| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Bromodomain-containing protein 9 (BRD9) and Bromodomain-containing protein 7 (BRD7). TP-472 is a potent and selective inhibitor of the bromodomains of BRD9 and BRD7. It has a Kd (binding affinity) of 33 nM for BRD9 and a Kd of 340 nM for BRD7, exhibiting >30-fold selectivity for BRD9 over all other bromodomain family members except the highly homologous BRD7. This selectivity allows it to specifically disrupt the interaction between BRD9/7 and acetylated histones, thereby modulating transcription of downstream target genes.
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| 体外研究 (In Vitro) |
TP-472（1 µM、3 µM；24-216 小时）可引起胚胎干细胞（ESCs）浓度依赖性生长异常[2]。TP-472（0.1-10 μM；24 小时）在 5 和 10 μM 的剂量下可有效抑制 BRAF 突变型黑色素瘤细胞系的生长[3]。TP-472 在 5 和 10 µM 的剂量下还能显著降低多种黑色素瘤细胞系（M14、SKMEL-28、A375 和 A2058）的长期存活率（该作用持续两周）[3]。当 A375 细胞用 TP-472（5-10 μM）处理 24 小时后，编码多种细胞外基质（ECM）蛋白（如整合素、胶原蛋白和纤连蛋白）的基因表达下调[3]。在 A375 细胞中，TP-472（0.1-10 μM；24 小时）诱导促凋亡基因（BAX、MDM2、CDKN1A）上调[3]。
在无细胞实验中，TP-472 与 BRD9 的结合亲和力（Kd）为 33 nM，该值通过等温滴定量热法 (ITC) 测定。在细胞 NanoBRET 实验中，其 EC₅0 值为 320 nM。在细胞培养模型中，TP-472 通过诱导细胞凋亡和破坏细胞外基质 (ECM) 介导的致癌信号通路，抑制黑色素瘤细胞和其他 BRD9 依赖性癌细胞的增殖。它以剂量依赖的方式上调多个促凋亡基因并降低细胞活力。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
TP-472（20 mg/kg；腹腔注射；每周 3 次；持续 5 周）有效抑制了黑色素瘤异种移植小鼠模型中的皮下肿瘤生长[3]。
在体内实验中，TP-472 在黑色素瘤临床前小鼠模型中展现出显著的抗肿瘤疗效。以 20 mg/kg 的剂量，每周三次腹腔注射，持续长达 5 周，TP-472 可有效抑制异种移植小鼠模型中黑色素瘤的生长。该疗法可抑制肿瘤生长，增加肿瘤内细胞凋亡，并提高受试小鼠的长期生存率。这表明 TP-472 具有作为黑色素瘤治疗药物的潜在应用价值。 |
| 酶活实验 |
采用时间分辨荧光共振能量转移 (TR-FRET) 检测方法。将重组 BRD9 溴结构域蛋白与生物素标记的乙酰化组蛋白肽段以及浓度递增的 TP-472 (0.001-10 uM) 孵育。加入链霉亲和素-别藻蓝蛋白 (APC) 和抗 GST-铕抗体。在 340 nm 激发下，如果肽段与 BRD9 结合，则会发生从铕到 APC 的能量转移。TP-472 竞争性地破坏这种相互作用，导致 665/620 nm 发射比值下降。计算 IC₅0 值。
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| 细胞实验 |
细胞活力测定[2]
细胞类型： 胚胎干细胞 测试浓度： 1 µM、3 µM 孵育时间： 24 小时、72 小时、120 小时、168 小时、216 小时 实验结果： 胚胎干细胞的生长缺陷与浓度相关。 细胞增殖试验[3] 细胞类型： M14 和 SKMEL-28 细胞[3] 测试浓度： 0.1 μM、0.5 μM、1 μM、2 μM、5 μM、10 μM 孵育时间： 24 小时 实验结果： 有效抑制了两种 BRAF 突变型黑色素瘤细胞系的生长。 蛋白质印迹分析[3] 细胞类型： A375 细胞 测试浓度： 10 μM 孵育时间： 24 小时 实验结果： 导致促凋亡基因上调。 将A375黑色素瘤细胞或其他悬浮细胞接种于96孔板中，并用不同剂量的TP-472（例如0.1-10 uM）处理48-72小时。使用CellTiter-Glo 2.0试剂盒检测细胞活力，该试剂盒可定量ATP水平。为检测细胞凋亡，用Annexin V-FITC和碘化丙啶（PI）对经化合物处理的细胞进行染色，并通过流式细胞术进行分析。为评估蛋白质变化，裂解细胞并进行免疫印迹分析，检测裂解的PARP和促凋亡标志物。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：注射A375-MA2细胞的NSG小鼠（雄性，5至6周龄）[3]
剂量：20 mg/kg 给药途径：腹腔注射（ip）；每周三次；连续5周 实验结果：显著抑制异种移植小鼠模型中黑色素瘤皮下肿瘤的生长。 将 5 × 10⁶ 个 A375 黑色素瘤细胞悬浮于 50% Matrigel 中，皮下注射至雌性 NOD-scid IL2Rγ-/- (NSG) 小鼠体内。当肿瘤平均体积达到约 150 mm³ 时，将小鼠随机分组（每组 n=6-10）。TP-472 以 20 mg/kg 的剂量溶于溶剂（例如，10% DMSO/90% 玉米油）中，每周三次腹腔注射，持续 5 周。每周两次使用游标卡尺测量肿瘤体积。当肿瘤体积达到 2000 mm³ 或实验结束时，处死小鼠。切除肿瘤，称重，并进行组织学（H&E 染色、TUNEL 染色）和蛋白质分析。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
检索结果中未发表TP-472的详细药代动力学数据。作为一种具有显著体内疗效的溴结构域抑制剂，TP-472可能适合通过腹腔注射进行全身给药。该化合物的分子量为333.38，预计具有较高的渗透性。它可溶于DMSO，这支持了其体内制剂的开发。其比半衰期（t1/2）、清除率（CL）和口服生物利用度（F%）仍需进一步研究确定。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无TP-472的具体毒理学数据。在临床前动物模型中，已报道的有效剂量（20 mg/kg，腹腔注射，每周三次）耐受性良好，治疗期间小鼠未出现明显的体重减轻或死亡。然而，与任何选择性表观遗传探针一样，不能排除靶向毒性。应遵循处理研究用化学品的标准安全预防措施，包括使用个人防护装备并在通风橱内操作。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
TP-472 是一种高质量的研究用化学探针，广泛用于靶点验证。它并非临床批准的药物，也未进入人体临床试验阶段。TP-472 被认为是首个 BRD9 靶点探针，尤其适用于滑膜肉瘤和黑色素瘤的研究。其非活性对照类似物 (TP-472N) 可用于靶点解卷积。TP-472 纯度高 (≥98%)，适用于生物学和药理学研究。
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| 分子式 |
C₂₀H₁₉N₃O₂
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|---|---|
| 分子量 |
333.38
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| 精确质量 |
333.147
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| CAS号 |
2079895-62-6
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| PubChem CID |
123773279
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 折射率 |
1.681
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| LogP |
1.25
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| tPSA |
63.5
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
25
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| 分子复杂度/Complexity |
533
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CC1=C(C=C(C=C1)C(=O)NC2CC2)C3=C4N=CC=CN4C(=C3)C(=O)C
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| InChi Key |
RPBMXJHQYJLPDN-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H19N3O2/c1-12-4-5-14(20(25)22-15-6-7-15)10-16(12)17-11-18(13(2)24)23-9-3-8-21-19(17)23/h3-5,8-11,15H,6-7H2,1-2H3,(H,22,25)
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| 化学名 |
3-(6-acetylpyrrolo[1,2-a]pyrimidin-8-yl)-N-cyclopropyl-4-methylbenzamide
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| 别名 |
TP472 TP 472
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~299.96 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.50 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.50 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.9996 mL | 14.9979 mL | 29.9958 mL | |
| 5 mM | 0.5999 mL | 2.9996 mL | 5.9992 mL | |
| 10 mM | 0.3000 mL | 1.4998 mL | 2.9996 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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