PARP1 ( IC50 = 0.57 nM )
In vitro activity: Talazoparib is a strong inhibitor of PARP1/2 (PARP1 IC50=0.57 nM); at concentrations up to 1 μM, it has no effect on PARG activity. With a dissociation constant (K_D) of 0.29 nM, talazoparib binds to PARP1. With K_is values of 1.20 and 0.85 nM, respectively, talazoparib inhibits PARP1 and -2 to a comparable degree. With 20–200 times more potency than current PARP1/2 inhibitors, talazoparib specifically targets tumor cells with BRCA1, BRCA2, or PTEN gene defects. The drug talazoparib targets tumor cells that have defects in homologous recombination genes. Both BRCA1-deficient tumor models (MX-1 and SUM149) and BRCA2-deficient tumor models (Capan-1) exhibit significant sensitivity to talazoparib. At concentrations as low as 100 pM, talazoparib induces nuclear γ-H2AX foci[1].

体外活性：BMN-673 选择性结合 PARP，并通过碱基切除修复途径阻止 PARP 介导的单链 DNA 断裂的 DNA 修复。这会增强 DNA 链断裂的积累，促进基因组不稳定并最终导致细胞凋亡。 BMN 673 选择性杀死具有 BRCA-1 或 BRCA-2 突变的癌细胞。 BMN 673 在 BRCA-1 突变体（MX-1，IC50 = 0.3 nM）和 BRCA-2 突变细胞（Capan-1，IC50 = 5 nM）中表现出单药细胞毒性。相比之下，在 MRC-5 正常人成纤维细胞和其他具有野生型 BRCA-1 和 BRCA-2 基因的肿瘤细胞系中，BMN 673 的 IC50 范围在 90 nM 至 1.9 μM 之间。在培养的人类癌细胞中，BMN 673 还显着增强替莫唑胺和 SN-38 的细胞毒性功效。脱靶分子筛选未发现此类 PARP 抑制剂具有显着的非特异性活性。激酶测定：对于 PARP 抑制剂 Ki 测定，在 96 孔 FlashPlate 中进行酶测定，最终体积中含有 0.5 U PARP1 酶、0.25x 活化 DNA、0.2 mCi [3H] NAD 和 5 mmol/L 冷 NAD(Sigma) 50 mL 反应缓冲液，含有 10% 甘油 (v/v)、25 mmol/L HEPES、12.5 mmol/L MgCl2、50 mmol/L KCl、1 mmol/L 二硫苏糖醇 (DTT) 和 0.01% NP-40 (v /v），pH 7.6。通过将 NAD 添加到含有或不含抑制剂的 PARP 反应混合物中来引发反应，并在室温下孵育 1 分钟。然后向每孔中加入50微升冰冷的20%三氯乙酸(TCA)以终止反应。将板密封并在室温下再摇动120分钟，然后离心。使用 Top-Count 确定与 FlashPlate 结合的放射性信号。 PARP1 Km 使用 Michaelis-Menten 方程从不同的底物浓度 (1-100 mmol/L NAD) 中确定。根据以下公式从酶抑制曲线计算化合物Ki：Ki 1/4 IC50/[1+(底物)/Km]。 PARP2 酶和化合物 Ki 的 Km 使用相同的测定方案测定，不同之处在于在室温下反应中使用 30 ng PARP2、0.25x 活化 DNA、0.2 mCi [3H] NAD 和 20 mmol/L 冷 NAD 30 分钟。细胞分析：BMN 673 对 11 种 SCLC 细胞系表现出有效的抑制作用（IC50=1.7 至 15 nmol/L），这些细胞系均在临床可达到的范围内。此外，对 BMN673 的敏感性与 DNA 修复蛋白表达和 PI3K 通路活性相关。

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在生物化学酶活性测定中，他拉唑帕尼托西酸盐抑制PARP1的IC50为0.57 nM，效力强于维利帕尼、鲁卡帕尼和奥拉帕尼。[1]
在LoVo细胞中测量抑制过氧化氢诱导的聚ADP核糖合成的细胞实验中，他拉唑帕尼托西酸盐的EC50为2.5 nM。[1]
他拉唑帕尼托西酸盐选择性杀死具有同源重组缺陷的肿瘤细胞。在BRCA2缺陷的胰腺癌细胞系Capan-1中，其单药细胞毒性IC50为5 nM。[1]
在一组人类肿瘤细胞系的集落形成或2D细胞毒性实验中，他拉唑帕尼托西酸盐在BRCA1缺陷、BRCA2缺陷和PTEN缺陷模型中显示出显著效力，而在HR功能正常的模型中效力较低。与其他PARP抑制剂相比，其在BRCA缺陷与正常细胞之间的治疗窗口更大。[1]
在BRCA缺陷的同基因模型（具有BRCA1缺陷的小鼠ES细胞和具有BRCA2敲除的人DLD1细胞）中，他拉唑帕尼托西酸盐在比维利帕尼、鲁卡帕尼或奥拉帕尼低得多的浓度下选择性抑制BRCA缺陷细胞的生长。[1]
在CAL51细胞中使用靶向960个基因的siRNA库进行的平行RNA干扰筛选表明，对他拉唑帕尼托西酸盐最显著的增敏作用是由靶向HR/双链断裂修复相关基因的siRNA引起的。其遗传增敏谱与其他PARP抑制剂无显著差异。[1]
他拉唑帕尼托西酸盐在低浓度下诱导DNA损伤生物标志物。它在低至100 pM的浓度下即可诱导细胞核γH2AX灶形成。[1]
他拉唑帕尼托西酸盐增强了DNA损伤剂的细胞毒性。与替莫唑胺联用时，在LoVo细胞中达到50%生长抑制的GI50为3 nM。它还在体外以剂量依赖性方式增强SN-38的效果，并与铂类药物显示出相加作用。[1]
他拉唑帕尼托西酸盐在高达1 μM的浓度下不抑制PARG活性。在10 μM浓度下进行的广泛脱靶筛选未显示显著相互作用。在高达100 μM的浓度下，对hERG钾通道无显著抑制。[1]

在大鼠药代动力学研究中，BMN 673 显示出 >50% 的口服生物利用度和药代动力学特性，可实现每日单次给药。在 MX-1 异种移植肿瘤模型研究中，每日口服 BMN 673 可以剂量依赖性方式显着增强细胞毒性疗法的抗肿瘤作用。

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在携带BRCA1缺陷的MX-1人乳腺肿瘤异种移植物的裸鼠中，每天一次口服他拉唑帕尼托西酸盐0.33 mg/kg，持续28天，可显著抑制肿瘤生长，6只小鼠中有4只达到完全缓解。0.1 mg/kg的较低剂量效果较小，但仍比每天一次口服100 mg/kg奥拉帕尼更有效。[1]
在携带MX-1异种移植物的鼠中单次口服他拉唑帕尼托西酸盐可显著降低给药后2小时和8小时的瘤内PAR水平，24小时后部分恢复。[1]
在MX-1模型中，每天两次给药方案比每天一次给药方案更有效，可防止肿瘤在治疗结束后重新生长。[1]
他拉唑帕尼托西酸盐在PTEN缺失的异种移植模型中也显示出抗肿瘤活性，导致显著的肿瘤生长延迟。[1]
他拉唑帕尼托西酸盐增强了顺铂和卡铂在MX-1异种移植模型中的抗肿瘤效果。与顺铂联用显示剂量依赖性增敏作用。[1]

酶测定在 96 孔 FlashPlates 中进行，最终体积为 50 mL 反应缓冲液，其中含有 0.5 U PARP1 酶、0.25x 活化 DNA、0.2 mCi [3H] NAD 和 5 mmol/L 冷 NAD (Sigma)，其中含有 10 % 甘油 (v/v)、25 mmol/L HEPES、12.5 mmol/L MgCl2、50 mmol/L KCl、1 mmol/L 二硫苏糖醇 (DTT) 和 0.01% NP-40 (v/v)，pH 7.6。将含有或不含抑制剂的 NAD 添加到 PARP 反应混合物中以启动反应，然后将其在室温下静置一分钟。为了停止反应，随后将 50 微升冰冷的 20% 三氯乙酸 (TCA) 添加到每个孔中。将板密封并在室温下另外摇动 120 分钟后进行离心。 Top-Count 用于识别与 FlashPlate 结合的放射性信号。使用 Michaelis-Menten 方程，计算一系列底物浓度 (1-100 mmol/L NAD) 的 PARP1 Km。利用公式 Ki 1/4 IC50/[1+（底物）/Km]，从酶抑制曲线计算化合物 Ki。使用相同的测定方案测定 PARP2 酶 Km 和化合物 Ki，不同之处在于在反应 30 小时期间使用 30 ng PARP2、0.25x 活化 DNA、0.2 mCi [3H] NAD 和 20 mmol/L 冷 NAD。分钟的室温持续时间。

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为了确定 PARP 抑制剂 Ki，在 96 孔 FlashPlate 中使用 0.5 U PARP1 酶、0.25x 活化 DNA、0.2 mCi [3H] NAD 和 5 mmol/L 冷 NAD (Sigma) 在最终样品中进行酶测定。 50 mL 反应缓冲液，含有 10% 甘油 (v/v)、25 mmol/L HEPES、12.5 mmol/L MgCl2、50 mmol/L KCl、1 mmol/L 二硫苏糖醇 (DTT) 和 0.01% NP-40 (v/v)，pH 7.6。将 NAD 添加到 PARP 反应混合物中（无论有或没有抑制剂）以启动反应，然后在室温下孵育一分钟。然后通过向每个孔中添加50微升冰冷的20%三氯乙酸(TCA)来终止反应。将板密封并在室温下另外摇动120分钟后，进行离心。 Top-Count 用于确定与 FlashPlate 结合的放射性信号。采用 Michaelis-Menten 方程计算不同底物浓度（1 至 100 mmol/L NAD）下的 PARP1 Km。使用公式 Ki 1/4 IC50/[1+（底物）/Km]，从酶抑制曲线计算化合物 Ki。使用相同的测定方案，发现了 PARP2 酶的 Km 和化合物 Ki。然而，反应在室温下运行 30 分钟，而不是使用 30 ng PARP2、0.25x 活化 DNA、0.2 mCi [3H] NAD 和 20 mmol/L 冷 NAD。

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PARP酶测定[1]
根据制造商的说明，使用Trevigen的PARP检测试剂盒评估测试化合物抑制PARP-1酶活性的能力。采用GraphPad Prism5软件计算IC50值。对于PARP抑制剂Ki的测定，酶分析在96孔FlashPlate上进行，0.5单位PARP1酶，0.25倍活化DNA， 0.2 μCi [3H] NAD和5 μM冷NAD，最终体积为50 μL反应缓冲液，含10%甘油（v/v）， 25 mM Hepes, 12.5 mM MgCl2, 50 mM KCl， 1 mM DTT和0.01% NP-40(v/v), pH 7.6。将NAD加入到有或没有抑制剂的PARP反应混合物中，在室温下孵育1分钟，开始反应。然后在每孔中加入50 μL冰凉的20% TCA以停止反应。将板密封并在RT下振荡120分钟，然后离心。使用TopCount测定绑定到FlashPlate的放射性信号。采用Michaelis-Menten方程测定不同底物浓度（1-100 μM NAD）下PARP1 Km。根据酶抑制曲线计算化合物Ki，公式为：Ki = IC50/（1+[底物]/Km）。除30 ng PARP2、0.25x活化DNA、0.2 μCi [3H] NAD和20 μM冷NAD在室温下反应30min外，采用相同的检测方法测定PARP2酶Km和化合物Ki。

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Biacore结合试验[1]
我们自制了带有n端6xhis标签的重组人PARP1 （rhPARP1）催化结构域（残基662 - 1011），并使用Biacore T200 （GE Healthcare）进行PARP抑制剂相互作用的结合试验。通过胺偶联法将rhPARP1固定在CM5传感器芯片上。简单地说，首先以10 μL/min的速率注射新鲜制备的50 mM NHS: 200 mM EDC(1:1)，以10 μL/min的速度注射7 min，激活CM5芯片的一个流动细胞。然后以10 μL/min的速度将rhPARP1 （100 μg/mL, 10 mM MES pH 6.5）注射到流式细胞上60秒。以10 μL/min注射1M乙醇胺7 min阻断剩余活性偶联位点。固定化缓冲液含有10 mM Hepes pH 7.4, 150 mM NaCl， 0.05%表面活性剂P20, 5 mM MgCl2和0.5 mM TCEP（三（2-羧乙基）膦）。固定水平为~7600 RU。为了测量结合动力学，在芯片表面注射浓度增加的PARP抑制剂（12.5、25、50、100、200 nM），每次注射60秒。最后一次注射后，在运行缓冲液（固定缓冲液+ 1% DMSO）中进行3600秒的解离期。流速为50 μL/min。根据参考流的信号对传感器图进行校正后，使用Biacore T200评估软件ver.1.0计算动力学。

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细胞内PAR形成试验[1]
细胞PAR合成试验评估了测试化合物抑制PAR聚合的能力。在96孔微滴板中生长的LoVo人结直肠肿瘤细胞在增加PARP抑制剂浓度的条件下预处理30分钟，然后加入终浓度为50 mM的H2O2。在室温下处理5分钟后，细胞在- 20°C下用预冷甲醇/丙酮（7:3）固定10分钟。固定细胞用抗par单克隆抗体孵育60 min，然后用FITC偶联山羊抗小鼠IgG（稀释1:100）和1 μg/mL DAPI孵育60 min，用DAPI信号归一化FITC信号，用GraphPad Prism计算EC50值。

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PARP酶抑制实验：使用商业PARP检测试剂盒评估测试化合物抑制PARP1酶活性的能力。反应体系包含PARP1酶、活化DNA、NAD和测试化合物。孵育后，用三氯乙酸终止反应，通过闪烁计数测定结合到板上的放射性信号，并根据剂量反应曲线计算IC50。通过变化NAD浓度确定Km，并使用公式Ki = IC50/(1+[底物]/Km)计算Ki。使用PARP2酶的类似方案用于测定PARP2 Ki。[1]
Biacore结合实验： 通过胺偶联法将重组人PARP1催化结构域固定在CMS传感器芯片上。以递增浓度的测试化合物注入芯片表面，每次注入60秒，然后在运行缓冲液中进行长时间解离。使用参考流动池校正传感图，并使用评估软件计算结合动力学参数和离解常数。[1]

为期五天，替莫唑胺 (TMZ) 和他拉佐帕尼 (10, 40 nM) 单独或联合给予 LoVo 细胞。 CellTiter-Glo 测定用于确定存活率。 [1] 一组 11 个 SCLC 细胞系（IC50=1.7 至 15 nmol/L），所有这些细胞系都在临床可行的范围内，证明了 BMN 673 的强大抑制作用。此外，PI3K 通路活性和 DNA 修复蛋白表达与 Talazoparib (BMN 673; MDV3800)  敏感性相关。

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共焦显微镜[1]
细胞接种于6孔板盖盖上，24小时后用不同浓度的奥拉帕尼或Talazoparib (BMN 673; MDV3800) 处理24小时后，将细胞用10%福尔马林（3.7% PFA）固定1小时。用0.2% Triton X-100在PBS中渗透20分钟，用50 μL DNase I（在PBS中稀释1/10）在37℃下处理1小时，然后用IFF （PBS + 1% BSA和2% FBS，过滤灭菌）阻断1小时。盖片与兔抗γ - h2ax原代和小鼠抗rad51原代（均为1:1000,50μL IFF）在4°C下孵育过夜。次日，细胞与抗小鼠Alexafluor 546和抗兔Alexafluor 488（均为1:1000,50μL IFF）共孵育1小时。细胞在含DAPI 1:10.000的PBS中洗涤10分钟，用vectasshield和指甲油贴在玻璃板上。使用徕卡共聚焦显微镜对每个盖盖至少拍摄四张照片，随后对细胞进行计数。每次覆盖至少评估100个细胞，如果每个细胞核有超过5个病灶，则为γ - h2ax阳性。绘制阳性细胞的百分比。

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细胞内PAR形成实验： 将生长在96孔板中的LoVo人结直肠肿瘤细胞用PARP抑制剂预处理30分钟。然后通过添加过氧化氢诱导PAR合成5分钟。固定细胞后，使用抗PAR单克隆抗体和一抗FITC偶联的二抗进行免疫荧光染色，并用DAPI复染。将FITC信号归一化为DAPI信号，并根据剂量反应曲线计算EC50。[1]
集落形成生存实验：将细胞以低密度接种于6孔板中。24小时后，更换为含PARP抑制剂的新鲜培养基。每周更换两次含抑制剂的培养基，持续14天。然后用三氯乙酸固定菌落，用磺基罗丹明B染色，计数，并归一化至载体处理对照组以计算生存分数。[1]
单药细胞毒性和化学增敏实验：对于单药细胞毒性，将细胞接种于96孔板，用递增浓度的PARP抑制剂处理10-12天。使用发光细胞活力测定法测定细胞存活率。对于化学增敏实验，将不同浓度的PARP抑制剂与固定浓度的细胞毒剂组合处理细胞5天，然后测定细胞活力。[1]
siRNA筛选：将CAL51细胞接种于96孔板，用靶向960个基因的siRNA库转染。转染后48小时，用各PARP抑制剂在其SF80浓度或载体处理细胞5天。使用发光法评估细胞活力。分析数据以计算每个siRNA的药物效应Z分数，识别其沉默能增敏细胞对药物反应的基因。[1]
γH2AX灶免疫荧光： 将接种在盖玻片上的细胞用PARP抑制剂处理24小时，固定、透化并用DNase I处理。封闭后，与抗γH2AX和抗RAD51的一抗在4°C孵育过夜。然后与荧光染料偶联的二抗和DAPI孵育。通过共聚焦显微镜获取图像。计数每个细胞核中超过5个γH2AX灶的细胞为阳性细胞。[1]

小鼠：在单药试验中，采用灌胃法（per os）分别每日一次或两次给予奥拉帕尼（100 mg/kg）、他拉唑帕尼（0.33 或 0.1 mg/kg/d）或赋形剂（10% DMAc、6% Solutol 和 84% PBS），共持续 28 天。最后一次给药后，每天观察小鼠 10 天[1]。\n异种移植实验[1]
\n所有体内异种移植研究均使用 8-10 周龄的雌性无胸腺裸鼠（nu/nu）。小鼠在实验操作前至少隔离 1 周。将处于指数生长期的细胞（LNcap、MDA-MB-468）或体内传代的肿瘤碎片（MX-1）皮下植入裸鼠右侧腹部。当肿瘤平均体积达到约 150 mm³ 时，每项研究中将小鼠随机分为不同的治疗组（每组 6-8 只小鼠）。每天对小鼠进行目测观察，并每周两次使用游标卡尺测量肿瘤，根据公式 [长度/2] × [宽度/2] 计算肿瘤体积。绘制各组肿瘤体积中位数（mm³）随时间变化的曲线图，以监测肿瘤生长。在单药治疗研究中，分别通过灌胃法（po）给予小鼠奥拉帕尼（100 mg/kg）、他拉唑帕尼（BMN 673；MDV3800）（剂量根据指示而定）或赋形剂（10% DMAc、6% Solutol 和 84% PBS），每日一次；或每日两次给予他拉唑帕尼（BMN 673；MDV3800）（0.165 mg/kg），连续给药 28 天。在最后一次给药后，继续对小鼠进行 10 天的持续监测。在顺铂联合研究中，从第 1 天开始，每天一次口服给予 Talazoparib (BMN 673; MDV3800)、olaparib 或赋形剂，持续 8 天。在第 3 天，于 PARP 抑制剂给药后 30 分钟，以 6 mg/kg 的剂量腹腔注射（ip）顺铂或其赋形剂（生理盐水）。在MX-1模型中，采用类似的方法进行与卡铂联合治疗，其中Talazoparib (BMN 673; MDV3800)每日口服一次，持续8天或5天，并在第3天Talazoparib (BMN 673; MDV3800)给药30分钟后，腹腔注射单剂量35 mg/kg的卡铂。[1]

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\n体内PAR检测[1]
\nMX-1肿瘤异种移植瘤的制备方法见“方法”部分。当肿瘤平均体积达到约150 mm3时，单次口服给予奥拉帕尼（100 mg/kg）、Talazoparib (BMN 673; MDV3800)（1 mg/kg）或载体。分别于给药后 2、8 和 24 小时收集肿瘤组织，并用液氮速冻。然后将肿瘤组织在冰上用 PBS 匀浆，并用含有 1% SDS 的裂解缓冲液（25mM Tris pH 8.0、150mM NaCl、5mM EDTA、2mM EGTA、25mM NaF、2mM Na3VO4、1mM Pefabloc、1% Triton X-100 和蛋白酶抑制剂混合物）提取。使用 PARP 体内 PD Assay II 试剂盒通过 ELISA 法测定肿瘤裂解液中 PAR 的水平。

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\n单药在异种移植模型中的疗效：将肿瘤细胞（例如 LNcap、MDA-MB-468）或肿瘤碎片（MX-1）皮下植入 8-10 周龄的雌性无胸腺裸鼠（nu/nu）。当肿瘤平均体积达到约 150 mm³ 时，将小鼠随机分为治疗组。Talazoparib tosylate（BMN 673）以指定剂量（例如，0.1、0.33 mg/kg）每日一次 (QD) 或每日两次 (BID，例如，0.165 mg/kg/次）灌胃给予，连续 28 天。Olaparib（100 mg/kg，po，QD）或载体（10% DMAc、6% Solutol、84% PBS）作为对照。每周测量两次肿瘤体积。[1]
\n异种移植瘤药效学（PAR 抑制）研究：携带 MX-1 异种移植瘤的小鼠接受单次口服 Talazoparib tosylate（1 mg/kg）、Olaparib（100 mg/kg）或载体。分别于给药后 2、8 和 24 小时收集肿瘤组织，速冻、匀浆并裂解。使用商业 ELISA 试剂盒定量肿瘤裂解液中的 PAR 水平。[1]
\n与 DNA 损伤剂联合治疗：与顺铂联合治疗时，从第 1 天开始，每日口服一次 他拉唑帕尼甲苯磺酸盐 或赋形剂，连续 8 天。在第 3 天，于 PARP 抑制剂给药后 30 分钟，腹腔注射顺铂（6 mg/kg）或生理盐水赋形剂。与卡铂联合治疗时，采用类似的方案，即每日口服一次 他拉唑帕尼甲苯磺酸盐，连续 5 或 8 天；在第 3 天，于 PARP 抑制剂给药后 30 分钟，腹腔注射卡铂（35 mg/kg）。监测肿瘤生长和动物体重。 [1]

吸收、分布和排泄
每日一次口服1 mg他拉唑帕尼后，他拉唑帕尼稳态时的平均[变异系数(CV%)] AUC和最大血浆浓度(Cmax)分别为208 (37%) ng·hr/mL和16.4 (32%) ng/mL。平均(CV%)稳态谷浓度(Ctrough)为3.53 (61%) ng/mL。治疗2至3周内达到稳态。达峰时间(Tmax)为1至2小时。高脂肪、高热量食物使平均Cmax增加46%，中位Tmax从1小时增加到4小时，但不影响AUC。
主要排泄途径为肾脏排泄。约 68.7% 的总给药放射性标记的他拉唑帕尼剂量从尿液中回收，其中 54.6% 为原形药物。约 19.7% 的药物从粪便中回收，其中 13.6% 为原形药物。
他拉唑帕尼的平均表观分布容积为 420 L。
平均表观口服清除率为 6.45 L/h。个体间变异性为 31%。

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代谢/代谢物
他拉唑帕尼的肝脏代谢极少。代谢途径包括单氧化、脱氢、单脱氟他拉唑帕尼的半胱氨酸结合以及葡萄糖醛酸结合。

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生物半衰期
癌症患者的平均终末血浆半衰期（±标准差）为 90 (±58) 小时。

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在大鼠、犬和人肝微粒体中进行的体外代谢研究表明，他拉唑帕尼甲苯磺酸盐具有优异的代谢稳定性，在 1 μM 浓度下孵育 2 小时后，仍有 90% 以上的化合物残留。[1]
在大鼠药代动力学研究中，他拉唑帕尼甲苯磺酸盐在 0.5% 羧甲基纤维素溶液中给药时，其绝对口服生物利用度 >40%。 [1]
浓度高达 10 μM 的他拉唑帕尼甲苯磺酸盐 不抑制五种主要的人类肝细胞色素 P450 酶（CYP1A2、2C9、2C19、2D6 和 3A4）。[1]

肝毒性
在接受他拉唑帕尼治疗期间，血清转氨酶水平升高较为常见，发生率达33%，但仅有1%的患者转氨酶水平超过正常值上限的5倍。这些升高通常是短暂的，且不伴有症状或黄疸。此外，对照组和比较组也报告了类似的转氨酶升高率。他拉唑帕尼的临床应用有限，但尚未发现与伴有症状或黄疸的急性肝损伤病例相关。由于他拉唑帕尼和其他PARP抑制剂的临床应用经验有限，其引起肝损伤的可能性尚不明确。
可能性评分：E（未经证实，但怀疑是临床上明显的肝损伤的原因）。

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妊娠和哺乳期影响
◉ 哺乳期用药概述
目前尚无关于他拉唑帕尼在哺乳期临床应用的信息。由于他拉唑帕尼与血浆蛋白的结合率为 74%，因此其在乳汁中的含量可能很低。生产商建议在他拉唑帕尼治疗期间以及末次给药后一个月内停止母乳喂养。
◉ 对母乳喂养婴儿的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。
◉ 对泌乳和母乳的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。

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蛋白结合
体外实验表明，他拉唑帕尼的蛋白结合率为 74%，且与他拉唑帕尼的浓度无关。

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在 MX-1 异种移植模型中，每日一次口服 0.33 mg/kg 和 0.1 mg/kg 的他拉唑帕尼甲苯磺酸盐，持续 28 天，耐受性良好，未观察到动物死亡或显著的体重减轻。 [1]
在与顺铂联合用药的研究中，他拉唑帕尼甲苯磺酸盐联合顺铂的治疗方案导致中度、剂量依赖性的体重下降。接受他拉唑帕尼甲苯磺酸盐剂量分别为1、0.33、0.1和0.033 mg/kg的组别联合顺铂治疗后，平均最大体重下降分别为11%、6%、5%和3%（相比之下，单独使用顺铂的组别为3%）。在第20天，1 mg/kg他拉唑帕尼甲苯磺酸盐联合顺铂组中有一只动物死亡。大多数动物在治疗结束后体重恢复正常。 [1]
在MX-1模型中，每日两次给药（0.165 mg/kg/次，BIDx28），六只小鼠中有一只出现显著体重下降（>20%），并于第53天处死。该研究中的所有其他动物均耐受良好。[1]
在体外，浓度高达100 μM时未观察到hERG钾通道的显著抑制，提示临床上发生心脏QTc间期延长的风险较低。[1]

[1]. BMN 673, a novel and highly potent PARP1/2 inhibitor for the treatment of human cancers with DNA repair deficiency. Clin Cancer Res. 2013 Sep 15;19(18):5003-15.

妥拉唑帕尼甲苯磺酸盐是妥拉唑帕尼的甲苯磺酸盐形式，是一种口服生物利用度高的核酶聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP）抑制剂，具有潜在的抗肿瘤活性。给药后，妥拉唑帕尼选择性地与PARP结合，阻止PARP介导的碱基切除修复途径对单链DNA断裂的修复。这会导致DNA链断裂的积累，促进基因组不稳定，最终导致细胞凋亡。 PARP 催化核蛋白的翻译后 ADP 核糖基化，这些核蛋白发出信号并募集其他蛋白来修复受损的 DNA，并被单链 DNA 断裂激活。
另见：他拉唑帕尼（含有活性部分）。

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药物适应症
Talzenna 适用于单药治疗携带种系 BRCA1/2 突变且患有 HER2 阴性局部晚期或转移性乳腺癌的成年患者。除非患者不适合接受蒽环类和/或紫杉烷类药物治疗，否则患者应在（新）辅助、局部晚期或转移性治疗中接受过这些药物治疗。激素受体（HR）阳性乳腺癌患者应已接受过内分泌治疗，或被认为不适合接受内分泌治疗。

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他拉唑帕尼是一种口服小分子DNA修复酶聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）抑制剂，用于治疗部分乳腺癌病例。他拉唑帕尼治疗期间血清转氨酶升高发生率中等，并疑似引起罕见的临床表现明显的急性肝损伤。
他拉唑帕尼是哺乳动物聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）的抑制剂，PARP是负责调节DNA转录和DNA修复等重要细胞功能的酶。由辉瑞公司研发的他拉唑帕尼于2018年10月首次获得美国食品药品监督管理局（FDA）批准，并于2019年6月获得欧洲药品管理局（EMA）批准。2020年9月，他拉唑帕尼获得加拿大卫生部批准。目前，他拉唑帕尼用于治疗BRCA突变型乳腺癌和HRR突变型前列腺癌。他拉唑帕尼是一种聚（ADP-核糖）聚合酶抑制剂。他拉唑帕尼的作用机制是作为聚（ADP-核糖）聚合酶抑制剂。他拉唑帕尼是一种口服小分子DNA修复酶聚ADP-核糖聚合酶（PARP）抑制剂，PARP是一种用于治疗特定类型乳腺癌的抗肿瘤药物。他拉唑帕尼治疗期间血清转氨酶升高发生率中等，并可能引起罕见的临床表现明显的急性肝损伤。他拉唑帕尼是一种口服生物利用度高的核酶聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP）抑制剂，具有潜在的抗肿瘤活性。他拉唑帕尼选择性地与PARP结合，阻止PARP介导的碱基切除修复途径修复单链DNA断裂。这会加剧DNA链断裂的积累，促进基因组不稳定，最终导致细胞凋亡。 PARP 催化核蛋白的翻译后 ADP 核糖基化，这些核蛋白发出信号并募集其他蛋白来修复受损的 DNA，并被单链 DNA 断裂激活。
另见：他拉唑帕尼甲苯磺酸盐（活性成分）。

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药物适应症
他拉唑帕尼适用于治疗携带致病性或疑似致病性种系 BRCA 突变 (gBRCAm) 且 HER2 阴性的局部晚期或转移性乳腺癌成人患者。该适应症已获得美国 FDA、EMA 和加拿大卫生部的批准。在美国，他拉唑帕尼（talazoparib）还与恩扎卢胺（enzalutamide）联合用于治疗携带HRR基因突变的转移性去势抵抗性前列腺癌（mCRPC）成人患者。
他拉唑帕尼单药治疗携带生殖系BRCA1/2突变且HER2阴性的局部晚期或转移性乳腺癌成人患者。除非患者不适合接受蒽环类药物和/或紫杉烷类药物治疗，否则患者应在（新）辅助、局部晚期或转移性治疗阶段接受过这些药物治疗。激素受体（HR）阳性乳腺癌患者应已接受过内分泌治疗，或被认为不适合接受内分泌治疗。
尤文氏肉瘤的治疗
乳腺恶性肿瘤的治疗，前列腺恶性肿瘤的治疗

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作用机制
聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP）是参与DNA转录和DNA修复等重要细胞功能的多功能酶。PARP通过碱基切除修复（BER）途径识别并修复DNA单链断裂（SSB）。DNA双链断裂（DSB）通过BRCA1和BRCA2编码的肿瘤抑制蛋白介导的同源重组进行修复。他拉唑帕尼是聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP）的强效抑制剂，包括PARP1和PARP2。体外实验表明，他拉唑帕尼与PARP-1和PARP-2亚型的亲和力相似。他拉唑帕尼抑制碱基切除修复（BER）通路，导致未修复的单链断裂（SSB）积累，进而形成双链断裂（DSB），而DSB是最具毒性的DNA损伤形式。虽然BRCA依赖的同源重组（HR）可以修复正常细胞中的DSB，但这种修复通路在携带BRCA1/2突变的细胞（例如某些肿瘤细胞）中存在缺陷。抑制携带BRCA突变的癌细胞中的PARP会导致基因组不稳定和细胞凋亡。这种最终结果也被称为合成致死性，指的是两种缺陷——PARP活性抑制和HR介导的DSB修复丧失——单独存在时无害，但组合起来却会导致有害后果。通过抑制PARP，他拉唑帕尼可增加PARP-DNA复合物的形成，从而导致DNA损伤、细胞增殖减少和细胞凋亡。

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他拉唑帕尼甲苯磺酸盐（BMN 673）是一种新型、高效且选择性的PARP1和PARP2抑制剂，具有良好的代谢稳定性、口服生物利用度和药代动力学特性。[1]
该药物利用合成致死性原理，选择性地杀死同源重组DNA修复缺陷的癌细胞，例如携带BRCA1、BRCA2或PTEN突变的癌细胞。 [1]
其化学名称为(8S,9R)-5-氟-8-(4-氟苯基)-9-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-8,9-二氢-2H-吡啶并[4,3,2-de]酞嗪-3(7H)-酮。它是外消旋体LT-00628衍生的反式异构体之一(LT-00673)。另一种反式异构体(LT-00674)和顺式异构体的活性则低得多。[1]
他拉唑帕尼甲苯磺酸盐的强效抗肿瘤活性与其PARP抑制活性密切相关，手性选择性研究将其与活性较低的异构体进行了比较，证实了这一点。 [1]
该药物在发表时正处于早期临床开发阶段，目前正在进行针对DNA修复通路缺陷的晚期肿瘤患者和晚期血液系统恶性肿瘤患者的I期临床试验。[1]

C26H22F2N6O4S

552.56

552.139

C, 56.52; H, 4.01; F, 6.88; N, 15.21; O, 11.58; S, 5.80

1373431-65-2

1207454-56-5 (racemic); 1207456-01-6; 1373431-65-2

135565654

White to off-white solid powder

4.22

154.73

3

10

3

39

861

2

S(C1C=CC(C)=CC=1)(=O)(=O)O.FC1C=C2C(NN=C3C2=C(C=1)N[C@H](C1C=CC(=CC=1)F)[C@H]3C1=NC=NN1C)=O

QUQKKHBYEFLEHK-QNBGGDODSA-N

InChI=1S/C19H14F2N6O.C7H8O3S/c1-27-18(22-8-23-27)15-16(9-2-4-10(20)5-3-9)24-13-7-11(21)6-12-14(13)17(15)25-26-19(12)28;1-6-2-4-7(5-3-6)11(8,9)10/h2-8,15-16,24H,1H3,(H,26,28);2-5H,1H3,(H,8,9,10)/t15-,16-;/m1./s1

(11S,12R)-7-fluoro-11-(4-fluorophenyl)-12-(2-methyl-1,2,4-triazol-3-yl)-2,3,10-triazatricyclo[7.3.1.05,13]trideca-1,5(13),6,8-tetraen-4-one;4-methylbenzenesulfonic acid

BMN 673 tosylate; BMN673; BMN-673; UNII-02WK9U5NZC; 02WK9U5NZC; Talazoparib tosylate [USAN]; LT673 tosylate; LT 673; LT-673 tosylate; MDV-3800 tosylate; MDV 3800; MDV3800 tosylate; trade name: Talzenna

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.52 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.52 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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配方 3 中的溶解度: 5%DMSO+ 40%PEG300+ 5%Tween 80+ 50%ddH2O: 2.5mg/ml (6.57mM)

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。