| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
hGAT-3 (IC50 = 5 μM); rGAT-2 (IC50 = 21 μM)
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| 体外研究 (In Vitro) |
分子克隆揭示了大脑中存在四种高亲和力GABA转运蛋白。其中三个位点GAT-2、GAT-3和BGT-1的存在在克隆之前是未知的，几乎没有人知道它们在调节GABA能传播中的作用。在很大程度上，我们缺乏知识是由于缺乏针对这些位点的特异性抑制剂。在本通讯中，我们描述了GAT-3人类同源物的克隆和表达，以及对该位点具有选择性的抑制剂（S）-SNAP-5114的鉴定。（（S）-SNAP-5114显示GAT-3的IC50为5微M，GAT-2为21微M，以及GAT-1和BGT-1的IC50大于或等于100微M。由于其亲脂性，（S）-SNAP-5114也有望穿过血脑屏障，因此，它应该是评估GAT-3在神经功能中作用的重要工具。[1]
从这一系列研究中得出的最有趣的化合物是尼泊金酸衍生物（S）-SNAP-5114，其结构如图1所示。如表3所示，（S）-SNAP-5114在GAT-3（ic50=5μM）的效力最强，在GAT-2（ic50~21μM）效力低约4倍。相比之下，（S）-SNAP-5114是一种弱得多的BGT-1抑制剂（ic50≈140μM），在GAT-1上最弱（ic50∼400μM）。有趣的是，（S）-SNAP-5114比（R）异构体更有效（Dhar等人，1994），这与尼泊金酸形成鲜明对比，后者的大部分活性都存在于（R）的异构体中（Borden等人，1994b）。据我们所知，（S）-SNAP-5114是第一个对GAT-3具有选择性的抑制剂。 由于其亲脂性甲氧基苯基取代基，（S）-SNAP-5114有望有效穿过血脑屏障。此外，由于它对GAT-3的选择性是GAT-1的75倍，因此应该有可能在体内选择性抑制GAT-3（可能还有GAT-2），同时保留更普遍的GAT-1。因此，（S）-SNAP-5114应作为确定GAT-2和GAT-3在中枢神经系统中的功能作用的重要工具，希望对其结构的进一步改进将导致化合物在这些位点的效力和选择性提高[2]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
脑缺血会引发兴奋毒性和细胞死亡，但目前还没有神经保护药物进入临床。虽然增强GABA能信号传导以抵消兴奋毒性在动物模型中显示出希望，但临床研究失败了。阻断GABA转运蛋白（GATs）提供了一种间接的方法来增加GABA抑制，从而降低神经元的兴奋阈值。在GATs中，已知GAT1可促进神经保护，而突触外转运蛋白GAT3和BGT1的保护作用尚不清楚。通过光血栓形成在2至4个月大的C57BL/6 J雄性小鼠的运动皮层中诱导了局灶性损伤。在卒中后1和6小时腹腔注射GAT1抑制剂噻加宾（1和10 mg/kg）、GAT2/3抑制剂（S）-SNAP-5114（5和30 mg/kg）和GAT1/BGT1抑制剂EF-1502（1和10mg/kg），以评估其对卒中后7天梗死体积和运动性能的影响。1 mg/kg的噻加宾改善了运动性能，而10 mg/kg的噻加宾、（S）-SNAP-5114和EF-1502没有效果。所有化合物均未影响梗死体积。有趣的是，使用噻加宾诱导的癫痫发作和（S）-SNAP-5114治疗导致死亡率增加。尽管我们证明了噻加宾可以促进保护作用，但我们的研究结果表明，在使用GAT1和GAT3抑制剂治疗脑缺血时应谨慎[3]。
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| 动物实验 |
化合物给药[3]
使用了噻加宾、(S)-SNAP-5114 和 (R,S)-EF-1502 (EF-1502)。噻加宾（1 mg/kg 和 10 mg/kg）和 EF-1502（1 mg/kg 和 5 mg/kg）溶于含 2% DMSO 的无菌等渗盐水中。(S)-SNAP-5114（5 mg/kg 和 30 mg/kg）由于溶解度低，溶于含 10% DMSO 的无菌等渗盐水中。所有动物在卒中后随机分配到不同的治疗组，以确保同一笼子内的所有动物接受不同的治疗。化合物的给药剂量根据先前发表的在其他疾病模型中获得的 EC50 值确定，这些模型未记录癫痫诱发作用。对照组动物注射2% DMSO等渗盐水作为噻加宾和EF-1502的对照，注射10% DMSO等渗盐水作为(S)-SNAP-5114的对照。每种化合物或溶剂均在卒中后1小时和6小时腹腔注射（12 µL/g体重），因为所有化合物均已被证明在与本研究剂量范围相同的剂量下，腹腔注射后能够调节脑兴奋性。每次注射后，将小鼠放回笼中，并在给药后最初2小时内每小时观察5-10分钟，以监测异常行为。 梗死面积[3] 中风后7天，小鼠用戊巴比妥钠（新西兰奥塔哥大学动物福利办公室）深度麻醉，并经心脏灌注4%多聚甲醛（PFA）。取出脑组织，先用4% PFA后固定1小时，然后转移至30%蔗糖溶液中。使用滑动式冰冻切片机将脑组织切成6组冠状平行切片，每组40 µm厚，并保存在-20℃的冷冻保护剂中。梗死体积采用甲酚紫染色法，根据先前发表的方案进行组织学评估。梗死体积由一位对治疗组不知情的观察者使用 Image J（美国国立卫生研究院）进行量化，基于从整个梗死区域每隔 6 个切片获取测量值（面积以 mm2 为单位），梗死体积的量化如下：梗死体积 mm3 = √𝑎𝑟𝑒𝑎𝑚𝑚2×𝑠𝑒𝑐𝑡𝑖𝑜𝑛𝑡ℎ𝑖𝑐𝑘𝑛𝑒𝑠𝑠×𝑠𝑒𝑐𝑡𝑖𝑜𝑛𝑖𝑛𝑡𝑒𝑟𝑣𝑎𝑙。共有6只小鼠的卒中体积小于0.6 mm³，因此根据卒中诱导不完全而被排除（10 mg/kg 噻加宾组1只；5 mg/kg EF-1502组3只；10% DMSO溶剂组2只）。5 mg/kg和30 mg/kg (S)-SNAP-5114组分别有1只和5只小鼠在给药后第二天死亡，因此最终用于梗死和行为分析的小鼠数量为：2% DMSO溶剂组，n = 10；10% DMSO溶剂组，n = 8；1 mg/kg 噻加宾组，n = 6；10 mg/kg 噻加宾组，n = 8；1 mg/kg EF-1502组，n = 8。 10 mg/kg EF-1502，n = 8；5 mg/kg (S)-SNAP-5114，n = 7；30 mg/kg (S)-SNAP-5114，n = 6。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
γ-氨基丁酸（GABA）是哺乳动物大脑中主要的抑制性神经递质。GABA通过特异性的高亲和力钠离子和氯离子依赖性转运蛋白从突触间隙清除，这些转运蛋白被认为位于突触前末梢和周围的神经胶质细胞上。早期研究表明神经元和神经胶质细胞的GABA转运存在差异，但分子克隆揭示了四种不同的GABA转运蛋白（分别称为GAT-1、GAT-2、GAT-3和BGT-1）的基因存在，从而揭示了GABA转运蛋白比之前认为的具有更大的异质性。异源表达使得研究人员能够详细表征这些转运蛋白的药理学特性，并发现GAT-1是抗惊厥药物噻加宾的作用位点。原位杂交和免疫细胞化学实验表明，每种转运蛋白在大脑中都有其独特的区域分布。结合细胞培养实验，研究人员正在阐明各种转运蛋白在神经元和胶质细胞中的定位。未来的研究将致力于确定每种转运蛋白在GABA能传递调控中的作用，并设计更多亚型特异性抑制剂，这些抑制剂有望成为治疗神经精神疾病的新型治疗药物。[2] 这些研究表明，在局灶性缺血性卒中急性期抑制GATs的神经保护作用有限，尤其是在卒中后1小时和6小时立即给予抑制剂时。尽管抑制GAT1可以促进保护作用，但由于噻加宾会诱发卒中后癫痫发作（推测是由过度强直性抑制介导的），其在卒中患者中的转化应用潜力受到限制。为了研究仅抑制GAT3或BGT1在急性卒中中的神经保护潜力，需要开发对这两种转运蛋白具有更好亚型选择性、更易透过血脑屏障且效力更强的抑制剂。4 最后，鉴于使用GAT3抑制剂(S)-SNAP-5114治疗期间出现不明原因死亡，在开发新药和开展GAT抑制剂治疗脑损伤的临床试验时应谨慎。考虑到不同动物卒中模型和物种之间的差异，需要开展更多研究来评估IC10和IC50浓度与强直性抑制和神经保护变化之间的相关性，尤其是在卒中后GAT功能可能已经受损或未受损的情况下。[3]
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| 分子式 |
C30H35NO6
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|---|---|
| 分子量 |
505.61
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| 精确质量 |
505.246
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| 元素分析 |
C, 71.27; H, 6.98; N, 2.77; O, 18.99
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| CAS号 |
157604-55-2
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| PubChem CID |
10458835
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.175g/cm3
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| 沸点 |
643.9ºC at 760mmHg
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| 闪点 |
343.2ºC
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| 蒸汽压 |
0mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.571
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| LogP |
4.755
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| tPSA |
77.46
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
11
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| 重原子数目 |
37
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| 分子复杂度/Complexity |
620
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
COC1=CC=C(C=C1)C(C2=CC=C(C=C2)OC)(C3=CC=C(C=C3)OC)OCCN4CCC[C@@H](C4)C(=O)O
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| InChi Key |
VDLDUZLDZBVOAS-QFIPXVFZSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C30H35NO6/c1-34-26-12-6-23(7-13-26)30(24-8-14-27(35-2)15-9-24,25-10-16-28(36-3)17-11-25)37-20-19-31-18-4-5-22(21-31)29(32)33/h6-17,22H,4-5,18-21H2,1-3H3,(H,32,33)/t22-/m0/s1
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| 化学名 |
(3S)-1-[2-[tris(4-methoxyphenyl)methoxy]ethyl]piperidine-3-carboxylic acid
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| 别名 |
SNAP5114; SNAP 5114; 157604-55-2; (S)-SNAP 5114; (3S)-1-{2-[tris(4-methoxyphenyl)methoxy]ethyl}piperidine-3-carboxylic acid; DTXSID40440224; (3S)-1-[2-[tris(4-methoxyphenyl)methoxy]ethyl]piperidine-3-carboxylic acid; (3S)-1-(2-(tris(4-methoxyphenyl)methoxy)ethyl)piperidine-3-carboxylic acid; DTXCID00391046; SNAP-5114
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~197.78 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.94 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.94 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.94 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.9778 mL | 9.8890 mL | 19.7781 mL | |
| 5 mM | 0.3956 mL | 1.9778 mL | 3.9556 mL | |
| 10 mM | 0.1978 mL | 0.9889 mL | 1.9778 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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