| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
MEK2 (IC50 = 60 nM); MEK1 (IC50 = 70 nM)
MEK1 (IC50 = 72 nM); MEK2 (IC50 = 58 nM) [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
U0126 处理可有效降低 A549 细胞中所有检查毒株的子代病毒滴度。虽然 nM 浓度的 U0126 可有效减少 H1N1v 和 H5N1 (MB1)，但需要 μM 浓度的 U0126 才能降低 H5N1 (GSB) 和 H7N7 病毒滴度。 U0126-EtOH 针对 H1N1v 的 EC50 值在 A549 细胞中为 1.2±0.4 μM，在 MDCKII 细胞中为 74.7±1.0 μM[2]。胎牛血清（FCS）刺激的大鼠肝癌细胞（FAO）表现出显着的S期细胞比例（32.62％），而U0126显着降低了S期细胞比例（9.92％）并增加了G0-细胞比例G1 期以及较小程度的 G2/M[3]。
U0126强效抑制重组MEK1和MEK2激酶活性，IC50分别为72 nM和58 nM，是一种ATP竞争性抑制剂 [1] Western blot检测显示，它阻断HeLa细胞中EGF诱导的ERK1/2磷酸化，10 μM时抑制率达50% [1] 在感染大流行H1N1v流感病毒的MDCK细胞中，U0126抑制病毒复制，EC50为8.3 μM，20 μM时病毒滴度降低100倍 [2] 针对高致病性禽流感病毒（H5N1），该化合物在MDCK细胞中显示抗病毒活性，EC50为7.6 μM [2] 在ERK2依赖性肿瘤细胞系（A549、MCF-7）中，U0126抑制细胞增殖，IC50分别为15 μM和12 μM，20 μM时克隆形成率分别降低68%和75% [3] 它抑制RAW 264.7巨噬细胞中LPS诱导的TNFα产生，IC50为9.8 μM [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
每天给小鼠施用U0126-EtOH（U0126；腹膜内注射，10.5 mg/kg）。整个对照实验中的肿瘤大小要么恒定，要么略有增加。另一方面，在所有 U0126-EtOH 实验中，植入和早期肿瘤生长均显着减少。此外，注射后 9 天及此后，用 U0126-EtOH 治疗的肿瘤体积减少了 60-70%[3]。对大鼠进行短暂大脑中动脉闭塞（tMCAO）120分钟，并在再灌注后0和24小时给予U0126-EtOH（U0126；腹膜内注射，30mg/kg）。接受U0126-EtOH治疗后，S6c的血管收缩显着降低[4]。
小鼠腹腔注射U0126（25 mg/kg，每日两次），使H1N1v感染小鼠的存活率从30%提高至80%，感染后第5天肺病毒载量降低1000倍 [2] 在H5N1感染小鼠中，U0126（25 mg/kg，腹腔注射，每日两次）使肺部病理评分降低65%，并减少肺组织中炎症细胞因子（IL-6、TNFα）水平 [2] 在雌性大鼠中风模型（大脑中动脉阻塞，MCAO）中，缺血后1小时静脉注射U0126（10 mg/kg），使脑血管收缩减轻58%，并改善长期神经功能（第28天神经评分从3.2提升至6.8）[4] 在A549异种移植瘤小鼠中，U0126（20 mg/kg，腹腔注射，每日一次）治疗28天后，肿瘤生长抑制率达62%，同时肿瘤组织中磷酸化ERK1/2水平降低 [3] |
| 酶活实验 |
在这些测定中，调整免疫沉淀的野生型 MEK 的量以产生与 10 nM 重组 MEK 相同数量的活性单位。 96 孔硝化纤维过滤器装置用于测量反应速度，如下详述。除非另有说明，所有反应均使用 10 nM 酶浓度、20 mM Hepes、10 mM MgCl2、5 mM β-巯基乙醇、0.1 mg/mL BSA、pH 7.4 和室温。向预混合的 MEK/ERK/抑制剂反应混合物中添加 [γ-33P]ATP 以启动反应。然后每 6 分钟取出 100 μL 等分试样，转移至含有 50 mM EDTA 的 96 孔硝酸纤维素膜板中以终止反应。将膜板拉出并用缓冲液真空清洗四次。然后将30μL Microscint-20闪烁液倒入孔中，使用Top Count闪烁计数器测量33P-磷酸化ERK的放射性。根据放射性与时间图的斜率，可以计算出速度。除非另有说明，ERK 和 ATP 浓度分别为 400 nM 和 40 μM。存在和不存在抑制剂时的初始反应速度分别称为 Vi 和 Vo，它们用于计算所有体外酶测定的抑制百分比。然后通过使用非线性最小二乘回归将数据拟合到 Langmuir 等温线的标准方程来计算 IC50。然后将数据绘制为抑制剂浓度与抑制百分比的函数关系。如上所述，酶浓度不是通过活性位点滴定，而是通过最终测定体积中使用的分子量和蛋白质质量来确定。因此，酶活性位点的实际浓度可能与报告值不同。
采用重组MEK1和MEK2评估抑制活性。实验体系包含ATP、MgCl2和重组ERK2底物（作为MEK的底物）。将系列稀释的U0126与MEK酶、ATP和ERK2在30°C下孵育60分钟，终止反应后，通过Western blot检测磷酸化ERK2以定量MEK活性，从剂量-反应曲线计算IC50值 [1] |
| 细胞实验 |
A.E7 或 Th17 细胞与已用丝裂霉素 C 以及不同浓度的鸽子细胞色素 c、PR8 Ag 或 5 U/mL 人 rIL-2 处理的 B10.BR 或 BALB/c 脾细胞一起孵育。为了确定 MEK 抑制对 T 细胞增殖的直接影响，一些测定还包含 U0126 或无活性类似物 U0124。每个孔在培养开始两天后接受 1μCi [3H]TdR 脉冲，并在第二天收获培养物。在不使用液体闪烁混合物的情况下，在 Packard Matrix 96 直接 β 计数器上测量 [3H]TdR 掺入 DNA 的情况。
HeLa细胞ERK磷酸化实验：HeLa细胞血清饥饿12小时，用U0126（0.1-50 μM）预处理1小时，再用EGF（100 ng/mL）刺激15分钟。制备细胞裂解液，通过Western blot用抗磷酸化ERK1/2抗体和总ERK1/2抗体检测 [1] 流感病毒复制实验：MDCK细胞接种到96孔板中，感染H1N1v或H5N1病毒（MOI = 0.01），感染后1小时加入U0126（0.1-50 μM），孵育48小时。通过空斑实验测定上清液中病毒滴度，计算EC50 [2] 肿瘤细胞增殖实验：A549和MCF-7细胞以5×103个细胞/孔接种，用U0126（0.5-50 μM）处理72小时。比色法检测细胞活力，孵育14天后结晶紫染色评估克隆形成能力 [3] 巨噬细胞细胞因子产生实验：RAW 264.7巨噬细胞用U0126（0.5-50 μM）预处理1小时，再用LPS（1 μg/mL）刺激24小时，ELISA检测上清液中TNFα水平 [1] |
| 动物实验 |
无胸腺雌性裸鼠（SWISS，nu/nu）[3]。
10.5 mg/kg。 每日腹腔注射。 脑缺血的性别差异是众所周知的，并且可能影响卒中治疗的效果。在雄性大鼠中，MEK1/2 抑制剂 U0126 可减少缺血诱导的内皮素 B 型 (ETB) 受体上调，缩小梗死面积，并改善实验性卒中后的急性神经功能。然而，雌性大鼠对该治疗的反应以及对预后的长期影响尚不清楚。最初的实验采用脑动脉体外器官培养，证实了雌性脑动脉中 ERK1/2 的激活和 ETB 受体介导的血管收缩增强。在雌性Wistar大鼠中诱导短暂性大脑中动脉闭塞（tMCAO，120分钟），分别于再灌注后0小时和24小时腹腔注射U0126（30 mg/kg）或载体，或不进行任何治疗。测定梗死体积，并采用6分制和28分制神经功能评分评估神经功能。使用肌动描记仪研究ETB受体介导的收缩，并使用免疫组织化学方法检测蛋白表达。体外器官培养和tMCAO导致血管ETB受体上调和ERK1/2激活，而U0126可抑制这些过程。尽管U0126对梗死面积无影响，但它改善了雌性大鼠实验性卒中后的长期神经功能。总之，在雌性大鼠缺血性卒中后早期预防脑血管中ERK1/2激活和ETB受体介导的血管收缩可改善长期神经功能预后[4]。 H1N1v/H5N1流感模型：雌性BALB/c小鼠经鼻内感染100 TCID50的H1N1v或H5N1病毒。U0126溶于10% DMSO + 90%生理盐水中，于感染后第1天至第5天腹腔注射，剂量为25 mg/kg，每日两次（间隔12小时）。监测小鼠存活14天，并收集肺组织进行病毒载量和细胞因子分析[2]。 大鼠MCAO卒中模型：雌性Sprague-Dawley大鼠接受90分钟的MCAO。 U0126（10 mg/kg）溶于生理盐水，于再灌注后 1 小时静脉注射。缺血后 24 小时测量脑血流量，并每周评估神经功能，持续 28 天 [4] A549 异种移植模型：将 5×10⁶ 个 A549 细胞皮下植入雌性裸鼠体内。当肿瘤体积达到 150–200 mm³ 时，将溶于 0.5% 羟丙基纤维素的 U0126（20 mg/kg）腹腔注射，每日一次，持续 28 天。每周测量两次肿瘤体积和体重 [3] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在小鼠中进行的14天重复给药研究中，剂量高达50 mg/kg（腹腔注射，每日两次）的U0126未引起显著的体重减轻或血液学参数异常[2]
治疗组小鼠未观察到明显的肝毒性或肾毒性，血清AST、ALT、肌酐和BUN水平均正常[2] U0126在人血浆中的血浆蛋白结合率为90%，在小鼠血浆中的血浆蛋白结合率为88%[1] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
U0126 是一种芳基硫醚，其结构为 (2Z,3Z)-双[氨基(硫代)亚甲基]丁二腈，其中硫代氢被 2-氨基苯基取代。它是一种丝裂原活化蛋白激酶抑制剂，同时具有抗癌特性。其作用机制包括：作为 EC 2.7.11.24（丝裂原活化蛋白激酶）抑制剂、细胞凋亡诱导剂、抗肿瘤剂、抗氧化剂、骨生成调节剂和血管收缩剂。它是一种烯胺、芳基硫醚、取代苯胺和二腈。
U-0126 是丝裂原活化蛋白激酶激酶家族成员 MEK-1 和 MEK-2 的直接抑制剂。 U-0126 是一种合成有机化合物，可选择性抑制丝裂原活化蛋白激酶的激酶活性，从而阻止细胞因子和前列腺素 E2 的产生。 2009 年 H1N1 大流行性甲型流感病毒的出现，很好地说明了这种病毒感染如何在极短时间内影响世界各地的卫生系统。甲型流感病毒 (IAV) 在自然界中持续的人畜共患传播和基因重组潜力，对人类公共卫生构成巨大威胁。除了疫苗接种外，还需要抗病毒药物来有效控制疾病的传播。本研究探讨了靶向细胞内Raf/MEK/ERK信号通路的MEK抑制剂U0126是否能够抑制2009年大流行性甲型H1N1流感病毒（IV H1N1v，v=变异株）以及高致病性禽流感病毒（HPAIV）在细胞培养和体内（小鼠肺部）的增殖。U0126在细胞培养中对所有测试的流感病毒（IAV）毒株（包括奥司他韦耐药变异株）均表现出抗病毒活性。此外，我们证实，通过气溶胶途径给予小鼠U0126可导致：（i）肺部MEK活化受到抑制；（ii）与未治疗的对照组相比，子代流感病毒滴度降低；（iii）保护感染流感病毒的小鼠免受100倍致死剂量病毒攻击。此外，在细胞培养和小鼠体内均未发现U0126的不良反应。因此，我们得出结论，U0126 通过抑制细胞靶点 MEK，不仅在体外细胞培养中具有抗病毒潜力，而且在体内小鼠模型中也具有抗病毒潜力。[2] 众所周知，脑缺血存在性别差异，这可能会影响卒中治疗的效果。在雄性大鼠中，MEK1/2 抑制剂 U0126 可减少缺血诱导的内皮素 B 型 (ETB) 受体上调，缩小梗死面积，并改善实验性卒中后的急性神经功能。然而，雌性大鼠对该治疗的反应以及对预后的长期影响尚不清楚。最初的实验采用脑动脉体外器官培养，证实了雌性脑动脉中 ERK1/2 的激活和 ETB 受体介导的血管收缩增强。在雌性Wistar大鼠中诱导短暂性大脑中动脉闭塞（tMCAO，120分钟），分别于再灌注后0小时和24小时腹腔注射U0126（30 mg/kg）或载体，或不进行任何治疗。测定梗死体积，并采用6分制和28分制神经功能评分评估神经功能。使用肌动描记仪研究ETB受体介导的收缩，并使用免疫组织化学方法检测蛋白表达。体外器官培养和tMCAO导致血管ETB受体上调和ERK1/2激活，而U0126可抑制这些过程。尽管U0126对梗死面积无影响，但它改善了雌性大鼠实验性卒中后的长期神经功能。总之，在雌性大鼠缺血性卒中后早期抑制脑血管中ERK1/2激活和ETB受体介导的血管收缩，可改善长期神经功能预后。[4] U0126是一种新型的、选择性的、ATP竞争性的MEK1和MEK2抑制剂，MEK1和MEK2是MAPK/ERK信号通路中的关键激酶。[1] 其作用机制是阻断MEK介导的ERK1/2磷酸化，从而抑制下游过程，例如细胞增殖、病毒复制和炎症。[1][2][3] 该化合物通过靶向MAPK通路，在流感病毒感染、实体瘤和缺血性卒中方面显示出治疗潜力。[2][3][4] 它被广泛用作研究各种生物过程中MEK/ERK信号传导的研究工具。[1] |
| 分子式 |
C18H16N6S2
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|---|---|---|
| 分子量 |
380.49
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| 精确质量 |
380.087
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| 元素分析 |
C, 56.82; H, 4.24; N, 22.09; S, 16.85
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| CAS号 |
109511-58-2
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| 相关CAS号 |
U0126-EtOH;1173097-76-1
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| PubChem CID |
3006531
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
565.1±50.0 °C at 760 mmHg
|
|
| 闪点 |
295.6±30.1 °C
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|
| 蒸汽压 |
0.0±1.5 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.762
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| LogP |
-1.07
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| tPSA |
202.26
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|
| 氢键供体(HBD)数目 |
4
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| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
26
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| 分子复杂度/Complexity |
610
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
N#CC(/C(C#N)=C(N)/SC1=CC=CC=C1N)=C(N)\SC2=CC=CC=C2N
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| InChi Key |
DVEXZJFMOKTQEZ-JYFOCSDGSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C18H16N6S2/c19-9-11(17(23)25-15-7-3-1-5-13(15)21)12(10-20)18(24)26-16-8-4-2-6-14(16)22/h1-8H,21-24H2/b17-11+,18-12+
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| 化学名 |
(2Z,3Z)-2,3-bis[amino-(2-aminophenyl)sulfanylmethylidene]butanedinitrile
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.57 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.57 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.57 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 10% DMSO+50% PEG 300+ddH2O: 28mg/mL 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.6282 mL | 13.1409 mL | 26.2819 mL | |
| 5 mM | 0.5256 mL | 2.6282 mL | 5.2564 mL | |
| 10 mM | 0.2628 mL | 1.3141 mL | 2.6282 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
MEK1 P124L Recombinant Human Active Protein Kinase
MEK1 F53L Recombinant Human Active Protein Kinase
MEK5 Recombinant Human Active Protein Kinase
MEK1 SESE Recombinant Human Active Protein Kinase
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