| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
TL02-59 is a selective inhibitor of the myeloid Src-family kinase Fgr (IC50 = 0.031 nM).
It also potently inhibits Lyn (IC50 = 0.10 nM), and with lower potency inhibits Hck (IC50 = 160 nM), Flt3-ITD (IC50 = 440 nM), Fes (IC50 = 290 nM), Syk (IC50 = 470 nM), p38α (IC50 = 126 nM), and Taok3 (IC50 = 509 nM) [1]. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
TL02-59（0.1-1000 nM；6 小时）显着降低 TF-1 细胞中的 Fgr 自磷酸化，在 0.1-1 nM 时具有中度抑制作用，总抑制作用超过 10 nM。 Hck、Lyn 和 Flt3 可有效调节 TL02-59 原代 AML 细胞系增殖中的 nM 并诱导细胞抑制 [1]。 TL02-59 在原代 AML 细胞样本中的抑制范围为 100 至 1000 nM [1]。
TL02-59 能强效抑制FLT3-ITD+ AML细胞系MV4-11（IC50 = 0.78 nM）和MOLM-14（IC50 = 6.6 nM）的增殖，但对THP-1细胞影响甚微（在1 μM浓度下无显著抑制）。[1] 在100 nM浓度下，TL02-59 能诱导MV4-11和MOLM-14细胞凋亡，此效果优于相同浓度的Flt3抑制剂tandutinib，而它不能诱导THP-1细胞凋亡。[1] 用TL02-59处理来自26名AML患者的原代骨髓样本，产生了范围广泛的生长抑制反应（IC50值从77 nM到>3000 nM）。敏感性与原代细胞中骨髓Src家族激酶（Fgr, Hck, Lyn）和Syk的高表达水平强相关，但与FLT3突变状态无关。四个最敏感的样本均为FLT3野生型。[1] 在工程化表达单个激酶的TF-1骨髓细胞中，TL02-59处理（0.1-1000 nM）能强效且选择性地抑制Fgr的自磷酸化（在≥10 nM时完全抑制），而对Hck、Lyn和Flt3-ITD的抑制需要更高浓度（100-1000 nM）。[1] 在MV4-11细胞中，通过慢病毒shRNA敲低Fgr表达可抑制细胞增殖，这证实了Fgr是一个相关靶点。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
TL02-59（包装说明书；1 mg/kg 和 10 mg/kg；持续三周）完全根除脾脏和外周血中的 AML 细胞，同时显着抑制 AML 模型中的细胞参与[1]。对于静脉内和静脉内小时制剂，59的t1/2分别为5.7小时和6.5小时[1]。
在使用MV4-11细胞的AML小鼠异种移植模型中，以10 mg/kg的剂量每天口服一次TL02-59，持续21天，可完全清除脾脏和外周血中的白血病细胞（人CD45+/CD33+），并将骨髓中的植入减少60%。在1 mg/kg剂量下，它能将脾脏植入减少50%，外周血受累减少70%，骨髓植入减少20%。相比之下，Flt3抑制剂sorafenib（10 mg/kg）对骨髓或脾脏植入没有显著影响，尽管它降低了外周血细胞计数。[1] 脾脏和骨髓切片的免疫组织化学分析证实，用10 mg/kg TL02-59处理的小鼠体内MV4-11细胞（用人CD45染色）几乎被完全清除。[1] |
| 酶活实验 |
采用基于FRET的方法进行体外激酶抑制实验。将重组激酶结构域或全长激酶与一系列浓度的TL02-59共同孵育。每个反应中的ATP浓度设定为相应激酶的Km值。生成剂量反应曲线，并通过非线性回归分析计算IC50值。[1]
使用KINOMEscan谱图分析（一种竞争性结合实验）来评估TL02-59在1 μM筛选浓度下对456种人激酶的选择性谱图。测量每种激酶的对照结合百分比（残留探针结合）。[1] |
| 细胞实验 |
蛋白质印迹分析 [1]
细胞类型： TF-1 骨髓细胞 测试浓度： 0.1、1、10、100、1000 nM 孵育持续时间：6小时 实验结果：抑制TF-1细胞中的Fgr自磷酸化。 对于细胞增殖实验，将AML细胞系或原代骨髓细胞接种，并用一系列浓度的TL02-59或DMSO对照处理。孵育72小时后，使用基于刃天青的代谢实验测量细胞活力。绘制剂量反应曲线并确定IC50值。[1] 对于细胞凋亡实验，用抑制剂或DMSO处理细胞72小时。使用发光底物测量caspase活性，并将其与平行实验中的细胞活力标准化，以确定凋亡与活力的比率。[1] 对于细胞内的激酶活性评估，用TL02-59处理表达特定激酶的TF-1细胞6小时。裂解细胞，从澄清的裂解液中免疫沉淀出目标激酶。免疫沉淀物通过SDS-PAGE分离，并用抗磷酸酪氨酸抗体（针对Flt3）或抗磷酸化激活环酪氨酸抗体（针对Src家族激酶）进行免疫印迹。用激酶特异性抗体进行印迹以验证总激酶水平。[1] 对于原代AML样本的基因表达分析，提取总RNA，进行逆转录，并使用基因特异性引物通过定量实时PCR（qPCR）进行分析。表达水平相对于GAPDH计算，然后标准化为每个样本内所有靶点激酶的平均表达量。[1] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： NOD.Cg-PrkdcscidIl2rgtm1Wjl/SzJ (NSG) 小鼠和人 MV4-11 AML 细胞 [1]：1 和 10 mg/kg
给药途径： 口服；持续三周 实验结果： 清除小鼠模型脾脏和外周血中的 AML 细胞，同时显著抑制骨髓受累。 将 10^7 个悬浮于 PBS 中的 MV4-11 人 AML 细胞经尾静脉注射到 NOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ (NSG) 免疫缺陷小鼠体内。14 天后，待细胞植入后，将小鼠随机分为治疗组（n=8）。每日一次，连续 21 天，通过灌胃给药。各治疗组分别接受：载体对照组、1 mg/kg TL02-59 组、10 mg/kg TL02-59 组或 10 mg/kg 索拉非尼组。抑制剂的具体制剂信息未予说明。治疗结束后，处死小鼠。采集骨髓、脾脏和外周血。采用流式细胞术，使用抗人 CD45 和 CD33 抗体定量检测人 AML 细胞。组织学方面，将脾脏和骨髓切片固定后，用抗人 CD45 抗体染色。[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
小鼠药代动力学研究表明，TL02-59具有口服生物利用度，血浆半衰期约为6小时。[1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
TL02-59 是一种 N-苯基苯甲酰胺类激酶抑制剂。[1]
其抗 AML 活性主要通过强效抑制 Src 家族激酶 Fgr 来实现，而 Fgr 此前在 AML 治疗中并未受到重视。[1] 在与 FLT3 突变状态无关的 AML 模型中均观察到疗效，提示其可能对 Fgr 和其他髓系 Src 家族激酶过表达的 AML 患者亚群具有潜在应用价值。[1] 对 TCGA 数据的分析表明，Fgr 过表达可能发生在约三分之一或更多的 AML 病例中。[1] |
| 分子式 |
C₃₂H₃₄F₃N₅O₄
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|---|---|
| 分子量 |
609.638678073883
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| 精确质量 |
609.256
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| CAS号 |
1315330-17-6
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| 相关CAS号 |
TL02-59 dihydrochloride;2415263-06-6
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| PubChem CID |
71254350
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
630.5±55.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
335.1±31.5 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.8 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.603
|
| LogP |
5.22
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| tPSA |
89
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
11
|
| 可旋转键数目(RBC) |
9
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| 重原子数目 |
44
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| 分子复杂度/Complexity |
923
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
AMHWQBGAKJESFB-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C32H34F3N5O4/c1-5-39-10-12-40(13-11-39)18-22-8-9-23(15-25(22)32(33,34)35)38-30(41)21-7-6-20(2)27(14-21)44-31-24-16-28(42-3)29(43-4)17-26(24)36-19-37-31/h6-9,14-17,19H,5,10-13,18H2,1-4H3,(H,38,41)
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| 化学名 |
3-[(6,7-Dimethoxy-4-quinazolinyl)oxy]-N-[4-[(4-ethyl-1-piperazinyl)methyl]-3-(trifluoromethyl)phenyl]-4-methylbenzamide
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| 别名 |
TL02-59 TL02 59 TL0259
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~125 mg/mL (~205.04 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.6403 mL | 8.2016 mL | 16.4031 mL | |
| 5 mM | 0.3281 mL | 1.6403 mL | 3.2806 mL | |
| 10 mM | 0.1640 mL | 0.8202 mL | 1.6403 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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