Thioflavin T

别名: Thioflavin T; 2390-54-7; Thioflavine T; Basic yellow 1; Acronol Yellow TC; 硫黄素T;碱性黄1;硫代磺素T;氯化2-[4-(二甲氨基)苯基]-3,6-二甲基苯并噻唑翁;硫代黄色素 T;盐基嫩黄;2-[4-(二甲基氨基)苯基]-3,6-二甲基苯并噻唑鎓氯化物;Basic Yellow 1 硫黄素T;硫代黄素T;氯化2-[4-(二甲氨基)苯基]-3,5-二甲基苯并噻唑翁;2-[4-(二甲基氨基)苯基]-3,6-二甲基苯并噻唑氯化物;硫黄素T,碱性黄1;氯化2-;硫黄素 T;碱性黄 1
目录号: V12268 纯度: ≥98%
Thioflavin T 是一种阳离子苯并噻唑染料,与组织切片中的淀粉样蛋白结合后可增加荧光强度。
Thioflavin T CAS号: 2390-54-7
产品类别: New1
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产品描述
硫黄素T是一种阳离子苯并噻唑染料,与组织切片中的淀粉样蛋白结合后可增强荧光强度。
硫黄素T (ThT)是一种阳离子苯并噻唑染料,与淀粉样蛋白原纤维结合后荧光增强,常用于体外和离体淀粉样蛋白原纤维的诊断。在水溶液中,硫黄素T在浓度高于其临界胶束浓度4.0 ± 0.5 μM时会形成直径为3 nm的胶束,这已通过电导率测量、荧光各向异性和原子力显微镜证实。这些胶束表面带有正电荷,可沿淀粉样蛋白原纤维的长度方向结合,导致在450 nm处出现新的激发峰,并在482 nm处增强荧光发射。当pH值低于3时,结合能力会降低数倍,表明ThT分子上的正电荷在胶束的形成和结合过程中起着重要作用。硫黄素T也能与其他结构结合,例如核酸、软骨基质、弹性纤维和包涵体,但并非所有类型的蛋白质聚集体都能结合[1]。
硫黄素T (ThT) 是一种苯并噻唑阳离子荧光染料。由于其与淀粉样蛋白聚集体结合后荧光显著增强,因此被广泛用作组织化学染料和荧光探针,用于在体外和体内可视化和定量淀粉样蛋白原纤维。
硫黄素T (CAS# 2390-54-7) 是一种细胞渗透性苯并噻唑染料,与淀粉样蛋白原纤维结合后荧光增强。其分子式为C17H19ClN2S,分子量为318.86 g/mol。硫黄素T广泛用作荧光报告分子,用于检测和研究蛋白质错误折叠和聚集,特别是与阿尔茨海默病相关的β-淀粉样蛋白斑块。
生物活性&实验参考方法
靶点
- Amyloid fibrils – Binds to amyloid fibrils via micelle formation, leading to enhanced fluorescence emission [1]
- Nucleic acids (DNA/RNA) – Binds to negatively charged nucleic acids, likely through electrostatic interactions between positively charged ThT micelles and negatively charged nucleic acids [1]
Thioflavin T does not have a biological target in the traditional sense. It is a fluorescent dye that binds to amyloid fibrils and stacked β-sheet aggregates. Upon binding, its fluorescence is significantly enhanced, making it a valuable tool for detecting and quantifying amyloid structures. It is also used in label-free G-quadruplex (G4)-based assays.
体外研究 (In Vitro)
硫黄素T与淀粉样蛋白原纤维结合后荧光增强;结合后在450 nm处出现一个新的激发峰,导致482 nm处的荧光发射增强[1]
- 在水溶液中,硫黄素T在常用荧光测定法监测原纤维的浓度(~10-20 μM)下形成胶束;通过电导率测量计算得出临界胶束浓度为4.0 ± 0.5 μM[1]
- 硫黄素T的荧光激发和发射特性取决于胶束的形成;在浓度高于5 μM时观察到激发和发射强度显著增加[1]
- 硫黄素T的荧光各向异性从0.5 μM开始增加,并在20 μM时达到最大值,表明存在分子缔合[1]
- 硫黄素T与白细胞介素-2的包涵体结合,荧光增强50-100倍;然而,其他蛋白质聚集体,如聚集的 P22 尾刺蛋白、来自 HeLa 细胞的热诱导蛋白质聚集体和 SMA VL 的无定形聚集体,并未导致硫黄素 T 荧光增强 [1]
- 源自各种蛋白质(A-β 肽、胰岛素、转甲状腺素蛋白、α-突触核蛋白、胰淀素、溶菌酶、Ig 轻链)的淀粉样原纤维在结合后显著增强硫黄素 T 荧光 [1]
- 形成原纤维的 13 个氨基酸肽 ED (EDVAVYYCHQYYS) 通过增强荧光和沿原纤维长度结合的胶束显示出与硫黄素 T 的结合;另一种带正电荷(三个赖氨酸残基)的肽KLEG(KLKLKLELELELELG)未显示增强的硫黄素T荧光,表明正电荷会排斥带正电荷的ThT胶束[1]
- 当pH值降至3以下时,硫黄素T与淀粉样蛋白原纤维的结合会降低数倍[1]
- 将NaCl盐浓度从0.5 M增加到2 M,导致与淀粉样蛋白原纤维结合的硫黄素T的荧光发射略微降低(30%),表明盐不会去除结合的ThT胶束[1]
硫黄素T(ThT)是一种苯并噻唑染料,常用于体外和离体检测淀粉样蛋白原纤维。它与淀粉样蛋白原纤维结合后会表现出增强的荧光。硫黄素T在水溶液中以胶束形式存在,浓度约为10–20 μM,常用于荧光法监测纤维。通过测量不同硫黄素T浓度下的电导率变化,确定4.0±0.5 μM为临界胶束浓度。胶束的生成也会影响硫黄素T的荧光激发和发射。利用原子力显微镜直接检测到了直径为3 nm的硫黄素T胶束,并观察到沿纤维长度方向存在与独特纤维结合的硫黄素T胶束。当硫黄素T浓度高于临界胶束浓度时,沿纤维长度方向结合的胶束数量增加。原子力显微镜显示,硫黄素T胶束在低pH值下会解离,并且硫黄素T与淀粉样蛋白原纤维结合后产生的荧光强度在pH值低于3时也会显著下降。淀粉样蛋白原纤维与硫黄素T胶束结合,从而增强荧光发射[1]。
在体外,硫黄素T用于检测和监测淀粉样蛋白原纤维的形成。其与淀粉样蛋白结构结合后荧光强度增强,从而可以对蛋白质聚集进行实时动力学研究。它被用于多种检测方法,以研究蛋白质错误折叠疾病,包括阿尔茨海默病、帕金森病和朊病毒病。
体内研究 (In Vivo)
动物研究表明,在高脂饮食诱导的肥胖小鼠模型中,ThT治疗可调节血清中脂肪因子激素(如脂联素和瘦素)的水平,降低胰岛素和HOMA-IR水平,表明其可能对代谢紊乱具有改善作用。ThT还用于动物组织中淀粉样斑块的组织化学染色。硫黄素T不用于体内治疗。它是一种荧光染料,用于研究和组织学中的染色和诊断。它曾用于病毒的荧光染色。它不作为药物使用。
酶活实验
典型的硫黄素T (ThT) 荧光结合实验在缓冲液(例如 PBS 或 Tris-HCl,pH 7.4)中进行。将特定浓度的淀粉样蛋白原纤维或 G-四链体 DNA 与 ThT(通常为 10-50 µM)混合,并在室温下孵育(例如 10-30 分钟)。使用微孔板读数仪在激发波长 440 nm 和发射波长 480-490 nm 处读取荧光强度。在竞争性结合实验中,首先将 ThT 与靶标结合,然后加入测试化合物以观察荧光猝灭。
在药理学背景下,硫黄素T 没有酶或受体结合实验。其表征涉及荧光光谱法。硫黄素T 与淀粉样蛋白原纤维的结合是通过在 450 nm 激发下,其在约 482 nm 处的荧光发射增强来测量的。
细胞实验
在细胞分析中,硫黄素T (ThT) 用于检测细胞内蛋白聚集体。将细胞接种于96孔板或培养皿中,进行处理或转染后,移除培养基并用PBS洗涤细胞。将细胞与ThT溶液(例如,10-20 µM的PBS溶液)在黑暗中孵育30-60分钟。染色后,移除ThT溶液,用PBS洗涤细胞,并通过荧光显微镜或流式细胞仪进行分析。荧光强度通常与细胞内聚集体含量呈正相关。硫黄素T在细胞分析中不作为药物使用。它在细胞生物学中用作染色剂,用于检测细胞或组织中的淀粉样蛋白沉积。它可用于活细胞成像以监测蛋白质聚集。
动物实验
在动物模型中,ThT 可通过腹腔注射或灌胃给药。在一项小鼠研究中,每天灌胃一次 ThT(5、10、15 mg/kg),持续 4 周,以评估其对肥胖的影响。在影像学研究中,可通过静脉注射 ThT 对动物进行体内成像,以追踪淀粉样斑块;或者处死动物以获取组织(例如脑或肝脏)进行切片和 ThT 染色。
硫黄素 T 在动物实验中不作为药物使用。它用作组织学染色剂,用于在阿尔茨海默病动物模型的脑组织中可视化淀粉样斑块。它不用于动物治疗目的。
药代性质 (ADME/PK)
硫黄素T (ThT) 是一种阳离子盐(通常为氯化物),具有中等的水溶性。在药代动力学方面,它易于穿过血脑屏障 (BBB),因此是研究中枢神经系统淀粉样变性的有效探针。具体的半衰期和组织分布参数因物种和给药途径而异,但已有报道称其血浆清除率和组织分布速度很快。
硫黄素T是一种荧光染料,其药代动力学与药物研发无关。它不进行全身给药。其化学稳定性和水溶性已得到充分表征。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
根据安全数据表,硫黄素T被归类为危险物质。吞咽有毒(H301),可造成严重眼损伤(H318),可能引起皮肤过敏反应(H317),并且对水生生物具有剧毒和长期持续影响(H410)。操作时应佩戴适当的防护设备(手套、护目镜)。硫黄素T通常被认为毒性较低。然而,作为一种染料,应按照标准的实验室防护措施进行操作。它可能刺激皮肤、眼睛和呼吸道。本品仅供研究使用,不得用于人体。
参考文献

[1]. Mechanism of thioflavin T binding to amyloid fibrils. J Struct Biol. 2005 Sep;151(3):229-38.

其他信息
硫黄素T是一种阳离子苯并噻唑染料(化学结构:疏水端连接一个二甲氨基,该二甲氨基连接一个苯基,苯基再连接一个含有极性氮和硫的极性苯并噻唑基团)[1]
- 硫黄素T由Vassar和Culling于1959年引入,用于荧光显微镜检测组织切片中的淀粉样蛋白[1]
- 该染料与淀粉样蛋白原纤维结合后荧光增强,常用于体外和离体淀粉样蛋白原纤维的诊断[1]
- 硫黄素T还能与其他结缔组织结合,例如软骨基质、弹性纤维和粘多糖,以及DNA和RNA[1]
- Kelenyi(1967)改进了染色条件,降低pH值(0.8至2.8之间),以提高对淀粉样蛋白的特异性并减少核酸染色[1]
- 硫黄素T形成通过原子力显微镜观察到水溶液中直径为 3 nm 的胶束;这些胶束沿淀粉样原纤维的长度方向结合 [1]
- 当 pH 值低于 3 时,硫黄素 T 胶束被破坏(如原子力显微镜观察所示),并且与淀粉样原纤维结合后的荧光增强作用降低数倍,这表明 ThT 分子上的正电荷在其胶束形成中起着作用 [1]
- 硫黄素 T 在水中的临界胶束浓度为 4.0 ± 0.5 μM;在 TBS(50 mM Tris,150 mM NaCl,pH 7.5)中,胶束尺寸在 3 至 6 nm 直径范围内变化 [1]
- 与硫黄素 T 不同,刚果红没有显示出与 ED 原纤维结合的特征性胶束;相反,观察到纤维高度增加至 10 ± 0.5 nm,这可能是由于刚果红诱导的侧向聚集所致[1]
- 硫黄素 T 与核酸的结合在低 pH 值下显著降低,表明带电相互作用在结合过程中发挥作用[1]
- 硫黄素 T 并非 β-折叠结构特异性结合,因为它既能结合核酸也能结合淀粉样纤维;其与核酸的结合完全基于带电相互作用[1]
硫黄素 T 是一种有机氯化物盐,其抗衡离子为 2-[4-(二甲氨基)苯基]-3,6-二甲基-1,3-苯并噻唑-3-鎓。它广泛用于体外和体内淀粉样蛋白的比色和定量分析。它还可以用作荧光染料、组织学染料和抗衰老剂。它含有硫黄素T阳离子。
硫黄素T是一种广泛用于检测淀粉样蛋白原纤维的荧光染料。它也被称为碱性黄1和硫黄素T。它被用于阿尔茨海默病和帕金森病等神经退行性疾病的研究。它并非美国食品药品监督管理局(FDA)批准的药物,也没有临床应用。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C17H19CLN2S
分子量
318.8642
精确质量
318.095
元素分析
C, 64.04; H, 6.01; Cl, 11.12; N, 8.79; S, 10.05
CAS号
2390-54-7
PubChem CID
16953
外观&性状
Yellow to orange solid powder
熔点
212ºC
LogP
0.771
tPSA
35.36
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
3
可旋转键数目(RBC)
2
重原子数目
21
分子复杂度/Complexity
325
定义原子立体中心数目
0
SMILES
CC1=CC2=C(C=C1)[N+](=C(S2)C3=CC=C(C=C3)N(C)C)C.[Cl-]
InChi Key
JADVWWSKYZXRGX-UHFFFAOYSA-M
InChi Code
InChI=1S/C17H19N2S.ClH/c1-12-5-10-15-16(11-12)20-17(19(15)4)13-6-8-14(9-7-13)18(2)3;/h5-11H,1-4H3;1H/q+1;/p-1
化学名
4-(3,6-dimethyl-1,3-benzothiazol-3-ium-2-yl)-N,N-dimethylaniline;chloride
别名
Thioflavin T; 2390-54-7; Thioflavine T; Basic yellow 1; Acronol Yellow TC;
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~16.67 mg/mL (~52.28 mM)
H2O : ~5 mg/mL (~15.68 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 1.67 mg/mL (5.24 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 16.7 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;再向上述溶液中加入50 μL Tween-80 +,混匀;然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.1362 mL 15.6809 mL 31.3617 mL
5 mM 0.6272 mL 3.1362 mL 6.2723 mL
10 mM 0.3136 mL 1.5681 mL 3.1362 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们