Spiperone 中文名称: 螺哌隆

别名: E 525; R-5147; spiperone; 749-02-0; Spiropitan; Spiroperidol; Espiperona; Spiperonum; R 5147; [3H]spiperone; NSC-170983; Spiperone; E525; R 5147; NSC170983; E-525; R5147; NSC 170983 螺哌隆;(2-(4 氟苯基)-1,3-双(1H-1,2,4-三唑-1-基)丙烷-2-醇); 螺环哌丁苯

目录号: V15137 纯度: ≥98%

COA 产品数据产品说明书 SDS

Spiperone（E-525；R-5147；螺哌啶醇）是一种新型强效抗精神病药，可作为阿多巴胺 D2、血清素 5-HT1A 和血清素 5-HT2A 拮抗剂，具有治疗神经系统疾病的潜力。

Spiperone CAS号: 749-02-0
产品类别: Dopamine Receptor

产品仅用于科学研究，不针对患者销售

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螺哌隆盐酸盐

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Nature 2025, 643(8070):192-200.

Nature 2024 Dec 18.

Nature 2021, 597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022: 8, eabm9427.

Nat Neurosci 2024, 27:1468-1474.

Science Adv 2025, 11(33):eadr5199.

Nat Metab 2024, 6: 1108-1127.

Cell Stem Cell 2024, 31:106-126.e13.

Nature 597, 119–125 (2021)

Cell Stem Cell 2020,26(6):845-861.e12.

Science Trans Med 2023,15(701):eadd7872.

STTT 2023,8(1):91.

Cell Reports 2023,42(4):112313

Science Trans Med 2023, 15: eadd7872.

Cancer Cell 2021,39(4):529-547.e7.

Cancer Discov 2022,12(4):1106-1127.

Immunity 2023,56(3):620-634.e11.

Immunity 2024,57:2651-2668.e12.

J Am Chem Soc 2022,144:21831-21836.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022:8,eabm9427.

Nature 2021,597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

PNAS Nexus 2022,1(3):pgac063.

ACS Nano 2023,17(10):9110-9125.

Biomaterial 2023 Sep16:302:122333.

产品描述
生物活性&实验参考方法
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产品描述

Spiperone（E-525；R-5147；螺哌啶醇）是一种新型强效抗精神病药，可作为多巴胺 D2、5-羟色胺 5-HT1A 和 5-羟色胺 5-HT2A 拮抗剂，具有治疗神经系统疾病的潜力。

生物活性&实验参考方法

靶点	D2 Receptor ( Ki = 0.06 nM ); D1 Receptor ( Ki ~350 nM ); D3 Receptor ( Ki = 0.6 nM ); D4 Receptor ( Ki = 0.08 nM ); D5 Receptor ( Ki ~ 3500 nM ); 5-HT2A Receptor ( Ki = 1 nM ); 5-HT1A Receptor ( Ki = 49 nM ); α1B-adrenoceptor; Calcium-activated chloride channel
体外研究 (In Vitro)	Spiperone 是一种有效的细胞内 Ca2+ 增强剂 (EC50=9.3 μM)，通过蛋白酪氨酸激酶偶联的磷脂酶 C 依赖性途径刺激细胞内 Ca2+，从而导致 Calu-3 和 CFBE41o- 细胞单层中 Cl- 的分泌增加[2] 。 Spiperone 显着降低脂多糖刺激的 BV-2 小胶质细胞、原代小胶质细胞和原代星形胶质细胞培养物中一氧化氮的产生。 Spiperone 还显着抑制 ATP 刺激的原代小胶质细胞培养物中一氧化氮的产生。 Spiperone 显着降低 BV-2 小胶质细胞中 TNF-α 的产生。 Spiperone 可减弱 BV-2 小胶质细胞中 mRNA 水平的诱导型一氧化氮合酶和促炎细胞因子（例如 IL-1β 和 TNF-α）的表达[3]。 Spiperone(1)是一种广泛使用的药理学工具，作为一种有效的多巴胺D2、5-HT1A和5-HT2A拮抗剂。尽管spiperone也与5-HT2C受体结合，但它是为数不多的对5-HT2A与5-HT2C受体表现出一定（约1000倍）结合选择性的药物之一，因此，如果已知其各种取代基对结合的影响，它可能作为开发新型5-HT2A拮抗剂的有用模板。在本研究中，我们重点研究了spiperone的1,3,8 -三氮唑斯匹罗[4.5]decanone部分，发现用甲基取代n1 -苯基只会略微降低克隆大鼠5-HT2A受体的亲和力。然而，n1 -甲基衍生物对5-HT1A、5-HT2C和多巴胺D2受体的亲和力显著降低。几个代表性的例子被证明是5-HT2拮抗剂。因此，spiperone的n1 -烷基类似物可以进入一系列新的5- ht2a选择性拮抗剂
体内研究 (In Vivo)	Spiperone（1.5 mg/kg；腹腔注射；第 1、3、6、7 和 13-21 天；C57Bl/6 小鼠）治疗可减少炎症细胞对肺泡间质和肺泡管的浸润，并防止结缔组织的生长博莱霉素肺实质组织[6]。动物模型：C57Bl/6小鼠（7-8周龄）博莱霉素诱导肺纤维化[6] 剂量：1.5 mg/kg 给药方式：腹腔注射；第 1、3、6、7 和 13-21 天结果：炎症细胞对肺泡间质和肺泡管的浸润减少，并阻止博莱霉素肺实质中结缔组织的生长。
酶活实验	囊性纤维化（CF）是由产生囊性纤维化跨膜传导调节因子（CFTR）的基因突变引起的。CFTR起Cl（-）通道的作用。它的功能障碍限制了Cl（-）的分泌，增强了Na+的吸收，导致气道粘液粘稠。Ca2+激活的Cl（-）通道（CaCCs）在气道表面上皮中与CFTR共表达。胞质Ca（2+）的增加激活了上皮细胞的CaCCs，这在CF中提供了另一种Cl（-）分泌途径。我们开发了一种筛选试验，并筛选了一个化合物库，这些化合物可以增强细胞质Ca2+，激活CaCC，增加Cl（-）分泌。我们发现spiperone，一种已知的抗精神病药物，是一种有效的细胞内Ca2+增强剂，并证明它刺激细胞内Ca2+，不是通过其众所周知的5-羟色胺5-HT2或多巴胺D2受体拮抗剂的作用，而是通过蛋白酪氨酸激酶偶联磷脂酶c依赖途径。Spiperone激活CaCCs，在体外和体内cftr敲除小鼠的极化人非CF和CF气道上皮细胞单层中刺激Cl（-）分泌。总之，我们已经确定了spiperone作为一种新的治疗平台，通过独立于CFTR的途径纠正CF中有缺陷的Cl（-）分泌。[2] 详细研究了酮色胺(1)和spiperone(2)的结构，以确定不同取代基对5-HT（2A）受体亲和力和选择性的作用。发现喹唑啉环的存在降低了酮色胺的选择性，而各种开环类似物显示出与酮色胺类似的亲和力，选择性提高了30倍。spiperone的三嗪吡喃癸酮部分是其5-HT亲和力和选择性的主要决定因素。环施加的构象刚性以及N(1)取代基的性质是控制5-HT（2A）、5-HT（2C）、5-HT（1A）和多巴胺D2受体结合的重要因素。甲基取代spiperone的N(1)-苯基环（KML-010）48)得到的化合物与5-HT（2A）受体结合的亲和力略低于spiperone，但对5-HT（2C）和5-HT（1A）受体缺乏亲和力（Ki >10,000 nM），与D2受体结合的亲和力降低了400倍。[4]
细胞实验	Spiperone 是一种有效的细胞内 Ca2+ 增强剂 (EC50=9.3 μM)，通过蛋白酪氨酸激酶偶联的磷脂酶 C 依赖性途径刺激细胞内 Ca2+，从而导致 Calu-3 和 CFBE41o- 细胞单层中 Cl- 的分泌增加[2] 。 Spiperone 显着降低脂多糖刺激的 BV-2 小胶质细胞、原代小胶质细胞和原代星形胶质细胞培养物中一氧化氮的产生。 Spiperone 还显着抑制 ATP 刺激的原代小胶质细胞培养物中一氧化氮的产生。 Spiperone 显着降低 BV-2 小胶质细胞中 TNF-α 的产生。 Spiperone 可减弱 BV-2 小胶质细胞中 mRNA 水平的诱导型一氧化氮合酶和促炎细胞因子（例如 IL-1β 和 TNF-α）的表达[3]。
动物实验	C57Bl/6小鼠（7-8周龄）通过博来霉素诱导肺纤维化 1.5 mg/kg 腹腔注射；第1、3、6、7和13-21天
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)	大鼠口服LD50 >1 g/kg，《日本药物》，6(380)，1982 大鼠腹腔注射LD50 >500 mg/kg，《大药学：药理学》，3(390)，1969 大鼠皮下注射LD50 >50 mg/kg，《大药学：药理学》，3(390)，1969 大鼠静脉注射LD50 14 mg/kg，《精神药物及相关化合物》，第二版，E. Usdin 和 DH Efron，华盛顿特区，1972，-(193)，1972 大鼠肌内注射LD50 168 mg/kg，《日本药物》，6(380)，1982
参考文献	[1]. Dopamine receptor pharmacology. Trends Pharmacol Sci. 1994 Jul;15(7):264-70. [2]. Spiperone, identified through compound screening, activates calcium-dependent chloride secretion in the airway. Am J Physiol Cell Physiol. 2009 Jan;296(1):C131-41. [3]. The antipsychotic spiperone attenuates inflammatory response in cultured microglia via the reduction of proinflammatory cytokine expression and nitric oxide production. J Neurochem. 2008 Dec;107(5):1225-35. [4]. Ketanserin and spiperone as templates for novel serotonin 5-HT(2A) antagonists. Curr Top Med Chem. 2002 Jun;2(6):539-58. [5]. Human umbilical vein vasoconstriction induced by epinephrine acting on alpha1B-adrenoceptor subtype. Am J Obstet Gynecol. 2003 Nov;189(5):1472-80. [6]. Effect of spiperone on mesenchymal multipotent stromal and hemopoietic stem cells under conditions of pulmonary fibrosis. Bull Exp Biol Med. 2014 May;157(1):132-7. [7]. Spiperone: influence of spiro ring substituents on 5-HT2A serotonin receptor binding. J Med Chem. 1998;41(25):5084-5093.
其他信息	螺哌隆是一种氮杂螺环化合物，其结构为1,3,8-三氮杂螺[4.5]癸烷，分别在1、4和8位被苯基、氧代基和4-(对氟苯基)-4-氧代丁基取代。它具有多巴胺能拮抗剂、5-羟色胺能拮抗剂、α-肾上腺素能拮抗剂、抗精神病药和精神药物的双重作用。它是一种有机氟化合物、氮杂螺环化合物、哌啶类化合物、叔胺化合物和芳香酮。螺哌隆是一种多巴胺拮抗剂，可与多巴胺和5-羟色胺受体结合。它是一种螺环丁酰苯类似物，与氟哌啶醇和其他相关化合物结构相似。它曾被推荐用于治疗精神分裂症。目的：本研究旨在确定人脐静脉 (HUV) 收缩中 α1-肾上腺素能受体信使 RNA 亚型的存在，并扩展对参与该收缩的 α1-肾上腺素能受体的药理学表征。研究设计：本研究使用了 124 例健康足月阴道分娩或剖宫产产妇的脐带。小心地从脐带中分离出脐静脉，并用于逆转录-聚合酶链式反应 (RT-PCR) 以扩增 α1-肾上腺素能受体转录本。在离体器官浴槽中，将 HUV 环固定，并绘制肾上腺素或选择性 α1A-肾上腺素能受体激动剂 A-61603 的累积浓度-反应曲线。在其他系列实验中，我们评估了选择性α(1A)-和α(1B)-肾上腺素能受体拮抗剂（分别为RS-100329或B8805-033或螺哌隆、AH11110A和环唑嗪）对肾上腺素浓度-反应曲线的阻断效力。结果：通过RT-PCR技术在HUV中检测到了α(1a)-和α(1b)-肾上腺素能受体转录本。RS-100329或B8805-033对肾上腺素介导反应的阻断效力值与α(1A)-肾上腺素能受体群的激活不符。此外，激动剂A-61603的低效力也与α(1A)-肾上腺素能受体相互作用不符。另一方面，螺哌隆、AH11110A 和环唑嗪的拮抗效力与 α(1B)-肾上腺素能受体亚型的相互作用相符。结论：尽管在人脐静脉 (HUV) 中检测到了 α(1a)- 和 α(1b)-肾上腺素能受体的信使 RNA，但只有 α(1B)-肾上腺素能受体参与肾上腺素的血管收缩作用。[5] 在 C57Bl/6 小鼠可逆性博来霉素诱导的肺纤维化模型中，研究了螺哌隆的抗纤维化特性及其对干细胞和祖细胞的影响。螺哌隆减少了炎症细胞对肺泡间质和肺泡管的浸润，并抑制了博来霉素肺实质中结缔组织的增生。除了抗炎作用外，螺哌隆还抑制骨髓造血细胞（CD3、CD45R（B220）、Ly6C、Ly6G（Gr1）、CD11b（Mac1）、TER-119）、Sca-1+、c-Kit+、CD34- 和造血祖细胞（粒细胞-红细胞-巨噬细胞-巨核细胞和粒细胞 CFU）。螺哌隆引起的纤维化紊乱伴随着肺实质内皮细胞的恢复、循环骨髓细胞和肺间充质造血细胞（间充质多能基质细胞（CD31-、CD34-、CD45-、CD44+、CD73+、CD90+、CD106+）和成纤维细胞祖细胞）数量的减少，以及多能间充质基质细胞（包括成纤维细胞谱系细胞）多系分化的抑制。[6]

*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性

化学信息 & 存储运输条件

分子式	C23H26FN3O2
分子量	395.47
精确质量	395.201
元素分析	C, 69.85; H, 6.63; F, 4.80; N, 10.63; O, 8.09
CAS号	749-02-0
相关CAS号	Spiperone hydrochloride; 2022-29-9
PubChem CID	5265
外观&性状	Off-white to light yellow solid powder
沸点	630.6ºC at 760 mmHg
熔点	190-193.6ºC
闪点	335.2ºC
LogP	3.548
tPSA	52.65
氢键供体(HBD)数目	1
氢键受体(HBA)数目	5
可旋转键数目(RBC)	6
重原子数目	29
分子复杂度/Complexity	577
定义原子立体中心数目	0
SMILES	O=C(C1=CC=C(F)C=C1)CCCN2CCC3(CC2)N(CNC3=O)C4=CC=CC=C4
InChi Key	DKGZKTPJOSAWFA-UHFFFAOYSA-N
InChi Code	InChI=1S/C23H26FN3O2/c24-19-10-8-18(9-11-19)21(28)7-4-14-26-15-12-23(13-16-26)22(29)25-17-27(23)20-5-2-1-3-6-20/h1-3,5-6,8-11H,4,7,12-17H2,(H,25,29)
化学名	8-[4-(4-fluorophenyl)-4-oxobutyl]-1-phenyl-1,3,8-triazaspiro[4.5]decan-4-one
别名	E 525; R-5147; spiperone; 749-02-0; Spiropitan; Spiroperidol; Espiperona; Spiperonum; R 5147; [3H]spiperone; NSC-170983; Spiperone; E525; R 5147; NSC170983; E-525; R5147; NSC 170983
HS Tariff Code	2934.99.03.00
存储方式	Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month
运输条件	Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

溶解度数据

溶解度 (体外实验)	DMSO: ~33.3 mg/mL (~84.3 mM)
溶解度 (体内实验)	配方 1 中的溶解度: ≥ 4.55 mg/mL (11.51 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 45.5 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。配方 2 中的溶解度:* ≥ 2.5 mg/mL (6.32 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

溶解度 (体外实验)

DMSO: ~33.3 mg/mL (~84.3 mM)

溶解度 (体内实验)

配方 1 中的溶解度: ≥ 4.55 mg/mL (11.51 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 45.5 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.32 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

制备储备液		1 mg	5 mg	10 mg
	1 mM	2.5286 mL	12.6432 mL	25.2864 mL
	5 mM	0.5057 mL	2.5286 mL	5.0573 mL
	10 mM	0.2529 mL	1.2643 mL	2.5286 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器

质量

浓度

体积

分子量*

计算重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度

参见示例

使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？

在分子量（MW）框中输入350.26
在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。

浓度 (起始)

体积 (起始)

浓度 (终)

体积 (终)

计算重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：

在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中

分子式

分子量

g/mol

计算重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4 c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：

要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。

分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：

分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。

配液体积

质量

配液浓度

计算重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
单击“计算”按钮
答案显示在体积框中

动物体内实验配方计算器（澄清溶液）

第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）

给药剂量 mg/kg

动物平均体重 g

每只动物给药体积 μL

动物数量

第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。

% DMSO

% Tween 80

% ddH₂O

计算重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH₂O，混匀澄清。

注意： (1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。