Thioflavin T

别名: Thioflavin T; 2390-54-7; Thioflavine T; Basic yellow 1; Acronol Yellow TC; 硫黄素T;碱性黄1;硫代磺素T;氯化2-[4-(二甲氨基)苯基]-3,6-二甲基苯并噻唑翁;硫代黄色素 T;盐基嫩黄;2-[4-(二甲基氨基)苯基]-3,6-二甲基苯并噻唑鎓氯化物;Basic Yellow 1 硫黄素T;硫代黄素T;氯化2-[4-(二甲氨基)苯基]-3,5-二甲基苯并噻唑翁;2-[4-(二甲基氨基)苯基]-3,6-二甲基苯并噻唑氯化物;硫黄素T,碱性黄1;氯化2-;硫黄素 T;碱性黄 1
目录号: V12268 纯度: ≥98%
Thioflavin T 是一种阳离子苯并噻唑染料,与组织切片中的淀粉样蛋白结合后可增加荧光强度。
Thioflavin T CAS号: 2390-54-7
产品类别: New1
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纯度: ≥98%

产品描述
Thioflavin T 是一种阳离子苯并噻唑染料,与组织切片中的淀粉样蛋白结合后可增加荧光强度。
硫黄素T (Thioflavin T, ThT) 是一种阳离子苯并噻唑染料,在与淀粉样纤维结合时表现出增强的荧光发射,常用于离体和体外的淀粉样纤维诊断。在水溶液中,硫黄素T在超过其临界胶束浓度(4.0 ± 0.5 μM)时形成直径为3 nm的胶束,这一现象通过电导率测量、荧光各向异性和原子力显微镜得到证实。这些表面带正电荷的胶束沿淀粉样纤维的长度方向结合,导致出现新的450 nm激发峰,并在482 nm处产生增强的荧光发射。当pH降至3以下时,结合减少数倍,表明ThT分子上的正电荷在其胶束形成和结合中起作用。硫黄素T还结合其他结构,如核酸、软骨基质、弹性纤维和包涵体,但不结合所有类型的蛋白质聚集体 [1]。
硫黄素T (Thioflavin T, ThT) 是一种苯并噻唑类阳离子荧光染料。它因其与淀粉样蛋白原纤维结合后荧光强度显著增强的特性,被广泛用作组织化学染料和荧光探针,以体外和体内检测并定量分析淀粉样蛋白聚集物。
生物活性&实验参考方法
靶点
- Amyloid fibrils – Binds to amyloid fibrils via micelle formation, leading to enhanced fluorescence emission [1]
- Nucleic acids (DNA/RNA) – Binds to negatively charged nucleic acids, likely through electrostatic interactions between positively charged ThT micelles and negatively charged nucleic acids [1]
体外研究 (In Vitro)
- 硫黄素T在与淀粉样纤维结合时表现出增强的荧光发射;结合后出现一个新的激发峰(450 nm),导致482 nm处的荧光发射增强 [1]
- 在水溶液中,硫黄素T在常用于荧光检测监测纤维的浓度(约10-20 μM)下形成胶束;通过电导率测量计算出的临界胶束浓度为4.0 ± 0.5 μM [1]
- 硫黄素T的荧光激发和发射性质依赖于胶束形成;在5 μM以上浓度观察到激发和发射强度的显著增加 [1]
- 硫黄素T的荧光各向异性从0.5 μM开始增加,在20 μM达到最大值,表明分子发生缔合 [1]
- 硫黄素T与白细胞介素-2的包涵体结合,显示50-100倍的荧光增强;然而,其他蛋白质聚集体如聚集的P22尾刺蛋白、HeLa细胞热诱导的蛋白质聚集体以及SMA VL的无定形聚集体并未导致硫黄素T荧光增强 [1]
- 来自多种蛋白质(A-β肽、胰岛素、转甲状腺素蛋白、α-突触核蛋白、胰淀素、溶菌酶、免疫球蛋白轻链)的淀粉样纤维在与硫黄素T结合时显著增强其荧光 [1]
- 形成纤维的13个氨基酸肽ED(EDVAVYYCHQYYS)通过增强的荧光和沿纤维长度结合的胶束显示与硫黄素T的结合;而带有正电荷(三个赖氨酸残基)的另一种肽KLEG(KLKLKLELELELELG)未显示增强的硫黄素T荧光,表明正电荷排斥带正电的ThT胶束 [1]
- 当pH降至3以下时,硫黄素T与淀粉样纤维的结合减少数倍 [1]
- 将NaCl浓度从0.5 M增加至2 M,导致结合淀粉样纤维的硫黄素T荧光发射小幅下降(30%),表明盐不能去除结合的ThT胶束 [1]
硫磺素 T (ThT) 是一种苯并噻唑染料,常用于体外和离体检测淀粉样原纤维。它在与淀粉样原纤维结合后表现出增强的荧光。硫磺素 T 以胶束形式存在于水溶液中,浓度约为 10-20 μM,经常用于使用荧光法监测原纤维。测量不同硫黄素 T 浓度下的比电导率变化后,确定 4.0±0.5 μM 为关键胶束浓度。胶束的产生也会影响硫代黄素T的荧光激发和发射。使用原子力显微镜,直接检测到直径为3 nm的硫黄素T胶束,并且沿着纤维长度,注意到具有独特原纤维的硫黄素T胶束的产生。硫代黄素 T 浓度升高至临界胶束浓度以上,表明沿纤维长度结合的胶束数量增加。原子力显微镜显示,硫黄素 T 胶束在低 pH 水平下会分解,硫黄素 T 与淀粉样原纤维结合导致的荧光增加也会多次下降到低于 3。淀粉样原纤维与硫黄素 T 胶束结合,从而增加荧光发射。 1]。
体内研究 (In Vivo)
一项动物研究表明,在高脂饮食诱导的肥胖小鼠模型中,ThT 处理能够调节脂肪因子激素(如脂联素和瘦素)的血清水平,降低胰岛素和 HOMA-IR 指数,显示出对代谢紊乱的潜在改善作用。此外,ThT 还可用于动物组织中淀粉样斑块的组织化学染色。
酶活实验
典型的 ThT 荧光结合实验在缓冲液(如 PBS 或 Tris-HCl,pH 7.4)中进行。将特定浓度的淀粉样蛋白纤维或 G-四链体 DNA 与 ThT(通常为 10-50 µM)混合,室温孵育(例如 10-30 分钟)。使用荧光酶标仪在激发光 440 nm 和发射光 480-490 nm 处读取荧光强度。在竞争结合实验中,先加入 ThT 与靶点结合,再加入待测化合物观察荧光猝灭。
细胞实验
细胞实验中,ThT 常用于检测细胞内蛋白聚集体。将细胞接种于 96 孔板或培养皿中,经药物处理或转染后,去除培养基并用 PBS 洗涤。细胞与 ThT 溶液(例如 10-20 µM 在 PBS 中)避光孵育 30-60 分钟。染色后去除 ThT 溶液,用 PBS 洗涤,通过荧光显微镜或流式细胞仪检测。荧光信号强度通常与细胞内聚集体的含量呈正相关。
动物实验
在动物模型中,ThT 可通过腹腔注射或口服灌胃给药。在一项小鼠研究中,ThT(5, 10, 15 mg/kg)通过灌胃给药,连续 4 周,每日一次,以评估其对肥胖的影响。对于成像研究,静脉注射 ThT 后,动物可用于活体成像以追踪淀粉样斑块;或者处死动物取脑或肝组织,切片后进行 ThT 染色观察。
药代性质 (ADME/PK)
ThT 是一种水溶性较低的阳离子盐(通常为盐酸盐形式)。在药代动力学方面,它易于通过血脑屏障 (BBB),这使其成为研究中枢神经系统淀粉样变性的有效探针。具体的半衰期和组织分布参数因物种和给药途径而异,但其快速的血浆清除和组织分布特性已被报道。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
根据化学品安全技术说明书,ThT 被归类为有害物质。吞食有毒(H301),可能导致严重的眼损伤(H318),可能引起皮肤过敏反应(H317),并对水生生物毒性极大并具有长期持续影响(H410)。操作时应佩戴适当的防护装备(手套、护目镜)。
参考文献

[1]. Mechanism of thioflavin T binding to amyloid fibrils. J Struct Biol. 2005 Sep;151(3):229-38.

其他信息
- 硫黄素T是一种阳离子苯并噻唑染料(化学结构:一个疏水末端,含有一个连接到苯基的二甲氨基,连接到一个含有极性N和S的极性苯并噻唑基团)[1]
- 硫黄素T由Vassar和Culling于1959年引入,用于通过荧光显微镜检测组织切片中的淀粉样蛋白 [1]
- 该染料在与淀粉样纤维结合时表现出增强的荧光,常用于离体和体外的淀粉样纤维诊断 [1]
- 硫黄素T还结合其他结缔组织,如软骨基质、弹性纤维和黏多糖,以及DNA和RNA [1]
- Kelenyi(1967)修改了染色条件,将pH降至0.8至2.8之间,以提高对淀粉样蛋白的特异性并减少对核酸的染色 [1]
- 硫黄素T在水溶液中形成直径为3 nm的胶束,通过原子力显微镜直接观察到;这些胶束沿淀粉样纤维长度结合 [1]
- 在pH低于3时,通过AFM观察到硫黄素T胶束被破坏,且与淀粉样纤维结合时的荧光增强减少数倍,表明ThT分子上的正电荷在其胶束形成中起作用 [1]
- 硫黄素T在水中的临界胶束浓度为4.0 ± 0.5 μM;在TBS(50 mM Tris,150 mM NaCl,pH 7.5)中,胶束大小在3至6 nm直径之间变化 [1]
- 与硫黄素T相比,刚果红未显示与ED纤维结合的特征性胶束;相反,观察到纤维高度增加至10 ± 0.5 nm,可能是由于刚果红诱导的侧向聚集 [1]
- 硫黄素T与核酸的结合在低pH下显著减少,表明带电相互作用在结合中起作用 [1]
- 硫黄素T对β-折叠结构不具有特异性,因为它既结合核酸也结合淀粉样纤维;与核酸的结合纯粹基于带电相互作用 [1]
硫黄素T是一种有机氯化物盐,其抗衡离子为2-[4-(二甲氨基)苯基]-3,6-二甲基-1,3-苯并噻唑-3-鎓。它广泛用于体外和体内淀粉样蛋白的显色和定量分析。它可用作荧光染料、组织学染料和抗衰老剂。它含有硫黄素T阳离子。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C17H19CLN2S
分子量
318.8642
精确质量
318.095
元素分析
C, 64.04; H, 6.01; Cl, 11.12; N, 8.79; S, 10.05
CAS号
2390-54-7
PubChem CID
16953
外观&性状
Yellow to orange solid powder
熔点
212ºC
LogP
0.771
tPSA
35.36
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
3
可旋转键数目(RBC)
2
重原子数目
21
分子复杂度/Complexity
325
定义原子立体中心数目
0
SMILES
CC1=CC2=C(C=C1)[N+](=C(S2)C3=CC=C(C=C3)N(C)C)C.[Cl-]
InChi Key
JADVWWSKYZXRGX-UHFFFAOYSA-M
InChi Code
InChI=1S/C17H19N2S.ClH/c1-12-5-10-15-16(11-12)20-17(19(15)4)13-6-8-14(9-7-13)18(2)3;/h5-11H,1-4H3;1H/q+1;/p-1
化学名
4-(3,6-dimethyl-1,3-benzothiazol-3-ium-2-yl)-N,N-dimethylaniline;chloride
别名
Thioflavin T; 2390-54-7; Thioflavine T; Basic yellow 1; Acronol Yellow TC;
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~16.67 mg/mL (~52.28 mM)
H2O : ~5 mg/mL (~15.68 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 1.67 mg/mL (5.24 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 16.7 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;再向上述溶液中加入50 μL Tween-80 +,混匀;然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.1362 mL 15.6809 mL 31.3617 mL
5 mM 0.6272 mL 3.1362 mL 6.2723 mL
10 mM 0.3136 mL 1.5681 mL 3.1362 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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