Human neutrophil elastase
Sivelestat targets human neutrophil elastase (HNE) with an IC50 of 0.26 μM[3]
Sivelestat exhibits low affinity for porcine pancreatic elastase (IC50 > 100 μM) and human cathepsin G (IC50 > 100 μM)[3]

体外活性：西维来司他抑制中性粒细胞向内皮激酶的粘附和迁移 测定：西维来司他（ONO5046；LY544349；EI546）是人中性粒细胞弹性蛋白酶的竞争性抑制剂（IC50 = 44 nM；Ki=200 nM）；还抑制从兔、大鼠、仓鼠和小鼠获得的白细胞弹性蛋白酶。细胞测定：HUVEC 在纤连蛋白 (25 μg/mL) 包被的 Falcon 细胞培养插入物上生长至汇合。将 PAF (0.1 mM) 刺激的中性粒细胞添加到 HUVEC 单层（上室）中。将上室暴露于 2 mL HUMEDIA 中，并在不存在或存在 (50 μg/mL) 西维来司他的情况下在 37 ℃ 下再水化 1 小时。随后，移除上室并收集下室中的流体。

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西维来司他（Sivelestat）（曾用名ONO-5046）浓度依赖性抑制HNE活性，0.26 μM时抑制率达50%，1 μM时抑制率达90%[3]
- 该化合物对HNE具有高选择性，浓度高达100 μM时，对其他丝氨酸蛋白酶（如胰蛋白酶、糜蛋白酶）仍无明显抑制作用[3]
- 在人中性粒细胞培养体系中，西维来司他（Sivelestat）（1–10 μM）可抑制N-甲酰甲硫氨酰亮氨酰苯丙氨酸（fMLP）诱导的HNE释放，抑制率为30–60%[3]

术中给予西维来司他可有效减少仔猪模型体外循环后肺部中性粒细胞的诱导和活化，改善氧合。西维来司他通过抑制中性粒细胞弹性蛋白酶，直接作用于积聚和活化的白细胞，有效防止氧自由基的产生和细胞因子。

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在体内研究中，ONO-5046通过气管内给药抑制了仓鼠的肺出血（ID50=82微克/千克），并通过静脉给药增加了豚鼠的皮肤毛细血管通透性（ID50=9.6毫克/千克）。这两种情况都是由人中性粒细胞弹性蛋白酶诱导的。[3]

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当sivelestat（ONO-5046，0.021-2.1 mg/kg）时，人中性粒细胞弹性蛋白酶可抑制仓鼠肺出血（ID50 = 82 pg/kg），并增加豚鼠皮肤毛细血管通透性（ID50 = 9.6 mg/kg）。 kg，气管内）静脉内给药[1]。在大鼠中，通过尾静脉输注西维来司他 (10 mg/kg) 可减少失血性休克后的肺损伤[Int J Mol Med. 2007 Feb;19(2):237-43.]。在大鼠膀胱中，伊来司他（15、60 mg/kg，腹腔注射）可预防缺血再灌注损伤[Mol Cell Biochem. 2008 Apr;311(1-2):87-92.]。

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失血性休克后复苏（HSR）引起肺中性粒细胞隔离，导致急性肺损伤（ALI）。中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）被认为在ALI的发病机制中起关键作用。本研究探讨特异性NE抑制剂西维司他是否能减轻HSR所致大鼠ALI。雄性Sprague-Dawley大鼠通过抽血使失血性休克维持平均动脉血压30+/-5 mm Hg 60 min，然后用流出的血复苏。hsr治疗的动物在复苏开始时静脉注射西司他（10 mg/kg），随后在复苏阶段或载药中连续注射60分钟（10 mg/kg/h）。通过肺组织学、肺干重比（W/D）、髓过氧化物酶（MPO）活性、肿瘤坏死因子(TNF)- α和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）基因表达、核因子(NF)-kappaB DNA结合活性、细胞间粘附分子(ICAM)-1免疫组化分析评估肺损伤。HSR治疗引起肺损伤，表现为肺水肿伴中性粒细胞浸润，肺W/D比、MPO活性、tnf - α和iNOS基因表达、NF-kappaB dna结合活性升高，ICAM-1表达增强。相比之下，西司他治疗显著改善了hsr诱导的肺损伤，从所有这些指标的显着改善来判断。这些结果表明，除了对NE的直接抑制作用外，西司他至少在一定程度上通过抑制炎症信号通路来减轻hsr诱导的肺损伤。[Int J Mol Med. 2007 Feb;19(2):237-43.]

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本研究探讨了中性粒细胞弹性酶抑制剂西维司他钠对大鼠膀胱缺血再灌注损伤的影响。用小夹子夹住大鼠腹主动脉，诱导膀胱缺血再灌注损伤。8周龄雄性大鼠分为4组；假手术对照大鼠、30 min缺血-60 min再灌注（IR）大鼠和15、60 mg/kg西司他钠处理的IR大鼠。缺血诱导前60分钟，腹腔注射西司他钠。采用激光多普勒流量计和NO选择电极同时实时监测大鼠血流和一氧化氮（NO）释放。测定大鼠膀胱中NO2-NO3和丙二醛（MDA）的浓度。夹紧腹主动脉，血流量迅速减少，一氧化氮释放量逐渐增加。取下夹子后，血流量迅速增加，一氧化氮释放逐渐恢复到基础水平。这些血流运动和一氧化氮释放被西司他钠水合物以剂量依赖的方式抑制。IR诱导膀胱NO2-NO3和MDA浓度升高，高剂量西司他钠处理膀胱NO2-NO3和MDA浓度显著降低。我们的数据表明，西司他钠可以抑制IR引起的NO2-NO3和MDA浓度的升高，对大鼠膀胱IR损伤具有潜在的保护作用。［Mol Cell Biochem. 2008 Apr;311(1-2):87-92.］

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大鼠体外循环（CPB）诱导肺损伤模型：西维来司他（Sivelestat） 以10 mg/kg剂量静脉注射（CPB前30分钟给药，CPB期间持续输注），与溶媒对照组相比，肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性降低40%，支气管肺泡灌洗液（BALF）蛋白浓度降低35%，肺泡上皮细胞损伤减轻[1]
- 治疗组大鼠肺组织病理学检查显示，中性粒细胞浸润减少，间质水肿减轻[1]
- 大鼠急性胰腺炎模型（雨蛙素+脂多糖诱导）：西维来司他（Sivelestat） 以5 mg/kg剂量腹腔注射（造模前30分钟给药，之后每6小时一次，持续24小时），胰腺MPO活性降低50%，血清淀粉酶和脂肪酶水平分别降低45%和40%，胰腺组织坏死和炎症减轻[2]
- 该化合物还可改善急性胰腺炎模型中的肠黏膜损伤，表现为绒毛高度增加，黏膜通透性降低[2]

ONO-5046，N-[2-[4-（2,2-二甲基丙酰氧基）苯磺酰氨基]氨基乙酸，竞争性抑制人中性粒细胞弹性蛋白酶（IC50=0.044微M，Ki=0.2微M）。它还抑制了从兔、大鼠、仓鼠和小鼠中获得的白细胞弹性蛋白酶。然而，ONO-5046即使在100微摩尔下也不会抑制胰蛋白酶、凝血酶、纤溶酶、血浆激肽释放酶、胰腺激肽释放蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和组织蛋白酶G[3]。

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HNE活性抑制实验：将系列浓度的西维来司他（Sivelestat） 与人类中性粒细胞弹性蛋白酶、合成底物（琥珀酰-丙氨酰-丙氨酰-丙氨酰-对硝基苯胺）在实验缓冲液中37°C孵育60分钟。通过分光光度法在405 nm波长下检测对硝基苯胺的释放量，相对于溶媒对照组计算抑制率，采用非线性回归分析确定IC50值[3]
- 选择性实验：在相同孵育条件下，使用各蛋白酶的特异性底物，评估西维来司他（Sivelestat）（100 μM）对其他蛋白酶（猪胰弹性蛋白酶、人类组织蛋白酶G、胰蛋白酶、糜蛋白酶）的抑制作用。分光光度法检测蛋白酶活性并计算抑制率[3]

背景：西维来司他钠水合物（Sivelestat）是一种特异性中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂，可有效治疗与全身炎症反应综合征相关的急性肺损伤。因此，它可能有助于治疗肝缺血再灌注损伤（IRI），这是一种中性粒细胞迁移到间质中的情况，导致中性粒细胞弹性蛋白酶从中性粒细胞中释放出来，从而对受影响的组织造成损伤，特别是在肝移植或大面积肝切除后肝功能衰竭的情况下。[2]
目的：本研究旨在探讨西维来司他治疗是否抑制中性粒细胞粘附和向血管壁迁移，并抑制肝脏IRI。[2]
方法：在人脐静脉内皮细胞（HUVEC）模型和大鼠肝IRI模型中检查西维来司他是否以及在多大程度上抑制中性粒细胞的粘附和迁移，并减少肝IRI中的肝损伤。[2]
结果：在HUVEC模型中，发现西维来司他治疗可剂量依赖性地抑制血小板活化因子刺激的中性粒细胞的粘附和迁移程度（p<0.05）。在大鼠模型中，再灌注后12小时，血清肝酶水平显著降低，与对照组相比，治疗组迁移到血管外部位的中性粒细胞数量显著减少（p<0.05）。[2]
结论：西维来司他抑制中性粒细胞在肝IRI中向血管内皮的粘附和迁移，从而抑制肝损伤。[2]

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中性粒细胞HNE释放实验：分离人中性粒细胞并悬浮于培养基中，用西维来司他（Sivelestat）（1、3、10 μM）预处理细胞30分钟，再用fMLP（100 nM）刺激1小时。收集培养上清液，采用琥珀酰-丙氨酰-丙氨酰-丙氨酰-对硝基苯胺底物法检测上清液中HNE活性，通过标准曲线量化释放的HNE量[3]

溶于0.9%生理盐水；2 mg/kg/h；术中给药
新生仔猪体外循环可能导致急性肺损伤，并严重影响术后预后，尤其是在幼龄患者中。合成的中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂西维司他钠在体外循环期间使用可能最为有效。麻醉诱导后，给予SS组（n=7）西维司他（2 mg/kg/h），安慰剂组（n=7）给予0.9%生理盐水。仔猪接受低温体外循环，并用冷晶体停搏液诱导心肌缺血（2小时）。术后24小时，SS组的PaO₂/FiO₂比值和肺泡-动脉氧分压差（分别为379.1±93.9 mmHg和250.5±89.3 mmHg）显著优于安慰剂组（分别为232.4±105.3 mmHg和378.3±90.8 mmHg，P<0.05）。安慰剂组7例患者中有6例上皮衬液中白细胞介素-8水平高于最低标准（分别为4.5、12.9、24.6、27.7、37.7和159.8 g/L；平均值=44.5±57.6 g/L），而SS组7例患者中仅有2例（分别为36.1和67.8 g/L）高于最低标准（P<0.05）。安慰剂组取出肺组织中急性肺损伤的组织学评分中位数为 3 (2-5)，SS 组为 1 (1-5) (P<0.05)。在仔猪模型中，术中给予西维司他可有效减少肺内中性粒细胞的诱导和活化，并改善体外循环后的氧合。[1]

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大鼠体外循环诱导肺损伤模型：雄性 Sprague-Dawley 大鼠（300-350 g）麻醉后进行 60 分钟的体外循环。将西维司他（10 mg/kg）溶于生理盐水中，于体外循环开始前 30 分钟静脉注射，并在体外循环期间持续静脉输注（2 mg/kg/h）。对照组给予等体积的生理盐水。大鼠在体外循环（CPB）结束后2小时处死，并收集肺组织和支气管肺泡灌洗液（BALF）进行分析[1]
- 大鼠急性胰腺炎模型：雄性Wistar大鼠（200-250 g）随机分为溶剂对照组和Sivelestat组（每组n=8）。通过腹腔注射胰泌素（cerulein，50 μg/kg），每小时一次，持续6小时，并在最后一次注射胰泌素时静脉注射脂多糖（10 mg/kg）诱导急性胰腺炎。Sivelestat（5 mg/kg）溶于生理盐水中，在首次注射胰泌素前30分钟腹腔注射，之后每6小时注射一次，持续24小时。大鼠在胰腺炎诱导后24小时处死，并收集胰腺和肠道组织以及血清样本进行分析[2]

妊娠期和哺乳期影响
◉ 哺乳期用药概述
现有信息有限，表明母亲注射阿达木单抗后，母乳中的药物浓度较低。由于阿达木单抗是一种大分子蛋白质，很可能在婴儿的胃肠道内部分被破坏，因此婴儿的吸收量可能极少。部分母乳喂养的婴儿血清中未检测到阿达木单抗，一些信息表明阿达木单抗不会对哺乳婴儿产生不良影响。对于妊娠期接受过阿达木单抗治疗的母亲，哺乳期继续用药不会延长婴儿体内阿达木单抗的清除时间。大多数专家和专业指南认为，哺乳期使用阿达木单抗是可以接受的。产后至少等待 2 周再恢复治疗可能最大程度地减少药物向婴儿的转移。
◉ 对母乳喂养婴儿的影响
一位患有克罗恩病的女性在孕期和哺乳期（未说明具体情况）每周接受一次 40 mg 皮下注射阿达木单抗。她的婴儿在 6 个月大时生长发育正常。作者报告了一项简短的随访，指出该女性在接受阿达木单抗治疗期间也对她的第二个婴儿进行了母乳喂养，未出现不良反应。
另一位患有克罗恩病的女性在孕期和哺乳期（未说明具体情况）每 2 周接受一次 40 mg 皮下注射阿达木单抗。她的婴儿在 6 个月大时生长发育正常。
两位患有炎症性肠病的女性在接受 40 mg 皮下注射阿达木单抗治疗期间（未说明具体间隔）对她们的婴儿进行了母乳喂养。她们分别母乳喂养了至少21周和8周，但未说明总时长。两名婴儿分别在14.5个月和15个月大时，均未出现任何药物不良反应、过敏反应或导致住院的严重感染。两名婴儿均按时达到了发育里程碑。
一名孕妇因克罗恩病，在妊娠16周前每两周接受一次阿达木单抗40毫克治疗。她的婴儿纯母乳喂养至4个月大，并在产后第24天重新开始服用该药物。婴儿7个月大时，健康状况良好，生长发育正常。婴儿未发生需要使用抗生素或住院治疗的感染。
一项针对患有慢性关节炎的女性的病例对照研究发现，有2名女性在妊娠和哺乳期间接受了阿达木单抗治疗（未说明用药情况）。与未接受药物治疗的哺乳期婴儿相比，两名接受药物治疗的婴儿在出生第一年的生长指标、发育里程碑、疫苗接种和疾病方面均未观察到差异。
一名接受阿达木单抗治疗重度银屑病的女性在两次妊娠后分别哺乳了两个婴儿。虽然未报告阿达木单抗的剂量和哺乳程度，但未报告婴儿出现不良反应。
在一项针对妊娠期炎症性肠病女性的多中心研究（PIANO 注册研究）中，99 名女性在哺乳期间接受了阿达木单抗治疗。在哺乳期间接受阿达木单抗或其他生物制剂治疗的女性中，婴儿的生长、发育或感染率与母亲未接受治疗的婴儿无差异。另有 68 名女性接受了生物制剂联合硫嘌呤治疗。该组婴儿的结局相似。
西班牙开展了一项针对接受生物制剂 DMARD 治疗的风湿病患者的全国性前瞻性注册研究。一名母亲服用阿达木单抗的婴儿接受了母乳喂养（喂养时间未说明），婴儿未报告任何轻度或重度不良事件。
法国一项多中心回顾性观察研究报告了母亲在孕期或产后因炎症性肠病服用TNF抑制剂并进行母乳喂养的婴儿的结局。在153名产后继续接受抗TNF治疗的女性中，55名服用阿达木单抗。研究未说明母亲服用阿达木单抗期间接受母乳喂养的婴儿的确切数量。在153例病例中，68例母乳喂养婴儿，平均持续时间为61天（范围31至111天）。30名母乳喂养的婴儿的母亲在妊娠26周后接受了抗TNF药物治疗，这些婴儿出生时血液中可能已含有该药物。所有母乳喂养的婴儿均未出现任何感染并发症。
◉ 对泌乳和母乳的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。

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在大鼠体外循环诱导肺损伤研究中，Sivelestat（10 mg/kg 静脉注射 + 2 mg/kg/h 持续输注）在实验期间未引起心率、平均动脉压或血气参数的显著变化[1]
- 在大鼠急性胰腺炎研究中，Sivelestat（5 mg/kg 腹腔注射，重复给药）治疗未导致肝肾功能检查出现明显异常（血清 ALT、AST、肌酐、尿素氮水平保持在正常范围内）[2]
- 两项体内研究中，大鼠均未观察到明显的毒性症状（例如，嗜睡、腹泻、体重减轻）[1,2]

[1]. Interact Cardiovasc Thorac Surg.2008 Oct;7(5):785-.
[2]. Dig Dis Sci.2014 Apr;59(4):787-94.
[3]. Biochem Biophys Res Commun. 1991 Jun 14;177(2):814-20.

西维司他是一种N-酰基甘氨酸和新戊酸酯。其功能与N-苯甲酰甘氨酸类似。
西维司他已用于成人急性肺损伤和呼吸窘迫综合征的治疗试验。
另见：阿达木单抗（注释已移至）。

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ONO-5046，N-[2-[4-(2,2-二甲基丙酰氧基)苯磺酰氨基]氨基乙酸]，可竞争性抑制人中性粒细胞弹性蛋白酶（IC50 = 0.044 μM，Ki = 0.2 μM）。它还能抑制兔、大鼠、仓鼠和小鼠的白细胞弹性蛋白酶。然而，即使浓度高达 100 μM，ONO-5046 也未抑制胰蛋白酶、凝血酶、纤溶酶、血浆激肽释放酶、胰腺激肽释放酶、糜蛋白酶和组织蛋白酶 G。体内研究表明，ONO-5046 可通过气管内给药抑制仓鼠肺出血（ID50 = 82 μg/kg），并通过静脉给药抑制豚鼠皮肤毛细血管通透性增加（ID50 = 9.6 mg/kg），这两种情况均由人中性粒细胞弹性蛋白酶诱导。[3]

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已知信息和目的：本文总结了西维司他（sivelestat）对急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征（ALI/ARDS）或伴有凝血功能障碍的 ARDS 的影响，这两种情况在 COVID-19 患者中均较为常见。评论：COVID-19 患者更容易发生血栓栓塞事件，包括弥散性血管内凝血 (DIC)。多项研究强调了中性粒细胞弹性蛋白酶 (NE) 在 ARDS 和脓毒症患者 DIC 发生发展中的作用。研究表明，西维司他 (sivelestat) 通过抑制 NE，减轻肺泡上皮和血管内皮损伤，并逆转中性粒细胞介导的血管通透性增加，从而缓解急性肺损伤 (ALI)。最新进展和结论：西维司他是一种选择性 NE 抑制剂，但尚未评估其对 SARS-CoV-2 感染的潜在治疗效果。鉴于其在 COVID-19 并发症中展现出的良好疗效，西维司他可能是一种有前景的治疗 COVID-19 诱发的 ALI/ARDS 或凝血功能障碍的有效方法。关键词：COVID-19；急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征；凝血功能障碍；中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂；西维司他。[J Clin Pharm Ther. 2020 Dec;45(6):1515-1519.]

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西维司他 最初被命名为 ONO-5046，是一种特异性强效的人中性粒细胞弹性蛋白酶 (HNE) 抑制剂[3]
- 其治疗机制包括阻断 HNE 介导的细胞外基质蛋白降解和抑制中性粒细胞过度活化，从而减轻组织炎症和损伤[1,2,3]
- 西维司他 在心脏手术中预防体外循环 (CPB) 引起的肺损伤以及减轻急性胰腺炎的器官损伤方面具有潜在的应用价值[1,2]
- HNE 是炎症和缺血条件下组织损伤的关键介质，因为它由活化的中性粒细胞释放，并导致细胞外基质破坏和炎症级联反应放大[1,2,3]

C20H22N2O7S

434.46

434.114

C, 55.29; H, 5.10; N, 6.45; O, 25.78; S, 7.38

127373-66-4

Sivelestat sodium;150374-95-1;Sivelestat sodium tetrahydrate;201677-61-4

107706

White to off-white solid powder

1.4±0.1 g/cm3

1.598

2.96

147.25

3

8

9

30

731

0

CC(C)(C)C(OC1=CC=C(S(=O)(NC2=CC=CC=C2C(NCC(O)=O)=O)=O)C=C1)=O

BTGNGJJLZOIYID-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C20H22N2O7S/c1-20(2,3)19(26)29-13-8-10-14(11-9-13)30(27,28)22-16-7-5-4-6-15(16)18(25)21-12-17(23)24/h4-11,22H,12H2,1-3H3,(H,21,25)(H,23,24)

N-{2-[({4-[(2,2-Dimethylpropanoyl)oxy]phenyl}sulfonyl)amino]benzoyl}glycine

ONO5046, LY544349, EI546; ONO 5046; ONO5046; ONO-5046; LY544349; LY-544349; LY 544349; EI 546 sodium salt hydrate, Elaspol sodium salt hydrate, LY 544349 sodium salt hydrate, Trade name: Elaspol.Ono-5046; 331731-18-1; 2-[[2-[[4-(2,2-dimethylpropanoyloxy)phenyl]sulfonylamino]benzoyl]amino]acetic acid; ONO5046; LY544349; ABT-D2E7;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : 87~100 mg/mL ( 200.24~230.17 mM )
Ethanol : 3.03 ~8 mg/mL(~6.97 mM )

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.75 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.75 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.75 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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配方 4 中的溶解度: 5% DMSO+ 40% PEG300+ 5% Tween 80+ 50% ddH2O: 3.25mg/ml (7.48mM)

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。