1 和 Cdk2-E 活性测定： 在杆状病毒系统中，将人 Cdk4 或 Cdk2 与细胞周期蛋白 D1 或 E 共表达并纯化。以 GST-视网膜母细胞瘤融合蛋白（氨基酸 776-928）为底物。该测定在 96 孔滤板中进行。将与 GSH-琼脂糖珠结合的 GST-Rb 加入孔中，随后加入含有 [γ-³²P]ATP 和待测化合物的反应混合物。加入酶启动反应，在 30°C 下孵育 30 分钟，然后过滤并洗涤。通过闪烁计数定量掺入的放射性。以黄酮吡啶醇为标准品。 激酶选择性分析： 在存在递增浓度的P276-00和相应底物的情况下，使用商业激酶分析服务，对一系列其他Cdk和非Cdk激酶（c-Src、GSK3β、LCK、MAPK1、MAPK2、PKCα、PKA、总PKC）进行了体外激酶活性测定。[1] |
| 细胞实验 |
在96孔板中，根据细胞类型，将细胞以每孔3000-5000个的密度接种于180 μL培养基中。然后将细胞置于培养箱中过夜使其贴壁。向孔中加入不同浓度的化合物，并在37°C下孵育48小时。每孔加入3H-胸苷（0.25 μCi），并使其掺入5至7小时。孵育结束后，使用Packard Filtermate Universal细胞收集器将细胞收集到GF/B单层滤膜板上，并使用Packard Top Count 96孔液体闪烁计数器对孔板进行计数。
碘化丙啶（PI）细胞增殖测定： 将细胞接种于96孔板中，并使其恢复24小时。随后，将细胞暴露于五种不同浓度（0.003-30 µg/mL）的Riviciclib HCl (P276-00)或顺铂中4天。处理后，将培养基更换为PI溶液（7 µg/mL）。冷冻培养板以使细胞膜通透化，并测量荧光强度。生长抑制率以T/C%表示。IC₅₀和IC₇₀值通过绘制浓度与细胞活力的关系图确定。 克隆形成实验：将实体人肿瘤异种移植瘤进行机械解离，并与酶混合物孵育。将所得细胞悬液用于克隆形成实验。Riviciclib HCl (P276-00)和顺铂的浓度范围为0.001至100 µmol/L，并持续暴露于细胞中。抗肿瘤活性定义为与未处理的对照组相比，集落形成抑制率 >70%。 流式细胞术细胞周期分析：将细胞（H-460、PC-3、HL-60、WI-38）接种后，用Riviciclib HCl (P276-00)（1.5 或 5 µmol/L）处理不同时间（0-72 小时）。在恢复研究中，细胞处理 48 小时后，在无药培养基中培养 6-48 小时。收集脱落细胞和贴壁细胞，用 70% 乙醇固定，并用 PI 和 RNase A 染色。通过流式细胞术分析细胞周期分布。[2] |
| 动物实验 |
H-460异种移植瘤
50 mg/kg，每日一次或30 mg/kg，每日两次 腹腔注射 小鼠肿瘤模型： 对于CA-51结肠癌模型，将肿瘤细胞皮下注射到BALB/c小鼠体内。24小时后，将小鼠随机分组，并腹腔注射Riviciclib HCl (P276-00)，剂量为50 mg/kg，每日一次，连续20天。对于Lewis肺癌模型，当肿瘤直径达到约5 mm时，将小鼠随机分组，并腹腔注射Riviciclib HCl (P276-00)，每日一次，连续14天，或Riviciclib HCl (P276-00)，隔日两次，每次30 mg/kg，连续7次。定期测量肿瘤直径并计算肿瘤重量。测定肿瘤生长抑制率和T/C%（肿瘤/细胞比值）。 人肿瘤异种移植瘤模型： 将HCT-116或H-460细胞皮下注射到SCID小鼠体内。当肿瘤长至约5 mm时，将小鼠随机分组。HCT-116组小鼠每日腹腔注射35 mg/kg的盐酸利维西利（P276-00），连续10天。H-460组小鼠每日腹腔注射50 mg/kg，连续20天，或每日腹腔注射30 mg/kg，连续20天。监测肿瘤生长情况，并按照小鼠模型计算肿瘤重量和生长抑制率。同时监测动物体重和健康状况恶化情况。[2] 小鼠肿瘤模型：对于CA-51结肠癌模型，将肿瘤细胞皮下注射到BALB/c小鼠体内。24小时后，将小鼠随机分组，并每日腹腔注射50 mg/kg的盐酸利维西利（P276-00），溶于水中，连续20天。对于Lewis肺癌模型，当肿瘤长至约5 mm时，将小鼠随机分组，分别腹腔注射35 mg/kg/天，连续14天，或30 mg/kg/天，隔日两次，连续7次。定期测量肿瘤直径并计算肿瘤重量。测定肿瘤生长抑制率和肿瘤/细胞比值（T/C%）。 人肿瘤异种移植模型：将HCT-116或H-460细胞皮下注射到SCID小鼠体内。当肿瘤长至约5 mm时，将小鼠随机分组。HCT-116组小鼠腹腔注射35 mg/kg/天的Riviciclib HCl (P276-00)，连续10天。H-460组小鼠腹腔注射50 mg/kg/天，连续20天，或30 mg/kg/天，连续20天。监测肿瘤生长情况，并按照小鼠模型的方法计算肿瘤重量和生长抑制率。对动物体重和健康状况恶化的迹象进行了监测。[2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
该研究提供了一些关于体内实验耐受性的信息。
最大耐受剂量 (MTD)：剂量探索研究确定，小鼠的最大耐受剂量为每日一次腹腔注射 78 mg/kg/天，连续 5 天。 体内毒性观察：在小鼠肿瘤模型中，未观察到明显的体重减轻。在人源异种移植模型中，长期治疗后，动物平均体重减轻 10-15%。未报告其他特定毒性（例如，肝脏、肾脏毒性）。该研究还指出，Riviciclib HCl (P276-00) 在体外对正常细胞（WI-38 成纤维细胞）的疗效较差，可导致 G1 期阻滞而无明显细胞凋亡，表明其对癌细胞具有一定的选择性。[2] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
盐酸利维西利是利维西利的盐酸盐形式，利维西利是一种黄酮类化合物，也是一种细胞周期蛋白依赖性激酶 (CDK) 抑制剂，具有潜在的抗肿瘤活性。利维西利选择性地结合并抑制 Cdk4/细胞周期蛋白 D1、Cdk1/细胞周期蛋白 B 和 Cdk9/细胞周期蛋白 T1，这些丝氨酸/苏氨酸激酶在细胞周期和细胞增殖的调控中起着至关重要的作用。抑制这些激酶会导致细胞周期停滞在 G1/S 期，从而诱导细胞凋亡并抑制肿瘤细胞增殖。
盐酸利维西利 (P276-00)是一种黄酮类化合物，可抑制细胞周期蛋白依赖性激酶，被鉴定为一种新型抗肿瘤药物。其作用机制是通过引起 G1 或 G2/M 期阻滞来干扰细胞周期进程，从而导致细胞凋亡，尤其是在快速增殖的癌细胞中。该化合物对多种人类肿瘤细胞系和异种移植瘤（包括对顺铂耐药的肿瘤细胞系和异种移植瘤）均表现出显著的抗肿瘤活性。体外实验表明，该化合物对癌细胞的选择性高于正常细胞。基于其强大的体外细胞活性以及在小鼠和人异种移植瘤模型中展现出的良好体内疗效，Riviciclib HCl (P276-00)被认为是进一步进行临床前和临床开发的候选药物。[2] |
| 分子式 |
C21H21CL2NO5
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|---|---|
| 分子量 |
438.301
|
| 精确质量 |
437.08
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| 元素分析 |
C, 57.55; H, 4.83; Cl, 16.18; N, 3.20; O, 18.25
|
| CAS号 |
920113-03-7
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| 相关CAS号 |
Riviciclib;920113-02-6
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| PubChem CID |
23643975
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| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
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| LogP |
4.044
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| tPSA |
94.14
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
29
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| 分子复杂度/Complexity |
628
|
| 定义原子立体中心数目 |
2
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| SMILES |
OC1C=C(O)C2C(C=C(C3C=CC=CC=3Cl)OC=2C=1[C@@H]1CCN(C)[C@H]1CO)=O.Cl
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| InChi Key |
OOVTUOCTLAERQD-OJMBIDBESA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C21H20ClNO5.ClH/c1-23-7-6-12(14(23)10-24)19-15(25)8-16(26)20-17(27)9-18(28-21(19)20)11-4-2-3-5-13(11)22;/h2-5,8-9,12,14,24-26H,6-7,10H2,1H3;1H/t12-,14+;/m1./s1
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| 化学名 |
2-(2-chlorophenyl)-5,7-dihydroxy-8-[(2R,3S)-2-(hydroxymethyl)-1-methylpyrrolidin-3-yl]chromen-4-one;hydrochloride
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| 别名 |
P-27600; P 27600; P27600; P276-00; P-276-00; P 276-00; Riviciclib HCl
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 50~88 mg/mL (114.1~200.8 mM)
Ethanol: ~7 mg/mL (~16 mM) Water: ~88 mg/mL (~200.8 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.75 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.75 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.75 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 30% propylene glycol, 5% Tween 80, 65% D5W: 30 mg/mL 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2815 mL | 11.4077 mL | 22.8154 mL | |
| 5 mM | 0.4563 mL | 2.2815 mL | 4.5631 mL | |
| 10 mM | 0.2282 mL | 1.1408 mL | 2.2815 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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