RO5256390

Trace amine-associated receptor 1 (TAAR1)

采用选择性TAAR1激动剂RO5256390联合常见损伤相关分子模式（ATP和ADP）观察TAAR1激动剂对细胞因子分泌和代谢谱的调节作用。在小鼠骨髓源性巨噬细胞中，TAAR1激动作用抑制ATP刺激后的TNF分泌，这似乎是代谢谱和TNF合成转录调节相关的促炎转移的下游。相比之下，TAAR1的激动作用对adp诱导的小鼠小胶质细胞中TNF和IL-6的分泌没有影响，无论星形胶质细胞存在与否。总之，我们报道了外周来源的巨噬细胞中TAAR1和嘌呤能信号之间的一种新的相互作用，而不是中枢系统内的巨噬细胞。这些发现提供了微量胺能和嘌呤能串扰的第一个证据，并支持TAAR1作为炎症性疾病的新治疗靶点的潜力。[1]

对美味食物的强迫性暴饮暴食构成了某些形式的肥胖和饮食失调的核心特征，以及最近提出的食物成瘾症。微量胺相关受体1 （TAAR1）是一种高度保守的由内源性微量胺结合的g蛋白偶联受体。TAAR1激动剂已被证明通过对中皮质边缘系统的作用来减少药物滥用的多种行为影响。在这项研究中，我们假设TAAR1可能在强迫性暴饮暴食中起作用；我们通过评估TAAR1激动剂RO5256390在大鼠限制获得高美味饮食引起的多种过度喂食相关行为中的作用来验证这一假设。我们的研究结果表明，RO5256390阻断了大鼠每天1小时对高美味含糖饮食的暴饮暴食。与适口选择效应一致，药物治疗选择性地降低了适口食物反应的速率和规律性，但它既不影响基线摄入量，也不影响食物限制引起的标准饮食过量。此外，RO5256390完全阻断了在光/暗冲突盒的厌恶隔间中提供美味食物时的强迫进食行为，并阻断了美味食物的条件奖励特性，以及二级强化计划中的美味寻找行为。药物治疗对类似焦虑或类似抑郁的行为都没有影响，在任何测试中也没有影响对照组的表现。重要的是，暴露于美味食物的大鼠显示内侧前额叶皮层（mPFC）的TAAR1水平降低，微注入边缘下亚区（而不是边缘前亚区）的RO5256390减少了暴饮暴食。总之，这些结果为TAAR1激动剂作为强迫性暴饮暴食的一种新的药物治疗提供了证据 在啮齿类动物中，两种新的药理学上不同的化合物——完全激动剂RO5256390和部分激动剂RO5263397——可以激活TAAR1，阻断精神兴奋剂诱导的多动症，并产生一种与抗精神病药物奥氮平相似的大脑激活模式，表明TAAR1具有类似抗精神病药物的特性。TAAR1激动剂不会诱发猝倒或体重增加；RO5263397甚至减少氟哌啶醇引起的猝厥，并阻止奥氮平增加体重和脂肪积累。最后，TAAR1的激活促进了大鼠的警觉性，并在啮齿动物和灵长类动物模型中显示出类似认知和抗抑郁的特性。这些数据表明，与目前的药物标准相比，TAAR1激动剂可能为精神分裂症提供一种新的、有区别的治疗方法：TAAR1激动剂不仅可以改善阳性症状，还可以改善阴性症状和认知缺陷，而不会引起运动障碍或体重增加等不良反应。[3]

高选择性TAAR1完全激动剂RO5256390（Revel等人，2012）已合成。实验1的剂量（0、1、3、10 mg/kg）参考了先前发表的报告（Pei等人，2014）。在其他实验中，使用了实验1中最有效的剂量。颅内给药时，RO5256390的给药剂量为每侧0、1.5、5和15 μg；这些剂量是根据我们实验室的初步观察结果选择的。腹腔注射（ip）时，RO5256390用0.3% Tween 80和0.9%生理盐水新鲜溶解；颅内给药时，RO5256390用乙醇：聚氧乙烯蓖麻油：生理盐水（2:2:18）混合液新鲜溶解。对于受试者内部药物测试，允许间隔 2-4 天，直到受试者的表现恢复到基线水平。除非另有说明，所有药物处理均采用平衡设计。[1]

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\n\n实验 1：TAAR1 激动剂 RO5256390 对操作性暴食样行为的影响[1]
\n在操作性实验开始前 30 分钟，分别向标准饲料组和适口性食物组（每组 n=12）的大鼠腹腔注射 TAAR1 激动剂 RO5256390（0、1、3、10 mg/kg）。

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\n食物限制诱导对标准饲料的高反应率[1]
\n为了在操作性实验中提高对标准饲料的反应率，将大鼠在笼内限制食物摄入 12 天（使每日总摄入量达到大鼠每日摄入量的 70%；Cottone 等，2012）。

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\n实验实验 2：TAAR1 激动剂 RO5256390 对食物限制诱导的标准饲料高反应率的影响 [1]
\n食物限制组大鼠（每组 n=9）在操作性条件反射实验前 30 分钟腹腔注射 TAAR1 激动剂 RO5256390（0、10 mg/kg）。

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\n实验 3：TAAR1 激动剂 RO5256390 对持续进食速率和规律性的影响 [1]
\n标准饲料组、食物限制标准饲料组和适口性饲料组大鼠（每组 n=7-10）在操作性条件反射实验前 30 分钟腹腔注射 TAAR1 激动剂 RO5256390（0、10 mg/kg）。

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\n实验 4： TAAR1激动剂RO5256390对强迫性进食的影响[1]
\n采用组间设计，在测试前30分钟，分别给普通饲料组和适口饲料组（每组n=21-23）的大鼠腹腔注射TAAR1激动剂RO5256390（0、10 mg/kg）。
\n条件性食物奖励：条件性位置偏好测试[1]
\n条件性位置偏好（CPP）测试程序如前所述（Velazquez-Sanchez等，2015）。

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\n实验5：TAAR1激动剂RO5256390对条件性食物奖励的影响[1]
\n普通饲料组和适口饲料组（每组n=16-22）采用组间设计，在条件反射后阶段前30分钟，腹腔注射TAAR1激动剂RO5256390（0、10 mg/kg）。\n

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\n实验6：TAAR1激动剂RO5256390对觅食行为的影响[1]
\n标准饲料组和适口饲料组（每组n=6-10）的大鼠在二级训练前30分钟腹腔注射TAAR1激动剂RO5256390（0、10 mg/kg）。\n
\n焦虑样行为：防御性退缩测试[1]
\n在这项10分钟的测试中（Cottone等人，2009；Parylak等人，2012），将大鼠放入退缩箱（2升Pyrex玻璃容器）。烧杯用黑色胶带包裹着，放置在面向后方的开阔场地中。首次出现潜伏期（四肢全部进入开放场地）和缩回时间被用作焦虑样行为的指标，而进入实验箱的次数则被用作运动活性的指标（Cottone et al, 2009; Parylak et al, 2012）。\n

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\n实验7：TAAR1激动剂RO5256390对焦虑样行为的影响[1]
\n采用组间设计，在测试前30分钟，分别给标准饲料组和适口饲料组（每组n=10-12只）的大鼠腹腔注射TAAR1激动剂RO5256390（0、10 mg/kg）。\n

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\n实验8：TAAR1激动剂RO5256390对抑郁样行为的影响[1]
\n标准饲料组和适口性食物组（每组 n=9–12）的大鼠在 15 分钟预测试结束时以及测试前 30 分钟分别接受 TAAR1 激动剂 RO5256390（0、10 mg/kg，腹腔注射）注射，采用组间设计。\n

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\n实验 10–11：TAAR1 激动剂 RO5256390 微量注射入内侧前额叶皮层 (IL) 和外侧前额叶皮层 (PrL) 对操作性暴食样进食的影响 [1]
\n标准饲料组和适口性食物组的大鼠分别接受 TAAR1 激动剂 RO5256390（每侧 0、1.5、5、15 μg）微量注射入内侧前额叶皮层 (IL)（每组 n=8–10）或外侧前额叶皮层 (PrL)。 （每组 n=11–12）在操作性训练前 10 分钟对皮层进行检测。

[1]. TAAR1 Regulates Purinergic-induced TNF Secretion from Peripheral, But Not CNS-resident, Macrophages. J Neuroimmune Pharmacol. 2023 Jun;18(1-2):100-111.
[2]. The Trace Amine-Associated Receptor 1 Agonist RO5256390 Blocks Compulsive, Binge-like Eating in Rats. Neuropsychopharmacology. 2017 Jun;42(7):1458-1470.
[3]. A new perspective for schizophrenia: TAAR1 agonists reveal antipsychotic- and antidepressant-like activity, improve cognition and control body weight. Mol Psychiatry. 2013 May;18(5):543-56.

因此，可以推测TAAR1激动剂对食物奖赏的影响可能是通过调节内侧前额叶皮层（mPFC）的多巴胺能神经末梢实现的。摄入美味食物会激活奖赏回路，并在mPFC中释放多巴胺（Babbs等人，2013；Volkow等人，2008）。此外，难以获得美味食物会导致奖赏回路发生神经适应性改变，从而导致强迫性暴食（Volkow等人，2013）。而且，肥胖和暴食症患者对条件性食物线索表现出更敏感的反应，例如，当接触到食物线索时，前额叶激活增强，多巴胺释放也更高（Dimitropoulos等人，2012）。因此，观察到的TAAR1激活对食物奖赏的影响可能是由于RO5256390治疗能够恢复因过度摄入高适口性食物而受损的前额皮质多巴胺能传递，尽管还需要进一步的研究来证实这一假设。总之，我们的结果证实了RO5256390作为治疗以强迫性暴食为特征的疾病的药物的潜力。[2]

C13H20CL2N2O

291.216

218.141

C, 71.53; H, 8.31; N, 12.83; O, 7.33

1043495-96-0

1043495-96-0

24963286

White to off-white solid powder

1.1±0.1 g/cm3

330.9±25.0 °C at 760 mmHg

153.9±23.2 °C

0.0±0.7 mmHg at 25°C

1.576

2.85

47.6

1

2

4

16

246

2

CC[C@@H](C[C@H]1COC(=N1)N)C2=CC=CC=C2

NCOOUUDYVQYIDE-HFXMYSAISA-N

InChI=1S/C13H18N2O.2ClH/c1-2-10(11-6-4-3-5-7-11)8-12-9-16-13(14)15-12/h3-7,10,12H,2,8-9H2,1H3,(H2,14,15)2*1H/t10-,12-/m0../s1

(S)-4-((S)-2-phenylbutyl)-4,5-dihydrooxazol-2-amine dihydrochloride

RO5256390; 1043495-96-0; RO5256390; (S)-4-((S)-2-Phenyl-butyl)-4,5-dihydro-oxazol-2-ylamine; TRACE AMINE RECEPTOR 1; (4S)-4-[(2S)-2-phenylbutyl]-4,5-dihydro-1,3-oxazol-2-amine; (S)-4-((S)-2-Phenylbutyl)-4,5-dihydrooxazol-2-amine; IXDKFUBXESWHSL-JQWIXIFHSA-N; SCHEMBL503518; RO-5256390; RO 5256390.

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~50 mg/mL (~229.05 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (11.45 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (11.45 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (11.45 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。