5-HT4 Receptor

细胞对马来酸泰色罗（SDZ-HTF-919；3-5 μM；24-72 小时）的反应在时间和剂量上均显着增加 [1]。 p-S6 和 p-p70 S6 (Thr421/Ser424) 可被马来酸替沙罗（0.1-3 μM；8-18 小时）还原[1]。 24 小时内，马来酸替加色罗 (0.1-3 μM) 有效抑制 5-HT 介导的。 Tegaserod（3-5 μM；24-72 小时）以时间和剂量依赖性方式显着增加细胞凋亡 [1]。 Tegaserod 可在 8-18 小时内降低 3-5 μM 的 p-S6 和 p-p70 S6 (Thr421/Ser424)[1]。根据 5-HT2B 受体拮抗剂活性，替加色罗（0.1-3 μM；24 小时）在体外可有效抑制 5-HT 介导的大鼠胃底收缩 (pA2=8.3) [3]。 Tegaserod（TM）独立于5-羟色胺信号发挥其抗癌作用。Tegaserod（TM）通过PI3K/Akt/mTOR途径钝化核糖体蛋白S6（S6）磷酸化[1]。 Tegaserod在8-18小时内降低3-5μM的p-S6和p-p70 S6（Thr421/Ser424）[1]。根据5-HT2B受体拮抗剂活性，替加色罗（0.1-3μM；24小时）在体外有效抑制5-HT介导的大鼠胃底收缩（pA2=8.3）[3]。

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1Tegaserod（Zelnorm）是一种强效的5-羟色胺4（5-HT4）受体激动剂，对与胃肠运动和转运减少相关的疾病具有临床疗效。本研究调查了替加色罗与5-HT2受体的相互作用，并将其在这方面的效力与其5-HT4受体激动剂活性进行了比较。2 Tegaserod对人重组5-HT2A、5-HT2B和5-HT2C受体具有显著的结合亲和力（pKi=7.5、8.4和7.0）。替加色罗的5-HT2B受体结合亲和力与稳定转染有人5-HT4（c）受体的人胚胎肾-293（HEK-293）细胞中的人重组5-HT4（c）受体的结合亲和力相同（平均pKi=8.4）。3替加色罗（0.1-3微米）能有效抑制5-羟色胺介导的大鼠离体胃底收缩（pA2=8.3），与5-羟色胺（2B）受体拮抗剂活性一致。替加色罗在稳定转染人5-HT4（c）受体的HEK-293细胞中以类似的效力产生了3'，5'环磷酸腺苷的升高（平均pEC50=8.6），以及5-HT4受体介导的大鼠离体食管的舒张（平均pEC50=8.2）和豚鼠离体结肠的收缩（平均pER50=8.3）。

马来酸替加色罗（SDZ-HTF-919；腹腔注射；5 mg/kg/天；连续五天）在体内抑制 p-S6 并延迟、缩小和生长肿瘤[1]。替加色罗卵磷脂（0.1-2.0 mg/kg；在胃负荷前15分钟腹膜内给药）显着提高了db/db小鼠的胃排空率，将0.1 mg/kg的时间缩短至30分钟。这使得食物在胃中的部分减少了 80% [2]。

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db/db小鼠的胃葡萄糖排空明显慢于对照同窝小鼠Tegaserod（0.1mg/kg（-1））显著加速了db/db小鼠的葡萄糖胃排空率，使30分钟时胃中剩余的膳食比例降低了80%。GR11308阻断了替加色罗的胃动力作用。 结论：db/db小鼠胃排空受损。在这种胃轻瘫模型中，低剂量替加色罗通过激活5-HT（4）受体提高了胃排空率。这些发现表明，5-HT（4）受体激动剂可能有助于改善胃轻瘫患者的胃排空延迟。[2]

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皮下给药后，Tegaserod（0.3或1 mg/kg（-1））抑制了麻醉大鼠胃底的收缩，这是对静脉注射选择性5-HT2B受体激动剂α-甲基5-HT（0.03 mg/kg（-1。在相似的剂量下，替加色罗（皮下注射1和3 mg kg（-1））在清醒的豚鼠中诱发了5-HT4受体介导的结肠转运增加。5本研究的数据表明，替加色罗拮抗5-HT2B受体的浓度与激活5-HT4受体的浓度相似。替加色罗的这种5-HT2B受体拮抗剂活性是否对其临床特征有贡献，仍有待确定。[3]

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替加色罗（TM）可延缓肿瘤生长，减少转移，提高存活率，并在体内抑制p-S6。[1]
为了评估TM对黑色素瘤肿瘤生长的疗效，我们使用了同基因免疫能力模型。小鼠皮下接种B16F10细胞，7天后，随机分组，每天注射TM或载体治疗5天。治疗显著降低了肿瘤生长（图4a），治疗后体重仅略有下降（附加文件1：图S6A）。肝损伤标志物AST、LDH和ALT没有变化（附加文件1：图S6B）。体外TM介导的PI3K/Akt/mTOR信号抑制在体内被重新释放。当对接种后13天收获的肿瘤组织进行S6磷酸化（Ser235/236）的免疫组织化学染色时，三分之一的对照肿瘤载玻片被归类为具有高阳性评分。这与TM治疗小鼠的肿瘤形成鲜明对比，在TM治疗小鼠中，只有一张载玻片得分很高（图4b）。使用IHC分析器对图像进行阳性染色评分，该分析器采用自动化、无偏倚的方法来评估组织切片中的抗体染色。此外，TM治疗小鼠的肿瘤裂解物具有显著较低的Akt和S6磷酸化水平（图4c）[1]。

结合试验条件[3]
如前所述进行人重组5-HT2A、5-HT2B、5-HT2C和5-HT4（c）受体膜放射性配体结合测定（Grossman等人，1993；Stam等人，1994；Bonhaus等人，1995；Pindon等人，2002）。简而言之，将由稳定转染有人重组5-HT2A、5-HT2B、5-HT2C和5-HT4（c）受体的细胞制备的膜与对给定受体具有高亲和力的放射性标记配体（即[3H]酮色林、[N-甲基-3H]麦角酸二乙胺（LSD）、[3H]美苏利精和[3H]GR113808）分别孵育。非特异性放射性配体结合分别由酮色林（1μM）、5-羟色胺（10μM），SB 242084（10μM）和GR113808（1μM）定义。
竞争结合研究是在未标记配体浓度增加（10 pM-30μM）和放射性配体浓度固定（nM）的情况下进行的：[3H]酮色林（0.5）、[N-甲基-3H]LSD（1.2）、[3H]美苏利精和[3H]GR113808（0.15）。对于[3H]GR113808，放射性配体浓度约为KD值的6倍，但对于所有其他配体，浓度均等于或接近KD。在足以达到平衡的孵育期后：分别在37°C下15分钟、37°C上30分钟、37℃下30分钟和22°C下60分钟，通过快速过滤收集膜，并通过液体闪烁光谱定量结合放射性。
使用GraphPad Prism™软件和单位点竞争的三参数模型通过非线性回归分析对结合数据进行分析。使用Cheng-Prusoff方程（Cheng&Prusoff，1973），根据最佳拟合的IC50值和放射性配体的Kd值计算受试化合物的pKi（Ki的负十年对数）值：Ki=IC50/（1+[L]/Kd），其中[L]是放射性配体的浓度。

细胞凋亡分析 [1]
细胞类型： A375、RPMI-7951 (RPMI)、SH4、B16F10、MeWo 和 MEL-JUSO
测试浓度： 3 ，5 μM
孵育时间：24、48、72 小时
实验结果：显着的时间和剂量依赖性增加所有细胞系均发生凋亡。

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蛋白质印迹分析 [1]
细胞类型： RPMI、SH4 和 B16F10 细胞
测试浓度： 3、5 μM
孵育持续时间：8 或 18 小时
实验结果：S6、p70 S6 上游 Thr421/Ser424 处激酶的磷酸化减弱。

动物/疾病模型： 将B16F10细胞皮下注射到C57BL/6J小鼠体内[1]。
剂量： 5 mg/kg。
给药途径： 腹腔注射，每日一次，连续5天。
实验结果： 治疗显著抑制了肿瘤生长，治疗后体重仅略有下降。

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动物/疾病模型： 雌性C57BLKS/J db/db小鼠[2] 剂量：0.1、0.5、1.0、2.0 mg/kg
给药途径： 腹腔注射；胃内负荷前15分钟
实验结果：剂量低至0.1 mg/kg（0.1 mg/kg）时，胃内剩余食物的比例显著降低。加速胃排空，30分钟时剩余食物减少近80%（P < 0.0001）（0.1 mg/kg）。30分钟时，由于剩余食物量显著增加（2.0 mg/kg），胃排空速率显著降低。抑制替加色罗诱导的胃排空增加（0.1 mg/kg）。

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\n\nC57BL/6 J小鼠饲养于无特定病原体（SPF）条件下。将5 × 10⁵个B16F10细胞皮下注射到7至9周龄的C57BL/6 J小鼠体内。注射后7天，当肿瘤体积达到约50 mm³时，将小鼠随机分组，连续5天每天腹腔注射5 mg/kg替加色罗或载体对照（2.5% DMSO PBS溶液）。替加色罗和载体均采用腹腔注射（ip）给药。使用游标卡尺测量肿瘤大小，并使用以下公式计算肿瘤体积：（肿瘤长度×宽度²）/2。在转移定量实验中，将2 × 10⁵个B16F10细胞静脉注射到C57BL/6J小鼠体内，并在接种后1天开始腹腔注射替加色罗或载体，每周三次，直至接种后第14天处死小鼠。将肺部转移灶保存在PBS中进行短期保存，并进行人工计数。在生存实验中，将10⁵个B16F10细胞静脉注射到C57BL/6J小鼠体内。接种后第1天开始给予替加色罗和赋形剂（腹腔注射），并持续每周三次，直至接种后第17天。[1]

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\n\n首先测定对照组和糖尿病小鼠胃排空葡萄糖溶液的速率。在胃灌注葡萄糖溶液后5、10、20、30和40分钟处死小鼠。每个数据点使用四只小鼠。使用Accu-chek III血糖仪（Roche Diagnostics Corporation，Indianapolis，IN，USA）检测血清葡萄糖水平，方法是取小鼠尾尖的一滴血。\n\n评估替加色罗对糖尿病小鼠胃排空的影响。在胃灌注前15分钟，通过腹腔注射给予替加色罗，剂量分别为0.1、0.5、1.0或2.0 mg kg−1。小鼠在喂食后30分钟处死。每剂量替加色罗使用4只db/db小鼠。将替加色罗的作用与腹腔注射赋形剂（DMSO和生理盐水的混合物）后的作用进行比较。\n\n在4只小鼠中，通过在注射替加色罗前10分钟腹腔注射5-HT4受体拮抗剂GR11308（3.0 mg kg−1）来评估5-HT4受体阻断对替加色罗介导作用的影响。\n\n药物制备：使用替加色罗。将5-HT4受体拮抗剂GR11308和替加色罗溶解于1-甲基-2-吡咯烷酮后，制备注射液。将溶液用生理盐水稀释，使替加色罗的最终浓度为 0.01 至 0.2 mg ml⁻¹，GR11308 的最终浓度为 0.3 mg ml⁻¹。两种化合物的注射体积均为每 10 g 动物体重 0.1 mL。[2]\n

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\n\n手术后，大鼠至少需要 30 分钟才能稳定下来。通常，在此期间，气囊压力开始出现自发的节律性变化，这代表胃底的收缩。选择性 5-HT2B 受体激动剂 α-甲基 5-HT（0.03 mg kg⁻¹）和 BW 723C86（0.3 mg kg⁻¹）或其溶剂通过颈静脉导管（1 ml kg⁻¹）给药。选择这些剂量的α-甲基-5-羟色胺（α-methyl 5-HT）和BW 723C86，是因为在初步实验中，这些剂量与胃压升高相关，而血压没有明显变化。在给予α-甲基-5-羟色胺（0.03 mg kg⁻¹）15分钟后，皮下注射替加色罗（tegaserod）或其溶剂（1 ml kg⁻¹）。同时给予选择性5-HT₄受体拮抗剂吡波色罗（piboserod，1 mg kg⁻¹；Sanger等人，1998），以排除5-HT₄受体激活对胃压的影响。再过15分钟，再次给予大鼠α-甲基-5-羟色胺（0.03 mg kg⁻¹）。通过测量胃收缩的幅度和面积来比较对α-甲基-5-羟色胺（α-methyl 5-HT）的反应，并将第二次α-甲基-5-羟色胺刺激的数据表示为第一次刺激的百分比（采用ANOVA和Dunnett事后检验，比较替加色罗和溶剂诱导的反应，统计学显著性水平为P<0.05）。为避免快速耐受性，每只大鼠仅在皮下注射哌博色罗（1 mg kg⁻¹）与替加色罗（1 mg kg⁻¹）或其溶剂15分钟后，用BW 723C86进行一次刺激，数据采用非配对t检验进行比较，统计学显著性水平设定为P<0.05。本研究还探讨了选择性5-HT2B/2C受体拮抗剂SB 206553（1 mg kg−1；Kennett等人，1996）对BW 723C86反应的影响。[3]

吸收、分布和排泄
空腹受试者服用替加色罗的绝对生物利用度约为10%。替加色罗血浆峰浓度（Tmax）的中位时间约为1小时（范围0.7至2小时）。然而，当受试者在摄入高脂肪、高热量餐（约150卡路里来自蛋白质，250卡路里来自碳水化合物，500卡路里来自脂肪）前30分钟服用替加色罗时，AUC降低了40%至65%，Cmax降低了约20%至40%，Tmax的中位值为0.7小时。此外，餐前30分钟内或餐后2.5小时服用替加色罗时，血浆浓度相似。
口服替加色罗约三分之二以原形经粪便排出，其余三分之一以代谢物形式经尿液排出。
尽管替加色罗未获准静脉给药，但静脉给药研究显示，其稳态平均分布容积为368 ± 223 L。
尽管替加色罗未获准静脉给药，但静脉给药研究显示，其平均血浆清除率为77 ± 15 L/h。

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代谢/代谢物
替加色罗最终通过水解和直接葡萄糖醛酸化代谢。该物质首先在胃中水解。然后，它经历氧化和结合反应，生成人血浆中主要的循环替加色罗代谢物，即所谓的M29代谢物或5-甲氧基吲哚-3-羧酸。然而，体外研究表明，这种主要的循环代谢物对5-HT(4)受体的亲和力可以忽略不计。此外，替加色罗的三个胍基氮原子均可直接发生N-葡萄糖醛酸化，生成三种异构的N-葡萄糖醛酸苷——即所谓的M43.2、M43.8和M45.3代谢物。
已知替加色罗的人体代谢物包括1-[(E)-(5-羟基-1H-吲哚-3-基)亚甲基氨基]-2-戊基胍。

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生物半衰期
口服替加色罗后，其平均末端消除半衰期为4.6至8.1小时。

妊娠期和哺乳期影响
◉ 哺乳期用药概述
目前尚无关于替加色罗在哺乳期临床应用的信息。由于可能对母乳喂养的婴儿造成严重不良反应，建议选择其他替代药物。
◉ 对母乳喂养婴儿的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。
◉ 对泌乳和母乳的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。

[1]. Repurposing the serotonin agonist Tegaserod as an anticancer agent in melanoma: molecular mechanisms and clinical implications. J Exp Clin Cancer Res. 2020 Feb 21;39(1):38.

[2]. The effects of tegaserod, a 5-HT receptor agonist, on gastric emptying in a murine model of diabetes mellitus. Neurogastroenterol Motil. 2005 Oct;17(5):738-43.

[3]. The 5-HT4 receptor agonist, tegaserod, is a potent 5-HT2B receptor antagonist in vitro and in vivo. Br J Pharmacol. 2004 Nov;143(5):549-60.

另见：替加色罗（含有活性成分）。

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药物适应症
Zelnorm适用于反复对症短期治疗以便秘为主的肠易激综合征（IBS）女性患者，这些患者常伴有腹痛/不适或腹胀（参见4.2节）。

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药效学
一般而言，替加色罗已被确定为5-羟色胺4型（5-HT(4)）受体激动剂，5-HT(2B)受体拮抗剂，但预计与5-HT(1)受体的结合极少，对5-HT(3)或多巴胺受体几乎没有亲和力。在替加色罗的临床试验中，研究人员对4605名接受替加色罗6 mg每日两次或安慰剂治疗的便秘型肠易激综合征（IBS-C）及其他相关动力障碍患者的中心分析心电图进行了记录。所有接受替加色罗治疗的受试者的QTcF间期均未超过480 ms。接受替加色罗治疗的患者中有7%出现QTcF间期延长30至60 ms，安慰剂组为8%。接受替加色罗治疗的患者中有0.3%出现QTcF间期延长超过60 ms，安慰剂组为0.2%。最终，研究认为替加色罗对QTcF间期的影响不具有临床意义。此外，研究还发现替加色罗及其主要代谢物（M29代谢物）在体外具有促进血小板聚集的潜力。在一项体外研究中，浓度高达推荐剂量下最大血浆浓度 (Cmax) 的 10 倍时，替加色罗可显著增加血小板聚集，且呈浓度依赖性，增幅高达 74%（范围 11% 至 74%），与对照溶剂相比（多种激动剂可增强此作用）。在另一项体外研究中，M29 代谢物浓度高达 M29 Cmax 的 0.6 倍时，也显示出血小板聚集增加 5% 至 16%，与对照溶剂相比。这些体外血小板聚集结果的临床意义尚不明确。

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背景：黑色素瘤，尤其是对免疫疗法和激酶抑制剂无反应的晚期患者，迫切需要新的治疗方法。方法：采用 MTT 法进行药物筛选、IC50 测定以及协同作用分析。使用 Annexin V 和 7AAD 染色，并通过流式细胞术评估细胞凋亡。采用免疫细胞化学法进行TUNEL染色。通过Western blot和免疫细胞化学法检测PI3K/Akt/mTOR及其他相关通路中关键分子的磷酸化变化。为评估替加色罗的体内抗肿瘤活性，采用同源静脉和皮下黑色素瘤异种移植模型。进行免疫细胞化学染色以检测肿瘤中活性Caspase-3、cleaved Caspase-8和p-S6的表达。采用流式细胞术评估免疫浸润情况。结果：通过筛选770种具有药理活性和/或FDA批准的药物，我们发现替加色罗（Zelnorm，Zelmac）是一种具有新型抗癌活性的化合物，可诱导小鼠和人恶性黑色素瘤细胞系凋亡。替加色罗 (TM) 是一种 5-羟色胺受体 4 (HTR4) 激动剂，用于治疗肠易激综合征 (IBS)。TM 的抗黑色素瘤细胞凋亡诱导作用与 5-羟色胺信号通路无关，而是归因于 PI3K/Akt/mTOR 信号通路的抑制。具体而言，TM 可抑制 BRAFV600E 和 BRAF 野生型 (WT) 黑色素瘤细胞系中 S6 的磷酸化。在体内同源免疫功能健全的模型中，TM 可减少肿瘤生长和转移，并延长生存期。在体内，TM 还可诱导肿瘤细胞凋亡，抑制 PI3K/Akt/mTOR 信号通路，并降低 S6 的磷酸化水平。此外，TM 还可减少免疫抑制性调节性 CD4+CD25+ T 细胞以及 FOXP3 和 ROR-γt 阳性 CD4+ T 细胞的浸润。重要的是，TM 与维莫非尼（Vemurafenib，用于治疗携带 BRAFV600E 突变的晚期疾病患者的标准治疗药物）具有协同作用，并且在 BRAFV600E 和 BRAF WT 黑色素瘤细胞系中，TM 可以与考比替尼（Cobimetinib）产生叠加或协同作用，从而诱导抗癌效应。结论：综上所述，我们发现了一种在体外和体内均具有抗黑色素瘤活性的药物，该药物有望与维莫非尼和考比替尼这两种标准治疗药物联合用于治疗 BRAFV600E 和 BRAF WT 黑色素瘤。[1]

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C57BLKS/J db/db 转基因小鼠是一种糖尿病模型，已被证明具有胃排空延迟。我们评估了C57BLKS/J小鼠的胃排空率，并研究了新型选择性5-HT₄受体部分激动剂替加色罗对胃排空的影响。方法：我们测定了12-20周龄雌性db/db小鼠及其同窝对照小鼠对20%葡萄糖餐的胃排空率。在另一组db/db小鼠中，我们检测了腹腔注射替加色罗（0.1-2.0 mg kg^-1）对胃转运的影响。使用特异性5-HT₄受体拮抗剂GR11308进行预处理，以验证替加色罗对胃排空的作用机制。结果：db/db小鼠的葡萄糖胃排空率显著低于同窝对照小鼠。替加色罗（0.1 mg kg⁻¹）显著加速了db/db小鼠胃排空葡萄糖的速度，使30分钟时胃内残留食物的比例降低了80%。GR11308阻断了替加色罗的胃动力作用。结论：db/db小鼠的胃排空受损。低剂量替加色罗通过激活5-HT₄受体改善了该胃轻瘫模型的胃排空速度。这些发现提示，5-HT₄受体激动剂可能有助于改善胃轻瘫引起的胃排空延迟。[2] 替加色罗（Zelnorm）是一种强效的5-羟色胺4（5-HT₄）受体激动剂，对与胃肠动力和转运减慢相关的疾病具有临床疗效。本研究探讨了替加色罗与5-HT2受体的相互作用，并将其在此方面的效力与其5-HT4受体激动剂活性进行了比较。替加色罗对人重组5-HT2A、5-HT2B和5-HT2C受体均具有显著的结合亲和力（pKi值分别为7.5、8.4和7.0）。在稳定转染人5-HT4(c)受体的人胚肾293 (HEK-293)细胞中，替加色罗与5-HT2B受体的结合亲和力与人重组5-HT4(c)受体的结合亲和力相同（平均pKi=8.4）。替加色罗（0.1-3 μM）能有效抑制大鼠离体胃底的5-HT介导的收缩（pA2=8.3），这与5-HT(2B)受体拮抗剂活性相符。替加色罗以相似的效力，在稳定转染人5-HT4(c)受体的HEK-293细胞中引起腺苷3',5'-环磷酸的升高（平均pEC50=8.6），并引起大鼠离体食管的5-HT4受体介导的舒张（平均pEC50=8.2）和豚鼠离体结肠的收缩（平均pEC50=8.3）。4 皮下注射替加色罗（0.3或1 mg kg(-1)）后，可抑制麻醉大鼠胃底对静脉注射α-甲基-5-HT（0.03 mg kg(-1)）和BW 723C86（0.3 mg kg(-1)，选择性5-HT2B受体激动剂）的收缩反应。在相似剂量下，替加色罗（皮下注射 1 和 3 mg kg⁻¹）可诱导清醒豚鼠结肠转运增加，该过程由 5-HT4 受体介导。⁵ 该研究数据表明，替加色罗在与激活 5-HT4 受体相似的浓度下可拮抗 5-HT2B 受体。替加色罗的这种 5-HT2B 受体拮抗活性是否对其临床疗效有贡献，仍有待确定。[3]

C20H27N5O5

417.466

417.201

C, 57.54; H, 6.52; N, 16.78; O, 19.16

189188-57-6

Tegaserod;145158-71-0;Tegaserod-13C,d3 maleate

135413539

Light yellow to yellow solid powder

661.4ºC at 760 mmHg

180-183ºC

353.8ºC

2.15E-18mmHg at 25°C

3.101

149.45

5

7

10

30

504

0

CCCCCN=C(N)N/N=C/C1=CNC2=C1C=C(C=C2)OC.C(=C\C(=O)O)\C(=O)O

CPDDZSSEAVLMRY-FEQFWAPWSA-N

InChI=1S/C16H23N5O.C4H4O4/c1-3-4-5-8-18-16(17)21-20-11-12-10-19-15-7-6-13(22-2)9-14(12)155-3(6)1-2-4(7)8/h6-7,9-11,19H,3-5,8H2,1-2H3,(H3,17,18,21)1-2H,(H,5,6)(H,7,8)/b20-11+2-1-

(E)-2-((5-methoxy-1H-indol-3-yl)methylene)-N-pentylhydrazine-1-carboximidamide maleate

Zelnorm; Zelmac; SDZ-HTF-919; Tegaserod maleate; CPD000471618; 189188-57-6; DTXSID50904761; HMS2051J10; SDZHTF-919; SDZ-HTF919; HTF919; HTF-919; SDZ-HTF 919; SDZ HTF-919; HTF 919; Tegaserod

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ≥ 35 mg/mL (~83.84 mM)
H2O : ~1 mg/mL (~2.40 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.99 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.99 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。