| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Estrogen receptor (IC50 = 3.3 nM); CRISPR/Cas9
The primary target of trans-4-Hydroxytamoxifen is the estrogen receptor (ER), with an IC50 of 3.3 nM for binding to [3H]oestradiol. It acts as an antagonist in breast tissues and as an agonist in other tissues such as the endometrium. It also targets estrogen-related receptors (ERR). In addition, trans-4-Hydroxytamoxifen induces the CRISPR/Cas9 system based on ER-mediated nuclear translocation. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
4-羟基他莫昔芬，又称单羟基他莫昔芬，是一种选择性雌激素受体拮抗剂。它与[3H]雌二醇的结合IC50值为3.3 nM。4-羟基他莫昔芬（10 nM和100 nM）可抑制人8S雌激素受体与[3H]雌二醇的结合[1]。4-羟基他莫昔芬可降低CRISPR介导的脱靶基因编辑，并激活内含肽连接的失活Cas9。条件激活的Cas9在改变人细胞靶基因组位点方面的选择性比野生型Cas9高25倍[2]。
体外实验表明，反式-4-羟基他莫昔芬是一种选择性雌激素受体拮抗剂，与[3H]雌二醇的结合IC50值为3.3 nM。它以 10 nM 和 100 nM 的浓度抑制人 8S 雌激素受体与 [3H]雌二醇的结合。在 T47D 人乳腺癌细胞中，固定环反式-4-羟基他莫昔芬是一种强效抗雌激素，其 IC50 值约为 4 × 10⁻⁸ 至 2 × 10⁻⁷ M。它能降低脱靶 CRISPR 介导的基因编辑，并激活内含肽连接的失活 Cas9。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在幼鼠中，4-羟基他莫昔芬（0.2、1 和 5 μg/d）以剂量依赖的方式降低子宫湿重[1]。4-在完整和去势的C57BL/6J小鼠中，甲基苯丙胺诱导的黑质纹状体多巴胺耗竭可被羟基他莫昔芬（6 μg/0.1 mL 芝麻油，每日一次皮下注射）显著减弱。4-纹状体多巴胺水平不受4-羟基他莫昔芬的影响[3]。
在体内，反式-4-羟基他莫昔芬（0.2、1 和 5 μg/d）以剂量依赖的方式降低幼鼠的子宫湿重。在完整和去势的C57BL/6J小鼠中，以6 μg/0.1 mL芝麻油的剂量皮下注射，可显著减轻甲基苯丙胺诱导的黑质纹状体多巴胺耗竭。反式-4-羟基他莫昔芬已用于乳腺癌患者术前经皮给药。 |
| 酶活实验 |
将胞质溶胶（200 μL）与不同浓度的雌二醇、他莫昔芬和（4-羟基他莫昔芬）或二羟基他莫昔芬（溶于 10 μL 甲醇中）在 4°C 下孵育 30 分钟。对照管仅用 10 μL 甲醇孵育，并通过平行孵育胞质溶胶（200 μL）和含有 DES（5 × 10⁶ M）的甲醇（10 μL）来测定非特异性结合。将 50 μL [2,4,6,7-3H]雌二醇溶液（溶于 TED 缓冲液）加入各试管中，使其最终浓度为 2 × 10⁻⁹ M。继续孵育 4 小时（4°C），然后加入 400 μL 葡聚糖包被活性炭悬浮液（250 mg% Norit A，2.5 mg% 葡聚糖，溶于 TED 缓冲液），静置 20 分钟。将试管在 800 g 下离心 10 分钟（4°C），取 400 μL 上清液加入 10 mL 氚闪烁液（6 g 丁基 PBD，135 mL 甲苯，720 mL 二恶烷，100 g 萘，45 mL 无水甲醇）。在液体闪烁计数器中计数 10 分钟。计数效率通过外部标准化法测定（35-36%）。结果以对照管中特异性结合放射性（cpm）的百分比表示[1]。 |
| 细胞实验 |
基因组 GFP 的修饰[2]
HEK293-GFP 稳定细胞系（组成型表达 Emerald GFP）用作报告细胞系。细胞培养于“全血清培养基”中：Dulbecco 改良 Eagle 培养基（DMEM）+ GlutaMax，含 10% (v/v) 胎牛血清 (FBS) 和 1× 青霉素/链霉素。将 5 × 10⁴ 个细胞接种于 48 孔胶原蛋白包被的 Biocoat 板中。接种 16-18 小时后，根据制造商的方案，使用 Lipofectamine 2000 进行细胞转染。简而言之，使用 1.5 µL Lipofectamine 2000 转染 650 ng 总质粒：500 ng Cas9 表达质粒、125 ng sgRNA 表达质粒和 25 ng 近红外 iRFP670 表达质粒。转染12小时后，将培养基更换为含或不含4-HT（1 µM）的全血清培养基。转染后3-4天再次更换培养基。转染5天后，用胰蛋白酶消化细胞，并重悬于全血清培养基中，使用C6流式细胞仪进行分析，激发波长为488 nm，滤光片波长为520 nm，带通带宽为20 nm。转染和流式细胞术测量均重复三次。 基因组修饰的高通量DNA测序[2] 如上所述，将表达Cas9（500 ng）和sgRNA（125 ng）的质粒转染至HEK293-GFP稳定细胞中。对于转染的野生型Cas9表达质粒量较少的处理组，使用pUC19质粒将质粒总量补足至500 ng。在转染过程中，根据需要添加 4-HT（终浓度为 1 µM）。转染 12 小时后，将培养基更换为不含 4-HT 的全血清培养基。转染 60 小时后，使用 DNAdvance 试剂盒，按照先前报道的方法，从三个生物学重复样本中分离基因组 DNA 并混合。取 150 ng 或 200 ng 基因组 DNA 作为模板，使用先前描述的侧翼 HTS 引物对，通过 PCR 扩增靶位点和非靶位点。PCR 产物使用 RapidTips 纯化，并使用 PicoGreen dsDNA 定量试剂盒进行定量。纯化的 DNA 使用含有测序接头的引物进行 PCR 扩增，并使用 MinElute PCR 纯化试剂盒和 AMPure XP PCR 纯化试剂盒进行纯化。样品在MiSeq高通量DNA测序仪上进行测序，测序数据按先前所述方法进行分析。 内含肽剪接的Western blot分析[2] 将500 ng Cas9表达质粒和125 ng sgRNA表达质粒转染至HEK293-GFP稳定细胞中。转染12小时后，更换为含或不含4-HT（1 µM）的完全血清培养基。分别在4-HT处理后4、8、12或24小时，裂解细胞并将三个技术重复的细胞混合。样品在Bolt 4–12% Bis-Tris凝胶上进行电泳。使用抗FLAG抗体（Sigma-Aldrich F1804）和抗小鼠800CW IRDye（LI-COR）在Odyssey红外成像仪上对凝胶进行显色。 体外细胞实验采用雌激素反应性乳腺癌细胞系，例如T47D和MCF-7。将细胞在37°C下与1 nM [3H]雌二醇孵育50分钟，同时加入或不加入递增浓度（0.1 nM - 10 μM）的反式-4-羟基他莫昔芬。通过测量细胞增殖来确定抗雌激素活性。在ZR-75-1人乳腺癌细胞中评估该化合物对细胞生长和基因表达的影响。 |
| 动物实验 |
本研究旨在评估4-羟基他莫昔芬（4-OHT）能否改变甲基苯丙胺诱导的黑质纹状体多巴胺能毒性。每日三次给予4-OHT（6 μg/天）可有效减轻完整和去势C57BL/6J小鼠（雌雄均适用）中甲基苯丙胺诱导的黑质纹状体多巴胺耗竭。单独使用4-OHT并不改变纹状体中的多巴胺含量。无论去势还是4-OHT治疗，雄性和雌性小鼠纹状体中的Cu,Zn-超氧化物歧化酶蛋白水平均相似。此外，4-OHT治疗对雌雄小鼠的基础体温和甲基苯丙胺诱导的高热均无影响。我们利用鲁米诺衍生的化学发光检测法发现，4-羟基他莫昔芬（4-OHT）本身即可在体外作为一种强效的超氧阴离子自由基清除剂。4-OHT对甲基苯丙胺诱导的黑质纹状体多巴胺耗竭的保护作用可能部分归因于其抗氧化特性。4-OHT的自由基清除能力提示其在临床应用中具有潜在的价值，值得进一步研究。[3]
将雌雄动物随机分为两组：一组连续三天皮下注射4-羟基他莫昔芬（6 μg/0.1 mL芝麻油/天，从早上6:00开始），另一组连续三天注射等量的芝麻油。第三次注射后4小时，将每组小鼠随机分为两组：一组皮下注射四次累积剂量的盐酸甲基苯丙胺（10 mg/kg），另一组每隔2小时注射等体积的生理盐水。在戊巴比妥麻醉（50 mg/kg，腹腔注射）下进行双侧性腺切除术。术后5周，将性腺切除小鼠（雌雄各半）随机分为六组。雌雄各五组小鼠每天注射三次不同浓度的4-羟基他莫昔芬（0、1.5、3.0、6.0和12.0 μg/0.1 mL芝麻油/天）。第三次注射后4小时，小鼠每隔2小时注射四次甲基苯丙胺（MA，10 mg/kg）。剩余的雌雄各组动物连续三天接受芝麻油预处理，随后注射生理盐水，作为对照组[3]。 体内动物实验采用未成熟雌性大鼠进行子宫重量测定。反式-4-羟基他莫昔芬的给药剂量分别为0.2、1和5 μg/d，并测量子宫湿重。在C57BL/6J小鼠中，该化合物以皮下注射（6 μg/0.1 mL芝麻油，每日一次）的方式给药，以研究其对多巴胺耗竭的影响。经皮给药研究在乳腺癌患者术前进行。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
吸收、分布和排泄
局部应用后被吸收。代谢/代谢物 已知的4-羟基他莫昔芬的人体代谢物包括3,4-二羟基他莫昔芬、他莫昔芬4-O-硫酸盐、他莫昔芬4-O-葡萄糖醛酸苷和内啡肽。4-羟基他莫昔芬是已知的他莫昔芬的人体代谢物。 反式-4-羟基他莫昔芬的药代动力学(PK)特性表明，它是他莫昔芬的活性代谢物，主要由CYP2D6和CYP3A4代谢生成。它可以经皮给药，穿过皮肤并在乳腺组织的受体结构中浓缩，从而避免肝脏代谢。该化合物的分子量为387.51，分子式为C26H29NO2。它可溶于二甲基亚砜和乙醇。建议在-20°C下储存以保持长期稳定性。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
反式-4-羟基他莫昔芬的毒理学数据与他莫昔芬相似。作为一种选择性雌激素受体调节剂（SERM），它在不同组织中既可发挥雌激素样作用，也可发挥抗雌激素样作用。由于其在子宫内膜中的激动剂活性，它可能导致子宫内膜增生。常见副作用包括潮热、恶心和阴道分泌物增多。长期使用可能增加子宫内膜癌和血栓栓塞事件的风险。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
阿菲莫昔芬是一种叔胺化合物，属于三苯胺类。其结构与他莫昔芬相似，区别在于与乙基取代基相连的Z构型苯基在对位被羟基化。它是一种三苯胺类化合物，也是他莫昔芬的活性代谢物。它具有多种功能，包括抗肿瘤活性、雌激素受体拮抗作用和代谢活性。阿菲莫昔芬属于叔胺类，也是一种酚类化合物。在功能上，它与他莫昔芬相关。阿菲莫昔芬（4-羟基他莫昔芬，商品名TamoGel）是一种新型雌激素抑制剂，目前正在研究其治疗多种雌激素依赖性疾病（包括周期性乳房疼痛和男性乳房发育症）的疗效。TamoGel采用增强型水醇凝胶（EHG）技术配制而成。这项技术能够实现无法口服药物的透皮给药。该药物由Ascend Therapeutics公司研发。据报道，4-羟基他莫昔芬存在于青霉菌（Penicillium aurantiacobrunneum）中，并且已有相关数据。
阿菲莫昔芬是他莫昔芬的代谢产物，具有雌激素和抗雌激素的双重作用。阿菲莫昔芬对雌激素受体的亲和力高于他莫昔芬，并在乳腺癌细胞中发挥拮抗剂的作用。 4-羟基他莫昔芬（阿菲莫昔芬）是他莫昔芬的代谢产物。阿菲莫昔芬（4-羟基他莫昔芬）是一种选择性雌激素受体调节剂，也是他莫昔芬的活性代谢产物。阿菲莫昔芬是一种透皮凝胶制剂，由Ascend Therapeutics公司以TamoGel为商标研发。 （维基百科） 药物适应症 用于治疗月经周期相关的乳房疼痛、乳腺纤维囊性病、乳腺疾病、男性乳房发育症和瘢痕疙瘩。 作用机制 阿非莫昔芬与雌激素受体 (ER) 结合，诱导受体构象变化。这导致雌激素依赖性基因表达的抑制或改变。 其他信息：反式-4-羟基他莫昔芬也称为 (Z)-4-羟基他莫昔芬、ICI 79280 和单羟基他莫昔芬。它是他莫昔芬的主要代谢产物，他莫昔芬是一种用于乳腺癌治疗的常用抗雌激素。该化合物用于研究雌激素受体信号传导，并作为条件性基因表达系统（例如 CRISPR/Cas9）的工具。其CAS编号为68047-06-3。 |
| 分子式 |
C26H29NO2
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|---|---|
| 分子量 |
387.52
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| 精确质量 |
387.219
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| 元素分析 |
C, 80.59; H, 7.54; N, 3.61; O, 8.26
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| CAS号 |
68047-06-3
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| 相关CAS号 |
(E/Z)-4-Hydroxytamoxifen;68392-35-8;(E)-4-Hydroxytamoxifen;174592-47-3
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| PubChem CID |
449459
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| 外观&性状 |
Typically exists as white to off-white solids at room temperature
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| 密度 |
1.1±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
514.4±50.0 °C at 760 mmHg
|
| 熔点 |
105-107ºC
|
| 闪点 |
264.9±30.1 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.4 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.597
|
| LogP |
7.34
|
| tPSA |
32.7
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
8
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| 重原子数目 |
29
|
| 分子复杂度/Complexity |
493
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
O(C([H])([H])C([H])([H])N(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])C1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[H])/C(/C1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[H])O[H])=C(\C1C([H])=C([H])C([H])=C([H])C=1[H])/C([H])([H])C([H])([H])[H]
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| InChi Key |
TXUZVZSFRXZGTL-QPLCGJKRSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C26H29NO2/c1-4-25(20-8-6-5-7-9-20)26(21-10-14-23(28)15-11-21)22-12-16-24(17-13-22)29-19-18-27(2)3/h5-17,28H,4,18-19H2,1-3H3/b26-25-
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| 化学名 |
4-[(Z)-1-[4-[2-(dimethylamino)ethoxy]phenyl]-2-phenylbut-1-enyl]phenol
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| 别名 |
ICI 79280; 4-Hydroxytamoxifen; trans-4-Hydroxytamoxifen; (Z)-4-Hydroxytamoxifen
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~50 mg/mL (~129.03 mM)
Ethanol : ~20 mg/mL (~51.61 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.37 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.37 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.37 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 5 mg/mL (12.90 mM) in 50% PEG300 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5805 mL | 12.9026 mL | 25.8051 mL | |
| 5 mM | 0.5161 mL | 2.5805 mL | 5.1610 mL | |
| 10 mM | 0.2581 mL | 1.2903 mL | 2.5805 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
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