| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| 500mg |
|
||
| 1g |
|
||
| 5g |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
Topoisomerase I; Camptothecins
DNA topoisomerase I (IC50 values ranging from 0.01 to 0.1 μM in various tumor cell lines) [1][2][3] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
SN-38，盐酸伊立替康（CPT-11）的生物活性代谢物。 SN-38 对 DNA 拓扑异构酶 I 的抑制作用最强，其次是 CPT，最后是 CPT-11。 CPT-11 剂量依赖性地使松弛 DNA 的位置向带切口 DNA 的方向移动，但 SN-38 和 CPT 对松弛 DNA 的位置没有影响。 SN-38 以剂量依赖性和时间依赖性的方式抑制 DNA 合成。 SN-38 在 DNA 合成中各自的 IC50 值为 0.077 μM。 SN-38对RNA合成的抑制作用小于对DNA合成的抑制作用，并且不抑制蛋白质合成。 SN-38 在 P388 细胞中引起频繁的 DNA 单链断裂。激酶测定：将1单位（本研究条件下0.5μg SV40 DNA完全松弛的最小量）拓扑异构酶I、0.5μL测试化合物和0.5μg SV40 DNA依次加入到反应缓冲液中，即由 25 mM Tris-HCl (pH 7.5)、50 mM KCl、5 mM MgCl2、0.25 mM EDTA 二钠盐、0.25 mM 二硫苏糖醇、15μg/mL 牛血清白蛋白和 5% 甘油组成。然后，将反应混合物 (50 μL) 在 37°C 下孵育 10 分钟，并用 7.5 μL 由 1% 十二烷基硫酸钠、20 mM EDTA 二钠盐和 0.5 mg/L 组成的溶液处理终止反应。 mL 蛋白酶 K 在 37°C 下再反应 30 分钟。将样品与 5 μL 含有 10 mM Na2HPO4、31.3% 蔗糖和 0.3% 溴酚蓝的上样缓冲液混合。在 2 μg/mL 氯喹、10 mM EDTA 存在的情况下，在 0.8% 琼脂糖凝胶上以 50 mA 和 20 V 电泳 17 小时，将松弛（Ir 型）DNA 与超螺旋（I 型）和切口（II 型）DNA 分离、30 mM NaH2PO4 和 36 Mm Tris-HCl (pH 7.8)。电泳后，凝胶用0.05%溴化乙锭染色并用紫外光（302 nm）拍照。 DNA 的量使用密度计进行定量。细胞测定：MTT测定
在人结肠癌细胞系（HT-29、HCT-116、SW480）中，SN-38 (NK012)表现出强效的浓度依赖性抗增殖活性，IC50值为0.02-0.08 μM。由于细胞摄取增强，NK012的抗增殖效果优于游离SN-38[4] - SN-38 (NK012)诱导结肠癌细胞发生S期细胞周期阻滞，伴随p21上调和cyclin E下调，从而抑制DNA复制[2][4] - 该药物可触发肿瘤细胞凋亡，表现为caspase-3激活增强、PARP切割和DNA片段化。相同浓度下，NK012的凋亡诱导效率高于游离SN-38[3][4] - 在人肺癌A549细胞中，SN-38抑制DNA拓扑异构酶I活性，稳定酶-DNA切割复合物并诱导DNA单链断裂，这是其抗肿瘤作用的重要机制[1] - NK012作为SN-38负载的纳米粒制剂，在体外可持续释放SN-38，有效药物浓度维持超过72小时[4] |
| 体内研究 (In Vivo) |
SN-38 (NK012)，抗癌前药伊立替康的活性和有毒代谢物。给药后 30 分钟，Slco1a/1b(−/−) 小鼠中的伊立替康血浆浓度比野生型小鼠高 1.9 倍（分别为 1.89 和 1.01 μM），而 SN-38 (NK012) 血浆浓度Slco1a/1b(−/−) 小鼠的细胞因子比野生型小鼠高 8 倍（分别为 0.4 μg/mL 和 0.05 μg/mL）。 Oatp1a/1b 敲除小鼠中伊立替康的总血浆暴露量 [AUC(5-240)] 比野生型小鼠高 1.7 倍（209.8±6.7 vs. 120.9±4.4 μM/min；P<0.01），并且 2.9- SN-38 的倍数更高（50±2.9 vs. 12±2 μM/min；P<0.001）。
在携带人结肠癌细胞HT-29异种移植瘤的裸鼠中，以10-30 mg/kg（基于SN-38当量）的剂量静脉注射SN-38 (NK012)，可显著抑制肿瘤生长，治疗4周后肿瘤体积缩小率达60-80%。相同剂量下，NK012的抗肿瘤疗效优于游离SN-38[4] - 在肺癌小鼠模型中，以5-15 mg/kg剂量静脉注射SN-38，表现出剂量依赖性肿瘤生长抑制，治疗组小鼠存活时间较对照组延长[1] - NK012在体内具有增强的肿瘤靶向性，与游离SN-38相比，肿瘤组织中SN-38蓄积量更高，而在正常器官（肝、肾、脾）中的分布更低[4] - 在I期临床试验相关的临床前模型中，SN-38 (NK012)对难治性实体瘤（包括结直肠癌和非小细胞肺癌）表现出活性[3] |
| 酶活实验 |
反应缓冲液由 25 mM Tris-HCl (pH 7.5)、50 mM KCl、5 mM MgCl2、0.25 mM EDTA 二钠盐、0.25 mM 二硫苏糖醇、15μg/mL 牛向反应缓冲液中依次加入血清白蛋白、5%甘油1个单位（本研究条件下0.5μg SV40 DNA完全松弛的最低量）、0.5μL测试化合物和0.5μg SV40 DNA。然后将 50 μL 反应混合物在 37°C 下孵育 10 分钟。最后，用 7.5 μL 含有 0.5 mg/mL 蛋白酶 K、20 mM EDTA 二钠盐和 1% 十二烷基硫酸钠的溶液在 37°C 下再处理混合物 30 分钟来终止反应。将样品与 5 μL 上样缓冲液混合，其中含有 0.3% 溴酚蓝、31.3% 蔗糖和 10 mM NaH2PO4。使用 0.8% 琼脂糖凝胶在 50 mA 和 20 V 下电泳 17 小时，同时加入 2 μg/mL 氯喹、10 mM EDTA、30，将 I 型（超螺旋）和 II 型（切口）DNA 与松弛（Ir 型）DNA 分离。存在 mM NaH2PO4 和 36 mM Tris-HCl (pH 7.8)。电泳后，对凝胶进行 0.05% 溴化乙锭染色，并进行紫外光 (302 nm) 照相。密度计用于测量 DNA 的数量。
DNA拓扑异构酶I活性检测：将纯化的人DNA拓扑异构酶I与超螺旋pBR322 DNA在反应缓冲液中于37°C孵育。加入系列浓度（0.001-1 μM）的SN-38，混合物孵育30分钟。加入SDS和蛋白酶K终止反应，随后在50°C孵育1小时。通过1%琼脂糖凝胶电泳分离DNA产物，溴化乙锭染色。定量松弛型DNA条带强度以评估酶抑制效果。结果显示，SN-38可稳定拓扑异构酶I-DNA切割复合物，减少松弛型DNA的形成[1][2] |
| 细胞实验 |
MTT 测定用于评估 SN-38 (NK012) 的体外敏感性。将细胞接种到 96 孔板后，第二天添加不同浓度的 SN-38 (NK012)。药物暴露 48 小时后丢弃培养基，然后将板在含有 MTT (0.5 mg/mL) 的培养基中孵育 3 小时。通过添加已酸化的 20% 十二烷基硫酸钠 (0.02 M HCl) 来溶解形成的甲臜。使用 570 nm 处的光密度（背景为 670 nm）将细胞活力计算为相对于未处理细胞的百分比。实验三次迭代后得出平均 IC50 值±标准偏差。每个耐药细胞系的相对耐药性的计算包括将其平均IC50值除以相应亲本细胞系的平均IC50值。
肿瘤细胞抗增殖检测：将结肠癌细胞（HT-29、HCT-116）和肺癌细胞（A549）以3×10³个细胞/孔的密度接种到96孔板中。用游离SN-38或NK012（基于SN-38当量浓度为0.001-1 μM）处理细胞，在37°C、5% CO₂条件下孵育72小时。采用四唑盐比色法检测细胞活力，根据剂量-反应曲线计算IC50值[2][4] - 细胞周期分析：用0.05 μM的SN-38 (NK012)处理HT-29细胞24-48小时。收集细胞，用70%乙醇固定，碘化丙啶染色后通过流式细胞术分析。测定G0/G1期、S期和G2/M期细胞的百分比，以评估细胞周期阻滞情况[2][4] - 凋亡检测：用NK012（0.03 μM SN-38当量）处理HCT-116细胞48小时。用膜联蛋白V-FITC和碘化丙啶染色细胞，通过流式细胞术区分早期凋亡细胞（膜联蛋白V阳性/PI阴性）和晚期凋亡细胞（膜联蛋白V阳性/PI阳性）。采用蛋白质印迹法检测caspase-3激活和PARP切割情况[3][4] - 纳米粒细胞摄取检测：将HT-29细胞与荧光标记的NK012孵育1-4小时。洗涤、固定细胞后，在共聚焦激光扫描显微镜下观察，定量细胞内SN-38蓄积量[4] |
| 动物实验 |
小鼠：使用遗传背景相似（>99% FVB）的小鼠，包括雌性野生型小鼠、Slco1a/1b(−/−)（Oatp1a/1b基因敲除小鼠）、Slco1a/1b(−/−);1B1(tg)小鼠和Slco1a/1b(−/−);1B3(tg)小鼠（肝脏特异性OATP1B1和OATP1B3人源化转基因小鼠）。小鼠年龄为8至14周。小鼠接受静脉注射伊立替康（20 mg/mL，溶于含氢氧化钠、乳酸和山梨醇的水溶液中），注射剂量为5 μL/g体重，并用生理盐水稀释至10 mg/kg。为了达到1 mg/kg的剂量，将SN-38（NK012）溶于DMSO（1 mg/mL）中，并以1 μL/g体重的剂量静脉注射给小鼠。实验结束时，进行异氟烷麻醉、组织采集、经心脏穿刺采集肝素抗凝血样本以及颈椎脱位。收集血浆并保存于-30°C直至分析，而血液样本则在4°C下以5200 × g离心5分钟。
结肠癌异种移植模型：将HT-29细胞（5×10⁶个细胞/只）皮下接种到裸鼠体内，建立肿瘤异种移植模型。当肿瘤体积达到100-150 mm³时，将小鼠随机分组（每组n=6-8只）。将游离的SN-38或NK012溶解于无菌生理盐水中，经尾静脉注射给药。剂量为10、20或30 mg/kg（基于SN-38当量），每7天给药一次，共给药4次。每周测量两次肿瘤体积和体重。实验结束时，收集肿瘤和主要器官进行药物浓度分析和组织病理学检查[4] - 肺癌模型：将Lewis肺癌细胞（2×10⁵个细胞/只小鼠）静脉注射到C57BL/6小鼠体内，建立转移性肺肿瘤模型。小鼠每5天静脉注射一次SN-38，剂量分别为5、10或15 mg/kg，共3个疗程。肿瘤细胞接种后21天处死小鼠，计数肺转移结节以评估抗肿瘤疗效[1] - 药代动力学研究：将NK012或游离SN-38以20 mg/kg SN-38当量静脉注射到大鼠体内。分别于给药后 0.083、0.25、0.5、1、2、4、8、12 和 24 小时采集血样。采用高效液相色谱法 (HPLC) 测定血浆中 SN-38 的浓度，并计算药代动力学参数 [4] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
吸收：由于首过代谢广泛，SN-38口服生物利用度差（＜10%）；NK012通过静脉给药，可实现快速全身暴露[3][4]
- 分布：NK012通过增强渗透性和滞留性（EPR）效应增强肿瘤分布，SN-38肿瘤浓度比游离SN-38高3-5倍。游离的SN-38广泛分布于正常组织中，在肝脏和肠道中含量较高[4] - 代谢：SN-38在肝脏中通过葡萄糖醛酸化代谢为无活性的SN-38G，后者经胆汁排泄[3] - 排泄：大部分SN-38及其代谢物经胆汁途径排泄（＞70%），少量经尿液排泄（＜10%）[3] - 药代动力学参数：与游离的SN-38（t₁/₂ = 2-4 小时）相比，NK012可延长SN-38的半衰期（t₁/₂ = 8-12 小时）。 NK012 制剂中 SN-38 的曲线下面积 (AUC) 比游离 SN-38 高 2-3 倍 [4] - 血浆蛋白结合率：SN-38 与血浆蛋白的结合率为 95-97% [3] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
胃肠道毒性：游离的SN-38可引起剂量依赖性腹泻（15 mg/kg 时发生率为 30-50%），而 NK012 可降低胃肠道暴露，在相同SN-38等效剂量下，腹泻发生率降低至 10-15% [3][4]
- 骨髓抑制：SN-38 (NK012) 可引起轻度至中度剂量依赖性骨髓抑制，其特征为白细胞减少和血小板减少。 NK012 和游离 SN-38 在等效剂量下的严重程度相当 [3] - 肝毒性：高剂量游离 SN-38 (＞30 mg/kg) 可引起肝转氨酶轻度升高，而 NK012 引起的肝转氨酶升高则较轻 [4] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
SN-38 属于吡喃并吲哚并喹啉类化合物，其结构为 (4S)-吡喃并[3',4':6,7]吲哚并[1,2-b]喹啉-3,14-二酮，在 4 位和 11 位分别连接有两个乙基取代基，在 4 位和 9 位分别连接有两个羟基取代基。它是伊立替康的活性代谢物，活性约为伊立替康的 1000 倍。SN-38 具有多种功能，包括诱导细胞凋亡、抑制 EC 5.99.1.2（DNA 拓扑异构酶）、作为药物代谢物以及作为抗肿瘤药物。它是一种吡喃并吲哚喹啉类化合物，属于δ-内酯类、叔醇类和酚类化合物。
7-乙基-10-羟基喜树碱 (SN 38) 是伊立替康 [DB00762] 活性代谢物的脂质体制剂，伊立替康是一种已获批准用于治疗晚期结直肠癌的化疗前药。SN 38 已用于研究癌症、晚期实体瘤、小细胞肺癌、转移性结直肠癌和三阴性乳腺癌等多种癌症的治疗试验。 据报道，中华蜜蜂 (Apis cerana) 中含有 7-乙基-10-羟基喜树碱，并有相关数据。 一种半合成的喜树碱衍生物，可抑制 DNA 拓扑异构酶 I，从而阻止 S 期核酸合成。它用作抗肿瘤药物，用于治疗结直肠肿瘤和胰腺肿瘤。 药物适应症 已研究用于治疗结直肠癌。 作用机制 SN-38 被包裹在脂质体中，使其更稳定、更易溶解。这提高了 SN-38 与脂质膜的亲和力，并改善了药物向肿瘤部位的递送。SN-38 是一种高效的细胞毒性拓扑异构酶 I 抑制剂。 药效学 SN-38（7-乙基-10-羟基喜树碱）是伊立替康 (CPT-11) 的活性代谢物。伊立替康是一种拓扑异构酶 I 抑制剂，商品名为 Camptosar®。 SN-38 的细胞毒性比 CPT-11 高 200-2000 倍，但由于其在药用溶剂中的溶解度差且与脂质膜的亲和力低，因此尚未被用作抗癌药物。此外，SN-38 在生理 pH 值下会发生可逆转化，生成无活性的开环内酯结构。LE-SN-38 是一种新型的脂质体制剂，其脂质体粒径分布均匀（<200 nm）。该制剂的药物包封率>95%。 SN-38是伊立替康的活性代谢物，一种喜树碱衍生物，其抗肿瘤活性比伊立替康高100-1000倍[1][3] - 作用机制：SN-38与DNA拓扑异构酶I结合，稳定酶-DNA切割复合物，阻止DNA重新连接，并诱导DNA损伤，最终导致细胞周期阻滞和凋亡[1][2][3] - NK012是一种SN-38负载的聚合物纳米颗粒制剂，旨在提高溶解度，通过EPR效应增强肿瘤靶向性，并降低全身毒性[4] - 临床应用潜力：SN-38 (NK012)已显示出对伊立替康耐药肿瘤的活性，包括结直肠癌、肺癌、在临床前研究中，SN-38 已被用于治疗乳腺癌[3][4] - 药物相互作用：UGT1A1 抑制剂会抑制 SN-38 的代谢，从而可能增加其血浆浓度和毒性[3] |
| 分子式 |
C22H20N2O5
|
|
|---|---|---|
| 分子量 |
392.4
|
|
| 精确质量 |
392.137
|
|
| 元素分析 |
C, 67.34; H, 5.14; N, 7.14; O, 20.39
|
|
| CAS号 |
86639-52-3
|
|
| 相关CAS号 |
|
|
| PubChem CID |
104842
|
|
| 外观&性状 |
Light yellow solid powder
|
|
| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
|
|
| 沸点 |
810.3±65.0 °C at 760 mmHg
|
|
| 熔点 |
217 °C
|
|
| 闪点 |
443.8±34.3 °C
|
|
| 蒸汽压 |
0.0±3.0 mmHg at 25°C
|
|
| 折射率 |
1.738
|
|
| LogP |
2.31
|
|
| tPSA |
101.65
|
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
|
| 可旋转键数目(RBC) |
2
|
|
| 重原子数目 |
29
|
|
| 分子复杂度/Complexity |
820
|
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
|
|
| SMILES |
C(C1C2C=C(C=CC=2N=C2C3=CC4[C@@](C(OCC=4C(=O)N3CC=12)=O)(O)CC)O)C
|
|
| InChi Key |
FJHBVJOVLFPMQE-QFIPXVFZSA-N
|
|
| InChi Code |
InChI=1S/C22H20N2O5/c1-3-12-13-7-11(25)5-6-17(13)23-19-14(12)9-24-18(19)8-16-15(20(24)26)10-29-21(27)22(16,28)4-2/h5-8,25,28H,3-4,9-10H2,1-2H3/t22-/m0/s1
|
|
| 化学名 |
(19S)-10,19-diethyl-7,19-dihydroxy-17-oxa-3,13-diazapentacyclo[11.8.0.02,11.04,9.015,20]henicosa-1(21),2,4(9),5,7,10,15(20)-heptaene-14,18-dione
|
|
| 别名 |
|
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
|
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
|
|||
|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (6.37 mM) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 配方 2 中的溶解度: 2.08 mg/mL (5.30 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: 2.08 mg/mL (5.30 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5484 mL | 12.7421 mL | 25.4842 mL | |
| 5 mM | 0.5097 mL | 2.5484 mL | 5.0968 mL | |
| 10 mM | 0.2548 mL | 1.2742 mL | 2.5484 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT03785873 | Active Recruiting |
Drug: Nanoliposomal-Irinotecan Drug: Nivolumab |
Biliary Tract Cancer | University of Michigan Rogel Cancer Center |
May 22, 2019 | Phase 1 |
| NCT02138617 | Active Recruiting |
Drug: Irinotecan Drug: Leucovorin |
Colon Cancer | NC Lineberger Comprehensive Cancer Center |
May 2014 | Phase 2 |
| NCT04641871 | Active Recruiting |
Drug: Irinotecan Hydrochloride Drug: Sym023 |
Solid Tumor Metastatic Cancer |
Symphogen A/S | October 12, 2020 | Phase 1 |
| NCT03567629 | Active Recruiting |
Drug: Irinotecan Drug: Oxaliplatin |
mCRC | Peking University | May 29, 2018 | Phase 2 |
| NCT03323034 | Active Recruiting |
Drug: Irinotecan Drug: Pevonedistat |
Recurrent Lymphoma Refractory Lymphoma |
Children's Oncology Group | January 11, 2018 | Phase 1 |
SDOX
Topoisomerase I/II inhibitor 2
Camptothecin-20(S)-O-propionate hydrate (Camptothecin-20-O-propionate hydrate)
Topoisomerase I inhibitor 9
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
