| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 10 mM * 1 mL in DMSO |
|
||
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| 500mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
IC50: 670 nM (Rev-ErbBα); 800 nM (Rev-ErbBβ)[1]
In a dose-dependent manner, SR9009 promotes the production of the Gal4-responsive luciferase reporter gene and the chimeric Gal4 DNA binding domain (DBD)-REV-ERB ligand binding domain (LBD) α or β (SR9009: REV-ERBα IC50=670 nM, REV-ERBβ IC50=800 nM). In co-transfection tests with full-length REV-ERBα and a luciferase reporter powered by the Bmal1 promoter, SR9009 potently suppresses transcription (IC50=710 nM). In HepG2 cells, SR9009 inhibits BMAL1 mRNA expression in a way that is dependent on REV-ERBα/β. Circular dichroism analysis (Kd=800 nM) was also used to confirm direct binding of SR9009 to REV-ERBα [1]. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
SR9009 以剂量依赖性方式促进 Gal4 响应性荧光素酶报告基因和嵌合 Gal4 DNA 结合域 (DBD)-REV-ERB 配体结合域 (LBD) α 或 β 的产生（SR9009：REV-ERBα IC50= 670 nM，REV-ERBβ IC50=800 nM）。在使用全长 REV-ERBα 和由 Bmal1 启动子驱动的荧光素酶报告基因的共转染测试中，SR9009 有效抑制转录 (IC50=710 nM)。在 HepG2 细胞中，SR9009 以依赖于 REV-ERBα/β 的方式抑制 BMAL1 mRNA 表达。圆二色性分析 (Kd=800 nM) 也用于确认 SR9009 与 REV-ERBα 的直接结合 [1]。
SR9009 在表达嵌合Gal4 DNA结合域与REV-ERB配体结合域（α或β）融合蛋白以及Gal4响应性荧光素酶报告基因的HEK293细胞中，剂量依赖性地增强REV-ERB依赖的抑制活性 (REV-ERBα IC50=670 nM; REV-ERBβ IC50=800 nM)。 在使用全长REV-ERBα和由Bmal1启动子驱动的荧光素酶报告基因的共转染实验中，SR9009 有效抑制转录 (IC50=710 nM)。 SR9009 以REV-ERBα/β依赖的方式抑制HepG2细胞中BMAL1 mRNA的表达。 作为直接激动剂，SR9009 在生化实验中增加了辅助抑制因子NCoR的CoRNR box肽段片段向REV-ERBα的募集。 圆二色谱分析证实了SR9009与REV-ERBα的直接结合，解离常数(Kd)为800 nM。 SR9009 在一组其他核受体上未表现出活性。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
给予 SR9009（100 mg/kg，腹膜内注射）的小鼠体重下降更为明显。此外，接受 SR9009 治疗的大鼠的血浆葡萄糖 (19%) 和非酯化脂肪酸 (NEFA) 降低了 23%。 SR9009 治疗后，白色脂肪组织 (WAT) 中甘油三酯 (TG) 合成相关基因的表达量减少；在瘦小鼠中也发现了这种效应[1]。
在持续黑暗条件下饲养的小鼠中，于昼夜节律时间6单次腹腔注射SR9009 (100 mg/kg)，导致其在随后的主观暗期完全丧失运动活动。正常的活动在下一个昼夜节律周期恢复。 在标准12小时光照/12小时黑暗循环条件下饲养的小鼠中，单次注射SR9009 (100 mg/kg)导致夜间运动活动开始时间延迟1-3小时。 在持续黑暗条件下于昼夜节律时间0单次注射SR9009 (100 mg/kg)，改变了小鼠下丘脑中核心时钟基因的昼夜表达模式，效果与其类似物SR9011相似（例如，增强Per2振幅，抑制Cry2，消除Npas2节律，使Bmal1相位偏移）。 用SR9009 (100 mg/kg，腹腔注射，每日两次) 慢性处理Balb/c或C57BL/6小鼠10-12天，导致体重减轻，主要原因是脂肪量减少，且不影响食物摄入。 在饮食诱导的肥胖C57BL/6小鼠中，用SR9009 (100 mg/kg，腹腔注射，每日两次，于昼夜节律时间0和12) 处理30天，引起显著的体重减轻（比载体对照组多减轻60%）并减少肥胖程度。 SR9009 处理改善了DIO小鼠的代谢参数：降低了空腹血浆甘油三酯（降低12%）、总胆固醇（降低47%）、非酯化脂肪酸（降低23%）、血糖（降低19%），并显示出降低胰岛素水平的趋势（降低35%）。血浆瘦素和促炎细胞因子IL-6水平也显著降低（分别降低80%和72%）。 在瘦的C57BL/6小鼠中，用SR9009 (100 mg/kg，腹腔注射，每日两次) 处理10天，降低了空腹血浆甘油三酯和总胆固醇。 在ob/ob（瘦素缺陷型）小鼠中，用SR9009 (100 mg/kg，腹腔注射，每日两次) 处理12天，抑制了通常观察到的体重增加程度。 单剂量SR9009改变了外周组织中代谢基因的昼夜表达模式：在肝脏中，它抑制了Srebfl、Scd1、Srebf2、Cyp7a1、Ppargc1a和Ppargc1b；在骨骼肌中，它升高了Cpt1b、Fatp1、Ppargc1b、Ucp3、Hk1和Pkm2；在白脂肪组织中，它抑制了Dgat1、Dgat2、Mgat、Plin1和Hsl。[1] |
| 酶活实验 |
在这项研究中，研究人员开发了两种REV-ERBα/β激动剂，它们具有足够的血浆/脑暴露，可以在体内评估其效果。SR9009和SR9009（图1a，补充图1）均剂量依赖性地增加了在表达嵌合Gal4 DNA结合结构域（DBD）-REV-ERB配体结合结构域α或β和Gal4反应性萤光素酶报告子的HEK293细胞中评估的REV-ERB依赖性阻遏物活性（图1b）（SR9009:REV-ERBαIC50=670 nM，REV-ERBβIC50=800 nM；SR9011:REV-ERB a IC50=790 nM，REV-ERBβIC50=560 nM）。REV-ERB配体GSK4112（补充图2）没有暴露于血浆中，其活性有限（图1b）。在使用全长REV-ERBα以及由Bmal1启动子驱动的萤光素酶报告子的共转染试验中，SR9011和SR9009均有效地抑制了转录（图1c）（SR9009 IC50=710 nM；SR9011 IC50=620 nM）。SR9011和SR9009以REV-ERBα/β依赖的方式抑制HepG2细胞中BMAL1 mRNA的表达（补充图3）。与这两种化合物作为REV-ERB的直接激动剂的作用一致，我们注意到，使用生化分析，这些化合物增加了NCoR的CoRNR盒肽片段的募集（补充图4）。SR9009与REV-ERBα的直接结合也通过圆二色谱分析得到证实（补充图5）（Kd=800 nM）。这两种化合物都没有在其他核受体上表现出活性12,13（补充图6）[1]。
使用生化实验评估辅助抑制因子肽段募集。在存在或不存在SR9009的情况下，测量了REV-ERBα配体结合域与源自核受体辅助抑制子的荧光标记CoRNR box肽段片段之间的相互作用。该化合物增加了肽段的募集，表明激动剂诱导了受体-辅助抑制子相互作用的稳定化。[1] 采用圆二色谱光谱法确认直接结合。将SR9009滴定到含有纯化的REV-ERBα配体结合域的溶液中，导致CD光谱发生浓度依赖性变化，从而计算出结合解离常数(Kd)。[1] |
| 细胞实验 |
HEK293 细胞在 96 孔板（1×106/孔）中生长，并使用 Lipofectamine 瞬时转染。每孔用总共 200 ng DNA 转染细胞，其中包含 pGL4 mIL-17 萤火虫荧光素酶报告基因构建体、pGL4 mIL-17 + CNS-5 萤火虫荧光素酶报告基因构建体或 pGL4 mIL-17 2kB RORE 突变体（100 ng/孔）、肌动蛋白启动子海肾荧光素酶报告基因（50 ng/孔）以及单独的对照载体或测试 DNA（50 ng/孔的全长 RORα 或全长 RORγ）。所有 48 种人类核受体均出现在特异性测定中，SR9009 的测试浓度为 20 μM。该测定的形式是在 HEK293 细胞中使用 Gal4 DNA 结合域-核受体融合物进行共转染测定[1]。
对于Gal4-REV-ERB报告基因实验，将HEK293细胞转染两种质粒：一种表达酵母Gal4 DNA结合域与人REV-ERBα或REV-ERBβ配体结合域的融合蛋白，另一种包含由具有多个Gal4结合位点启动子驱动的荧光素酶报告基因。转染后，用不同浓度的SR9009处理细胞。测量荧光素酶活性，并量化该化合物增强Gal4-REV-ERB融合蛋白抑制活性（导致荧光素酶信号降低）的能力，以确定其效力(IC50)。[1] 对于全长REV-ERB报告基因实验，将HEK293细胞转染表达全长人REV-ERBα的质粒，以及一个由小鼠Bmal1启动子（一个天然的REV-ERB靶标）驱动表达的荧光素酶报告质粒。用SR9009处理细胞，测量随后荧光素酶活性的抑制，这代表了REV-ERB介导的对Bmal1启动子的抑制。[1] 对于HepG2细胞的基因表达分析，用SR9009处理细胞。然后提取RNA，并使用实时定量PCR量化靶基因（例如BMAL1）的mRNA水平。为了确认REV-ERB依赖性，在使用siRNA降低REV-ERBα和/或REV-ERBβ表达的细胞中进行平行实验。[1] |
| 动物实验 |
在昼夜节律基因表达实验中，雄性C57BL/6小鼠（8-10周龄）分别置于12小时光照/12小时黑暗（L:D）循环或持续黑暗条件下饲养。在昼夜节律时间（CT）0，小鼠腹腔注射单剂量100 mg/kg的SR9009或SR9011，并在CT0、CT6、CT12和CT18处死各组小鼠（n=6）。采用实时定量PCR（qPCR）检测基因表达。[1]
在持续黑暗（D:D）条件下进行昼夜节律行为和基因表达研究时，雄性C57BL/6小鼠（8-10周龄）首先在12小时光照/12小时黑暗（L:D）循环下适应至少一周，然后置于持续黑暗条件下饲养。在D:D条件下饲养12天后，小鼠在特定的昼夜节律时间点（CT，例如CT6或CT0）接受单次腹腔注射SR9009（通常为100 mg/kg）或载体。使用跑轮监测小鼠的运动活性。为了进行基因表达分析，在注射后不同的CT时间点处死小鼠，并收集组织（下丘脑、肝脏、肌肉、脂肪组织）进行qPCR分析。[1] 在标准L:D周期的研究中，小鼠按照12小时L:12小时的昼夜节律饲养。它们接受单次腹腔注射SR9009（100 mg/kg），并按类似方法进行运动活性检测或组织收集。 [1] 在慢性代谢研究（例如，体重减轻、CLAMS 分析）中，小鼠（Balb/c 或 C57BL/6）腹腔注射 SR9009，剂量为 100 mg/kg，每日两次 (bid)，通常在 CT0 和 CT12 时给药，疗程为 10 至 30 天。监测小鼠的体重和体成分。[1] 在饮食诱导肥胖 (DIO) 研究中，20 周龄的 C57BL/6 小鼠已喂食高脂饮食（60% 脂肪）14 周，在继续喂食高脂饮食的同时，接受 SR9009（100 mg/kg，腹腔注射，每日两次，分别在 CT0 和 CT12 时给药）或载体处理，持续 30 天。评估小鼠的体重、脂肪量和血浆参数。 [1] 在ob/ob小鼠研究中，瘦素缺陷小鼠接受SR9009（100 mg/kg，腹腔注射，每日两次）治疗12天，并监测体重。[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
化合物SR9009和SR9011的研发目的是为了使其在血浆和脑组织中具有足够的暴露量，从而能够在体内评估其作用，这与之前的工具化合物（GSK4112）不同，后者不具有血浆暴露量。[1]
如正文所述，SR9009和SR9011在小鼠体内均显示出“合理的血浆暴露量”。然而，正文中并未提供SR9009的具体定量药代动力学参数（例如，半衰期、Cmax、AUC、口服生物利用度）。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在小鼠中，单次注射SR9009后，在持续黑暗条件下观察到的运动活性完全丧失，并非由于全身毒性或虚弱所致，因为小鼠在旷场实验中仍能继续活动，且未表现出力量下降。[1]
对接受治疗的小鼠进行全血细胞计数检查，未观察到明显的毒性。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
SR-9009 是一种 REV-ERB 激动剂。SR-9011 已被证实对癌细胞和癌基因诱导的衰老细胞（包括黑色素细胞痣）具有特异性杀伤作用，且对正常细胞或组织的活力无影响。
同步行为和代谢过程的节律对于心血管健康和预防代谢性疾病至关重要。核受体 REV-ERB-α 和 REV-ERB-β 在调节驱动活动和代谢节律的核心时钟蛋白的表达中发挥着不可或缺的作用。本文描述了具有体内活性的强效合成 REV-ERB 激动剂的鉴定。给予合成 REV-ERB 配体可改变小鼠的昼夜节律行为以及下丘脑中核心时钟基因表达的昼夜节律模式。肝脏、骨骼肌和脂肪组织中一系列代谢基因的昼夜节律表达模式也发生改变，导致能量消耗增加。用 REV-ERB 激动剂治疗饮食诱导的肥胖小鼠，可通过减少脂肪量并显著改善血脂异常和高血糖来减轻肥胖。这些结果表明，药理学靶向昼夜节律的合成 REV-ERB 配体可能对治疗睡眠障碍和代谢性疾病有益。[1] SR9009 是一种合成的小分子核受体激动剂，可激动 REV-ERBα 和 REV-ERBβ。REV-ERB 是转录因子，在调节核心昼夜节律时钟蛋白的表达中发挥着重要作用，并且也参与代谢调节。[1] REV-ERB 的生理配体是血红素。 SR9009 是一种旨在药理学调节 REV-ERB 活性的合成配体。 [1] SR9009 通过靶向生物钟机制，改变昼夜节律行为（睡眠/觉醒周期）以及多种组织（肝脏、肌肉、脂肪组织）中参与代谢的基因的昼夜节律表达模式。[1] SR9009 的代谢效应包括增加能量消耗、促进骨骼肌中脂肪酸和葡萄糖的氧化、抑制肝脏中的脂肪生成和胆固醇合成，以及抑制白色脂肪组织中甘油三酯的合成和储存。[1] 这些综合效应可降低肥胖小鼠模型的脂肪含量，减轻体重，并改善血脂异常和高血糖症。[1] 该研究表明，像 SR9009 这样的合成 REV-ERB 激动剂可能具有治疗睡眠障碍（通过重置昼夜节律）以及肥胖和血脂异常等代谢性疾病的潜力。 [1] |
| 分子式 |
C20H24CLN3O4S
|
|
|---|---|---|
| 分子量 |
437.94
|
|
| 精确质量 |
437.118
|
|
| CAS号 |
1379686-30-2
|
|
| 相关CAS号 |
|
|
| PubChem CID |
57394020
|
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
|
| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
|
|
| 沸点 |
547.2±45.0 °C at 760 mmHg
|
|
| 闪点 |
284.7±28.7 °C
|
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.5 mmHg at 25°C
|
|
| 折射率 |
1.608
|
|
| LogP |
4.17
|
|
| tPSA |
106.84
|
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
|
| 可旋转键数目(RBC) |
8
|
|
| 重原子数目 |
29
|
|
| 分子复杂度/Complexity |
556
|
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
|
| InChi Key |
MMJJNHOIVCGAAP-UHFFFAOYSA-N
|
|
| InChi Code |
InChI=1S/C20H24ClN3O4S/c1-2-28-20(25)23-10-9-16(13-23)12-22(11-15-3-5-17(21)6-4-15)14-18-7-8-19(29-18)24(26)27/h3-8,16H,2,9-14H2,1H3
|
|
| 化学名 |
|
|
| 别名 |
|
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
|
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
|
|||
|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 20 mg/mL (45.67 mM) in 5% DMSO 10% Cremophor EL + 85% ddH2O (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (5.71 mM) in 5% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: 2.5 mg/mL (5.71 mM) in 5% DMSO + 95% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 配方 4 中的溶解度: 2.08 mg/mL (4.75 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清的DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 5 中的溶解度: 2.08 mg/mL (4.75 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将100μL 20.8mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 配方 6 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.75 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2834 mL | 11.4171 mL | 22.8342 mL | |
| 5 mM | 0.4567 mL | 2.2834 mL | 4.5668 mL | |
| 10 mM | 0.2283 mL | 1.1417 mL | 2.2834 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
SR9011 and SR9009 are synthetic REV-ERB agonists with activityin vivo.Nature.2012 Mar 29;485(7396):62-8. |
Synthetic REV-ERB ligands alter circadian behavior and the pattern of expression of core clock genes.Nature.2012 Mar 29;485(7396):62-8. |
Activation of REV-ERB by SR9011in vivoresults in an increase in energy expenditure and weight loss.Nature.2012 Mar 29;485(7396):62-8. |
REV-ERB ligands alter the pattern of circadian expression of metabolic genes in the liver, skeletal muscle and adipose tissue.Nature.2012 Mar 29;485(7396):62-8. |
SR9009 treatment results in a decrease in fat mass and in plasma lipids in diet-induced obese mice.Nature.2012 Mar 29;485(7396):62-8. |
Tepotinib hydrochloride monohydrate
BKN-1
NEO214
MJO445
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
