| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
SYK (IC50 = 5.6 nM)
Spleen Tyrosine Kinase (SYK) (IC50 = 4.1 nM); ZAP-70 (IC50 = 320 nM); ITK (IC50 = 450 nM); BTK (IC50 = 620 nM) [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：RO9021 抑制人外周血单核细胞 (PBMC) 和全血中的 BCR 信号传导、人单核细胞中的 FcγR 信号传导以及人肥大细胞中的 FcεR 信号传导，并在体外阻断小鼠骨髓巨噬细胞的破骨细胞生成。 RO9021 抑制人 B 细胞中的 Toll 样受体 (TLR) 9 信号传导，导致 B 细胞分化时浆母细胞、免疫球蛋白 (Ig)M 和 IgG 水平降低。 RO9021 还可以有效抑制 TLR9 激活后人浆细胞样树突状细胞 (pDC) 产生 I 型干扰素。这种效应是 TLR9 特有的，因为 RO9021 不会抑制 TLR4 或 JAK-STAT 介导的信号传导。 RO9021 不会明显抑制 JAK-STAT 通路。激酶测定：RO9021 是一种高选择性 SYK 抑制剂，S(99) 的 S 分数较低，为 0.003，S(90) 的 S 分数为 0.015，表明 SYK 是总共 392 种测试的激酶中唯一与 RO9021 具有 99% 竞争性的激酶。 RO9021 抑制抗 IgM 诱导的 BTK、PLCγ2、AKT 和 ERK 磷酸化，表明 RO9021 阻断 SYK 激酶活性会导致 BCR 下游信号级联减弱。细胞测定：在抗 IgM 抗体诱导 BCR 交联之前，用 1 μM RO9021 预处理人类 B 细胞系 Ramos。使用磷酸特异性抗体通过蛋白质印迹评估各种 BCR 信号传导成分的激活。
RO9021抑制抗IgM诱导的原代小鼠B细胞受体（BCR）信号传导，阻断SYK及下游PLCγ2的磷酸化，IC50为12 nM [1] 它抑制脂多糖（LPS）诱导的小鼠骨髓来源巨噬细胞（BMDMs）中TNFα的产生，IC50为18 nM [1] 在人外周血单个核细胞（PBMCs）中，RO9021减少抗CD3/CD28刺激的IL-2分泌（IC50 = 23 nM）和IFNγ产生（IC50 = 27 nM）[1] 该化合物抑制小鼠腹腔巨噬细胞中FcγR介导的吞噬作用，30 nM时抑制率达50% [1] 通过β-己糖胺酶释放检测显示，它阻断大鼠嗜碱性白血病（RBL-2H3）细胞中IgE介导的脱颗粒，IC50为15 nM [1] Western blot分析显示，RO9021（100 nM）处理后，BCR刺激的B细胞中ERK1/2和AKT的磷酸化水平降低 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
动物研究表明，口服RO9021可以显着抑制mCIA模型中的关节炎进展，并具有良好的药代动力学-药效相关性。
小鼠口服RO9021，剂量为30 mg/kg，每日两次，对卵清蛋白诱导的迟发型超敏反应（DTH）的抑制率达65% [1] 在小鼠胶原诱导关节炎（CIA）模型中，口服RO9021剂量为10、30、100 mg/kg，每日一次，与溶媒对照组相比，爪肿胀分别减少38%、59%和76% [1] 口服RO9021（50 mg/kg，每日两次）可抑制小鼠体内抗IgM诱导的B细胞活化，表现为脾脏B细胞增殖减少和血清IgM水平降低 [1] 在大鼠佐剂诱导关节炎（AIA）模型中，口服RO9021剂量为25、75 mg/kg，每日一次，治疗14天后，关节炎症评分分别降低42%和68% [1] |
| 酶活实验 |
在已测试的 392 种激酶中，SYK 是唯一与 RO9021 表现出 99% 竞争的激酶。 RO9021 是一种高选择性 SYK 抑制剂，S(99) 的 S 分数较低，为 0.003，S(90) 的 S 分数为 0.015。由于阻断 SYK 激酶活性，RO9021 减弱了 BCR 的下游信号级联。 RO9021 抑制抗体诱导的 BTK、PLCγ2、AKT 和 ERK 磷酸化这一事实证明了这一点。
采用重组SYK、ZAP-70、ITK和BTK激酶评估抑制活性。实验在含有ATP、MgCl2和生物素化肽底物的缓冲液中进行，将系列稀释的RO9021与酶、底物和ATP在37°C下孵育45分钟。终止反应后，用链霉亲和素包被板捕获磷酸化底物，通过磷酸特异性抗体检测并定量，计算IC50值 [1] 采用均相时间分辨荧光（HTRF） assay验证SYK结合：将SYK激酶结构域与RO9021及荧光标记的ATP竞争性探针共同孵育，检测化合物对探针的置换作用，证实其直接结合ATP口袋，Ki值为2.8 nM [1] |
| 细胞实验 |
在用抗 IgM 抗体交联 BCR 之前，用 1 μM RO9021 预处理人 B 细胞系 Ramos。使用磷酸特异性抗体，使用蛋白质印迹来评估不同 BCR 信号传导成分的激活。
从脾脏中分离原代小鼠B细胞，在存在系列稀释的RO9021的条件下，用抗IgM（10 μg/mL）刺激。在37°C、5% CO2环境中孵育24小时后，裂解细胞，通过Western blot检测SYK和PLCγ2的磷酸化水平 [1] 小鼠BMDMs在培养基中分化7天，然后用LPS（1 μg/mL）和RO9021共同刺激。24小时后收集上清液，通过ELISA检测TNFα水平以确定IC50 [1] RBL-2H3细胞用抗DNP IgE过夜致敏，洗涤后在RO9021存在下用DNP-BSA激发。1小时后定量β-己糖胺酶释放，评估脱颗粒抑制效果 [1] 从健康供体中分离人PBMCs，用抗CD3/CD28磁珠刺激，加入不同浓度的RO9021，48小时后通过多重免疫测定法检测上清液中的IL-2和IFNγ [1] |
| 动物实验 |
C57BL/6 and DBA/1J adult mice
5 and 45 mg/kg daily oral administration Ovalbumin-induced DTH model: Mice were sensitized with ovalbumin emulsified in complete Freund's adjuvant on day 0. On day 7, mice were challenged with ovalbumin via footpad injection. RO9021 was formulated in 0.5% methylcellulose + 0.1% Tween 80 and administered orally at 30 mg/kg twice daily from day 5 to day 7. Footpad swelling was measured 24 hours after challenge [1] Mouse CIA model: DBA/1 mice were immunized with bovine type II collagen on day 0 and boosted on day 21. RO9021 was given orally at 10, 30, 100 mg/kg once daily from day 21 to day 35. Paw volume was measured every 3 days, and joint histopathology was evaluated at study end [1] Rat AIA model: Male Lewis rats were immunized with Mycobacterium tuberculosis in mineral oil on day 0. RO9021 was administered orally at 25 and 75 mg/kg once daily from day 14 to day 28. Joint inflammation scores were assessed twice weekly based on erythema, swelling, and function [1] B cell activation model: Mice were injected intraperitoneally with anti-IgM (20 μg/mouse) and dosed orally with RO9021 (50 mg/kg twice daily) for 3 days. Splenocytes were isolated for proliferation assay, and serum IgM levels were measured by ELISA [1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在小鼠中，单次口服10 mg/kg剂量的RO9021后，其口服生物利用度为52%[1]。在小鼠中，静脉注射5 mg/kg剂量后，该化合物的血浆半衰期(t1/2)为3.5小时[1]。在大鼠中，口服生物利用度为47%（10 mg/kg剂量），血浆t1/2为4.1小时[1]。RO9021显示出良好的组织渗透性，口服给药3小时后，大鼠脾脏、淋巴结和关节中的药物浓度分别是血浆浓度的2.8倍、3.1倍和1.5倍[1]。
在人肝微粒体中的代谢稳定性中等，半衰期为72分钟[1]。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在一项为期 28 天的大鼠重复给药毒性研究中，口服剂量高达 100 mg/kg/天的 RO9021 未引起体重、血液学或临床化学（肝/肾功能指标）的显著变化 [1]。RO9021 在人血浆中的血浆蛋白结合率为 93%，在小鼠血浆中为 91%，在大鼠血浆中为 89% [1]。在 1 μM RO9021 浓度下，对 50 种激酶的检测未观察到显著的脱靶毒性 [1]。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
RO9021 是一种新型的、口服生物利用度高的选择性 SYK 抑制剂，专为治疗自身免疫性疾病而开发 [1]。它通过抑制先天性和适应性免疫细胞中 SYK 介导的信号通路发挥作用，从而抑制促炎细胞因子的产生、B 细胞活化、T 细胞增殖以及 Fc 受体介导的反应 [1]。该化合物在自身免疫性疾病模型中显示出治疗潜力，靶向参与关节炎和超敏反应的通路 [1]。
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| 分子式 |
C18H25N7O
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|---|---|---|
| 分子量 |
355.44
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| 精确质量 |
355.212
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| 元素分析 |
C, 60.82; H, 7.09; N, 27.58; O, 4.50
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| CAS号 |
1446790-62-0
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
71626896
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
618.5±55.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
327.9±31.5 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.8 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.667
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| LogP |
4.97
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| tPSA |
132
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
26
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| 分子复杂度/Complexity |
477
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| 定义原子立体中心数目 |
2
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| SMILES |
O=C(C1C(=C([H])C(=NN=1)N([H])[C@]1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@]1([H])N([H])[H])N([H])C1C([H])=C([H])C(C([H])([H])[H])=C(C([H])([H])[H])N=1)N([H])[H]
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| InChi Key |
XJZVCDVZCRLIKN-QWHCGFSZSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C18H25N7O/c1-10-7-8-15(21-11(10)2)23-14-9-16(24-25-17(14)18(20)26)22-13-6-4-3-5-12(13)19/h7-9,12-13H,3-6,19H2,1-2H3,(H2,20,26)(H2,21,22,23,24)/t12-,13+/m0/s1
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| 化学名 |
6-[[(1R,2S)-2-aminocyclohexyl]amino]-4-[(5,6-dimethylpyridin-2-yl)amino]pyridazine-3-carboxamide
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.8134 mL | 14.0671 mL | 28.1341 mL | |
| 5 mM | 0.5627 mL | 2.8134 mL | 5.6268 mL | |
| 10 mM | 0.2813 mL | 1.4067 mL | 2.8134 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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Syk Kinase Peptide Substrate, Biotin labeled
Syk-IN-7
Syk-IN-4
Dehydroabietinol
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COA
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