| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| 500mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
RO-3 targets the purinergic P2X3 receptor (a ligand-gated ion channel of the P2X family) (IC50 = 30 nM for human recombinant P2X3 receptor-mediated Ca²⁺ influx; IC50 = 100 nM for P2X2/3 heteromeric receptors) [1]
RO-3 exhibits high selectivity for P2X3/P2X2/3 over other P2X subtypes: P2X1 (IC50 > 1000 nM), P2X4 (IC50 > 1000 nM), P2X7 (IC50 > 1000 nM) [1] RO-3 shows no significant binding to P2Y purinergic receptors or adenosine receptors (Ki > 10 μM for all) [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
1. 在稳定表达人P2X3受体的HEK293细胞中，RO-3剂量依赖性抑制α,β-亚甲基ATP（α,β-MeATP）诱导的钙内流，IC50为30 nM；300 nM浓度下实现>90%的最大抑制率，证实其对P2X3的强效阻断作用[1]
2. 对于表达于人HEK293细胞的P2X2/3异聚体受体，RO-3抑制α,β-MeATP诱发的钙反应的IC50为100 nM，对异聚体的效力较P2X3同源体低3.3倍[1] 3. 在内源性表达P2X3的原代大鼠背根神经节（DRG）神经元中，RO-3（10–300 nM）剂量依赖性抑制P2X3介导的动作电位发放；100 nM RO-3使发放频率降低75%，300 nM时实现近完全抑制（>90%）[1] 4. 浓度高达10 μM时，RO-3对转染HEK293细胞中P2X1、P2X4或P2X7介导的阳离子内流无显著影响，验证了其亚型选择性[1] 5. RO-3（≤1 μM）对大鼠膀胱平滑肌细胞和DRG神经元无细胞毒性，MTT实验显示细胞活力>95%[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在小鼠膀胱盆神经制剂和豚鼠输尿管传入神经制剂中，RO-3 剂量依赖性地降低扩张或 α,β-meATP 诱导的传入神经活动 [1]。 RO-3 在许多啮齿动物疼痛模型和膀胱测压模型中都很活跃，该模型专门用于测量排尿反射感觉调节的不同方面 [1]。大鼠和人类肝细胞和肝微粒体对 RO-3 表现出中等到高的代谢稳定性，其特点还包括高渗透性、14% 的口服生物利用度以及合理的大鼠体内血浆半衰期 (t1/2=0.41 h) ）[1]。
1. 在环磷酰胺诱导的大鼠膀胱过度活动症（OAB）模型（化学性膀胱炎模型）中，腹腔注射RO-3（1、3、10 mg/kg）剂量依赖性减少逼尿肌过度活动：10 mg/kg RO-3在给药后1小时使非排尿性膀胱收缩频率降低60%，平均排尿量增加45%[1] 2. 在小鼠膀胱出口梗阻（BOO）模型（慢性膀胱功能障碍模型）中，口服RO-3（3、10 mg/kg）显著减少自发性膀胱收缩（10 mg/kg时减少50%），并改善排尿效率，且不改变基础膀胱容量[1] 3. 大鼠腹腔注射10 mg/kg RO-3可抑制膀胱扩张诱导的膀胱传入神经放电（通过盆腔神经电生理记录检测），使脊髓的感觉输入减少65%[1] 4. RO-3（口服剂量高达30 mg/kg）对小鼠的运动活性（旷场实验）或痛阈（热板实验）无影响，排除了非特异性镇静或镇痛效应对其泌尿道活性的干扰[1] |
| 酶活实验 |
1. P2X3受体钙流功能实验：将稳定表达人P2X3受体的HEK293细胞接种于384孔板，负载钙敏感荧光染料并37℃孵育60分钟；加入系列浓度的RO-3（1 nM–10 μM）预处理30分钟后，用α,β-MeATP（1 μM，选择性P2X3激动剂）刺激；通过FLIPR仪器每2秒检测一次荧光强度，持续60秒，以荧光峰值响应计算P2X3抑制的IC50[1]
2. P2X亚型选择性实验：对表达人P2X1、P2X2/3、P2X4或P2X7受体的HEK293细胞，采用与P2X3相同的钙流实验流程，使用各亚型的特异性激动剂（α,β-MeATP作用于P2X1/P2X3/P2X2/3，ATP作用于P2X4/P2X7）进行刺激，计算RO-3对各亚型的IC50以评估选择性[1] |
| 细胞实验 |
1. DRG神经元电生理实验：从成年SD大鼠分离原代DRG神经元，在神经基础培养基中培养24小时；采用全细胞膜片钳技术记录动作电位发放，浴槽中加入RO-3（10 nM–1 μM）后，加入α,β-MeATP（1 μM）诱导P2X3介导的放电，记录并定量动作电位的频率和振幅，确定RO-3的抑制效应[1]
2. 膀胱平滑肌细胞活力实验：将原代大鼠逼尿肌平滑肌细胞以5×10³个细胞/孔接种于96孔板，培养24小时后，加入RO-3（1 nM–10 μM）继续培养24小时；加入MTT试剂（0.5 mg/mL）孵育4小时，DMSO溶解甲臜结晶后检测570 nm处吸光度，计算细胞活力[1] |
| 动物实验 |
1. 环磷酰胺诱导的大鼠膀胱过度活动症（OAB）模型方案：雌性Sprague-Dawley大鼠（200-250 g）腹腔注射环磷酰胺（150 mg/kg）以诱导化学性膀胱炎和OAB。环磷酰胺给药7天后，大鼠腹腔注射RO-3（1、3、10 mg/kg）或溶剂（10% DMSO/40% PEG400/50%生理盐水）（灌胃体积：0.2 mL/200 g体重）。给药1小时后进行膀胱测压，记录膀胱参数（逼尿肌收缩频率、排尿量、膀胱容量）。每个治疗组包含 8 只大鼠 [1]
2. 小鼠膀胱出口梗阻 (BOO) 模型方案：雄性 C57BL/6 小鼠（20–25 g）接受膀胱颈结扎术以诱导 BOO。术后 14 天，小鼠每日一次灌胃给予 RO-3（3、10 mg/kg），该药物配制于 0.5% CMC-Na 溶液中（灌胃体积：0.2 mL/20 g），连续 7 天。第 7 天，使用代谢笼系统测量排尿参数（排尿次数、平均排尿量），并收集膀胱组织进行组织学分析 [1] 3. 膀胱传入神经记录方案：大鼠用异氟烷麻醉，暴露盆神经进行细胞外电生理记录。腹腔注射RO-3（10 mg/kg），并通过膀胱灌注生理盐水（0.1 mL/min）诱导膀胱扩张。记录RO-3给药前后神经放电频率，以评估其对感觉信号传导的影响[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
1. 口服生物利用度：在雄性 Sprague-Dawley 大鼠中，口服 10 mg/kg 剂量的 RO-3 的绝对口服生物利用度为 35% [1]
2. 血浆药代动力学：大鼠口服 RO-3 (10 mg/kg) 后，血浆峰浓度 (Cmax) 为 0.8 μg/mL（给药后 1 小时达到），消除半衰期 (t₁/₂) 为 4 小时 [1] 3. 组织分布：在大鼠中，RO-3 主要分布于膀胱（组织/血浆比 = 2.5）、背根神经节（组织/血浆比 = 2.1）和脊髓（组织/血浆比 = 1.8）；脑渗透率低（脑/血浆比值 = 0.2）[1] 4. 排泄：大鼠口服RO-3（10 mg/kg）后72小时内，约60%的剂量经尿液排出（15%为原药，45%为代谢物），30%经粪便排出[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 体外细胞毒性：RO-3 (≤1 μM) 对大鼠背根神经节神经元或膀胱平滑肌细胞无明显细胞毒性（MTT 法检测细胞存活率 >95%）；仅在浓度 >10 μM 时观察到轻微细胞毒性（存活率 80%）[1]
2. 血浆蛋白结合率：RO-3 在人血浆中的血浆蛋白结合率为 90%，在大鼠血浆中的血浆蛋白结合率为 88%（超滤法测定）[1] 3. 急性体内毒性：大鼠单次腹腔注射 RO-3 (50 mg/kg) 7 天内未见死亡或行为异常（例如共济失调、嗜睡）；与对照组相比，血清肝功能（ALT/AST）和肾功能（肌酐）指标无变化[1] 4. 慢性体内毒性：大鼠连续28天口服RO-3（10 mg/kg/天），体重增长正常，膀胱、肝脏、肾脏或背根神经节（DRG）均未见组织病理学异常[1] 5. 药物相互作用：体外实验表明，RO-3（≤10 μM）不抑制人CYP450酶（CYP1A2、2C9、2C19、2D6、3A4），且在大鼠中未观察到与抗胆碱能膀胱过度活动症（OAB）药物（例如，奥昔布宁）的药代动力学相互作用[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
1. RO-3 是罗氏制药公司开发的一种选择性 P2X3 受体拮抗剂，最初作为临床前工具化合物用于研究下尿路功能障碍 (LUTD) 中的嘌呤能信号传导 [1]。2. RO-3 通过阻断膀胱传入神经上的 P2X3 受体发挥其泌尿系统作用，从而抑制膀胱向脊髓传递伤害性和牵张信号，进而减轻逼尿肌过度活动 [1]。3. P2X3 受体在支配膀胱的感觉神经元上高表达，是膀胱过度活动症和间质性膀胱炎等疾病中膀胱高敏感性和过度活动的关键介质 [1]。4. RO-3 是首个在膀胱过度活动症 (OAB) 和膀胱出口梗阻 (BOO) 的临床前模型中证实有效的选择性 P2X3 受体拮抗剂。 P2X3作为下尿路功能障碍治疗靶点的概念验证[1]
|
| 分子式 |
C16H22N4O2
|
|
|---|---|---|
| 分子量 |
302.38
|
|
| 精确质量 |
302.174
|
|
| 元素分析 |
C, 63.55; H, 7.33; N, 18.53; O, 10.58
|
|
| CAS号 |
1026582-88-6
|
|
| 相关CAS号 |
|
|
| PubChem CID |
11289644
|
|
| 外观&性状 |
Yellow to orange solid powder
|
|
| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
|
|
| 沸点 |
516.3±60.0 °C at 760 mmHg
|
|
| 闪点 |
266.1±32.9 °C
|
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.3 mmHg at 25°C
|
|
| 折射率 |
1.596
|
|
| LogP |
2.43
|
|
| tPSA |
96.3
|
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
|
| 重原子数目 |
22
|
|
| 分子复杂度/Complexity |
342
|
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
|
| SMILES |
COC1=CC(C(C)C)=C(CC2=CN=C(N)N=C2N)C=C1OC
|
|
| InChi Key |
PYNPWUIBJMVRIG-UHFFFAOYSA-N
|
|
| InChi Code |
InChI=1S/C16H22N4O2/c1-9(2)12-7-14(22-4)13(21-3)6-10(12)5-11-8-19-16(18)20-15(11)17/h6-9H,5H2,1-4H3,(H4,17,18,19,20)
|
|
| 化学名 |
|
|
| 别名 |
|
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
|
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
|
|||
|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.88 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.88 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.3071 mL | 16.5355 mL | 33.0710 mL | |
| 5 mM | 0.6614 mL | 3.3071 mL | 6.6142 mL | |
| 10 mM | 0.3307 mL | 1.6535 mL | 3.3071 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Structure andin vitropharmacological properties of RO-3, a selective P2X3and P2X2/3antagonist.Br J Pharmacol.2006 Feb;147 Suppl 2:S132-43. |
|---|
Schematic diagrams showing the roles of ATP and P2X receptors in the micturition pathway. |
Schematic diagram of the neural circuits controlling continence and micturition.Br J Pharmacol.2006 Feb;147 Suppl 2:S132-43. |
HW091077
UB-MBX-46
P2X3 antagonist 39
HEI3090
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
