MEK1 (IC50 = 0.92 nM); MEK2 (IC50 = 1.8 nM)

GSK1120212 的 IC50 范围为 0.92 nM 至 3.4 nM，无论 Raf 和 MEK 的同种型如何，都会抑制 MBP 的磷酸化。 c-Raf、B-Raf、ERK1 和 ERK2 不受 GSK1120212 激酶活性的抑制。此外，GSK1120212 并未显着抑制其他 98 种激酶。 GSK1120212 能有效抑制人结直肠癌细胞系。对 GSK1120212 敏感性最高的细胞的 IC50 值分别为 0.48 nM 和 0.52 nM，并且已知在 HT-29 和 COLO205 中具有组成型活性 B-Raf 突变体。具有 K-Ras 突变的细胞系的 IC50 范围为 2.2–174 nM，对 GSK1120212 表现出广泛的敏感性。 B-Raf 和 K-Ras 中的野生型基因均存在于 COLO320 DM 细胞中，即使在 10 μM 浓度下，该细胞也能抵抗 GSK1120212。所有敏感细胞系在用 GSK1120212 处理 24 小时后都会经历细胞周期停滞在 G1 期。在大多数结直肠癌细胞系中，GSK1120212 治疗后 p15INK4b 和/或 p27KIP1 持续上调。 GSK1120212 的 ERK 磷酸化在所有易感细胞系中均受到抑制。 HT-29 和 COLO205 细胞均经历 GSK1120212 诱导细胞凋亡；然而，COLO205 细胞比 HT-29 细胞更容易受到这种诱导。 [1] 外周血单核细胞 (PBMC) 不能产生肿瘤坏死因子或白细胞介素 6，因为 GSK1120212 抑制此过程。 [2]

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曲美替尼/JTP-74057可抑制LPS诱导的ERK1/2磷酸化和促炎细胞因子的产生[2]
JTP-74057是一种强效的MEK1/2抑制剂，特异性抑制MEK1/2，IC50值约为2nM。众所周知，LPS通过COT/Tpl2-MEK1/2途径诱导单核细胞中ERK1/2磷酸化，因此我们检测了JTP-74057对LPS刺激的人、小鼠或大鼠PBMC中ERK1/2磷酸化的抑制活性。ERK1/2磷酸化在LPS刺激后30分钟内迅速磷酸化，在所有物种中，10 nM的JTP-74057完全抑制了ERK1/2的磷酸化，表明该化合物的抑制活性没有物种差异（图1）。使用来自不同供体的人PBMCs以及在小鼠和大鼠PBMCs的重复实验中获得了相同的结果（数据未显示）。由于在RA患者的滑膜组织中已经报道了MEK-ERK通路的激活，并且这种激活导致TNF-α和IL-6等促炎细胞因子的产生，我们接下来研究了MEK1/2抑制剂对LPS刺激的hPBMCs产生细胞因子的影响。如图2所示，与MEK1/2的抑制活性一致，10 nM的JTP-74057抑制TNF-α的产生约为对照的10%。IL-6的产生也受到抑制；然而，即使在100nM的化合物下，最大抑制作用也约为对照的50%，这意味着除了MEK-ERK途径外，可能还有其他途径可以激活IL-6的产生。

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曲美替尼/JTP-74057和来氟米特对抗CII抗体产生和CII反应性T细胞再激活的差异作用[2]
为了研究MEK1/2抑制是否影响自身抗体的产生，在第35天通过ELISA测定血清中的抗CII IgG。来氟米特以剂量依赖的方式抑制抗CII IgG的升高。另一方面，即使在最高剂量下，JTP-74057也不影响抗CII IgG的产生（图6a），这表明MEK1/2在自身抗体的产生中不起作用。接下来，我们研究了MEK1/2抑制剂对CIA小鼠抗原特异性记忆T细胞再激活的影响。在第二次CII免疫接种后5天，从用CIA进行非药物治疗的小鼠中收集淋巴结细胞，然后在有或没有试验药物的情况下，用热降解的II型胶原在体外重新刺激。两天后，通过[3H]胸苷掺入评估LN细胞的增殖。JTP-74057在CII刺激下抑制了LN细胞的增殖（图6b），这意味着MEK1/2抑制剂对CIA发育的抑制作用至少部分是由于阻断了抗原特异性记忆T细胞的再激活。来氟米特的活性代谢产物A77 1726对LN细胞的增殖影响很小（图6b）。这些结果清楚地表明，MEK抑制剂与来氟米特具有不同的疾病改善活性。

当每天口服一次 0.3 mg/kg 或 1 mg/kg 剂量的 GSK1120212，连续 14 天时，可以有效阻止 HT-29 异种移植物的生长。剂量为 1 mg/kg 时，肿瘤生长几乎完全停止。单次口服剂量1 mg/kg GSK1120212完全抑制已形成肿瘤组织中ERK1/2的磷酸化，治疗14天后，蛋白p15INK4b和p27KIP1的水平均升高。即使剂量为 0.3 mg/kg，COLO205 异种移植模型中也可以看到肿瘤消退。接受 1 mg/kg 剂量的六只小鼠中，有四只经历了完全消退，其中肿瘤已消退到不再可检测到其体积的程度。 [1] Lewis 大鼠或 DBA1/J 小鼠的佐剂诱导性关节炎 (AIA) 和 II 型胶原诱导性关节炎 (CIA) 在给予 0.1 mg/kg 的 GSK1120212 后几乎完全被抑制。 [2]

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JTP-74057/曲美替尼对大鼠佐剂性关节炎模型的影响[2]
为了证实MEK1/2抑制剂对炎性关节炎发展的药理作用，我们首先采用了大鼠佐剂诱导性关节炎（AIA）模型，该模型被广泛用作RA的模型。在第0天，雄性Lewis大鼠在尾部底部皮内注射含有佐剂的结核分枝杆菌，然后监测后爪的体积。在第21天，对后爪的关节破坏进行了放射学评估。从第0天开始每天口服一次JTP-74057。来氟米特被用作参考药物。如图3所示，曲美替尼/JTP-74057以剂量依赖的方式显著阻断了后爪肿胀，0.1 mg/kg的JTP-74057显示出与10 mg/kg的来氟米特相当的疗效。AIA大鼠在关节炎发展过程中体重减轻，而JTP-74057和来氟米特都抑制了这种体重减轻（数据未显示）。在肉眼观察中，0.1 mg/kg的JTP-74057或10 mg/kg的来氟米特均未发现不良事件的迹象；特别是用0.1mg/kg JTP-74057治疗的大鼠的肝损伤标志物（AST、ALT）或肾损伤标志物的肌酐没有显著变化（数据未显示）。大鼠JTP-74057的最大耐受剂量（MTD）被确认为0.3mg/kg（数据未显示）。在后爪的放射学评估中，在第21天，在受AIA影响的大鼠中检测到骨侵蚀和破坏，尤其是跗骨和踝骨（图4b）。JTP-74057防止了后爪的骨侵蚀和破坏（图4c），表明MEK抑制剂对AIA大鼠既有抗炎作用，也有骨保护作用。

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JTP-74057/曲美替尼给药可改善小鼠胶原诱导性关节炎模型中的足肿胀[2]
为了进一步比较曲美替尼/JTP-74057与来氟米特的药理作用，我们在另一种广泛使用的RA模型——小鼠胶原诱导的关节炎模型中测试了这些化合物。在第0天和第21天，将用弗氏完全佐剂乳化的CII皮内注射到DBA1/J小鼠的尾基。在第二次免疫接种后，定期对爪子肿胀进行评分。从第21天至第35天，每天口服一次JTP-74057或来氟米特。如图5a所示，JTP-74057以剂量依赖的方式抑制关节炎的发展，0.3 mg/kg的JTP-74057完全抑制了临床评分的恶化。来氟米特也抑制了关节炎的发展，但即使在10mg/kg的剂量下也没有完全抑制它（图5b）。据报道，JTP-74057在小鼠体内的MTD为3mg/kg。与此一致，在接受0.3mg/kg JTP-74057治疗的组中，没有出现AST升高或体重减轻等不良反应的迹象（数据未显示）。

B-Raf/c-Raf、非磷酸化 MEK1/MEK2 和 EERRK2 以及非磷酸化髓磷脂碱性蛋白 (MBP) 的活性形式在存在以下物质的情况下与含有 12.5 mM MgCl2 和 10 μM ATP 的 MOPS 缓冲液混合不同浓度的 GSK1120212。抗磷酸化MBP抗体可以识别已磷酸化的MBP。

在 96 孔组织培养板中，将指数生长的细胞预培养 24 小时，然后暴露于 GSK1120212。基于磺胺罗丹明 B 的体外毒理学检测试剂盒可测量细胞生长。收集贴壁细胞和漂浮细胞用于细胞凋亡测定并用 70% 乙醇固定。然后用 PBS 洗涤细胞，悬浮在 100 μg/mL RNase 和 25 μg/mL 碘化丙啶 (PI) 中，并在黑暗中加热至 37°C 30 分钟。 Cytomics FC500 或 Guava EasyCyte plus 流式细胞仪用于测量每个细胞的 DNA 含量。

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PBMC在添加了10%热灭活胎牛血清（HI-FBS）的RPMI1640中培养，然后在有或没有不同浓度的曲美替尼/JTP-74057的情况下用LPS（人，1μg/ml；小鼠和大鼠，10μg/ml）激活。对于蛋白质印迹分析，在刺激后30分钟裂解细胞，并如前所述通过蛋白质印迹分析ERK1/2的磷酸化。为了分析细胞因子的产生，在刺激过夜后收集细胞上清液，并通过ELISA测定TNF-α和IL-6的浓度。[2]

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Affymetrix表达分析[3]
在单独用GSK2118436和曲美替尼/GSK1120212复合处理24小时后，选择16R6-4与A375进行比较。数据分析按照补充方法中的描述进行。微阵列数据保存在NCBI的基因表达综合数据库（GEO，http://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/)可通过GEO系列登录号GSE35230访问。

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细胞生长试验[4]
将细胞（2.5 E4）铺在96孔板中，并在第二天用浓度递增的药物或等摩尔二甲亚砜（DMSO）处理三次。72小时后，根据制造商的说明，通过荧光光度法，使用Cell Titer Blue Assay测定每种处理相对于单独DMSO处理的氧化还原染料转化率。等摩尔浓度的DMSO载体对所有细胞系的细胞活力没有显著影响。

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流式细胞术[4]
对于细胞周期分析，收集培养上清液，并与通过短暂胰蛋白酶处理去除的培养细胞合并。用PBS洗涤细胞两次，并用70%乙醇固定。细胞在-20°C下储存过夜。然后用PBS洗涤细胞两次，在RNA酶A 100ug/mL和20ug/mL碘化丙啶中复溶，并在分析前储存在4°C下。对于凋亡测量，类似地收集细胞，用膜联蛋白V对洗涤后的细胞进行染色，洗涤一次，然后重新悬浮在20 ug/mL碘化丙啶中。在FACs Canto上分析细胞，并使用FlowJo分析数据。细胞指数被确定为S/G2/M期细胞的百分比，与未处理的基线培养物标准化。使用Graphpad Prism将三次重复实验的平均值与重复测量的单因素方差分析和Bonferroni多重比较检验进行比较。显著性表示在95%的置信区间内，p值小于0.05。

小鼠：本研究使用BALB/c-nu/nu雌性小鼠。将悬浮于冰冷HBSS（-）中的HT-29细胞或COLO205细胞，于第0天皮下注射至小鼠右侧腹部，注射密度分别为5×10⁶个细胞/100 µL/点或1×10⁶个细胞/100 µL。当平均肿瘤体积达到100 mm³时，将醋酸溶解的曲美替尼（JTP-74057，0.3 mg/kg或1 mg/kg）溶于10% Cremophor EL-10% PEG400溶液中，每日一次口服给药，连续14天。给药两周后，使用微型测量仪测量肿瘤的长度[L(mm)]和宽度[W(mm)]，并使用公式肿瘤体积(mm³)=L×W×W/2计算肿瘤体积。

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大鼠佐剂诱导关节炎[2]
将0.5 mg结核分枝杆菌溶于100 μl石蜡油中，皮内注射到6周龄雄性Lewis大鼠尾根部（第0天），诱导关节炎。正常未处理的大鼠作为对照组。曲美替尼DMSO溶剂化物和来氟米特研磨后悬浮于0.5%甲基纤维素溶液中，配制成5 ml/kg的体积。第0天，根据体重将大鼠随机分为6组（每组6只）。从第0天到第21天，每天口服一次试验药物。关节炎诱导后，分别于第6、13、16和21天采用排水法，使用大鼠体积测量仪测量后爪体积。于第21天使用X光机拍摄双侧后肢的X光片。

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胶原诱导性关节炎[2]
将牛II型胶原蛋白（CII）溶解于0.01 M乙酸中，浓度为2 mg/ml，然后与等体积的弗氏完全佐剂H37Ra乳化。将100 μl CII乳剂经尾根部皮内注射免疫6周龄雄性DBA/1J小鼠。21天后，根据体重将小鼠随机分为7组（每组16只）。所有小鼠均注射相同量的CII乳剂以诱导关节炎。将曲美替尼乙酸溶剂化物溶解于 10% Cremophor EL/10% 聚乙二醇 400 溶液中，配制成 10 ml/kg 的溶液。将来氟米特研磨后悬浮于 0.5% MC 溶液中，配制成 10 ml/kg 的溶液。从第 21 天到第 35 天，每天口服一次试验药物或赋形剂。通过对每条肢体的视觉严重程度进行评分来计算关节炎的临床评分，其中趾和整个爪的肿胀程度按以下方式评分（每条肢体的最高分为 4 分）：趾肿胀（0 分，无肿胀；1 分，一个趾肿胀；2 分，两个或更多趾肿胀）；整个爪肿胀（0 分，无肿胀；1 分，轻度肿胀；2 分，整个爪严重肿胀）。评分采用盲法进行。每只小鼠的关节炎评分以 4 条肢体的平均评分表示。在第35天，采用夹心ELISA法检测血清中CII特异性抗体。将500 ng CII溶解于100 μl PBS中，加入96孔EIA板，4℃孵育过夜。洗去多余的CII后，用Block Ace封闭1小时。将CIA小鼠血清稀释后加入孔中。室温孵育2小时后，洗孔，然后用辣根过氧化物酶标记的抗小鼠IgG抗体检测CII特异性抗体。

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CIA小鼠淋巴结细胞增殖[2]
在第二次免疫后5天，从未经药物治疗的CIA小鼠中收集腹股沟淋巴结（LN）细胞，并以5 × 10⁵个细胞/孔的浓度接种于96孔培养板中，培养基为含青霉素-链霉素、2-巯基乙醇和10% HI-FBS的RPMI1640培养基。在有或无测试化合物Trametinib或A77 1726的情况下，向细胞中加入终浓度为10 μg/ml的CII溶液。在37°C、5% CO₂条件下孵育42小时后，向每个孔中加入0.5 μCi的[³H]胸苷，并继续培养6小时。使用TopCount微孔板闪烁计数器测量放射性掺入量。

吸收、分布和排泄
口服后，曲美替尼吸收迅速且易于吸收。本研究在实体瘤和BRAF V600突变阳性转移性黑色素瘤患者中考察了曲美替尼的吸收情况。每日服用0.125 mg（相当于成人推荐剂量的0.0625倍）至4 mg（相当于成人推荐剂量的2倍）曲美替尼片剂后，Cmax和AUC均呈剂量比例增加。稳态时AUC和Cmax的个体间变异性分别为22%和28%。每日重复给药可使曲美替尼蓄积，每日一次2 mg剂量时的平均蓄积比为6.0。第15天达到稳态。口服片剂的平均绝对生物利用度为72%，口服溶液的平均绝对生物利用度为81%。Tmax为1.5小时。与空腹状态相比，高脂肪、高热量餐（约 1000 卡路里）使曲美替尼的 AUC 降低 24%，Cmax 降低 70%，Tmax 延迟约 4 小时。
口服 [¹⁴C]-曲美替尼后，超过 80% 的放射性物质从粪便中排出，而不到 20% 的放射性物质从尿液中排出，其中母体分子占排泄剂量的比例不到 0.1%。
表观分布容积 (V_c/F) 为 214 L。
表观清除率为 4.9 L/h。

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代谢/代谢物
曲美替尼主要通过羧酸酯酶（例如羧酸酯酶 1b/c 和 1b/c）介导的脱乙酰化作用代谢。 2) 以及其他水解酶。脱乙酰代谢物可能进一步发生葡萄糖醛酸化。体外研究表明，脱乙酰化可能伴随单加氧、羟基化和葡萄糖醛酸化。CYP3A4 介导的氧化是次要途径。在晚期癌症患者中已鉴定出四种代谢物（M1/2/3/4）。体外研究表明，M1 和 M3 代谢物的磷酸化 MEK1 抑制活性与母体化合物大致相同或低 10 倍。单次注射 [¹⁴C]-曲美替尼后，循环放射性中约 50% 为母体化合物。根据曲美替尼重复给药后代谢物分析的结果，血浆中未代谢的母体药物占药物相关物质的75%或以上。

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生物半衰期
估计消除半衰期为3.9至4.8天。

肝毒性
在大型临床试验中，常规肝功能检查异常较为常见，接受曲美替尼治疗的患者中，39%至60%出现血清转氨酶升高，24%至67%出现碱性磷酸酶升高。然而，ALT升高超过正常值上限5倍的情况并不常见，发生率仅为0%至5%，且通常可通过暂时停药或调整剂量迅速恢复正常。在曲美替尼联合或不联合达拉非尼的上市前对照试验中，未报告临床上明显的急性肝损伤或肝功能衰竭病例。目前尚未有已发表的、归因于曲美替尼的临床上明显的肝毒性病例报告。然而，它仅短期使用过。
可能性评分：E（未经证实但怀疑是临床上明显的肝损伤的原因）。

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妊娠和哺乳期影响
◉ 哺乳期用药概述
目前尚无关于曲美替尼在哺乳期临床应用的信息。由于曲美替尼与血浆蛋白的结合率高达97%，因此其在乳汁中的含量可能很低。然而，其半衰期为3.9至4.8天，可能会在婴儿体内蓄积。制造商建议在接受曲美替尼治疗期间以及末次给药后 4 个月内停止母乳喂养。
◉ 对母乳喂养婴儿的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。
◉ 对泌乳和母乳的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。

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蛋白结合
曲美替尼与人血浆蛋白的结合率为 97.4%。

[1]. Int J Oncol . 2011 Jul;39(1):23-31.

[2]. Inflamm Res . 2012 May;61(5):445-54.

[3]. Mol Cancer Ther . 2012 Apr;11(4):909-20.

[4]. Clin Cancer Res . 2012 Aug 15;18(16):4345-55.

药效学
曲美替尼在体外和体内均能抑制多种BRAF V600突变阳性肿瘤细胞的生长。曲美替尼常与BRAF抑制剂达拉非尼联合使用。在BRAF突变型结直肠癌中，EGFR介导的MAPK通路再激活已被确定为BRAF抑制剂的内在耐药机制。

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MAPK通路是新型抗癌药物研发中最重要的通路之一。我们对诱导p15INK4b表达的化合物进行了高通量筛选，并鉴定出JTP-74057（GSK1120212），该化合物目前正在进行I期、II期和III期临床试验。我们对其体外和体内抗肿瘤活性进行了表征。JTP-74057能强效抑制MEK1/2激酶活性，但对其他98种激酶活性无抑制作用。 JTP-74057 处理可抑制大多数受试结直肠癌细胞系的生长，并伴有 p15INK4b 和/或 p27KIP1 的上调。每日口服 JTP-74057 14 天可抑制裸鼠体内 HT-29 和 COLO205 异种移植瘤的生长。值得注意的是，仅在 COLO205 异种移植瘤中观察到肿瘤消退，且 COLO205 细胞在体外对 JTP-74057 诱导的细胞凋亡比 HT-29 细胞更为敏感。Akt 抑制剂可增强 JTP-74057 诱导的 HT-29 细胞凋亡。最后，JTP-74057 与标准治疗药物 5-氟尿嘧啶、奥沙利铂或 SN-38 联合用药表现出叠加或协同效应。 JTP-74057 是一种高特异性和强效的 MEK1/2 抑制剂，在体外和体内均表现出良好的抗肿瘤活性。对 JTP-74057 诱导的细胞凋亡的敏感性可能是评估其体内疗效的重要因素，而 Akt 抑制剂可增强这种敏感性。这些结果表明 JTP-74057 在结直肠癌患者的治疗应用中具有潜在价值。[1]

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目的和设计：探讨丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶激酶 1/2 抑制剂 JTP-74057 对炎症性关节炎发展的影响，并将其抗关节炎作用与来氟米特进行比较。材料：采用人、小鼠和大鼠外周血单核细胞 (PBMC)。本研究采用Lewis大鼠和DBA/1J小鼠作为动物模型。治疗：体外实验中，JTP-74057的浓度范围为0.1-100 nM。体内实验中，分别口服给予JTP-74057（0.01-0.3 mg/kg）和来氟米特（2-10 mg/kg）。方法：用脂多糖刺激外周血单核细胞（PBMC）。分别在Lewis大鼠和DBA1/J小鼠中诱导佐剂诱导性关节炎（AIA）和II型胶原诱导性关节炎（CIA）。结果：JTP-74057抑制PBMC中肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-6的产生。0.1 mg/kg的JTP-74057或10 mg/kg的来氟米特几乎完全抑制了AIA和CIA的发生发展。在CIA模型中，JTP-74057（而非来氟米特）可抑制体外胶原反应性T细胞增殖，而来氟米特（而非JTP-74057）可抑制抗胶原抗体的产生。结论：JTP-74057具有强效的抗关节炎作用，其作用机制与来氟米特不同，提示JTP-74057可能作为一种新的治疗药物用于治疗类风湿性关节炎。[2]

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近期BRAF抑制剂GSK2118436（达拉非尼）和PLX4032（维莫非尼）的临床试验结果显示出令人鼓舞的缓解率；然而，缓解持续时间有限。为了鉴定获得性耐药 GSK2118436 的决定因素以及克服耐药性的策略，我们从 A375 BRAF(V600E) 和 YUSIT1 BRAF(V600K) 黑色素瘤细胞系中分离出 GSK2118436 耐药克隆。这些克隆对变构丝裂原活化蛋白/细胞外信号调节激酶 (MEK) 抑制剂 GSK1120212（曲美替尼）的敏感性也降低。对这些克隆进行基因表征发现，在 BRAF(V600E) 背景下，存在 MEK1 的框内缺失 (MEK1(K59del)) 或 NRAS 突变 (NRAS(Q61K) 和/或 NRAS(A146T))，伴或不伴 MEK1(P387S)；在 BRAF(V600K) 背景下，存在 NRAS(Q61K)。利用短发夹RNA稳定敲低NRAS可部分恢复突变NRAS克隆对GSK2118436的敏感性，而A375亲代细胞中NRAS(Q61K)或NRAS(A146T)的表达则降低了其对GSK2118436的敏感性。类似地，MEK1(K59del)的表达（而非MEK1(P387S)的表达）降低了A375细胞对GSK2118436的敏感性。GSK2118436与GSK1120212的联合应用可有效抑制耐药克隆的细胞生长，降低ERK磷酸化水平，降低细胞周期蛋白D1的表达，并增加p27(kip1)蛋白的表达。此外，GSK2118436 或 GSK1120212 与磷脂酰肌醇 3-激酶/mTOR 抑制剂 GSK2126458 联用可增强细胞生长抑制并降低这些克隆中 S6 核糖体蛋白的磷酸化水平。我们的结果表明，NRAS 和/或 MEK 突变是体外 BRAF 抑制剂耐药的致病因素，而 GSK2118436 与 GSK1120212 联用可克服这种耐药性。此外，这些耐药克隆对 GSK2126458 与 GSK2118436 或 GSK1120212 联用也有反应。目前正在进行或计划开展临床试验以测试这些组合疗法。[3]

C26H23FIN5O4

615.39

615.077

C, 50.74; H, 3.77; F, 3.09; I, 20.62; N, 11.38; O, 10.40

871700-17-3

Trametinib (DMSO solvate);1187431-43-1;Trametinib-d4;Trametinib-13C6;Trametinib-13C,d3;2712126-59-3

11707110

white solid powder

1.7±0.1 g/cm3

1.734

2.68

110.62

2

6

5

37

1090

0

O=C(C)NC1C=C(N2C3C(=C(N(C)C(C=3C)=O)NC3C(F)=CC(I)=CC=3)C(=O)N(C3CC3)C2=O)C=CC=1

LIRYPHYGHXZJBZ-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C26H23FIN5O4/c1-13-22-21(23(31(3)24(13)35)30-20-10-7-15(28)11-19(20)27)25(36)33(17-8-9-17)26(37)32(22)18-6-4-5-16(12-18)29-14(2)34/h4-7,10-12,17,30H,8-9H2,1-3H3,(H,29,34)

N-[3-[3-cyclopropyl-5-(2-fluoro-4-iodoanilino)-6,8-dimethyl-2,4,7-trioxopyrido[4,3-d]pyrimidin-1-yl]phenyl]acetamide

JTP-74057; GSK 1120212; GSK1120212; GSK-1120212; JTP74057; Trametinib. Trade name: Mekinist

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.06 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.06 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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配方 3 中的溶解度: 4% DMSO+corn oil: 3mg/mL

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配方 4 中的溶解度: 6.67 mg/mL (10.84 mM) in 0.5%HPMC 1%Tween80 (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。