| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
HDAC6 (IC50 = 4.6 μM); HDAC8 (IC50 = 1.9 μM); HDAC10 (IC50 = 7.7 μM)
TH34 exhibits no significant affinity for HDAC2 at concentrations up to 50 µM, but it binds strongly to HDAC6, 8, and 10 with low-micromolar IC50 concentrations (HDAC6: 4.6 µM, HDAC8: 1.9 µM, and HDAC10: 7.7 µM). Treatment results in hyperacetylation of SMC3 and tubulin. While protecting non-transformed human cells, TH34 efficiently and selectively destroys high-grade neuroblastoma cells. It significantly damages DNA in neuroblastoma cell lines and primary neuroblastoma cells, which is followed by differentiation and cell cycle arrest in the G2/M phase at later times, ultimately resulting in cell death[1]. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
TH34 在浓度高达 50 µM 时对 HDAC2 没有显着的亲和力，但它以低微摩尔 IC50 浓度与 HDAC6、8 和 10 强烈结合（HDAC6：4.6 µM、HDAC8：1.9 µM 和 HDAC10：7.7 µM）。治疗导致 SMC3 和微管蛋白过度乙酰化。在保护未转化的人类细胞的同时，TH34 可以高效、选择性地破坏高级神经母细胞瘤细胞。它显着损伤神经母细胞瘤细胞系和原代神经母细胞瘤细胞中的 DNA，随后发生分化，细胞周期停滞在 G2/M 期，最终导致细胞死亡[1]。
用TH34处理（25 µM，6小时）可诱导SK-N-BE(2)-C神经母细胞瘤细胞中SMC3（HDAC8特异性底物）和微管蛋白（HDAC6特异性靶标）发生高乙酰化，证实其对HDAC8和HDAC6的细胞内抑制。[1] 用TH34处理（25 µM，24小时）可诱导SK-N-BE(2)-C细胞中酸性囊泡细胞器大量积累，这是一种与HDAC10抑制相关的表型。[1] 用TH34处理（25 µM，4天，随后再培养7天）可完全抑制多个人神经母细胞瘤细胞系（SK-N-BE(2)-C, IMR-32, Kelly, SH-SY5Y, SK-N-AS）的集落形成，但对髓母细胞瘤细胞系（HD-MB03, MED8A）的效果较弱。[1] TH34以浓度依赖的方式（10-25 µM, 48-72小时）诱导SK-N-BE(2)-C神经母细胞瘤细胞发生半胱天冬酶依赖性程序性细胞死亡，表现为caspase-3活性增加和subG1期细胞比例升高，这种效应可被广谱半胱天冬酶抑制剂Z-VAD-FMK所挽救。[1] 在25 µM浓度下处理72小时，TH34对增殖中的非恶性人包皮成纤维细胞（VH7细胞）的细胞毒性作用有限。[1] 用TH34处理（10 µM，72小时）可显著增加SK-N-BE(2)-C细胞中神经元分化标志物NTRK1的表达。[1] 用TH34处理（10 µM，6天）可诱导SK-N-BE(2)-C细胞发生形态学分化，其特征是形成更多、更长的神经突样结构，并且神经丝蛋白M（NEFM）染色呈阳性。[1] 用TH34处理（10 µM，72小时）可在TP53突变（SK-N-BE(2)-C）和TP53野生型（IMR-32）神经母细胞瘤细胞中剂量依赖性上调细胞周期抑制剂CDKN1A (p21) 的表达。[1] TH34处理导致SK-N-BE(2)-C细胞周期阻滞，在72小时后，细胞从G0/G1期明显向S/G2/M期转移；处理6天后，有丝分裂细胞数量增加，包括出现异常特征（如多极纺锤体）的细胞。[1] 用TH34处理（10-25 µM，24小时）以剂量依赖的方式诱导SK-N-BE(2)-C细胞发生DNA双链断裂，表现为γH2AX阳性细胞和核内 foci 形成显著增加。这种DNA损伤发生在显著的细胞死亡之前，并且不依赖于半胱天冬酶的激活，因为与Z-VAD-FMK共处理无法挽救此现象。[1] TH34处理24小时后，也能在来源于MYCN扩增的4期神经母细胞瘤患者的原代神经母细胞瘤细胞（NBS）中剂量依赖性增加γH2AX阳性细胞的比例。[1] TH34与全反式维甲酸（ATRA）联用，对SK-N-BE(2)-C细胞的集落生长具有协同抑制作用，当两种药物均为10 µM时，联合指数（CI）小于0.1。[1] |
| 酶活实验 |
使用特异性荧光底物进行生化HDAC抑制实验。对于HDAC3抑制测试，TH34以1000 µM为起始浓度，进行十倍、三倍系列稀释，针对特定的HDAC3底物肽进行测试。IC50值使用相应软件计算。[1]
IIa类HDAC活性实验按照先前描述的方法进行。[1] |
| 细胞实验 |
对于细胞内靶点结合实验，采用了NanoBRET法。将稳定转染了NanoLuc融合的HDAC6或HDAC10质粒的HeLa细胞接种。加入示踪剂和系列稀释的TH34。孵育后，加入NanoGlo底物，测量BRET信号（受体/供体信号比），以确定相对于药物浓度的占有率百分比。[1]
对于集落形成实验，将神经母细胞瘤和髓母细胞瘤细胞以低密度（500-1000细胞/孔）接种于6孔板中，用TH34或溶剂处理96小时。然后清洗细胞，在新鲜培养基中再培养7天，用结晶紫染色存活集落，并使用图像分析软件进行定量。[1] 细胞活力通过使用细胞活力分析仪进行自动台盼蓝染色来测量。[1] Caspase-3样蛋白酶活性使用基于先前方法的荧光法进行分析。[1] 细胞周期分析：将固定、透化的细胞用碘化丙啶染色以量化DNA含量，然后通过流式细胞术进行分析。[1] DNA双链断裂的γH2AX检测：处理后，将活细胞固定、透化，并与针对磷酸化组蛋白H2AX（Ser139）的一抗孵育，然后与荧光二抗孵育。通过流式细胞术分析细胞，以确定平均荧光强度和γH2AX阳性细胞的比例。[1] γH2AX和NEFM的免疫荧光染色：将细胞接种在腔室载玻片上，处理后用多聚甲醛固定、透化、封闭。然后与一抗（抗γH2AX或抗NEFM）孵育过夜，随后与荧光二抗孵育并用DAPI复染。使用荧光或共聚焦显微镜获取图像。[1] 酸性囊泡细胞器的吖啶橙染色：处理后，用吖啶橙染色细胞，并通过流式细胞术分析以量化酸性囊泡的积累。[1] 定量实时PCR：提取RNA，进行反转录，并使用基因特异性引物（如NTRK1, CDKN1A, PUMA）进行qPCR。使用2^(-ΔΔCt)方法计算基因表达，并以内参基因（SDHA和HPRT）进行归一化。[1] 细胞分化实验（神经突生长）：将接种于6孔板的细胞处理6天，用结晶紫染色并成像。使用图像分析软件中的半自动宏，在多个视野中确定细胞体的表面积、神经突的数量和长度，并归一化至溶剂对照。[1] 细胞代谢活性实验（CellTiter-Glo）：将原代神经母细胞瘤细胞或细胞系接种于96孔板，用TH34处理72小时，然后与CellTiter-Glo试剂孵育。测量产生的生物发光信号，该信号与存在的ATP量（代谢活跃细胞的指标）成正比。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
TH34（3-(N-苄氨基)-4-甲基苯并羟肟酸）是一种新型的小分子羟肟酸类组蛋白去乙酰化酶 (HDAC) 抑制剂。[1] 据称，它是首个对 HDAC 6、8 和 10 具有显著选择性，而对 HDAC 1、2 和 3 具有较高选择性的 HDAC 抑制剂。[1] 其在高级别神经母细胞瘤中的作用机制涉及诱导 DNA 双链断裂、有丝分裂异常、细胞周期阻滞（G2/M 期）和神经元分化，最终导致 caspase 依赖性程序性细胞死亡。[1] 该研究支持选择性抑制 HDAC6/8/10 作为高级别神经母细胞瘤靶向治疗的潜在疗效。 [1]
TH34 与全反式维甲酸 (ATRA) 联用在体外对神经母细胞瘤细胞显示出协同活性。[1] |
| 分子式 |
C15H16N2O2
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|---|---|---|
| 分子量 |
256.299743652344
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| 精确质量 |
256.12
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| 元素分析 |
C, 70.29; H, 6.29; N, 10.93; O, 12.48
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| CAS号 |
2196203-96-8
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
134159676
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
2.6
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| tPSA |
61.4
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
19
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| 分子复杂度/Complexity |
290
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
PZBARTUEWCQNSN-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C15H16N2O2/c1-11-7-8-13(15(18)17-19)9-14(11)16-10-12-5-3-2-4-6-12/h2-9,16,19H,10H2,1H3,(H,17,18)
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| 化学名 |
3-(benzylamino)-N-hydroxy-4-methylbenzamide
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (9.75 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (9.75 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (9.75 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.9017 mL | 19.5084 mL | 39.0168 mL | |
| 5 mM | 0.7803 mL | 3.9017 mL | 7.8034 mL | |
| 10 mM | 0.3902 mL | 1.9508 mL | 3.9017 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
TH34 inhibits HDACs 6, 8 and 10.Arch Toxicol.2018 Aug;92(8):2649-2664. |
TH34 induces caspase-dependent programmed cell death in neuroblastoma cells.Arch Toxicol.2018 Aug;92(8):2649-2664. |
 TH34 induces DNA damage in high-grade neuroblastoma cells.Arch Toxicol.2018 Aug;92(8):2649-2664. |
TH34 differentially impairs colony formation and cell survival in neuroblastoma cell lines with distinct molecular features.Arch Toxicol.2018 Aug;92(8):2649-2664. |
TH34 induces differentiation and cell cycle arrest in neuroblastoma cells.Arch Toxicol.2018 Aug;92(8):2649-2664. |
TO-1187 TFA
ZWZH-21
LSD1/HDAC-IN-3
HDAC6-IN-63
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粤公网安备 44011102003439号
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