UNC3230

别名: UNC3230 UNC-3230 UNC 3230 5-[(环己基羰基)氨基]-2-(苯基氨基)-4-噻唑甲酰胺
目录号: V9771 纯度: ≥98%
UNC3230 是脂质激酶 PIP5K1C 的选择性抑制剂。
UNC3230 CAS号: 1031602-63-7
产品类别: New12
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
5mg
10mg
25mg
50mg
100mg
250mg
500mg
Other Sizes
点击了解更多
  • 与全球5000+客户建立关系
  • 覆盖全球主要大学、医院、科研院所、生物/制药公司等
  • 产品被大量CNS顶刊文章引用
InvivoChem产品被CNS等顶刊论文引用
纯度/质量控制文件

纯度: ≥98%

产品描述

描述:UNC3230 是一种选择性脂质激酶 PIP5K1C 抑制剂。它通过降低背根神经节 (DRG) 神经元中的 PIP2 水平来减轻过敏反应。


生物活性&实验参考方法
靶点
UNC3230 targets phosphatidylinositol-4-phosphate 5-kinase type 1C (PIP5K1C) and phosphatidylinositol-5-phosphate 4-kinase, type II, gamma (PIP4K2C).
IC50 for PIP5K1C: ~41 nM (using a microfluidic mobility shift assay).
Kd for PIP4K2C: <0.2 μM (using competitive binding assays).
At 10 μM, it did not inhibit PIP5K1A, a highly similar family member. [1]
体外研究 (In Vitro)
与载体对照组相比,用 100 nM UNC3230(约为 IC50 的 2 倍)处理的背根神经节 (DRG) 神经元膜 PIP2 水平显著降低约 45%。在 DRG 神经元中,与载体培养相比,UNC3230 培养显著抑制了溶血磷脂酸 (LPA) 诱导的钙信号传导 [1]。
UNC3230 降低了培养的背根神经节 (DRG) 神经元膜磷脂酰肌醇 4,5-二磷酸 (PIP2) 水平。用 100 nM UNC3230 处理 20 小时后,与载体对照组相比,膜 PIP2 水平显著降低约 45%,这是通过使用 PIP2 特异性抗体的平均周长染色强度进行定量分析得出的。 [1]
UNC3230显著降低了培养的背根神经节 (DRG) 神经元中溶血磷脂酸 (LPA) 诱导的钙信号传导。用浓度分别为 10 nM、100 nM 和 1000 nM 的 UNC3230 预孵育 20 小时后,钙反应曲线下面积 (AUC) 降低,表明其信号传导作用减弱。[1]
体内研究 (In Vivo)
在野生型小鼠鞘内注射UNC3230(2 nmol)两小时后,害虫的热诱导缩爪潜伏期显著延长,表明其具有抗炎作用[1]。鞘内注射UNC3230(2 nmol)一小时后,再同时鞘内注射1 nmol LPA。与对照组相比,UNC3230显著降低了机械性痛觉过敏和热痛觉过敏[1]。鞘内注射UNC3230(2 nmol)可显著降低热痛觉过敏和机械性痛觉过敏[1]。在数天的观察中,与对照组相比,佐剂(CFA)诱导的后爪炎症表现出机械性痛觉过敏和热痛觉过敏,但未炎症后爪的热觉和机械觉均未受到影响[1]。鞘内注射UNC3230(2 nmol,溶于20% DMSO)可显著延长野生型(WT)小鼠对有害热刺激的缩爪潜伏期,该作用可持续至注射后两小时,表明其具有镇痛作用。但UNC3230对机械敏感性无急性影响[1]。在LPA诱导的神经病理性疼痛模型中,鞘内注射UNC3230(2 nmol,与LPA(1 nmol)同时注射一小时)可显著减轻热痛觉过敏和机械性痛觉过敏,与溶剂对照组相比差异显著。 [1] 在弗氏完全佐剂 (CFA) 炎症疼痛模型中,在 CFA 注射前后两小时分别给予 UNC3230 (2 nmol) 可显著减轻炎症后爪的热痛觉过敏和机械性痛觉异常,且作用持续数天。[1] 在 CFA 注射后 48 小时给予 UNC3230 (2 nmol) 可显著降低 CFA 诱导的热痛觉过敏。在 CFA 炎症后给予 UNC3230 对已存在的机械性痛觉异常无影响。[1] 外周给予 UNC3230 (8 nmol) 可减轻 CFA 炎症后爪的热痛觉过敏。[1]
酶活实验
主要酶活性测定采用高通量微流控迁移率变动分析法,用于筛选重组人PIP5K1C的抑制剂。该分析在384孔板中进行,将N端His6标签的全长重组人PIP5K1C与或不与小分子在测定缓冲液中孵育10分钟。随后加入荧光素标记的底物[PI(4)P]和浓度为PIP5K1C Km值(15 μM)的ATP,并孵育40分钟。反应用EDTA终止。使用微流控迁移率变动分析法分离并定量荧光素标记的PIP2和剩余的PI(4)P。该分析法用于测定UNC3230的IC50值(~41 nM)。[1]
选择性评估采用两种不同的分析方法。ProfilerPro分析法评估了对48种激酶的选择性。将UNC3230加入到预先配制好的384孔板中,每个激酶均设置两个复孔,孵育15分钟。然后加入与每种激酶Km值相匹配的荧光底物和ATP,继续孵育90分钟。使用微流控迁移率分析法分离并定量荧光底物和产物。[1]
采用DiscoveRx KINOMEscan竞争性结合分析法定量检测UNC3230与100种不同激酶之间的相互作用。在该分析中,将UNC3230和每种DNA标记的激酶同时加入到含有每种激酶固定化配体的384孔板中。孵育1小时后,使用qPCR定量与固定化配体结合的激酶量。该检测方法测定了UNC3230与多种激酶相互作用的Kd值,包括与PIP4K2C的Kd值<0.2 μM。[1]
细胞实验
从成年小鼠中培养背根神经节 (DRG) 神经元。为评估 PIP2 水平,将神经元用载体 (0.002% DMSO) 或 100 nM UNC3230 处理 20 小时。然后固定细胞,并用 PIP2 特异性抗体和神经元标记物 NeuN 进行免疫染色。采集共聚焦图像,并量化平均周长(膜)染色强度。[1]
对于钙成像,将培养的 DRG 神经元与载体或不同浓度的 UNC3230 (10 nM、100 nM、1000 nM) 孵育 20 小时。随后,用比率钙指示剂 Fura-2-AM 加载神经元。通过用 10 μM LPA 刺激神经元 90 秒来测量钙反应。对每个响应神经元的钙反应曲线下面积(AUC)进行定量分析。LPA刺激后,用HBSS洗涤培养物120秒,然后用100 mM KCl刺激30秒以确认神经元身份。[1]
动物实验
所有动物实验程序均已获得机构动物护理和使用委员会的批准。实验采用成年雄性野生型小鼠(6-8周龄)。
采用直接腰椎穿刺法,在清醒小鼠中进行鞘内注射(5 μL)。鞘内注射用UNC3230的最终浓度为0.4 mM(2 nmol/5 μL),溶于20% DMSO;或0.6 mM(3 nmol/5 μL),溶于50% DMSO。[1]
腹腔注射:腹腔注射用UNC3230的最终浓度为5 mM,溶于90%玉米油和10%乙醇的混合溶液中,给药剂量为20 mg/kg。 [1]
足底(后爪)注射:外周给药时,将UNC3230配制成终浓度为0.4 mM的20% DMSO溶液,并注射到后爪(每只后爪20 μL;总计8 nmol)。[1]
LPA诱导的神经性疼痛模型:注射UNC3230(2 nmol,足底)或溶剂。一小时后,再次注射UNC3230(2 nmol,足底)和1 nmol LPA。[1]
CFA炎症性疼痛模型:在向一只后爪注射CFA前后两小时,分别注射UNC3230(2 nmol,足底)或溶剂。在另一项测试其对已建立疼痛的影响的实验中,于CFA注射48小时后给予UNC3230(2 nmol,注射)。[1]
热敏感性(Hargreaves试验):使用足底热敏试验装置加热每只后爪。记录后爪缩回的潜伏期。辐射热源强度经过校准,使野生型小鼠的平均缩爪潜伏期约为10秒,截断时间为20秒。[1]
机械敏感性(von Frey试验):使用带有半柔性探头的电子von Frey装置。对每只后爪进行三次测量并取平均值,以确定以克为单位的缩爪阈值。[1]
转棒试验:通过转棒试验评估运动功能。UNC3230(2 nmol,注射)不影响其运动功能。[1]
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
UNC3230(2 nmol,即)不影响转棒试验中的表现,表明未观察到急性运动功能障碍。[1]
UNC3230的非活性类似物(在伯酰胺上添加了甲基)未表现出热镇痛活性,提示观察到的UNC3230镇痛活性反映的是靶向结合而非脱靶毒性。[1]
参考文献

[1]. The lipid kinase PIP5K1C regulates pain signaling and sensitization. Neuron. 2014 May 21;82(4):836-47.

[2]. Type Iγ phosphatidylinositol phosphate kinase promotes tumor growth by facilitating Warburg effect in colorectal cancer. EBioMedicine. 2019 Jun;44:375-386.

[3]. Development of a High-Throughput Screening Assay to Identify Inhibitors of the Lipid Kinase PIP5K1C. J Biomol Screen. 2015 Jun;20(5):655-62.

其他信息
UNC3230 [5-(环己烷甲酰胺基)-2-(苯氨基)噻唑-4-甲酰胺] 是从激酶靶向化合物库(约5000个化合物)的高通量筛选中发现的,是首个报道的PIP5K1C和PIP4K2C抑制剂。[1]
UNC3230的选择性评分(S-score)为0.12(评分范围为0至1.0)。在类似检测方法中,对38种激酶抑制剂进行了基准测试,其中大多数(n=22)的选择性低于UNC3230。[1]
UNC3230的有效窗口较窄,且在合适的载体中溶解度较低,这限制了其在体外和体内进行完整剂量反应研究的能力。 [1]
UNC3230 的镇痛作用强度与在 Pip5k1c+/-(单倍体不足)小鼠中观察到的镇痛作用强度相似。[1]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C17H20N4O2S
分子量
344.43
精确质量
344.13
元素分析
C, 59.28; H, 5.85; N, 16.27; O, 9.29; S, 9.31
CAS号
1031602-63-7
相关CAS号
1031602-63-7;
PubChem CID
46355372
外观&性状
Off-white to light yellow solid powder
密度
1.4±0.1 g/cm3
折射率
1.687
LogP
2.49
tPSA
125
氢键供体(HBD)数目
3
氢键受体(HBA)数目
5
可旋转键数目(RBC)
5
重原子数目
24
分子复杂度/Complexity
450
定义原子立体中心数目
0
SMILES
O=C(N)C=1NC(SC1NC(C2CCCCC2)=O)=NC3=CC=CC=C3
InChi Key
RZCNASHHHSKTGP-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C17H20N4O2S/c18-14(22)13-16(21-15(23)11-7-3-1-4-8-11)24-17(20-13)19-12-9-5-2-6-10-12/h2,5-6,9-11H,1,3-4,7-8H2,(H2,18,22)(H,19,20)(H,21,23)
化学名
5-(Cyclohexanecarboxamido)-2-(phenylamino)thiazole-4-carboxamide
别名
UNC3230 UNC-3230 UNC 3230
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~125 mg/mL (~362.92 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.04 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.9033 mL 14.5167 mL 29.0335 mL
5 mM 0.5807 mL 2.9033 mL 5.8067 mL
10 mM 0.2903 mL 1.4517 mL 2.9033 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
+
+

计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

生物数据图片
  • Identification of UNC3230 as a selective small molecule PIP5K1C inhibitor (A) High-throughput screen is based on incubating fluorescein conjugated PI(4)P (substrate) with recombinant human PIP5K1C and then measuring product formation using a microfluidic mobility shift assay (LabChip). (B) Representative traces showing substrate and product peak separation in assay performed with and without a small molecule inhibitor (UNC3230; 10 μM). (C) UNC3230 structure and inhibitory concentration-50 (IC50) doses-response curve, using LabChip assay. (D) Selectivity of UNC3230 relative to a diverse panel of kinases, using ProfilerPro (48 kinases) and KINOMEscan (100 kinases) assays. Table 1 lists all kinases that were tested. Circle size and color reflects percent activity/binding remaining in the presence of UNC3230 (10 μM) relative to controls. Branches without circles denote kinases that were not tested. AGC: Containing PKA, PKG, PKC families; CAMK: Calcium/calmodulindependent protein kinase; CK1: Casein kinase 1; CMGC: Containing CDK, MAPK, GSK3, CLK families; STE: Homologs of yeast Sterile 7, Sterile 11, Sterile 20 kinases; TK: Tyrosine kinase; TKL: Tyrosine kinase-like. Image generated using TREEspot™ Software Tool and reprinted with permission from KINOMEscan®, a division of DiscoveRx Corporation, © DISCOVERX CORPORATION 2010. (E–G) KINOMEscan competitive binding assays with multiple doses of UNC3230, presented from (E) strongest Kd to (G) weakest Kd. All data are mean ± SEM. See also Figure S4.[1].Wright BD, et al. The lipid kinase PIP5K1C regulates pain signaling and sensitization. Neuron. 2014 May 21;82(4):836-47.
  • UNC3230 reduces membrane PIP2 levels in DRG neurons and GPCR signaling (A) PIP2 antibody staining of WT DRG neurons after incubating with vehicle (0.002% DMSO) or 100 nM UNC3230 for 20 h. Co-stained with the neuronal marker NeuN (blue). (B) Quantification of the average perimeter (membrane) intensity. n=30–40 neurons per condition. (C) LPA-evoked calcium response in WT DRG neurons after incubating with vehicle or the indicated concentrations of UNC3230 for 20 h. After stimulation, cultures were washed with HBSS for 120 s to remove LPA, then stimulated for 30 s with 100 mM KCl to confirm neuron identity. (D) Quantification of the LPA-evoked calcium response by measuring the AUC of each responding neuron. Number of neurons quantified is indicated in bar graph. Data are mean ± SEM. *p<0.005, ***p<0.005.[1].Wright BD, et al. The lipid kinase PIP5K1C regulates pain signaling and sensitization. Neuron. 2014 May 21;82(4):836-47.
  • UNC3230 reduces thermal and mechanical sensitization in models of chronic pain (A) Thermal and (B) mechanical sensitivity of WT mice after administering vehicle or 2 nmol UNC3230 (i.t.). Arrow indicates injection. n=10 male mice per group. (C) Thermal and (D) mechanical sensitivity of WT mice in the LPA-induced neuropathic pain model. Vehicle or 2 nmol UNC3230 were administered i.t. One hour later, vehicle or 2 nmol UNC3230 was administered i.t. with 1 nmol LPA. n=10 male mice per group. (E) Thermal and (F) mechanical sensitivity of WT mice in the CFA model of inflammatory pain. Vehicle or 2 nmol UNC3230 were administered i.t. Two hours later, CFA was injected into one hindpaw of each animal. The other hindpaw was not inflamed and served as a control. Vehicle or 2 nmol UNC3230 was administered (i.t.) 2 hours after CFA injection. n=10 male mice per group. (G–H) Thermal sensitivity of WT mice in the CFA model of inflammatory pain. CFA was injected into one hindpaw of each animal. The other hindpaw was not inflamed and served as a control. (G) Two days post CFA injection, vehicle or 2 nmol UNC3230 was administered i.t. n=10 male mice per group. (H) One day post CFA injection, vehicle or 8 nmol UNC3230 was administered into the inflamed hindpaw. n=10 mice per group. (A) One-way ANOVA with post hoc Bonferonni correction was used to compare differences between treatment groups for the 5 hour time course and at each hour. Black asterisks indicate significance at individual time points. ANOVA for the 5 hour time course, p=0.0045. (C–H) One-way ANOVAs were used to assess treatment effect over the 7-day time course (black asterisks). (G) One-way ANOVA was used to assess treatment effect in the non-inflamed paw over the 5 hour time course following injection (grey asterisk). All data are mean ± SEM. *p<0.05, **p<0.005. See also Figure S5.[1].Wright BD, et al. The lipid kinase PIP5K1C regulates pain signaling and sensitization. Neuron. 2014 May 21;82(4):836-47.
相关产品
联系我们