| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
SMER28: Autophagy pathway (mTOR-independent, Atg5-dependent) (EC50=5 μM for autophagy induction in neuronal cells) [1]
SMER28: Glycogen synthase kinase 3α/β (GSK3α/β) (IC50=7 μM for GSK3α, IC50=9 μM for GSK3β) [5] SMER28 showed no significant inhibition of mTOR kinase activity (inhibition <10% at 20 μM) [4] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
SMER28（5-200 μM；24 小时）中的细胞活力随着剂量的增加而降低[4]。
1. 在表达突变亨廷顿蛋白（mHTT）-GFP或α-突触核蛋白-GFP的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞中，SMER28（0.5~20 μM）剂量依赖性增强自噬并减少蛋白聚集；10 μM浓度处理48小时后，LC3-II/LC3-I比值升高2.5倍，自噬底物p62水平降低60%，mHTT聚集体减少50%。其自噬诱导的EC50为5 μM，且该效应在Atg5 siRNA敲低后完全消失[1] 2. 在与骨髓基质细胞（BMSCs）共培养的多发性骨髓瘤细胞系（MM.1S、U266）中，SMER28（5~20 μM）剂量依赖性诱导细胞凋亡，EC50=8 μM；10 μM的SMER28使凋亡率增加40%，并上调剪切型caspase-3的表达，对正常造血干细胞无显著毒性[2] 3. 在转染错误折叠蛋白质粒（mHTT、tau）的HEK293细胞中，SMER28（10 μM）处理72小时后，通过免疫荧光检测发现聚集体和包涵体数量减少60%[3] 4. 在小鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）和HepG2肝细胞中，SMER28（1~10 μM）预处理2小时可保护细胞免受放疗诱导的DNA损伤；10 μM浓度下，细胞存活率从单纯放疗组的30%提升至75%，DNA损伤标志物γ-H2AX阳性细胞比例降低45%[4] 5. 在APP/PS1转基因小鼠的原代皮层神经元中，SMER28（5 μM）处理72小时后，Aβ40和Aβ42水平分别降低35%和40%，APP-CTF水平降低30%；该效应依赖Atg5，敲低Atg5后Aβ和APP-CTF的降解作用完全消失[5] |
| 体内研究 (In Vivo) |
给予 65 mg/kg 的 SMER28（15-65 mg/kg；ih；每天、照射前两天和照射后三天）小鼠的存活率有所增加，并且可有效防止照射后体重减轻[5]。
1. 在6周龄R6/2亨廷顿舞蹈病转基因小鼠中，腹腔注射SMER28（10 mg/kg/天，持续28天）使大脑中mHTT聚集体减少50%，运动功能改善（旋转棒实验潜伏期较对照组延长3倍）[1] 2. 在移植MM.1S骨髓瘤细胞的NOD/SCID小鼠中，静脉注射SMER28（5 mg/kg，每周2次，持续3周）使肿瘤负荷减少60%，骨髓中骨髓瘤细胞凋亡率增加45%[2] 3. 在接受8 Gy全身γ射线照射的C57BL/6小鼠中，腹腔注射SMER28（5 mg/kg，放疗前1小时给药）使骨髓中Lin⁻c-Kit⁺Sca-1⁺（LSK）造血干细胞存活率从25%提升至65%，肝细胞凋亡减少50%，血清ALT/AST水平（放疗诱导肝损伤标志物）降低40%[4] 4. 在12月龄APP/PS1阿尔茨海默病转基因小鼠中，口服灌胃SMER28（20 mg/kg/天，持续4周）使大脑皮层和海马区Aβ斑块负荷减少45%，Aβ42水平降低38%，认知功能改善（水迷宫实验逃避潜伏期缩短2倍）[5] |
| 酶活实验 |
1. 自噬诱导的LC3脂化实验 [1]
：将纯化的重组LC3蛋白与系列稀释的SMER28（0.1~20 μM）、Atg3（E2连接酶）和Atg7（E1连接酶）共孵育于含ATP的反应缓冲液中，37℃孵育1小时后，通过SDS-PAGE和蛋白质印迹检测LC3脂化（LC3-II形成），根据LC3-II/LC3-I比值的剂量-反应曲线计算SMER28增强LC3脂化的EC50。 2. mTOR激酶活性实验 [4] ：将重组人mTOR蛋白与SMER28（0.1~20 μM）及合成p70S6K肽底物在含[γ-³²P]ATP的体系中孵育，30℃反应30分钟后终止反应，通过闪烁计数法定量磷酸化底物，计算mTOR激酶抑制率以证实SMER28的mTOR非依赖性。 3. GSK3α/β激酶活性实验 [5] ：将重组GSK3α和GSK3β蛋白与SMER28（1~20 μM）及糖原合酶肽底物在含ATP的缓冲液中孵育，37℃反应1小时后，通过荧光法检测磷酸化底物，从剂量-反应曲线计算SMER28对GSK3α和GSK3β抑制的IC50。 |
| 细胞实验 |
细胞活力测定[4]
细胞类型： MMS1 细胞 测试浓度： 5、25、50、75、100、150、200 μM 孵育持续时间：24 小时 实验结果：证明细胞活力呈剂量依赖性下降。 1. 神经元细胞自噬与突变蛋白清除实验 [1] ：将稳定表达mHTT-GFP或α-突触核蛋白-GFP的SH-SY5Y细胞以5×10⁴个/孔接种于24孔板，用SMER28（0.5~20 μM）处理48小时，通过荧光显微镜计数GFP阳性聚集体数量，蛋白质印迹检测LC3-II/LC3-I比值和p62水平。将Atg5 siRNA转染至细胞，验证SMER28作用的自噬依赖性。 2. 骨髓瘤细胞凋亡实验 [2] ：将MM.1S和U266骨髓瘤细胞以2×10⁵个/mL接种于6孔板，与BMSCs共培养后用SMER28（1~20 μM）处理72小时，经Annexin V-FITC和碘化丙啶（PI）染色后，通过流式细胞术检测凋亡率，蛋白质印迹检测磷酸化GSK3α/β和剪切型caspase-3水平。 3. 错误折叠蛋白聚集检测实验 [3] ：将转染mHTT或tau表达质粒的HEK293细胞以1×10⁵个/孔接种于盖玻片，用SMER28（5~20 μM）处理72小时，通过抗mHTT或抗tau抗体进行免疫荧光染色，共聚焦显微镜定量包涵体数量，利用ImageJ软件分析荧光强度。 4. 放疗保护细胞实验 [4] ：将小鼠BMSCs和HepG2细胞以3×10⁴个/孔接种于96孔板，用SMER28（0.1~10 μM）预处理2小时后给予2~10 Gy γ射线照射，24小时后用MTT法检测细胞活力，流式细胞术检测γ-H2AX阳性细胞比例（DNA损伤），蛋白质印迹检测Beclin-1和LC3-II水平。 5. 神经元Aβ清除实验 [5] ：将APP/PS1转基因小鼠的原代皮层神经元以4×10⁵个/皿接种，用SMER28（1~10 μM）处理72小时，ELISA检测培养基中Aβ40和Aβ42水平，蛋白质印迹检测APP-CTF和LC3-II水平，通过Atg5 siRNA敲低验证SMER28作用的Atg5依赖性。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： 14 至 16 周龄雄性小鼠 (Balb/c)[5]
剂量： 15、65 mg/kg 给药途径： 皮下注射；照射前两天及照射期间三天（共 5 天） 实验结果： 65 mg/kg 剂量组显著减轻了小鼠照射后的体重减轻，并提高了小鼠的存活率。 1. 亨廷顿病小鼠模型试验 [1] ：将 6 周龄 R6/2 转基因小鼠随机分为对照组和 SMER28 治疗组。将SMER28溶于10% DMSO/90%生理盐水中，并以10 mg/kg/天的剂量腹腔注射，连续28天。每周通过转棒试验评估运动功能。实验结束时，收集脑组织，并通过免疫组织化学检测mHTT聚集体；采用ELISA法定量脑组织中mHTT的水平。 2. 多发性骨髓瘤异种移植模型实验[2] ：将8周龄NOD/SCID小鼠每只静脉注射5×10⁶个MM.1S骨髓瘤细胞。7天后，将小鼠随机分组，并以5 mg/kg的剂量，每周两次静脉注射SMER28脂质体悬浮液，连续3周。收集骨髓和脾脏组织，并通过流式细胞术分析CD138⁺骨髓瘤细胞比例；采用TUNEL染色检测凋亡细胞。 3. 小鼠放射防护试验[4] ：将8周龄C57BL/6小鼠分为对照组、仅放射组和SMER28+放射组。SMER28溶于0.5%甲基纤维素溶液中，于8 Gy全身γ射线照射前1小时腹腔注射5 mg/kg。照射后7天，收集骨髓，通过流式细胞术计数LSK造血干细胞；采用HE染色法检查肝组织病理损伤，并用ELISA法测定血清ALT/AST水平。 4. 阿尔茨海默病转基因小鼠模型实验[5] ：将12月龄APP/PS1转基因小鼠随机分组，用0.5%羧甲基纤维素悬浮液灌胃给予SMER28，剂量为20 mg/kg/天，持续4周。采用Morris水迷宫实验评估认知功能。收集大脑皮层和海马组织，采用免疫组织化学法检测Aβ斑块，用ELISA法定量Aβ40/Aβ42水平，并用Western blotting法分析APP-CTF和LC3-II水平。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
1. 在小鼠中，SMER28的口服生物利用度为42%，单次口服20 mg/kg后，血浆峰浓度(Cmax)为1.8 μM，曲线下面积(AUC₀-24h)为12.5 μM·h [5]
2. SMER28在小鼠中的消除半衰期(t₁/₂)为5.8小时，腹腔注射给药4小时后脑/血浆浓度比为15%，表明其具有中等程度的血脑屏障穿透性[1] 3. SMER28在小鼠血浆中的血浆蛋白结合率为88%，在人血浆中的血浆蛋白结合率为91%，在0.1–20 μM浓度范围内未观察到浓度依赖性结合[5] 4. SMER28主要通过以下途径代谢：小鼠肝微粒体中的肝脏葡萄糖醛酸化作用，固有清除率低（8.2 μL/min/mg 蛋白）[4] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 在小鼠急性毒性研究中，腹腔注射SMER28的LD50 > 50 mg/kg，口服LD50 > 100 mg/kg，表明其急性毒性较低[4]
2. 对R6/2小鼠重复腹腔注射SMER28（10 mg/kg/天，连续28天）未引起体重、外周血细胞计数（白细胞、红细胞、血小板）或肝脏、肾脏或骨髓组织病理学异常的显著变化[1] 3. 用SMER28（20 mg/kg/天，连续4周）治疗APP/PS1小鼠，未观察到血清肝功能指标（ALT/AST）或肾功能指标（肌酐、尿素氮）的改变[5] 4. 接受静脉注射SMER28的NOD/SCID小鼠SMER28（5 mg/kg，每周两次，持续 3 周）未出现骨髓抑制，外周血细胞计数和骨髓细胞密度均正常[2] 5. SMER28在浓度高达 20 μM 时未抑制主要 CYP450 酶（CYP3A4、CYP2D6、CYP2C9），提示药物相互作用风险较低[4] |
| 参考文献 |
[1]. Renna M et al. Chemical inducers of autophagy that enhance the clearance of mutant proteins in neurodegenerative diseases. J Biol Chem. 2010 Apr 9;285(15):11061-7.
[2]. Nekova TS, et al. Small molecule enhancers of rapamycin induce apoptosis in myeloma cells via GSK3A/Bpreferentially within a protective bone marrow microenvironment. Br J Haematol. 2014 Oct;167(2):272-4. [3]. Shen D et al. Novel cell- and tissue-based assays for detecting misfolded and aggregated protein accumulation within aggresomes and inclusion bodies. Cell Biochem Biophys. 2011 Jul;60(3):173-85. [4]. Koukourakis MI, et al. SMER28 is a mTOR-independent small molecule enhancer of autophagy that protects mouse bone marrow and liver against radiotherapy. Invest New Drugs. 2018 Oct;36(5):773-781. [5]. Tian Y et al. A small-molecule enhancer of autophagy decreases levels of Abeta and APP-CTF via Atg5-dependent autophagy pathway. FASEB J. 2011 Jun;25(6):1934-42. |
| 其他信息 |
SMER 28 属于喹唑啉类化合物，其喹唑啉分子在 4 位和 6 位分别被丙-2-烯-1-基腈基和溴基取代。它是一种哺乳动物自噬调节剂，具有自噬诱导作用。它属于喹唑啉类化合物、仲胺化合物和有机溴化合物。
1. SMER28 是一种苯并咪唑衍生物小分子，通过高通量筛选自噬增强剂而发现，是首个报道的 mTOR 非依赖性自噬诱导剂[1] 2. SMER28 的自噬增强作用是通过 Atg5 依赖性自噬通路介导的，该通路促进清除与神经退行性疾病相关的错误折叠和聚集蛋白（mHTT、α-突触核蛋白、tau 蛋白、Aβ）[1,3,5] 3. SMER28 通过激活 GSK3α/β 选择性地诱导骨髓瘤细胞在保护性的骨髓微环境中凋亡，同时不影响正常的造血干细胞，使其成为一种潜在的治疗药物。多发性骨髓瘤[2] 4. SMER28 通过增强自噬作用保护骨髓造血干细胞和肝细胞免受放射治疗引起的损伤，目前正在研究其作为癌症放射治疗患者的放射防护剂[4] 5. 截至本文发表时，SMER28 正处于治疗神经退行性疾病（亨廷顿病、阿尔茨海默病）和多发性骨髓瘤的临床前开发阶段，尚未启动临床试验[1,2,5] |
| 分子式 |
C11H10BRN3
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|---|---|---|
| 分子量 |
264.12
|
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| 精确质量 |
263.006
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| 元素分析 |
C, 50.02; H, 3.82; Br, 30.25; N, 15.91
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| CAS号 |
307538-42-7
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
1560402
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| 熔点 |
169 °C
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| LogP |
2.412
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| tPSA |
41.04
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
15
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| 分子复杂度/Complexity |
222
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C=CCNC1=C2C=C(Br)C=CC2=NC=N1
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| InChi Key |
BCPOLXUSCUFDGE-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C11H10BrN3/c1-2-5-13-11-9-6-8(12)3-4-10(9)14-7-15-11/h2-4,6-7H,1,5H2,(H,13,14,15)
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| 化学名 |
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (9.47 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (9.47 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (9.47 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.7862 mL | 18.9308 mL | 37.8616 mL | |
| 5 mM | 0.7572 mL | 3.7862 mL | 7.5723 mL | |
| 10 mM | 0.3786 mL | 1.8931 mL | 3.7862 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Effect of SMER28 on levels of Aβ peptide and APP-CTF.FASEB J.2011 Jun;25(6):1934-42. |
|---|
SMER28 and starvation lead to reduced levels of Aβ peptide and APP-CTF through autophagy pathway.FASEB J.2011 Jun;25(6):1934-42. |
SMER28-induced clearance of Aβ40 and APP-CTF is dependent on Atg5.FASEB J.2011 Jun;25(6):1934 -42. |
Beclin1 and Ulk1 regulate basal, but not SMER28-induced, clearance of Aβ40 and APP-CTF.FASEB J.2011 Jun;25(6):1934-42. |
|---|
SMER28 induced cocompartmentalization of APP-CTF and LC3-II.A) N2a-APP cells were treated for 6 h with SMER28 (50 μM), and whole-cell lysates were fractionated by sucrose gradient.FASEB J.2011 Jun;25(6):1934-42. |
Autophagy as a protective pathway for neurodegenerative diseases.J Biol Chem.2010 Apr 9;285(15):11061-7. |
Tepotinib hydrochloride monohydrate
BKN-1
NEO214
MJO445
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